内容正文:
第1章 第2节 微生物的选择培养与计数
一、【学习目标】
1.基于实例分析,说明选择培养基的概念和如何设计培养基来分离分解尿素的细菌。(科学思维,科学探究)
2.通过学习稀释涂布平板法,运用分析与综合的科学方法,总结分离微生物的过程。(科学思维)
3.基于稀释涂布平板法和显微镜计数法,运用归纳与概括的科学方法,概述测定微生物数量的常用方法。(科学思维)
二、【重点难点】
1.微生物选择培养的原理。
2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
三、课本导读(按照读、划、写、记、练、思六字诀进行课本内容的预习,并进行组内的评价)
课本阅读程序:①阅读本节聚焦中的问题,带着问题阅读本节课本,②看懂每段话的内容,划出每段话中的关键语句。③边看书边写批注(随时写下读书过程中发现的问题,简要书面回答课本上的思考与讨论,旁栏思考题等);④填写学习指导上的知识填空并进行记忆。⑤做学习指导上的例题并纠错。⑥反思本节所学内容,提出自己的问题。
四、重点再现(填写下面的填空进一步熟悉本节主要内容,一定要在认真预习课本之后再填写)
一、选择培养基的概念:在微生物学中,将 特定种类的微生物生长,同时 或
其他种类微生物生长的培养基,叫选择培养基
二、微生物的数量测定
1.稀释涂布平板法:
(1)稀释涂布平板法除可以用于分离( )外,也常用来统计样品中( )。原理:当样品的 足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
(2)操作。
①一般选择菌落数为 的平板进行计数。
②选用 的样品液进行培养,在同一稀释度下,应至少对 个平板进行重复计数,然后求 。
2. 显微镜直接计数:利用特定的细菌计数板或 ,在显微镜下观察、 ,然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。
2. 绝大多数微生物都能利用葡萄糖,但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基,可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。
五、问题预设(思)
问题1、尿素是一种重要的农业氮肥,尿素不能直接被农作物吸收,土壤中的某些细菌将尿素分解成NH3,NH3再转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。细菌利用尿素的原理:土壤中分解尿素的细菌合成脲酶,脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可作为细菌生长的氮源。
(1)如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的配方该如何设计?
(2)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长?
(3)设计对照实验:如何验证所用的选择培养基没有受到污染?该培养基与普通培养基有哪些相同点和不同点?
问题2:微生物生长量的测定有计数法、重量法、生理指标法等方法,但是一般使用计数法,计数法可分为直接计数法和间接计数法。二者的比较如下表所示:
项目
直接计数法
间接计数法
原理
利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量
当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌
主要用具
显微镜、细菌计数板
培养基
计数数据
菌体本身
培养基上菌落数
优点
计数方便、操作简单
计数的是活菌
缺点
死菌、活菌都计算在内
操作较复杂,有一定误差
计算公式
每毫升原液含菌数=每小格平均菌体数×400×10 000×稀释倍数
每毫升原液含菌数=培养基上平均菌落数×稀释倍数÷涂布液体积
合作探究
1.在用稀释涂布平板法对微生物进行计数时,统计菌落数目的理论依据是什么?
。
2.为什么一般选择菌落数为30~300的平板进行计数?
3.稀释涂布平板法和显微计数法对微生物计数产生的实验误差如何?试分析原因。
六、课堂展示和小结。
七、课堂检测
1.下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述,不合理的是( )
A.筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养
B.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌
C.在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力
D.用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值
2.下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作,乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中错误的是( )
A.甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能涂菌液B.甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的计数C.乙中接种环需要灼烧5次 D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
3.下列有关微生物培养的叙述,正确的是( )
A.培养过微生物的培养基经灭菌后仍可用于培养微生物
B.涂布接种时,要待涂布器上酒精燃尽后冷却再使用
C.对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿盖标记便于观察
D.长期保存菌种时,可以采用甘油管藏的方法,放在 4℃冰箱中保存
4.稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( )
A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B.需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
5.在做分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述,出现科学性错误的是( )
A.甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同,也可能是操作过程出了问题
B.可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,以证明培养基是否受到污染
C.将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验,如果结果与甲同学一致,则可以证明甲同学无误
D.B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则
6.选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物,通过不加碳源的培养基、不加氮源的培养基、以尿素为唯一氮源的培养基,可从土壤中分离出的微生物高中生物
依次是( )
A.硝化细菌、放线菌、根瘤菌
B.根瘤菌、青霉菌、固氮菌
C.异养型细菌、放线菌、硝化细菌
D.自养型细菌、固氮菌、分解尿素的细菌
7.下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法中,错误的是( )
A.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以,为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离
B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同
C.如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数
D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
八、限时训练,巩固新知(做限时训练 …… 题) (用)
九、作业五级评价:逐级收集学习过程中发现的问题
十、 学习反思:
1. 本节课学到了哪些知识
2.还有哪些疑惑?
(
高一生物导学案 第
3
页 (共4页) 高一生物导学案 第
4
页 (共4页)
)
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高
二
生物导学案 第
1
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二
生物导学案 第
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