1.2 微生物的基本培养技术（第二课时）- 【精讲课堂】2024-2025学年高二生物同步教学实用课件（人教版2019选择必修3）

第2节 微生物的培养技术及应用（第二课时） 以信息技术为支撑；以现代教育教学理论为指导；强调新型教学模式的构建；教学内容具有更强的时代性和丰富性；教学更适合学生的学习需要和特点。信息化教学不仅仅是在传统教学的基础上对教学媒体 和手段的改变,而且是以现代信息技术为基础的整体的教学体系的一系列的改革和变化。 授课人：大道至简 微信：a533722113333 第一章 发酵工程 1 核心素养 1.生命观念：掌握通过配制培养基，了解配制培养基的基本步骤，以及培养基中各类营养物质的配比。 2.科学思维：通过对培养皿和培养基进行灭菌，了解消毒和灭菌的原理及方法。 3．科学探究：通过对酵母菌进行纯培养，理解并掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。 2 一、微生物的纯培养 （一）培养物、纯培养物、纯培养概念辨析： 1.培养物： 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。 2.纯培养物： 由单一个体繁殖所获得的微生物群体。 3.纯培养： 获得纯培养物的过程就是纯培养。 获得过程 一、微生物的纯培养 （二）纯培养的步骤： 配制培养基 灭菌 接种 分离 培养 一、微生物的纯培养 （二）纯培养的步骤： 1.配制培养基： 称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15～20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml。 马铃薯 (200g) 去皮、切块 马铃薯块 加水 (1000mL) 煮沸 纱布过滤 滤液 加葡萄糖/蔗糖 (20g) 加琼脂 加水定容 (1000mL) 酵母菌培养基 一、微生物的纯培养 （二）纯培养的步骤： 2.灭菌： 灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15～30min。将5～8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160～170℃灭菌2h。 酵母菌培养基 --高压蒸汽灭菌 转移 包牛皮纸 锥形瓶 加棉塞 皮筋勒紧 放入高压蒸汽灭菌锅中(100kPa、121℃) 灭菌15~30min 一、微生物的纯培养 （二）纯培养的步骤： 3.倒平板： ①拔出锥形瓶的棉塞。 ②将瓶口迅速通过火焰。 ③用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（10 ~ 20mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖。 ④等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒转过来放置。 ④ ③ ① ② 防止瓶口微生物污染 倒平板 待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 一、微生物的纯培养 （二）纯培养的步骤： 3.倒平板： >培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。 >在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 最好不要用这个平板培养微生物。 防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 一、微生物的纯培养 （二）纯培养的步骤： 3.倒平板： 将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。 >怎么确定所倒平板未被杂菌污染？ >平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 一、微生物的纯培养 平板划线法 4.接种和分离酵母菌： 1、将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。 2、在火焰旁冷却接种环，并拔出装有酵母菌的棉塞 3、将试管口通过火焰 .4、将已冷却的接种环伸入菌液中，蘸取一环菌液 5、将试管通过火焰，并塞上棉塞 6、左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基 7、灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连 8、将平板倒置放入培养箱中培养。 一、微生物的纯培养 平板划线法 4.接种和分离酵母菌： ⑤在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线以免接种环温度太高，杀死菌种。 第1区划线 接种环灭菌 第2区划线 接种环灭菌 第3区划线 接种环灭菌 接种环灭菌 1 2 3 4 5 ①接种环只蘸一次菌液,在培养基不同位置连续划线多次 ④划线后,培养皿倒置培养 ②划线首尾不能相接 ③每次划线前接种环进行灼烧灭菌，待冷却后再开始画线 一、微生物的纯培养 平板划线法 4.接种和分离酵母菌： 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞 杀死接种环上原有微生物 灼烧时期 目的 取菌种前 每次划线前 接种结束后 一、微生物的纯培养 （二）纯培养的步骤： 5.培养酵母菌： 完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板（一般做三组，重复实验）和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养24-48h； 警示: ①在实验室中，切不可饮食，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染。 ②使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境 一、微生物的纯培养 （二）纯培养的步骤： 6.观察现象： 观察长出酵母菌的单个菌落。 >在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明了什么？ 在未接种的培养基表面应该没有菌落生长，如果有，说明培养基被杂菌污染。 >在接种酵母菌的培养基上，你是否观察到了单菌落？这些菌落的颜色、形状和大小是否一致？如果你观察到了不同形态的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的吗？ 如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。 一、微生物的纯培养 酵母菌的纯培养 2.接种和分离酵母菌 1.制备培养基 3.培养酵母菌 ①配制培养基（马铃薯、葡萄糖、琼脂、水） ②灭菌 ③倒平板（在酒精灯火焰附近操作） 培养基：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌锅） 培养皿：干热灭菌（干热灭菌锅） 用接种环在固体培养基上用平板划线法接种 平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱培养 课堂小结 1.下列为几位同学描述的平板划线接种法的划线方式，其中正确的是（ ） A. B. C. D. 课堂练习 C 2.某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中,并放置在摇床上培养，摇床转速分别为210 r/min，230 r/min和250 r/min。培养时间与酵母菌种群密度的关系如下图所示。请分析回答下列问题 (1)摇床转速不同,意味着培养条件有什么不同? 意味着培养液中02含量不同。 (2)从图中数据你可以得出什么结论?其原因是什么? 培养液中02含量越高,酵母菌种群密度越大。 (3)为什么培养8h后，其中2个能瓶中酵母菌的种群密度基本达到稳定? 这时候已经达到了环境容纳量。 课堂练习 $$