内容正文:
第三章
基因的本质
第 1节 DNA是主要的遗传物质
1
1
提出“遗传因子”,并总结遗传规律
孟德尔
2
把“遗传因子”命名为基因
约翰逊
3
提出基因在染色体上的假说
萨 顿
4
实验证明基因位于染色体上
摩尔根
科学家发现:染色体的主要组成成分是DNA和蛋白质
5
遗传物质的探索
遗传物质是蛋白质还是DNA?
染色体
蛋白质
DNA
氨基酸多种多样的排列顺序,可能蕴含着遗传信息。
没发现其他大分子有类似的结构特点。
20世纪20年代
蛋白质是生物体的
遗传物质。
20世纪30年代
人们认识到DNA是由许多脱氧核苷酸聚合而成的生物大分子
脱氧核苷酸的化学组成包括磷酸、碱基、脱氧核糖。意识到DNA的重要性,但对DNA结构没有清晰认识。
蛋白质是遗传物质的观点占主导地位。
一、对遗传物质的早期推测(阅读课本P42)
核酸的基本知识
核酸
脱氧核糖核酸
(DNA)
核糖核酸
(RNA)
基本组成单位
主要在细胞核的染色体上,少数在线粒体和叶绿体
主要在细胞质中
基本组成单位
脱氧核糖核苷酸
核糖核苷酸
五碳糖:脱氧核糖
碱基:
磷酸
A、G、C 、T
脱氧
核糖
碱基
磷酸
A
腺嘌呤
G
鸟嘌呤
脱氧核糖核苷酸
C
胞嘧啶
T
胸腺嘧啶
五碳糖:核糖
碱基:
磷酸
A、 G、C 、 U
核糖
碱基
磷酸
A
腺嘌呤
G
鸟嘌呤
核糖核苷酸
C
胞嘧啶
U
尿嘧啶
依据已有知识分析推理——谁是遗传物质?
蛋白质 DNA
支持的材料
否定的材料
一、对遗传物质的早期推测
一、对遗传物质的早期推测
1.亲子代之间联系的桥梁是生殖细胞。生殖细胞形成过程中,染色体和DNA的数量存在规律性的变化。
2.人们推测,既然基因能够控制那么多、那么复杂的生物性状,那么构成基因的遗传物质也一定是一种非常复杂、非常多样的化学物质,才能承担做为基因的艰巨任务。蛋白质恰好是结构最复杂、最多样的分子。
3.组成蛋白质的主要氨基酸约有21种。
4.组成DNA的核苷酸有4种。
5.蛋白质中氨基酸的不同排列组合可以贮存大量信息。
6.蛋白质是生命活动的承担者,与生物的性状密切相关。
7.蛋白质有复杂的空间结构,但在高温下空间结构会被破坏,容易变性。
8.DNA结构稳定,耐高温。
9.蛋白质不能进行自我复制,而且它在染色体中的含量往往是不固定的。
10.DNA能自我复制、并且在复制的过程中有多种机制保证准确性。
11. 一般情况下,同一种生物在不同发育时期或不同组织的细胞中,DNA的含量基本相等,而生殖细胞中的DNA含量恰好是体细胞中的一半。
12.同一生物的不同组织细胞中,蛋白质的种类和质量差异较大。
一、对遗传物质的早期推测
分析推理——谁是遗传物质?
