内容正文:
第1章 种群及其动态
第2节 种群的数量变化(第2课时)
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六、探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验
1.提出问题
培养液中酵母菌的数量是怎样随时间变化的?
2.作出假设:
在环境资源有限的条件下,酵母菌的数量变化随时间呈“S”形增长曲线
3. 材料用具:
酵母菌菌种,无菌马铃薯培养液或者肉汤培养液,血细胞计数板,显微镜等。
(一)实验前准备
(二)实验原理
(1)用液体培养基培养酵母菌,种群的增长受_________________、________、________、__________等因素的影响。
(2)在理想的无限环境中,酵母菌种群呈“J”形增长;自然界中_____________总是有限的,酵母菌种群呈“S”形增长。
(3)统计酵母菌数量可用_____________法。
培养液的成分
空间
pH
温度
资源和空间
抽样检测
液体
无菌
均匀
酵母菌
数量变化规律
第 1 天
第 4 天
第 6 天
第 7 天
死亡
(四)实验结果
1.请你设计处理实验数据的表格
时间
(天)
次数 1 2 3 4 5 6 7
1
2
3
… …
平均
2.分析结果,得出结论
实验结论: 在适宜条件下 ,酵母菌种群呈“S” 形增长;
种群的增长速率是: 先增加后减少,在K/2时增长速率最大。
3.封闭环境中的种群数量变化模型
恒定容积培养液中酵母菌的增长曲线
在封闭环境中,无外源物质和能量的补充,随着时间推移,由于营养物质的______、有害代谢产物的______、pH的_________,酵母菌数量开始下降。
消耗
积累
改变
归纳:影响酵母菌种群数量增长的因素
培养液的成分、空间、pH、温度、代谢产物
在封闭环境中,无外源物质和能量的补充,种群数量达到最大值后由于资源的消耗和代谢废物的积累,最终K值不断降低,种群数量减少甚至消亡。如
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1.从试管中吸出培养液进行计数之前,需将试管轻轻振荡几次,其目的是___________________________________________________________
2.本实验需要设置对照吗?
3.本实验进行重复实验目的是________________________________。
4.如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取的措施是_______________________________________。
为了是培养液中的酵母菌均匀分布,以保证估算的准确性。
本实验中存在自身前后对照(酵母菌在不同时期的数量相互对比),不需要另外设置对照。
提高实验数据的准确性,避免偶然误差
稀释一定倍数(如10倍)后重新计数
(五)实验操作分析
注:每次取样前应将培养瓶振荡摇匀,取样后稀释一定倍数。
提问
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5. 怎么分辨死亡细胞和有活性的细胞?
死亡细胞多集结成团;
可以借助台盼蓝染色(死亡细胞呈蓝色)
6.对于压在小方格界线上的酵母菌应当怎样计数?
只计相邻两边及其顶角上的酵母菌,
一般遵循“计上不计下,计左不计右”的原则
(六)注意事项:
(1)取样时间需一致,且应做到随机取样(每天同一时间取样,或者每隔相同一段时间取样);
(2)抽取样液之前,需要振荡,使酵母菌均匀分布,如果未振荡试管就吸出培养液,可能出现两种情况:一是从试管下部吸取的培养液浓度偏大; 二是从试管上部吸出的培养液浓度偏小。因为酵母菌会沉降在瓶底;
(3)若保持培养条件,酵母菌种群数量不会一直保持稳定,将会下降,因为营养物质减少、代谢废物增多、空间有限、pH降低等;
(4)血细胞计数板使用完毕后,用水冲洗干净或浸泡在酒精溶液中,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度
(七)酵母菌的计数方法
1.显微镜计数操作步骤:
①将盖玻片放在血细胞计数板的计数室上;
②用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入到计数室内;
③待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在在载物台中央
④计数一个小方格内酵母菌数量,再以此为依据估计试管中酵母菌总数。
正面图
侧面图
计数室
滴液处
如果先加培养液再盖盖玻片,那么盖玻片可能由于已加入液滴的表面张力而不能严密地盖到计数板表面,使计数室内部液体增多,导致计数结果偏高。
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计数室
计数室(中间大方格)的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为______mm3 ,合_________mL。
1mm
0.1
1×10-4
血细胞计数板:
一种用来对较大的单细胞微生物等计数的仪器
计数室
计数室分为 25 中格(双线边)
每一中格又分为16小格
计数室是由___________个小格组成
25×16=400
注:有的是16中格,25小格,共400小格。
放大后的计数室
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如何计数?
