精品解析：福建省福州市长乐第一中学2023-2024学年高二下学期第一次测试生物试题

2023—2024学年第二学期长乐一中阶段一考试 高中二年生物科试卷 考试日期： 3月29日 完卷时间：75分钟 满分：100分 一、选择题（25小题，每小题2分，共50分） 1. 下列关于发酵与传统发酵技术的叙述，正确的是（ ） A. 发酵过程中有机物的干重和种类均减少 B. 传统发酵技术都是直接利用天然原料中的微生物 C. 传统发酵是以混合菌种的固体发酵及液体发酵为主 D. 发酵是将原料通过微生物的代谢转化为人类所需的产物的过程 2. 泡菜发酵所用的微生物主要是乳酸菌，而在发酵初期，水槽内经常有气泡产生，这些气泡产生的原因及成分主要是（ ） A. 乳酸菌是兼性厌氧微生物，初期进行有氧呼吸产生CO2；气体为CO2 B. 因腌制过程中盐进入蔬菜使蔬菜体积缩小，气体被排出；气体为空气 C. 发酵初期活动强烈的是酵母菌，其进行细胞呼吸产生CO2；气体为CO2 D. 乳酸菌在发酵过程中产生了热量，使坛内温度升高，空气受热膨胀排出；气体为空气 3. 红酸汤是苗族人民的传统食品，它颜色鲜红、气味清香、味道酸爽。以番茄和辣椒为原料的红酸汤制作流程如下。下列相关叙述中正确的是（ ） A. 红酸汤制作过程中用到微生物主要是醋酸菌 B. 装坛时加入成品红酸汤是为了增加发酵菌种的数量 C. 装坛时不装满的原因是为了促进微生物繁殖 D. 红酸汤的制作中发酵时间越长，口味越纯正 4. 通过发酵工程制作酱油的流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 大豆、小麦和麦麸等原料需要经蒸煮和适当配比处理 B. 阶段Ⅰ米曲霉产生的胞外蛋白酶分解原料中的蛋白质 C. 阶段Ⅱ可以利用显微镜直接计数法来监测微生物的种类和数量 D. 阶段Ⅲ酱油中的风味物质来自微生物代谢产物及其化学反应产物 5. 下列有关微生物实验室培养的说法不正确的有几项（ ） ①微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 ②扩大培养时用不加琼脂的液体培养基效果更好 ③稀释涂布平板法是需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面 ④灭菌是指杀灭物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子 ⑤用选择性培养基筛选特定菌种时，需要设置一组用完全培养基培养的实验作为对照，两者所接种的菌种不同 ⑥稀释涂布平板法进行梯度稀释时，要用移液管吹吸试管中溶液几次，目的是达到足够稀释倍数 ⑦平板划线在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自第一次划线末端 A. 1 项 B. 2 项 C. 3 项 D. 4 项 6. 我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化，冒出鱼眼大小的气泡，把八斗米淘净，蒸熟，摊开冷透。下列说法错误的是（ ） A. “浸曲发” 过程中酒曲中的微生物代谢加快 B. “鱼眼汤” 现象是微生物呼吸作用产生的CO2释放形成的 C. “净淘米”" 是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施 D. “舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡 7. 大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如下图所示。大肠杆菌的代谢物能与伊红—亚甲蓝（EMB培养基的指示剂）反应，菌落呈深紫色。下列对该实验操作的分析，错误的是（ ） A. 测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均需灭菌处理 B. 过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染 C. 将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作 D. 在EMB培养基上，只有大肠杆菌能正常生长并形成深紫色菌落 8. 下表为培养某种微生物的培养基配方，下列说法正确的是（ ） 成分 NaNO3 KHPO4 KCl MgSO4·7H2O FeSO4 （CH2O） H2O 青霉素 含量 3g 1g 0．5g 0．5g 0．01g 30g 1L 0．1万单位 A. 该培养基培养的微生物同化作用类型是自养型 B. 该培养基属于液体培养基，培养时均需在摇床上进行 C. 培养基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3 D. 若用该培养基培养纤维素分解性细菌应除去（CH2O），添加纤维素 9. 营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种生长因子的能力，只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。下列分析正确的是（ ） A. 接种到甲培养皿采用的是平板划线法 B. 甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基 C. 甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少 D. 甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型菌落 10. 关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是（ ） A. 培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的 B. 对微生物进行分离、纯化用平板划线法，而计数只能用稀释涂布平板法 C. 对10 mL土样稀释106倍后，取0.1 mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10 mL土样中分解尿素的细菌数为2.55×108个 D. 应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度 11. 下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是（ ） A. 用完全营养马铃薯琼脂培养基筛选酵母菌 B. 用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌 C. 含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的细菌 D. 利用高温条件筛选水生栖热菌 12. 科研人员通过人参细胞的悬浮培养来获取人参皂苷，其培养过程及结果如下图（图中2，4-D为生长素类似物，KT为细胞分裂素类似物）。下列说法错误的是（ ） A. 人参根切块后需用乙醇和次氯酸钠溶液消毒 B. 继代培养时人参细胞只分裂不分化 C. 人参皂苷是人参细胞的初生代谢物 D. 悬浮培养第20天时人参皂苷的产量最高 13. 植株甲是自花传粉的二倍体植物，基因型为AaBb，这两对基因独立遗传。下图为利用植株甲培育植株A、B、C、D的过程。将植株甲自交所结的种子种下，可得到植株C。下列说法正确的是（ ） A. 利用植株甲花粉粒获得植物A的育种方法称为单倍体育种 B. 植株C的获得需要用到植物组织培养技术 C. 图中某种药剂是秋水仙素，作用时期为细胞有丝分裂的后期 D. 对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种 14. 甲植株具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗除草剂基因引入甲中，进行如下图操作。下列叙述错误的是（ ） A. 植物体细胞杂交体现了植物细胞膜的结构特性和植物细胞的全能性 B. 过程B中常用PEG诱导原生质体融合 C. 过程C中只有融合的不同核的杂交细胞可以正常生长 D. 过程D没有发生基因的选择性表达 15. 将Oct3/4、Sox2、c-Myc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞后，置于培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养。2~3周后，细胞会呈现出与ES细胞类似的形态和活跃分裂能力，这样的细胞称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列说法错误的是（ ） A. 从获取途径看，iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞 B. 体细胞转化成的iPS细胞用于自身疾病的治疗，有低免疫排斥的优点 C. 欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，应设置不转入外源基因的对照组 D. 欲比较上述4种基因诱导iPS细胞时作用的大小，应设置分别转入1种基因的四个实验组和同时转入4种基因的对照组 16. 