蛋白质 DNA
支持的材料 2、3、5、6 1、8、10、11
否定的材料 7、9、12 4
1. 亲子代之间联系的桥梁是生殖细胞。生殖细胞形成过程中,染色体和DNA的数量存在规律性的变化。
9. 蛋白质不能进行自我复制,而且它在染色体中的含量往往是不固定的。
10. DNA能自我复制、并且在复制的过程中有多种机制保证准确性。
遗传物质应在亲子代间有连续性
一、对遗传物质的早期推测
2. 人们推测,既然基因能够控制那么多、那么复杂的生物性状,那么构成基因的遗传物质也一定是一种非常复杂、非常多样的化学物质,才能承担做为基因的艰巨任务。蛋白质恰好是结构最复杂、最多样的分子。
3. 组成蛋白质的主要氨基酸约有21种。
4. 组成DNA的核苷酸有4种。
5. 蛋白质中氨基酸的不同排列组合可以贮存大量信息。
遗传物质应具有:多样性
7. 蛋白质有复杂的空间结构,但在高温下空间结构会被破坏,容易变性。
DNA结构稳定,耐高温。
11. 一般情况下,同一种生物在不同发育时期或不同组织的细胞中,DNA的含量基本相等,而生殖细胞中的DNA含量恰好是体细胞中的一半。
12. 同一生物的不同组织细胞中,蛋白质的种类和质量差异较大。
一、对遗传物质的早期推测
遗传物质应具有:稳定性
小结:遗传物质应该具有的特点
(1)多样性。具有贮存巨大数量遗传信息的潜在能力。
(2)连续性。能够精确地复制自己,保证在亲子代之间的传递。
(3)稳定性。结构稳定,保证遗传信息的准确,同时又具有可变化的机制。
(4)能够控制蛋白质的合成,从而控制生物的性状和新陈代谢。
必修1教材
第44页
寻找直接证据——实验
艾弗里
赫尔希
蔡斯
格里菲斯
二、肺炎链球菌的转化实验(体内转化实验)
1928年.英国.格里菲思
1.实验材料:
肺炎链球菌
(原核生物)
S型细菌 R型细菌
菌落
菌体
毒性
光滑Smooth
粗糙Rough
有多糖类的荚膜
无多糖类的荚膜
有毒性,可致死
无毒性
S型菌使小鼠患败血症死亡,R型菌无毒性。
2.实验原理:
注意:S型细菌有致病性,可使人和小鼠患肺炎,小鼠并发败血症死亡。S型细菌使人和小鼠所患病症不同。
阅读课本43页的第二段,勾画课本中表格的相应内容
肺炎链球菌
R型菌
(菌落粗糙)
S型菌
(菌落光滑)
第一组
不死亡
第二组
死亡
第三组
不死亡
第四组
死亡
注射R型
活细菌
注射S型
活细菌
注射加热致死的S型细菌
将R型活细菌与加热致死的S型细菌混合后注射
1.自变量是什么? 因变量是什么?
2.第一、二两组实验在整个实验中起什么作用?
3.实验过程
4.第四组小鼠为何死亡?死亡小鼠体内能分离出S型活菌,说明什么?推测导致小鼠死亡的S型活菌是从哪里来的?
①R型菌以某种方式使加热杀死的S型菌“复活”。
②S型死菌刺激小鼠体内产生免疫物质,后者刺激R型菌突变成了S型菌。
③S型菌的某种物质进入R型菌,合成了S型菌的荚膜。
3.对比第二、三组实验,说明什么?
材料1:1931年,道森和西亚成功地在体外进行了转化实验:只在培养皿中使R型菌转化成S型菌,不需要以小鼠为媒介。
材料2:1933年,阿洛维将R型菌和S型菌的无细胞提取液(所有完整细胞、细胞碎片、荚膜分子都通过离心和过滤从提取物中去掉)混合,培养皿上仍长出了S型菌。
结论:已经加热致死的S型细菌,含有某种促使R型活细菌转化为S型活细菌的活性物质—“转化因子”
R型菌
S型菌
转化因子
S型菌
后代
“转化因子究竟是什么物质?”
可以控制生物的性状,可以复制,并能传递给下一代。
即遗传物质
设计实验
要解决的问题 ——
转化因子是什么物质?
已有背景知识 ——
构成肺炎链球菌的主要物质有蛋白质、核酸、酯类、荚膜多糖等
如何设计实验?
思路1:将加热致死S型菌各种物质分离提纯后与R型混合,观察是否发生转化。
思路2:用酶解法分别去除细胞提取液中各种成分后,观察能否将R型菌转化。
1.实验的自变量、因变量是什么?
2.实验的对照组和实验组分别是什么?
3.实验的方法有哪些?
自变量:是否加入酶及酶的种类;
因变量:培养基中是否有活得S菌。
第一组为对照组,第二至第五组为实验组。
酶解法、细菌培养技术、对照实验等。
4.如何区分R型细菌和S型细菌?