五点取样法
样方法
=A ×5×104
A1
A2
A5
A3
A4
例:取1mL培养液,稀释B倍,然后计数,若 5个中方格中的酵母菌总数为A个,则该1mL培养液中酵母菌数量为?
×B(稀释倍数)
注:1毫升=1立方厘米
计数原则:显微镜计数时,对于压在小方格界线上的酵母菌,应遵循“数上线不数下线,数左线不数右线”的原则计数。
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归纳:
1.酵母菌种群密度计算公式
一个计数室内酵母菌总数
10-4ml
酵母菌种群密度=
×稀释倍数
2.酵母菌总数计算公式
一个计数室内酵母菌总数
10-4ml
酵母菌
种群密度
×
培养液
体积(ml)
稀释倍数
×
=
【典例】下图表示显微镜的目镜以及用显微镜观察到的两个视野中的图像,回答下列问题:
估算培养液中酵母菌种群密度的常用方法称为___________,在吸取细胞培养液计数之前需要将培养液________。若吸取酵母菌样液1mL并稀释100倍,采用血球计数板(规格为1mm×1mm×0.1mm ,16格×25格)计数,观察的结果如图3所示,则该1ml样品中酵母菌数约为______个。
抽样检测法
振荡摇匀
8×108
检测1:检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体.已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3.现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 个/mL.
5×105n
检测2:下列关于本实验的相关操作,判断对错:
①培养酵母菌时,必须去除培养液中的溶解氧
②将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的锥形瓶中,在适宜条件下培养
③将培养液振荡摇匀后,用吸管从锥形瓶中吸取一定量的培养液
④在血细胞计数板中央滴一滴培养液,盖上盖玻片,并用滤纸吸去边缘多余培养液
⑤将计数板放在载物台中央,培养液渗入计数室时应立即开始在显微镜下观察、计数
⑥计数时,压在小方格界线上的酵母菌应计相邻两边及其顶角。显微计数结果比实际结果偏大。
⑦早期培养不需取样,培养后期每天取样一次
×
√
√
×
×
√
×
待酵母菌全部沉降到计数室底部后才能计数
死细胞会被计入
【答案】D
【解析】①酵母菌为兼性厌氧生物,培养酵母菌时,不需要去除培养液中的溶解氧;④细胞计数时,应将培养液滴在计数板上盖玻片边缘,让其自行渗入计数板;⑦早期培养也要抽样检测。
检测3:下列对“探究酵母菌种群数量变化规律实验”的叙述,正确的是( )
A. 用血细胞计数板计数酵母菌个数时,取适量培养液直接滴加到计数室内
B. 对于压在一个方格界限上的酵母菌的处理方法是计数四条边及其顶角的酵母菌数
C. 已知血细胞计数板的方格为2 mm×2 mm,若盖玻片下经稀释10倍的培养液厚度为0.1 mm,计数时观察值为M,则10 mL培养液中酵母菌的总数约为2.5M×105个
D. 与一般的生物实验一样,该探究实验也需要单独设置对照组
X
1mL
=
0.1mm3(10-4)
每小方格中细胞的个数×400
X
10mL
=
2 X 2 X 0.1mm3(10-4)
M
X × 稀释倍数
=2.5M×105
C
检测4:某学生在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中,根据实验结果绘制出下图所示的曲线。有关分析错误的是( )
A. 实验过程中酵母菌种群的年龄结构先是增长型,后是稳定型,最后变为衰退型
B. 种群数量在不同时间的增长速率可能相同
C. 本实验中不存在对照
D. 每次取样前应将培养瓶振荡摇匀
ab段种群数量增长速率逐渐升高,到b点时到达最大值,而bc段种群数量增长速率逐渐降低,因此,种群数量在不同时间的增长速率可能相同,B正确;
C
(三) 实验流程
1.eq \x(酵母菌培养)——eq \x(_______培养基,_______条件)
↓
2.eq \x(振荡培养基)——eq \x(酵母菌______分布于培养基中)
↓
3.eq \x(观察并计数)——eq \x(\a\al(将酵母菌接种到培养液中混合均,匀并培养,每天将含有酵母菌的,培养液滴在计数板上,计数一个,小方格内的___________数量,再以此为,根据,估算试管中的酵母菌总数))
↓
4.eq \x(重复2、3步骤)——eq \x(连续观察7 d,统计数目)
↓
5.eq \x(绘图分析)——eq \x(\a\al(将所得数值用曲线表,示出来,得出酵母菌,种群的_______________))
$$