内容正文:
探究:
培养液中酵母菌种群数量的变化
探究培养液中酵母菌种群数量的变化
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实验原理:
单细胞真核生物
属于兼性厌氧型微生物,有氧时产生二氧化碳和水;无氧时产生二氧化碳和酒精。
用液体培养基培养酵母菌,种群的增长受培养基的成分,空气,温度,酸碱度及有害代谢废物等因素的影响。
在理想的环境中,酵母菌种群的增长呈“J”型曲线;
在有限的环境下,酵母菌种群的增长呈“S”型曲线。
方法:抽样检测法
工具:血细胞计数板
怎样进行酵母菌的计数?
侧面观
上
面
观
计数区域(方格网)
先盖上盖玻片,再滴加培养液于盖玻片的边缘,让培养液自行渗入。
血细胞计数板:一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。
计数室
1mm
大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm×1mm×0.1mm,其容积为0.1mm3;
正面图
侧面图
计数室
滴液处
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大方格
中方格
小方格
计数室通常也有两种规格
16×25型:即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格
25×16型:即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格
探究培养液中酵母菌种群数量的变化
如何计算每毫升培养液中酵母菌的数量?
在计数室内如何做到随机取样?
A1
A2
A4
A5
A3
1.假设中方格酵母菌数量的平均值是A个,稀释倍数为B,求每毫升培养液中酵母菌的数量?
酵母菌数量=A×25×104×B
五点取样法
探究培养液中酵母菌种群数量的变化
2. 盖盖玻片和滴加培养液哪个步骤在前?
先盖盖玻片,再滴加培养液于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,用滤纸吸去多余的培养液。
如果先加培养液再盖盖玻片,那么盖玻片可能由于已加入液滴的表面张力而不能严密地盖到计数板表面,使计数室内部液体增多,导致计数结果偏高。
先盖盖玻片再滴加培养液,还能避免因直接滴加培养液时,在计数室内产生气泡,导致计数室相对体积减小而造成误差。
3.从试管中吸出培养液进行计数之前,建议将试管轻轻振荡几次。这是为什么?
使培养液中的酵母菌分布均匀,以减少误差。若没有摇匀,从底部吸取,基数结果会偏大。从上部吸取,计数结果会偏小。
4.滴加培养液后要稍等片刻,待酵母菌全部沉降到计数室底部再计数。请分析原因。
如果酵母菌未能全部沉降到计数室底部,通过显微镜观察时,就可能出现以下现象:要么能看清酵母菌但看不清格线,要么能看清格线但看不清酵母菌。
5. 如果一个小方格内酵母菌数量过多,难以数清,应当采取什么措施?
第 1 天
第 4 天
第 6 天
第 7 天
死亡
当小方格中的酵母菌过多时,可以增大稀释倍数然后再计数,即计数前应摇匀→取样→稀释→计数。
6.计数的酵母菌都是活的吗?怎样分辨是否为活菌?
不都是,计数的酵母菌包括活菌和死菌。
可以用台盼蓝染液对菌体进行染色,被染成蓝色的是死菌,没有染色的是活菌。
7.对于压在计数方格界线上的酵母菌,应当怎样计数?
对于压在计数方格界线上的酵母菌,应只计数相邻两边及其夹角(一般是左上边界及其夹角)的酵母菌。
✔
✔
✔
8.若使用的血细胞计数板(规格为1 mm×1 mm×0.1 mm)每个计数室分为25个中方格,每个中方格又分为16个小方格,将样液稀释100倍后计数,发现计数室四个角及中央共5个中方格内的酵母菌总数为20个,则培养液中酵母菌的密度为_______________________________________。
20×(25÷5)×100×10 000=1×108个/mL
任务二:实验设计及结果分析
1.探究本实验需要设置对照实验吗?需要做重复实验吗?
酵母菌在不同时间内的数量可以相互对照,不需另设对照实验。需要做分组重复实验获取平均值,以保证计数的准确性(对每个样品可计数三次,再取平均值)。
资料2.对照原则是中学生物实验设计中最常用的原则。除了自变量的因素外,其余因素(无关变量)都保持一致并将实验结果进行比较的实验叫作对照实验。
3.根据实验结果绘制的曲线图如图所示,请分析回答下列问题:
(1)增长曲线的总趋势是 ,原因是在开始时培养液的 、空间充裕、条件适宜,因此酵母菌大量繁殖,种群数量剧增,随着酵母菌数量的不断
先增加再降低
营养充足
增多,营养消耗、pH变化、 积累等,使生存条件恶化,酵母菌死亡率高于出生率,种群数量下降。
有害产物
(2)根据酵母菌数量的变化曲线,作出对应增长速率的曲线图。
4.进一步探究:其他因素对酵母菌种群数量的影响。
资料2 实验设计如表所示:
试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃)
1 10 - 0.1 28
2 10 - 0.1 5
3 - 10 0.1 28
每天同一时间,各组取出试管,用血细胞计数板分别计数酵母菌个数并记录,连续观察7天种群的密度变化如曲线图所示:
(1)本实验的自变量是 。
(2)A曲线对应的培养条件是什么?
10 mL培养液中28 ℃下培养(试管1)。
温度、营养物质
(3)由实验结果可以得出结论:____________________________________
。
温度和营养物质均会对酵母菌种群数量产
生影响,温度较低时种群增长缓慢,营养缺乏时种群几乎不增长
培养液中酵母菌种群数量的变化
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