5.本实验能得出什么结论?
观察菌落的形态。
(1)蛋白质、RNA、脂质不是S型细菌的遗传物质。(2)DNA是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。(3)DNA只有保持分子结构稳定才能行使遗传功能
20
肺炎链球菌转发实验
1928年,格里菲斯肺炎链球菌小鼠体内转化实验
体内转化实验
加热杀死的S型细菌有某种转化因子促使R型活细菌转化为S型活细菌
20世纪40年代,艾佛里
DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。
体外转化实验
S型菌
荚膜
控制荚膜形成的X基因
加热
杀死
被破坏的S型菌
X基因吸附在R型菌表面
X基因进入R型菌
重组
R型菌转化成S型菌
蛋白质和核酸对于高温的耐受力是不同的。在80-100 ℃的温度范围内,蛋白质失活,DNA双链解开;当温度恢复至室温后,DNA双链能够重新恢复,但蛋白质的活性无法恢复。
注意:
注意:只是少数R型细菌转化为S型细菌
基因重组
R型细菌转化为S型细菌的本质:
22
该实验的设计遵循哪些原理?其巧妙之处是什么?在实际操作过程中最大的困难是什么?
遵循单一变量原则和对照原则。
其巧妙之处在于:运用“减法原理”,即在每个实验组人为去除某个影响因素后,观察实验结果的变化。
最大的困难是:如何彻底去除细胞中含有的某种物质(糖类、脂质、蛋白质等)
科学方法:自变量控制中的“加法原理”和“减法原理”
与常态相比,人为去除某种影响因素的称为“减法原理”。
加法原理
与常态比较,人为增加某种影响因素的称为“加法原理”。
减法原理
S型细胞提取物
去掉蛋白质
去掉RNA
去DNA
①常温放置
H2O2溶液
②90℃加热
③加2滴FeCl3溶液
④加2滴H2O2酶
艾弗里实验引发的思考
——理应万众瞩目,缘何备受冷落?!
“四核苷酸假说”DNA不可能作为遗传物质?
提取的DNA分子和DNA酶纯度不够?
DNA只是对荚膜的形成有直接效应,而非遗传物质?
1948年
1949年
1950年
体内转化实验 体外转化实验
实验者
自变量
实验原理
实验方法
实验结果
实验结论
联
系
格里菲思
艾弗里及同事
加入培养基的S型菌的成分
S型细菌使人患肺炎或使小鼠患败血症
对S型细菌中的物质进行提取分离,分别单独地观察各种物质的作用
注射法
加热杀死的S型细菌能使R型细菌转化为S型细菌
S型细菌的DNA使R型细菌转化为S型细菌
S型细菌体内有“转化因子”
S型细菌的DNA是遗传物质
①所用材料相同,都是肺炎双球菌(R型和S型)
②体内转化实验是基础,仅说明S型细菌体内有“转化因子”,体外转化实验进一步证明“转化因子”是DNA
③两个转化实验都遵循对照原则、单一变量原则
注射的肺炎链球菌的类型、死活
酶解法、细菌培养技术
有没有比细菌更为简单的实验材料?
1952年,赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料,利用放射性同位素标记的新技术,完成了另一个更具有说服力的实验。
思维碰撞
艾弗里的实验引起了人们的注意。但是,由于艾弗里实验中无法真正提取出纯DNA来进一步验证遗传物质就是DNA,因此,仍有人对实验结论表示怀疑
赫尔希 蔡斯
三、T2噬菌体侵染细菌实验
资料:
T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌内的病毒。在T2噬菌体的化学组分中,60%是蛋白质,40%是DNA。
DNA的元素组成:
蛋白质的元素组成:
C. H. O. N. P
C. H. O. N.(S)
1.实验材料:噬菌体
增殖特点:在自身遗传物质的作用下,利用大肠杆菌体内的物质来合成自身的组成成分,进行大量增殖。当噬菌体增殖到一定数量后,大肠杆菌裂解,释放出大量的噬菌体。
成分与染色体相似的生物 同位素示踪法
28
噬菌体侵染细菌过程
吸附
注入
合成
组装
释放
噬菌体吸附在细菌表面
把遗传物质注入到细菌细胞
利用细菌的化学成分和酶系统合成出噬菌体的DNA、蛋白质
新合成的DNA、蛋白质组装成很多噬菌体
细菌解体,释放出噬菌体
1.进入大肠杆菌体内的是遗传物质
2.如何证明进入的是DNA还是蛋白质?