在菊花的组织培养操作完成了3－4天后，观察同一温室中的外植体，发现有的外植体正常生长，有的外植体死亡，你认为外植体死亡的原因可能是（ ） ①外植体来自衰老的植物组织，其中细胞活性低或结构不完整 ②愈伤组织形成初期没有给予充足的光照 ③接种时培养基灭菌不彻底，接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体 ④培养过程中保持温度、pH的适宜，但没有及时调整各种营养物质、激素的比例 A. ①②③ B. ①③④ C. ②③④ D. ①②④ 17. 植物组织培养技术常用于商业化生产：其过程一般为:无菌培养物的建立→培养物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是（ ） A. 为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养 B. 组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构 C. 提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 D. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异 18. 我国科学家提出的异种克隆大熊猫实验技术路线如下图。下列相关叙述错误的是（　　） A. 整个过程用到技术手段有动物细胞培养、动物体细胞核移植和胚胎移植等 B. 异种重构囊胚在体外培养时，为保证无毒无菌环境，往往需要在培养液中加入维生素 C. 囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成，后者将来可发育成胎儿的各种组织 D. 兔子宫提供的生理环境与大熊猫差异大，异种重构囊胚可能不能正常发育出大熊猫幼仔 19. “筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是（ ） A. 胚胎移植流程中需要筛选 B. 在小鼠胚胎细胞培养过程中，需要通过筛选才能获得具有无限分裂能力的细胞 C. 植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选 D. 单克隆抗体制备过程中，第二次筛选出的细胞既能无限增殖又能产特定抗体 20. 利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞“基因组印记”，使其“变性”。我国科研人员将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞后（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 体外培养卵母细胞时，为防止污染需将培养皿密闭培养在二氧化碳培养箱中 B. 胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应 C. 甲基化会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化后该基因可正常表达 D. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同 21. 下图是经体外受精和胚胎分割培育优质奶牛的过程。下列相关叙述正确的是（　　） A. 胚胎工程操作中，常以观察到两个极体作为受精完成的标志 B. 将囊胚期的胚胎均分后，取样内细胞团的部分做DNA分析和鉴定性别 C. 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D. 胚胎移植时，受体母牛必须经过免疫学检验以避免发生免疫排斥 22. CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6—5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列分析正确的是（ ） A. 可用灭活病毒诱导②过程两种细胞融合，该方法也适用于植物体细胞的杂交 B. ③过程可利用CD47糖蛋白筛选出目标杂交瘤细胞 C. 抗CD47单克隆抗体与巨噬细胞结合，增强其吞噬作用 D. 在肿瘤细胞培养液中加入抗CD47抗体将抑制肿瘤细胞的增殖 23. 如图是“生物导弹”的作用原理，阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列叙述错误的是（ ） A. 活化阿霉素有选择性杀伤肿瘤细胞的功能 B. 单克隆抗体的工业化生产可在体内进行，也可在体外进行 C. 单克隆抗体作用的特异性可减轻阿霉素对正常细胞的伤害 D. 从“生物导弹”的作用原理推测，肿瘤细胞和正常细胞的基因表达情况不一致 24. 下列有关试管婴儿及试管动物技术和体外受精的叙述，正确的是（ ） A. 通过试管动物技术繁育后代的过程属于有性生殖 B. 试管牛所采用技术中包含体外受精、胚胎移植和克隆技术 C. 试管婴儿能使不能产生精子或卵子的夫妇得到自己的孩子 D. 从雌性体内采集的卵子均可直接与获能的精子受精 25. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图1所示。将得到的普通小麦、中间偃麦草及杂种植物1~4的基因组 DNA进行PCR扩增，结果如图2所示，下列叙述错误的是（ ） A. 过程②紫外线的作用是诱导中间偃麦草发生染色体片段断裂 B. 过程③利用了细胞膜的流动性，过程⑤可种植在高盐土壤中筛选 C. ④过程中需要更换培养基，适当提高生长素的比例有利于根的分化 D. 据图2推断符合要求的耐盐杂种植株为植株1、2、4 二、非选择题：（4大题，共50分） 26. 随着个人承担传染病防控社会责任的意识和行为不断加强，很多人外出能自觉地戴口罩。某同学对戴一段时间后的灭菌口罩上的微生物进行检测，以了解其污染情况。请回答下列问题： （1）从戴一段时间后的口罩上剪取总量5cm2样品，剪碎后加入灭菌生理盐水中，定容至100mL，充分混匀，得到样液A。待样液A自然沉降后，取上清液稀释103倍得到样液B。取4个经___________________（填“干热”或“灼烧”）灭菌处理的培养皿，向其中3个培养皿中分别加入1ml样液B，再将冷却到45~50℃的培养基倒入培养皿。随即转动培养皿，使样液B与培养基充分混匀，待_______后，将平板倒置，置培养箱内培养24h。第4个培养皿添加___________________（填“样液”、“培养基”或“样液和培养基”）作为对照。 （2）一段时间后，3个平板上长出的菌落数分别为50、40和45，可计算出1cm2口罩样品中菌体数量为___________________。统计计算出的量往往___________________（填“大于”、“等于”或“小于”）口罩中菌体的实际数量，原因可能是在培养箱中培养的时间过短，___________________。 （3）若要对口罩中的金黄色葡萄球菌进行选择性分离培养，可将样液B用___________________法接种到甘露醇高盐琼脂培养基上，培养基中的高浓度氯化钠用于___________________。 27. 甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物，问答下列问题： （1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原因是____________。 （2）若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是____________（填“已转入抗性基因”、“只有完整的细胞核”或“具有叶绿体”）。 （3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，不同结果的出现主要是由培养基中____________两种激素用量的不同造成的；此外，光照条件也很重要，图中____________（字母）结果在培养过程中需要适当的光照处理。请再写出一个培养过程中需要注意的事项? ____________ （4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖。在培养时，能否采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体?如果可能，请用流程图写出培养过程；如果不能，解释其原因。____________。 28. 黑线姬鼠与小鼠是同科不同属的两个物种，具有极为相似的体型和生物学特性，为远缘异种克隆提供良好的实验材料。下图为克隆黑线姬鼠的流程示意图。 回答下列问题： （1）培养成纤维细胞时要定期更换培养液，目的是_____。 （2）成纤维细胞在培养过程中会出现_____现象，因此在核移植前要用_____（试剂）将培养的成纤维细胞分散开来。 （3）为获得数量较多的卵母细胞，可以给雌性小鼠注射_____，使其超数排卵；选用卵母细胞作为细胞核的受体的最主要原因是_____。 （4）为了提高早期胚胎的利用率，可以对桑葚胚进行_____处理，操作时要注意_____。 29. 《伤寒论》中记载的芍药甘草汤是由芍药和甘草两味药物制成，具有调和肝脾，缓急止痛的作用，芍药和甘草的主要活性成分分别为芍药苷和甘草酸。科研团队通过制备抗芍药苷的单克隆抗体，将其纯化后结合在固相载体上，让芍药甘草汤流过，去除汤中芍药苷，用于探究芍药苷与芍药甘草汤对小鼠镇痛作用的相关性。