同位素标记法
实验方法:放射性同位素标记法
DNA:
C、H、O、N、P
蛋白质:
C、H、O、N、S
35S
32P
35S标记的噬菌体
32P标记的噬菌体
对这两种物质的分析表明:仅蛋白质分子中含有硫,磷几乎都存在于DNA分子中。
思考:标记哪一种元素可以把DNA和蛋白质分开?为什么?
设法把DNA与蛋白质分开,单独地、直接地观察它们的作用。
标记噬菌体方法:
在分别含有放射性同位素32P 和35S的培养基中培养细菌
分别用上述细菌培养T2噬菌体,制备含32P的噬菌体和含35S的噬菌体
1.先培养细菌
2.再培养噬菌体
直接用含有放射性同位素的培养基来培养噬菌体。
×
制备含有放射性标记噬菌体过程示意图
离
心
含35S培养基
含35S细菌
噬菌体侵染含35S细菌
含35S噬菌体
含32P培养基
含32P细菌
噬菌体侵染含32P细菌
含32P噬菌体
(1)噬菌体与大肠杆菌混合后为何要短时间保温?
(2)搅拌的目的是?
(3)离心的目的是?
(4)理论上,上清液和沉淀物中分别是什么?
使噬菌体充分侵染大肠杆菌
33
上清液:
沉淀物:
未进入的物质
大肠杆菌和其体内新合成的噬菌体
(4)理论上,上清液和沉淀物中分别是什么?
34
(5)噬菌体与大肠杆菌混合后要短时间保温
(6)搅拌不充分有什么影响?
搅拌不充分有少量含35S的蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。
保温时间过短:
保温时间过长:
部分噬菌体还没有侵染大肠杆菌,
大肠杆菌已裂解释放出子代噬菌体
上清液中出现放射性
上清液中出现放射性
上清液:
沉淀物:
实际:
实际:
理论:未进入的物质
理论:大肠杆菌和其体内新合成的噬菌体
未吸附的噬菌体、未进入的物质、已经释放的噬菌体
大肠杆菌和其体内新合成的噬菌体、吸附着大肠杆菌的噬菌体或物质
请对进入大肠杆菌的遗传物质是什么作出假设
36
组别 第一组实验
(35S标记蛋白质) 第二组实验
(32P标记DNA)
假设1:蛋白质进入,DNA未进入 上清液放射性_______
沉淀物放射性_______ 上清液放射性_______
沉淀物放射性_______
假设2:DNA进入,
蛋白质未进入 上清液放射性_______
沉淀物放射性_______ 上清液放射性_______
沉淀物放射性_______
假设3:DNA和蛋白质都进入 上清液放射性_______
沉淀物放射性_______ 上清液放射性_______
沉淀物放射性_______
较低
较高
较高
较低
较高
较低
较低
较高
较低
较高
较低
较高
结论:DNA进入,蛋白质未进入。即DNA是遗传物质
37
亲代噬菌体 上清液(主要是噬菌体外壳) 沉淀物(主要是被侵染的大肠杆菌) 细菌裂解释放出的子代噬菌体有无放射性
35S-蛋白质
32P-DNA
实验结果
放射性高
放射性低
没有检测到35S
放射性低
放射性高
检测到32P
1. 35S标记的一组,为什么沉淀中出现了放射性?
2. 32P标记的一组,为什么上清液中出现了放射性?
搅拌不充分,仍有少量含35S的噬菌体蛋白质外壳吸附在细菌表面
a. 保温时间过短,部分噬菌体DNA还未侵染到细菌细胞内;
b. 保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖,后子代噬菌体释放出来;
【思考】以下噬菌体侵染细菌实验中,子代的标记情况?
①若用32P和35S标记病毒而细菌未被标记,
只在子代病毒的DNA中有32P标记。
②若用32P和35S标记细菌而病毒未被标记,
在子代病毒的DNA和蛋白质外壳中均有标记元素。
③若用C、H、O、N标记病毒而细菌未被标记,
只在子代病毒的DNA中有标记元素。
④若用C、H、O、N标记细菌而病毒未被标记,
子代病毒的DNA和蛋白质外壳中均有标记元素。
两个经典实验比较
艾弗里实验 噬菌体侵染细菌实验
处理方式
对照原则
实验结论
设计思路
直接分离
放射性同位素标记法
S型细菌的分离物质分别与R型细菌混合培养相互对照
分别标记噬菌体DNA和蛋白质的两组实验相互对照
设法将DNA与其他物质分开,单独地直接研究各自不同的遗传功能
证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质
证明DNA是遗传物质,但不能有效证明蛋白质不是遗传物质(蛋白质没有进入细菌体内)
1.个体很小,结构简单,易于观察由遗传物质改变导致的结构和功能的变化;繁殖快,细菌20-30min就可以繁殖一代,病毒可在短时间内大量繁殖。
P46思考讨论:
2.巧妙运用减法原理,最大的困难是如何彻底去除细胞中含有的某种物质(糖类、脂质、蛋白质等)。
3.艾弗里:细胞培养技术、物质的提纯和鉴定技术等;
赫尔希:噬菌体的培养技术、同位素标记法、物质的提取和分离等技术
启示:科学成果的取得必须有技术手段作保证,技术的发展需要以科学原理为基础,因此,科学与技术是相互支持、相互促进的。
DNA是唯一的遗传物质吗?
如果你是科学家,请设计实验证明烟草花叶病毒的遗传物质是什么?
背景知识:烟草花叶病毒TMV是由RNA和蛋白质组成的,在感染烟草时,会出现致病斑。
正常叶片
感染烟草花叶病素的叶片
(1)烟草花叶病毒,感染烟草→
(2)提取烟草花叶病毒的RNA,感染烟草→
(3)提取烟草花叶病毒的蛋白质,感染烟草→
烟叶无病斑
烟叶出现病斑,并提取出烟草花叶病毒
烟叶出现病斑
RNA
蛋白质
RNA
分
离
感染
烟草
感染
烟草
出现病斑
不出现病斑
烟草花叶病毒(RNA和蛋白质)
TMV蛋白质 +HRV的RNA
HRV
HRV蛋白质 +TMV的RNA
TMV
烟草花叶病毒重建实验
实验结论:烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,蛋白质不是遗传物质
车前草病毒HRV
烟草花叶病毒TMV
RNA
蛋白质
蛋白质
RNA
+
+
项目 核酸 遗传物质
类型 核苷酸种类 碱基
种类 类型 核苷酸种类 碱基
种类
细胞
生物 真核细胞 DNA和RNA 8 5 DNA 4 4
原核生物 DNA和RNA ____ ___ _____ ___ ___
非细胞生物
(病毒) DNA病毒 DNA 4 4 _____ ___ ___
RNA病毒 RNA ___ ___ ____ ____ ____
8
5
DNA
4
4
DNA
4
4
4
4
真核生物、原核生物及病毒的核酸类型
绝大多数生物的遗传物质是 ,只有少数生物的遗传物质是 。所以说DNA是主要的遗传物质。
DNA
RNA
RNA
4
4
①真核生物和原核生物的遗传物质一定是 DNA
②病毒的遗传物质要么为 DNA,要么为 RNA
③对于任何一种生物,其遗传物质只能是 DNA,或只能是 RNA,不会有“主要是 DNA”之说——只有面对“所有生物”综合描述时,才会有“主要是 DNA”之说。
3、在只含RNA的少数病毒(烟草花叶病毒、HIV、SARS、流感、禽流感)中,RNA才作为遗传物质。
2、凡是具有细胞结构的生物,既有DNA,又有RNA,遗传物质是DNA
1、一切生物的遗传物质是核酸
思考:
1、动物和人体的遗传物质是什么?