回答下列问题。 （1）制备单克隆抗体时，将芍药苷与蛋白质结合作为抗原，定期间隔免疫小鼠，目的是___________________取免疫后的小鼠脾脏，剪碎并用___________________酶处理得到小鼠脾脏细胞，图中诱导其与骨髓瘤细胞融合的试剂X是___________________，经选择培养筛选出的细胞Y具有___________________特点。 （2）用多孔培养板培养细胞Y并收集上清液，利用___________________技术对上清液进行抗体阳性检测。选择阳性孔中的细胞继续植入小鼠腹腔内进行体内培养，可从___________________中提取到抗芍药苷的单克隆抗体。 （3）研究人员将生理状态相同的小鼠随机分为对照组、造模组进行如下处理，造模组前期已完成冰醋酸致痛处理（冰醋酸能引起深部的、大面积且较持久的疼痛刺激，此时小鼠会出现扭体反应）。请完善实验方案。 组别 前期处理 后期处理 对照组 腹腔注射生理盐水 I 造模组 腹腔注射冰醋酸 模型组：口服生理盐水 阳性药组：口服芍药甘草汤 实验组：Ⅱ a．口服生理盐水 b．口服芍药甘草汤 c．口服去除芍药苷的芍药甘草汤 ①表中I、Ⅱ分别进行的处理是___________________、___________________（用上述字母表示）。 ②结果与分析： 若前期处理后，造模组小鼠扭体次数显著___________________对照组，表明致痛处理成功。后期处理结束后测定各组小鼠扭体次数，若结果为___________________，则表明芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2023—2024学年第二学期长乐一中阶段一考试 高中二年生物科试卷 考试日期： 3月29日 完卷时间：75分钟 满分：100分 一、选择题（25小题，每小题2分，共50分） 1. 下列关于发酵与传统发酵技术的叙述，正确的是（ ） A. 发酵过程中有机物的干重和种类均减少 B. 传统发酵技术都是直接利用天然原料中的微生物 C. 传统发酵是以混合菌种的固体发酵及液体发酵为主 D. 发酵是将原料通过微生物的代谢转化为人类所需的产物的过程 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种计数。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的制备、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、发酵过程中微生物代谢会消耗有机物，导致有机物的干重减少，但会有中间物质的产生，有机物种类会增加，A错误； B、传统发酵技术是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术，B错误； C、传统发酵是以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，C错误； D、发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需的产物的过程，D正确； 故选D。 2. 泡菜发酵所用的微生物主要是乳酸菌，而在发酵初期，水槽内经常有气泡产生，这些气泡产生的原因及成分主要是（ ） A. 乳酸菌是兼性厌氧微生物，初期进行有氧呼吸产生CO2；气体为CO2 B. 因腌制过程中盐进入蔬菜使蔬菜体积缩小，气体被排出；气体为空气 C. 发酵初期活动强烈的是酵母菌，其进行细胞呼吸产生CO2；气体为CO2 D. 乳酸菌在发酵过程中产生了热量，使坛内温度升高，空气受热膨胀排出；气体为空气 【答案】C 【解析】 【分析】泡菜在腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化： ①发酵初期：以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌的活动为主，同时还有一部分硝酸盐还原菌活动。该时期利用了氧气，产生了厌氧环境，乳酸菌才开始活动。此时乳酸菌和乳酸的量都比较少，而由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量有所增加。 ②发酵中期：由于乳酸菌产生了大量乳酸，其他细菌活动受到抑制，只有乳酸菌活动增强。此时期乳酸菌数量达到最高峰，乳酸的量继续积累。由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降。 ③发酵后期：由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制。乳酸菌数量下降，而硝酸盐还原菌完全被抑制。 【详解】A、乳酸菌是厌氧型微生物，其无氧呼吸的产物是乳酸，没有CO2产生，A错误； B、蔬菜体积变小是因为在高盐环境作用下脱水，与气体被排出并无联系，B错误； C、发酵初期，水槽内有氧气存在，此时有酵母菌的活动，酵母菌进行有氧呼吸产生二氧化碳，因而此时经常有气泡产生，这些气泡应该是二氧化碳，C正确； D、乳酸菌在发酵过程中为无氧呼吸，不会产生大量热量，坛内温度不会太高，D错误。 故选C。 3. 红酸汤是苗族人民的传统食品，它颜色鲜红、气味清香、味道酸爽。以番茄和辣椒为原料的红酸汤制作流程如下。下列相关叙述中正确的是（ ） A. 红酸汤制作过程中用到的微生物主要是醋酸菌 B. 装坛时加入成品红酸汤是为了增加发酵菌种的数量 C. 装坛时不装满的原因是为了促进微生物繁殖 D. 红酸汤的制作中发酵时间越长，口味越纯正 【答案】B 【解析】 【分析】红酸汤制作需要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧的条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜品有一股特别的风味提升菜品的口感。 【详解】A、红酸汤制作过程中用到的微生物主要是乳酸菌，A错误； B、红酸汤制作需要用到乳酸菌，装坛时加入成品红酸汤是为了增加乳酸菌的数量，B正确； C、装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是防止番茄发酵后液体膨胀外溢，C错误； D、在无氧的条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜品有一股特别的风味提升菜品的口感，但如果发酵时间过长，会影响口感，D错误。 故选B。 4. 通过发酵工程制作酱油的流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（ ） A. 大豆、小麦和麦麸等原料需要经蒸煮和适当配比处理 B. 阶段Ⅰ米曲霉产生的胞外蛋白酶分解原料中的蛋白质 C. 阶段Ⅱ可以利用显微镜直接计数法来监测微生物的种类和数量 D. 阶段Ⅲ酱油中的风味物质来自微生物代谢产物及其化学反应产物 【答案】C 【解析】 【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用； 2、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。 【详解】A、大豆中的蛋白质含有N，可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供碳源和能量，所以大豆、小麦和麦麸等原料需要经蒸煮除掉杂菌，同时要有适当配比，保证微生物的营养物质需求，A正确； B、米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，所以产生的胞外蛋白酶可以分解原料中的蛋白质，B正确； C、利用显微镜计数不能直接判断微生物的种类，而阶段Ⅱ含有多种微生物，所以不能用显微镜直接计数法来监测微生物的种类，C错误； D、阶段Ⅲ酱油中的风味物质来自微生物代谢产物及其化学反应产物，D正确。 故选C。 5. 下列有关微生物实验室培养的说法不正确的有几项（ ） ①微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 ②扩大培养时用不加琼脂的液体培养基效果更好 ③稀释涂布平板法是需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面 ④灭菌是指杀灭物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子 ⑤用选择性培养基筛选特定菌种时，需要设置一组用完全培养基培养的实验作为对照，两者所接种的菌种不同 ⑥稀释涂布平板法进行梯度稀释时，要用移液管吹吸试管中溶液几次，目的是达到足够稀释倍数 ⑦平板划线在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自第一次划线末端 A. 1 项 B. 2 项 C. 3 项 D. 4 项 【答案】B 【解析】 【分析】含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为纯培养。在进行菌种鉴定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化，方法有许多种。 1、最简单的分离微生物的方法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。当接种环在培养基表面上往后移动时，接种环上的菌液逐渐稀释，Z后在所划的线上分散着单个细胞，经培养，每一个细胞长成一个菌落。 2、涂布平板法。首先把微生物悬液通过适当的稀释，取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上，然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上，经恒温培养便可以得到单个菌落。 【详解】①微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，①正确； ②液体的空间更大，营养也更多，菌体繁殖上限高，所以一般用液体扩大，固体用来活化或者保藏较多，②正确； ③稀释涂布平板法是将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内，③正确； ④灭菌是指采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。灭菌常用的方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等，④正确； ⑤用选择性培养基筛选特定菌种时，需要设置一组用完全培养基培养的实验作为对照，两者所接种的菌种相同，⑤错误； ⑥梯度稀释过程中，用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀，⑥错误； ⑦平板划线在第二区域内划线时，接种环上菌种直接来自第一次划线末端，⑦正确。 故选B。 6. 我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：将蒸熟的米和酒曲混合前需“浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷”。意思是将酒曲浸到活化，冒出鱼眼大小的气泡，把八斗米淘净，蒸熟，摊开冷透。下列说法错误的是（ ） A. “浸曲发” 过程中酒曲中的微生物代谢加快 B. “鱼眼汤” 现象是微生物呼吸作用产生的CO2释放形成的 C. “净淘米”" 是为消除杂菌对酿酒过程的影响而采取的主要措施 D. “舒令极冷”的目的是防止蒸熟的米温度过高导致酒曲中的微生物死亡 【答案】C 【解析】 【分析】参与酒精的制作的微生物是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型微生物，在有氧条件下进行有氧呼吸将葡萄糖分解为二氧化碳和水，在无氧条件下生成酒精和二氧化碳。 【详解】A、“浸曲发”是将酵母菌活化，可以使微生物代谢加快，A正确； B、“鱼眼汤”是指酵母菌在呼吸过程中产生CO2，使溶液中出现气泡，B正确； C、在做酒过程中，为消除杂菌的影响主要靠“炊作饭”，即蒸熟，C错误； D、“舒令极冷”是将米饭摊开冷透，防止温度过高导致微生物（酵母菌死亡），D正确。 故选C。 【点睛】本题需要考生结合酵母菌的代谢类型进行分析，理解题干中的相关术语是解答本题的关键。 7. 大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如下图所示。大肠杆菌的代谢物能与伊红—亚甲蓝（EMB培养基的指示剂）反应，菌落呈深紫色。下列对该实验操作的分析，错误的是（ ） A. 测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均需灭菌处理 B. 过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染 C. 将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作 D. 在EMB培养基上，只有大肠杆菌能正常生长并形成深紫色菌落 【答案】D 【解析】 【分析】鉴别培养基：培养基中加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂，可以鉴别微生物。 【详解】A、测定前，滤杯、滤膜和滤瓶需要用干热灭菌法进行灭菌处理，防止杂菌污染，A正确； B、酒精灯火焰附近操作可以减少空气中的杂菌污染，B正确； C、由于过滤完后细菌黏附在滤膜上，将滤膜紧贴在EMB培养基上可将黏附的菌种接种在培养基上，C正确； D、EMB培养基属于鉴别培养基，没有选择作用，D错误； 故选D。 8. 下表为培养某种微生物的培养基配方，下列说法正确的是（ ） 成分 NaNO3 KHPO4 KCl MgSO4·7H2O FeSO4 （CH2O） H2O 青霉素 含量 3g 1g 0．5g 0．5g 0．01g 30g 1L 0．1万单位 A. 该培养基培养的微生物同化作用类型是自养型 B. 该培养基属于液体培养基，培养时均需在摇床上进行 C. 培养基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3 D. 若用该培养基培养纤维素分解性细菌应除去（CH2O），添加纤维素 【答案】C 【解析】 【分析】分析图表，该培养基的配方中，含有青霉素，可以抑制细菌的生长繁殖，所以该培养基为选择培养基。 【详解】A、该培养基中含有有机物碳源（CH2O），所以该培养基培养的微生物同化作用类型是异养型，A错误； B、该培养基没有加入凝固剂，属于液体培养基，摇床可以增加培养液中的溶解氧，对于厌氧型微生物的培养不需要用摇床，B错误； C、分析表格可知，（CH2O）含有C，NaNO3中含有N，该培养基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3，C正确； D、纤维素分解性细菌能利用纤维素（碳源），且青霉素能抑制细菌生长，若用该培养基培养纤维素分解性细菌应除去（CH2O）和青霉素，添加纤维素，D错误； 故选C。 9. 营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种生长因子的能力，只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。下列分析正确的是（ ） A. 接种到甲培养皿采用的是平板划线法 B. 甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基 C. 甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少 D. 甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型菌落 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、由甲平板观察可知，平板中菌落分布均匀，采用的是稀释涂布平板法，A错误； B、由题图信息分析可知，甲、丙培养基菌落数目多，含有野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，而乙培养皿菌株是某种营养缺陷型酵母菌菌株，据此推测，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是补充了相应的生长因子的基本培养基，B错误； C、由于基因突变具有不定向性，因此接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，故甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确； D、由题图分析可知，乙培养皿的培养基是基本培养基，故起乙培养皿中能够形成的菌落是野生型菌株，其中不存在营养缺陷型菌落，D错误。 故选C。 10. 关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述正确的是（ ） A. 培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的 B. 对微生物进行分离、纯化用平板划线法，而计数只能用稀释涂布平板法 C. 对10 mL土样稀释106倍后，取0.1 mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10 mL土样中分解尿素的细菌数为2.55×108个 D. 应该设置对照以排除非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度 【答案】D 【解析】 【分析】 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的稀释倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数。 【详解】A、从土壤中分离分解尿素的细菌，培养基应以尿素为唯一氮源，尿素分解菌为异养型，利用的是有机碳源，硝化细菌是自养型，以二氧化碳为碳源，二氧化碳为无机物，A错误； B、平板划线法只能用来分离纯化微生物，不能计数；稀释涂布平板法既能计数活菌数目，又能用于纯化，B错误； C、计数时通常选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数，若对10mL土样稀释106倍后，取0.1 mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别为18、234、276，则该10 mL土样中分解尿素的细菌数为[（234+276）÷2]÷0.1×106×10=2.55×1010个，C错误； D、分离微生物时，需要设置不接种的培养基与实验组一起培养做空白对照，以排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰，提高可信度，D正确。 