DNA
2、烟草的遗传物质是什么?
DNA
3、烟草花叶病毒的遗传物质是什么?
RNA
4、细菌的遗传物质是什么?
DNA
5、一切生物的遗传物质是什么?
核酸
6、病毒的遗传物质是什么?
DNA或RNA
4、植物细胞中DNA的载体:染色体、叶绿体、线粒体,动物细胞中DNA的载体:染色体、线粒体,所以说,染色体是DNA的主要载体。原核细胞和病毒没有染色体。
设法将DNA与蛋白质分开,单独地.直接地去观察它们的作用。
以上成功之处,把几中成分分离后独立
1.科学的结论来自于科学的实验,同样也来自于对实验结果的正确说明。
提出问题——讲述研究的过程和方法——得出结论——提出新问题——讲述新的研究过程和方法——得出新结论”
任何一项科学成就,都是一个“实践、认识、再实践、再认识”的过程
T2噬菌体侵染细菌实验
肺炎链球菌转化实验
体外转化实验
体内转化实验
实验方法
放射性同位素标记法:
32P标记DNA
35S标记蛋白质
实验结论
DNA是T2噬菌体的遗传物质
实验过程
标记噬菌体
用含32P或35S的培养基培养大肠杆菌,再用大肠杆菌培养T2噬菌体。
噬菌体侵染细菌
用含32P或35S的T2噬菌体与细菌混合培养,然后搅拌、离心检测放射性
实验过程
实验结论
实验过程
实验结论
1.R型活细菌+小鼠→不死亡
2.S型活细菌+小鼠→死亡
3.加热致死的S型细菌+小鼠→不死亡
4.加热杀死的S型细菌+R型活细菌+小鼠→死亡
加热致死的S型细菌中含有使R型细菌转化为S型细菌的转化因子
1.S型细菌提取液+R型活细菌→R、S
2.S型细菌提取液+蛋白酶/RNA酶/酯酶+R型活细菌→R、S
3.S型细菌提取液+DNA酶+R型活细菌→R
DNA是使R型细菌产生稳定性遗传变化的物质
T2噬菌体侵染细菌实验
肺炎链球菌转化实验
体外转化实验
体内转化实验
实验方法
放射性同位素标记法:
32P标记DNA
35S标记蛋白质
实验结论
DNA是T2噬菌体的遗传物质
实验过程
标记噬菌体
用含32P或35S的培养基培养大肠杆菌,再用大肠杆菌培养T2噬菌体。
噬菌体侵染细菌
用含32P或35S的T2噬菌体与细菌混合培养,然后搅拌、离心检测放射性
实验过程
实验结论
实验过程
实验结论
1.R型活细菌+小鼠→不死亡
2.S型活细菌+小鼠→死亡
3.加热致死的S型细菌+小鼠→不死亡
4.加热杀死的S型细菌+R型活细菌+小鼠→死亡
加热致死的S型细菌中含有使R型细菌转化为S型细菌的转化因子
1.S型细菌提取液+R型活细菌→R、S
2.S型细菌提取液+蛋白酶/RNA酶/酯酶+R型活细菌→R、S
3.S型细菌提取液+DNA酶+R型活细菌→R
DNA是使R型细菌产生稳定性遗传变化的物质
课后练习
基础题 1.(1)(×);(2)(×)。 2.C。3.D。
拓展题
1.实验表明,噬菌体在感染大肠杆菌时,进入大肠杆菌内的主要是DNA,而大多数蛋白质却留在大肠杆菌的外面。因此,大肠杆菌裂解后,释放出的子代噬菌体是利用亲代噬菌体的遗传信息,以大肠杆菌的氨基酸为原料来合成蛋白质外壳的。
2.肺炎双球菌转化实验和噬菌体感染大肠杆菌的实验证明,作为遗传物质至少要具备以下几个条件:能够精确地复制自己;能够指导蛋白质合成,从而控制生物的性状和新陈代谢;具有贮存遗传信息的能力;结构比较稳定等。
$$