故选D。 11. 下列有关微生物筛选的叙述中，不正确的是（ ） A. 用完全营养马铃薯琼脂培养基筛选酵母菌 B. 用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌 C. 含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的细菌 D. 利用高温条件筛选水生栖热菌 【答案】A 【解析】 【分析】筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。 【详解】A、全营养马铃薯琼脂培养基常用于大肠杆菌的培养，该培养基对酵母菌无选择作用，A错误； B、用高浓度NaCl的培养基可筛选耐盐突变菌株，其它不耐盐的菌株在此培养基上不能生长，B正确； C、尿素分解菌可以将尿素分解成氨，使培养基pH升，导致酚红指示剂呈红色，因此用含酚红的尿素培养基筛选出能分解尿素的菌株，C正确； D、利用高温培养条件可筛选出耐热的水生栖热菌，其它不耐热的菌体无法在此环境下生存，D正确。 故选A。 12. 科研人员通过人参细胞的悬浮培养来获取人参皂苷，其培养过程及结果如下图（图中2，4-D为生长素类似物，KT为细胞分裂素类似物）。下列说法错误的是（ ） A. 人参根切块后需用乙醇和次氯酸钠溶液消毒 B. 继代培养时人参细胞只分裂不分化 C. 人参皂苷是人参细胞的初生代谢物 D. 悬浮培养第20天时人参皂苷的产量最高 【答案】C 【解析】 【分析】植物细胞培养是将外植体培养成大量的细胞群体，以便获得人类所需的细胞次生代谢产物。 【详解】A、外植体需要用体积分数为70%的酒精、质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液进行消毒，A正确； B、继代培养基中含有2，4-D、KT，人参细胞在激素的作用下只分裂不分化，B正确； C、人参皂苷是人参细胞的次生代谢物，C错误； D、从图中可以看出，悬浮培养第20天时人参皂苷的产量最高，D正确。 故选C。 13. 植株甲是自花传粉的二倍体植物，基因型为AaBb，这两对基因独立遗传。下图为利用植株甲培育植株A、B、C、D的过程。将植株甲自交所结的种子种下，可得到植株C。下列说法正确的是（ ） A. 利用植株甲的花粉粒获得植物A的育种方法称为单倍体育种 B. 植株C的获得需要用到植物组织培养技术 C. 图中某种药剂是秋水仙素，作用时期为细胞有丝分裂的后期 D. 对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：甲植株的花粉离体培养得到的植株A为单倍体植株，植株A的幼苗经秋水仙素处理得到的植物B是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种；植株甲的种子发育形成植株C是二倍体，该过程属于杂交育种；植株甲的细胞离体培养得到植株D时采用了植物组织培养技术，属于细胞工程育种。 【详解】A、甲植株的花粉离体培养得到的植株A为单倍体植株，植株A的幼苗经秋水仙素处理得到的植物B是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种，A错误； B、植株C经种子的正常发育就可以得到，不需要用到植物组织培养技术，B错误。 C、秋水仙素能抑制纺锤体的形成，作用时期为有丝分裂前期，C错误； D、对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种，D正确。 故选D。 14. 甲植株具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗除草剂基因引入甲中，进行如下图操作。下列叙述错误的是（ ） A. 植物体细胞杂交体现了植物细胞膜结构特性和植物细胞的全能性 B. 过程B中常用PEG诱导原生质体融合 C. 过程C中只有融合的不同核的杂交细胞可以正常生长 D. 过程D没有发生基因的选择性表达 【答案】D 【解析】 【分析】该图为体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的抗性基因和甲品种的控制多种优良性状的核基因。 【详解】A、植物体细胞杂交涉及原生质体的融合和植物组织培养，原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，因此植物体细胞杂交体现了植物细胞膜的结构特性和植物细胞的全能性，A正确； B、B为诱导原生质体融合，常用PEG诱导融合，B正确； C、过程C为筛选杂种细胞，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中，必需保证具有甲细胞核和乙细胞质基因的融合细胞才能正常生长，而其它类型的细胞在此培养基上不能生长，C正确； D、过程D为脱分化，存在基因的选择性表达，D错误。 故选D。 15. 将Oct3/4、Sox2、c-Myc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞后，置于培养胚胎干细胞（ES细胞）的培养基上培养。2~3周后，细胞会呈现出与ES细胞类似的形态和活跃分裂能力，这样的细胞称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列说法错误的是（ ） A. 从获取途径看，iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞 B. 体细胞转化成的iPS细胞用于自身疾病的治疗，有低免疫排斥的优点 C. 欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，应设置不转入外源基因的对照组 D. 欲比较上述4种基因诱导iPS细胞时作用的大小，应设置分别转入1种基因的四个实验组和同时转入4种基因的对照组 【答案】D 【解析】 【分析】胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。 【详解】A、由于iPS细胞具有活跃的分裂能力，故iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，A正确； B、体细胞转化成的iPS细胞用于自身疾病的治疗，为自身细胞，因此有低免疫排斥的优点，B正确； C、欲验证iPS细胞的产生是由于外源基因的作用，自变量为是否含有外源基因，应设置不转入外源基因的对照组，C正确； D、欲比较上述4种基因诱导iPS细胞时作用的大小，应设置分别转入1种基因的四个实验组和不转入4种基因的对照组，D错误。 故选D。 16. 在菊花的组织培养操作完成了3－4天后，观察同一温室中的外植体，发现有的外植体正常生长，有的外植体死亡，你认为外植体死亡的原因可能是（ ） ①外植体来自衰老的植物组织，其中细胞活性低或结构不完整 ②愈伤组织形成初期没有给予充足的光照 ③接种时培养基灭菌不彻底，接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体 ④培养过程中保持温度、pH的适宜，但没有及时调整各种营养物质、激素的比例 A. ①②③ B. ①③④ C. ②③④ D. ①②④ 【答案】B 【解析】 【分析】 由于植物组织培养所利用的植物材料体积小，抗性差，所以对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长，而培养基一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 培养的不同阶段，对主要营养物质和激素的需求不同，所以培养过程中要及时调整各种营养物质、激素的比例，愈伤组织形成过程中，细胞还没有开始再分化，没有叶绿素和叶绿体的形成，不可能进行光合作用，因此愈伤组织形成初期不需要充足的光照。 【详解】①外植体来自衰老的植物组织，其中细胞活性低或结构不完整，会导致外植体死亡，①正确； ②愈伤组织形成过程中，细胞还没有开始再分化，没有叶绿素和叶绿体的形成，不可能进行光合作用，因此愈伤组织形成初期不需要充足的光照，此时不照光不是引起外植体死亡的原因，②错误； ③接种时培养基灭菌不彻底，就会受到微生物的污染，从而导致实验前功尽弃；接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体，高温会杀死外植体，因而可能是导致外植体死亡的原因，③正确； ④培养的不同阶段，对主要营养物质和激素的需求不同，所以培养过程中要及时调整各种营养物质、激素的比例，否则会导致外植体死亡，④正确； 即①③④均是导致外植体死亡的原因。 故选B。 【点睛】 17. 植物组织培养技术常用于商业化生产：其过程一般为:无菌培养物的建立→培养物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是（ ） A. 为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养 B. 组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构 C. 提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 D. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异 【答案】D 【解析】 【分析】1、离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。 2、植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。 【详解】A、植物组织培养过程中应注意无菌操作，为获得无菌培养物，外植体要经过表面消毒处理后，才能进行培养，所用的培养基必须彻底灭菌，A正确； B、组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构，胚状体若包裹上人工种皮，可制作成人工种子，B正确； C、生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成，因此提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根，C正确； D、用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗会出现变异，如在愈伤组织的培养过程中可能发生基因突变等变异，D错误。 故选D。 18. 我国科学家提出的异种克隆大熊猫实验技术路线如下图。下列相关叙述错误的是（　　） A. 整个过程用到的技术手段有动物细胞培养、动物体细胞核移植和胚胎移植等 B. 异种重构囊胚在体外培养时，为保证无毒无菌环境，往往需要在培养液中加入维生素 C. 囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成，后者将来可发育成胎儿的各种组织 D. 兔子宫提供的生理环境与大熊猫差异大，异种重构囊胚可能不能正常发育出大熊猫幼仔 【答案】B 【解析】 【分析】分析图解：异种克隆大熊猫的培育首先通过核移植技术获得重组细胞，然后经过早期胚胎培养获得异种重构囊胚，再利用胚胎移植技术将重构囊胚移植如代孕兔体内。 【详解】A、取大熊猫细胞核移植入兔卵母细胞中运用了动物细胞核移植技术，体外培养则用到了动物细胞培养技术，将异种重构胚囊移植到代孕兔中继续发育则用到了胚胎移植技术，A正确； B、异种重构囊胚在体外培养时，往往需要在培养液中加入抗生素，从而保证无毒无菌环境，B错误； C、囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成，其中滋养层细胞将来发育为胎盘和胎膜，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，C正确； D、目前，异种重构囊胚在代孕兔的子宫内能正常着床，但是不能正常发育生产出大熊猫幼仔，很可能是代孕兔提供的营养物质不能让异种重构囊胚正常发育，D正确。 故选B。 19. “筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是（ ） A. 胚胎移植流程中需要筛选 B. 在小鼠胚胎细胞培养过程中，需要通过筛选才能获得具有无限分裂能力的细胞 C. 植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选 D. 单克隆抗体制备过程中，第二次筛选出的细胞既能无限增殖又能产特定抗体 【答案】B 【解析】 【分析】筛选在生物工程中是一种重要的技术手段，用于从众多的对象中选出符合特定要求的部分。基因工程中，标记基因可以帮助筛选出可能含重组质粒的细胞，但不能保证一定含有。植物体细胞杂交后，融合得到的细胞类型多样，需要筛选出所需的杂种细胞。单克隆抗体制备中，经过两次筛选，第二次筛选出既能无限增殖又能产生特定抗体的细胞。 【详解】A、在胚胎移植前，需要对胚胎进行筛选，目的是选择目标性别、质量较好、发育潜力较大的胚胎进行移植，以提高移植的成功率等，A正确； B、在小鼠胚胎细胞培养过程中，具有无限分裂能力的细胞系能继续分裂、生长，不具有无限分裂能力的细胞已停止分裂，所以不需要进行筛选，B错误； C、植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞有未融合的胞或自身融合的细胞和杂种细胞，需要进行筛选，C正确； D、单克隆抗体制备过程中，第二次筛选即专一抗体检测，筛选出的细胞既能无限增殖又能产特定抗体，D正确。 故选B。 20. 利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”。我国科研人员将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞后（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 体外培养卵母细胞时，为防止污染需将培养皿密闭培养在二氧化碳培养箱中 B. 胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应 C. 甲基化会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化后该基因可正常表达 D. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同 【答案】C 【解析】 【分析】分析图示，从卵泡中取出卵母细胞，再将经过甲基化处理的卵母细胞进行早期胚胎培养、胚胎移植等获得孤雌小鼠。 【详解】A、动物细胞培养过程中，为防止杂菌污染，需要加入抗生素，A错误； B、胚胎移植不会发生免疫排斥，B错误； C、DNA分子甲基化会影响基因的表达，从而关闭基因的活性，而对某些基因进行去甲基化后该基因可正常表达，C正确； D、孤雌小鼠是由次级卵母细胞发育而来，如果提供卵细胞的母本基因型是AaBb，经过减数分裂形成的次级卵母细胞基因型可以是AABB，所以二者基因型可能不同，D错误。 故选C。 21. 下图是经体外受精和胚胎分割培育优质奶牛的过程。下列相关叙述正确的是（　　） A. 胚胎工程操作中，常以观察到两个极体作为受精完成的标志 B. 将囊胚期的胚胎均分后，取样内细胞团的部分做DNA分析和鉴定性别 C. 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 D. 胚胎移植时，受体母牛必须经过免疫学检验以避免发生免疫排斥 【答案】C 【解析】 【分析】题图分析：图中表示的是经体外受精和胚胎分割培育优质奶牛的过程。①表示内细胞团，②表示囊胚腔，图中在进行胚胎分割的过程中需注意将内细胞团均等分割。 【详解】A、胚胎工程操作中，常以观察到雌雄原核融合形成一个核，作为受精完成的标志，A错误； B、DNA分析鉴定性别须从胚胎滋养层部位取样，这样既保证了遗传信息一致，又不影响内细胞团进一步发育，B错误； C、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，因此，该过程中需要对供受体进行同期发情处理，C正确； D、胚胎移植中，受体对移入的外来胚胎基本上不发生免疫排斥，不需要进行免疫学检测，D错误。 故选C。 22. CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6—5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列分析正确的是（ ） A. 可用灭活病毒诱导②过程两种细胞融合，该方法也适用于植物体细胞的杂交 B. ③过程可利用CD47糖蛋白筛选出目标杂交瘤细胞 C. 抗CD47单克隆抗体与巨噬细胞结合，增强其吞噬作用 D. 在肿瘤细胞培养液中加入抗CD47抗体将抑制肿瘤细胞的增殖 【答案】B 【解析】 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【详解】A、植物体细胞杂交过程可用物理或化学法诱导，但不能用灭活的病毒诱导，灭活病毒可诱导动物细胞的融合，A错误； B、筛选步骤的目的就是从未融合的效应B细胞、两个效应B细胞融合形成的细胞、未融合的骨髓瘤细胞、两个骨髓瘤细胞融合形成的细胞及骨髓瘤细胞与效应B细胞融合形成的细胞，所组成的细胞群中筛选出骨髓瘤细胞与效应B细胞融合形成的细胞，可利用CD47糖蛋白特异性结合的功能筛选目标杂交瘤细胞，B正确； C、实验组中加入了单克隆抗体，抗体与肿瘤细胞表面的CD47发生特异性结合，从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组，C错误； D、利用抗CD47抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性，可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞，不能抑制肿瘤细胞的增殖，D错误。 故选B。 23. 如图是“生物导弹”的作用原理，阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列叙述错误的是（ ） A. 活化阿霉素有选择性杀伤肿瘤细胞的功能 B. 单克隆抗体的工业化生产可在体内进行，也可在体外进行 C. 单克隆抗体作用的特异性可减轻阿霉素对正常细胞的伤害 D. 从“生物导弹”的作用原理推测，肿瘤细胞和正常细胞的基因表达情况不一致 【答案】A 【解析】 【分析】1、单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 2、单克隆抗体的作用： （1）作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。 （2）用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症 可制成“生物导弹”。 【详解】A、阿霉素是一种抗肿瘤药物，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性，故不能有选择性杀伤肿瘤细胞，A错误； B、可以将杂交瘤细胞用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体， 单克隆抗体的工业化生产可在体内进行，也可在体外进行，B正确； C、单克隆抗体特异性强，阿霉素能定位杀死癌细胞，从而减轻阿霉素对正常细胞的伤害，C正确； D、单克隆抗体能与肿瘤细胞特异性结合，不能与正常细胞结合，可说明两种细胞膜的蛋白质不同，即肿瘤细胞和正常细胞的基因表达情况不一致，D正确。 故选A。 24. 下列有关试管婴儿及试管动物技术和体外受精的叙述，正确的是（ ） A. 通过试管动物技术繁育后代的过程属于有性生殖 B. 试管牛所采用的技术中包含体外受精、胚胎移植和克隆技术 C. 试管婴儿能使不能产生精子或卵子的夫妇得到自己的孩子 D. 从雌性体内采集的卵子均可直接与获能的精子受精 【答案】A 【解析】 【分析】试管牛的培育一般采用体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，而克隆牛的培育一般采用体细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植技术，因此在试管牛和克隆牛的培育中采用动物细胞培养和胚胎移植技术。 【详解】A、试管婴儿只是受精作用发生在体外，受精卵在体外培养3～5天，形成早期胚胎后移植回母体子宫，着床继续发育形成胎儿直至分娩是经过了两性生殖细胞的结合，所以试管婴儿的诞生是属于有性生殖，A正确； B、试管牛的培育一般采用体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，B错误； C、试管婴儿首先需在体外将精子和卵子受精，故试管婴儿不能使不能产生精子或卵子的夫妇得到自己的孩子，C错误； D、在输卵管获得的卵子可直接与获能的精子受精，在卵巢内采集的卵母细胞需体外培养后，才能与获能的精子受精，D错误。 故选A。 25. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图1所示。将得到的普通小麦、中间偃麦草及杂种植物1~4的基因组 DNA进行PCR扩增，结果如图2所示，下列叙述错误的是（ ） A. 过程②紫外线的作用是诱导中间偃麦草发生染色体片段断裂 B. 过程③利用了细胞膜的流动性，过程⑤可种植在高盐土壤中筛选 C. ④过程中需要更换培养基，适当提高生长素的比例有利于根的分化 D. 据图2推断符合要求的耐盐杂种植株为植株1、2、4 【答案】D 【解析】 【分析】题图分析：①是通过酶解法去除植物细胞壁，②是用紫外线诱导染色体变异，③是诱导融合形成杂种细胞，④为脱分化和再分化形成杂种植株的过程，体现了植物细胞的全能性，⑤为筛选耐盐小麦的过程。 【详解】A、过程②紫外线的作用是诱导中间偃麦草的染色体断裂，从而可能实现偃麦草的耐盐相关基因整合到小麦染色体上，从而获得高耐盐的小麦，A正确； B、③是诱导融合形成杂种细胞，利用了细胞膜的流动性；⑤为筛选耐盐小麦的过程，可种植在高盐土壤中筛选，B正确； C、④为脱分化和再分化形成杂种植株的过程，由于分化形成根或芽所需要的生长素和细胞分裂素的比例不同，因此该过程中需要更换培养基，适当提高生长素的比例有利于根的分化，C正确； D、根据图2可知，1、2、4同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段，因此再生植株1-4中一定是杂种植株的有1、2、4。若要筛选得到耐盐的小麦，需要将杂种植株种植在高盐的土壤中进一步筛选，即植株1、2、4不一定都是耐盐的杂种植株，D错误。 故选D。 二、非选择题：（4大题，共50分） 26. 随着个人承担传染病防控社会责任的意识和行为不断加强，很多人外出能自觉地戴口罩。某同学对戴一段时间后的灭菌口罩上的微生物进行检测，以了解其污染情况。请回答下列问题： （1）从戴一段时间后的口罩上剪取总量5cm2样品，剪碎后加入灭菌生理盐水中，定容至100mL，充分混匀，得到样液A。待样液A自然沉降后，取上清液稀释103倍得到样液B。取4个经___________________（填“干热”或“灼烧”）灭菌处理的培养皿，向其中3个培养皿中分别加入1ml样液B，再将冷却到45~50℃的培养基倒入培养皿。随即转动培养皿，使样液B与培养基充分混匀，待_______后，将平板倒置，置培养箱内培养24h。第4个培养皿添加___________________（填“样液”、“培养基”或“样液和培养基”）作为对照。 （2）一段时间后，3个平板上长出的菌落数分别为50、40和45，可计算出1cm2口罩样品中菌体数量为___________________。统计计算出的量往往___________________（填“大于”、“等于”或“小于”）口罩中菌体的实际数量，原因可能是在培养箱中培养的时间过短，___________________。 （3）若要对口罩中的金黄色葡萄球菌进行选择性分离培养，可将样液B用___________________法接种到甘露醇高盐琼脂培养基上，培养基中的高浓度氯化钠用于___________________。 【答案】 ①. 干热 ②. 培养基凝固（完全冷却） ③. 培养基 ④. 9×105 ⑤. 小于 ⑥. 培养基上部分菌体还未形成肉眼可见的菌落 ⑦. 稀释涂布平板 ⑧. 抑制除金黄色葡萄球菌外的其他微生物的生长 【解析】 【分析】 微生物常见的接种的方法有： 1、平板划线法：用接种环挑取菌种后，在平板上连续不重复划线，放在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 2、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 对微生物计数时，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 【详解】（1）培养皿的灭菌方法有干热灭菌、高压节气灭菌。倒平板时，需等培养基凝固（完全冷却）后，才能将平板倒置。根据题意分析，第4个培养基为对照组，只需要添加培养基即可，其他操作与实验组相同。一段时间后，对照组培养基上无菌落产生，说明实验组上长出的菌落均来自样液中的微生物。 （2）3个平板上长出的菌落数均在30～300之间，说明操作中的稀释倍数是合适的，其平均数是（50+40+45）/3=45。考虑1ml样液B是稀释103倍的样液A，样液A共100mL，这些样液A内的菌数是45×103×100=45×105，则lcm2口罩样品中菌体数量为（45×105）/5=9×105。统计计算出的量往往小于口罩中菌体的实际数量，原因可能是在培养箱中培养的时间过短（24h），培养基上部分菌体还未形成肉眼可见的菌落。 （3）稀释涂布平板法常用于固体培养基上的接种、分离培养等。甘露醇高盐琼脂培养基含有高浓度的NaCl。与一般的微生物对所需无机盐的适量要求是不符合的，可推知高浓度NaCl可抑制除葡萄球菌外的其他微生物的生长。 【点睛】本题考查微生物分离和培养、微生物数量的测定及培养基对微生物的选择作用，重点考查实验操作方法以及知识的综合运用能力。 27. 甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物，问答下列问题： （1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原因是____________。 （2）若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是____________（填“已转入抗性基因”、“只有完整的细胞核”或“具有叶绿体”）。 （3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，不同结果的出现主要是由培养基中____________两种激素用量的不同造成的；此外，光照条件也很重要，图中____________（字母）结果在培养过程中需要适当的光照处理。请再写出一个培养过程中需要注意的事项? ____________ （4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖。在培养时，能否采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体?如果可能，请用流程图写出培养过程；如果不能，解释其原因。____________。 【答案】（1）绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株 （2）具有完整的细胞核 （3） ①. 细胞分裂素、生长素 ②. B、C ③. 无菌条件、适宜的温度和pH、外植体不能倒插等 （4）不能；用花粉粒进行组织培养得到的花卉是单倍体，基因型不同于原杂合体。 【解析】 【分析】植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。植物的组织培养广义又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。 【小问1详解】 绿色叶片和白色花瓣是细胞分化的结果，遗传物质并没有改变，所以以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性。 【小问2详解】 若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞必须具有全能性，因此应具备的条件是具有完整的细胞核。 【小问3详解】 图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是因为培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是细胞分裂素、生长素；A中的愈伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的，需要再分化为B、C的话，需要光照诱导；期间保持无毒无菌和外植体正插。 【小问4详解】 若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，不能采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是对杂合体的植株来说，其体细胞的基因型相同，通过减数分裂形成花粉粒，可以导致等位基因分离，非同源染色体上的非等位基因自由组合等，花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，后代会出现性状分离，用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株。 28. 黑线姬鼠与小鼠是同科不同属的两个物种，具有极为相似的体型和生物学特性，为远缘异种克隆提供良好的实验材料。下图为克隆黑线姬鼠的流程示意图。 回答下列问题： （1）培养成纤维细胞时要定期更换培养液，目的是_____。 （2）成纤维细胞在培养过程中会出现_____现象，因此在核移植前要用_____（试剂）将培养的成纤维细胞分散开来。 （3）为获得数量较多的卵母细胞，可以给雌性小鼠注射_____，使其超数排卵；选用卵母细胞作为细胞核的受体的最主要原因是_____。 （4）为了提高早期胚胎的利用率，可以对桑葚胚进行_____处理，操作时要注意_____。 【答案】（1）清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时为细胞生长、增殖提供充足的营养 （2） ①. 贴壁生长和接触抑制 ②. 胰蛋白酶 （3） ①. 促性腺激素 ②. 卵母细胞中含有促进细胞核全能性表现的物质 （4） ①. 胚胎分割 ②. 将内细胞团均等分割 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。 【小问1详解】 培养成纤维细胞时要定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时为细胞生长、增殖提供充足的营养。 【小问2详解】 成纤维细胞在培养过程中会出现贴壁生长和接触抑制现象；因此在进行核移植前要用胰蛋白酶处理，将培养的成纤维细胞分散开来。 【小问3详解】 为了获得更多数量的卵母细胞，可以给雌性小鼠注射促性腺激素，使其超数排卵；选用卵母细胞作为细胞核的受体的主要原因是卵母细胞中含有促进细胞核全能性表现的物质。 【小问4详解】 为了提高早期胚胎的利用率，可以对囊胚期的胚胎进行胚胎分割处理，操作时要注意将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【点睛】本题主要考查胚胎工程的相关知识，要求学生有一定的理解分析能力。 29. 《伤寒论》中记载的芍药甘草汤是由芍药和甘草两味药物制成，具有调和肝脾，缓急止痛的作用，芍药和甘草的主要活性成分分别为芍药苷和甘草酸。科研团队通过制备抗芍药苷的单克隆抗体，将其纯化后结合在固相载体上，让芍药甘草汤流过，去除汤中芍药苷，用于探究芍药苷与芍药甘草汤对小鼠镇痛作用的相关性。回答下列问题。 （1）制备单克隆抗体时，将芍药苷与蛋白质结合作为抗原，定期间隔免疫小鼠，目的是___________________取免疫后的小鼠脾脏，剪碎并用___________________酶处理得到小鼠脾脏细胞，图中诱导其与骨髓瘤细胞融合的试剂X是___________________，经选择培养筛选出的细胞Y具有___________________特点。 （2）用多孔培养板培养细胞Y并收集上清液，利用___________________技术对上清液进行抗体阳性检测。选择阳性孔中的细胞继续植入小鼠腹腔内进行体内培养，可从___________________中提取到抗芍药苷的单克隆抗体。 （3）研究人员将生理状态相同的小鼠随机分为对照组、造模组进行如下处理，造模组前期已完成冰醋酸致痛处理（冰醋酸能引起深部的、大面积且较持久的疼痛刺激，此时小鼠会出现扭体反应）。请完善实验方案。 组别 前期处理 后期处理 对照组 腹腔注射生理盐水 I 造模组 腹腔注射冰醋酸 模型组：口服生理盐水 阳性药组：口服芍药甘草汤 实验组：Ⅱ a．口服生理盐水 b．口服芍药甘草汤 c．口服去除芍药苷的芍药甘草汤 ①表中I、Ⅱ分别进行的处理是___________________、___________________（用上述字母表示）。 ②结果与分析： 若前期处理后，造模组小鼠扭体次数显著___________________对照组，表明致痛处理成功。后期处理结束后测定各组小鼠扭体次数，若结果为___________________，则表明芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一。 【答案】（1） ①. 获得大量分泌芍药苷抗体的B淋巴细胞（获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞） ②. 胰蛋白##胶原蛋白 ③. 聚乙二醇##PEG ④. 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 （2） ①. 抗原抗体杂交 ②. 小鼠腹水 （3） ①. a ②. c ③. 高于 ④. 实验组小鼠扭体次数高于阳性药组低于模型组 【解析】 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问1详解】 将抗原注入小鼠，目的是使小鼠产生大量分泌芍药苷抗体的B淋巴细胞（获得能产生特异性抗体的B淋巴细胞）。剪碎后的组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成单个细胞。诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的试剂是聚乙二醇（PEG），该诱导方法属于化学方法。用特定的选择培养基进行筛选，只有杂交瘤细胞才能成活，因此经选择培养筛选出的细胞Y具有既能迅速大量增殖，又能产生抗体的特点。 【小问2详解】 上清液中含有杂交瘤细胞，由于杂交瘤细胞能分泌抗体，故利用抗原抗体杂交技术对上清液进行抗体阳性检测，以便筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞。选择阳性孔中的细胞（即能产生芍药苷抗体的细胞）继续植入小鼠腹腔内进行体内培养，从小鼠腹水中可提取到抗芍药苷的单克隆抗体，也可以将阳性孔中的细胞在体外进行扩大培养。 【小问3详解】 ①正常对照组：前期处理为腹腔注射生理盐水(空白对照)，后期处理为a口服生理盐水 (空白对照) ；造模组：模型组为口服生理盐水(产生模型小鼠)，阳性药组为口服芍药甘草汤(药物具有显著的镇痛作用)，实验组为c口服去除芍药苷的芍药甘草汤(检验去除芍药苷的芍药甘草汤是否具有镇痛作用)。②因为造模组注射了冰醋酸，结合题意可知，冰醋酸能引起小鼠的扭体反应，因此前期处理后，造模组小鼠扭体次数显著高于正常对照组，表明致痛处理成功。如果芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一，则阳性药组小鼠的扭体次数最低，实验组小鼠虽然口服的是去除了芍药苷的芍药甘草汤，但芍药甘草汤中除了芍药苷还有其他成分能够起到镇痛作用，则实验组小鼠扭体次数低于模型组，因此若结果为实验组小鼠扭体次数高于阳性药组低于模型组，则表明芍药苷是芍药甘草汤中发挥镇痛作用的重要成分之一。 【点睛】本题以芍药甘草汤为题材，主要考查动物细胞培养技术、动物细胞融合和单克隆抗体的制备以及实验探究等相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程，掌握单克隆抗体的制备流程，能正确分析题文获取有效信息，再结合所学知识正确答题。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$