生物技术与工程知识清单-2024-2025学年高二下学期生物人教版选择性必修3

选择性必修三 生物技术与工程 第1章 发酵工程 第1节 传统发酵技术的应用 1、什么是发酵？人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程 2、腐乳制作的原理是什么？蛋白质小分子的肽和氨基酸。脂肪甘油和脂肪酸。 3、毛霉是什么样的菌？生殖方式是什么？代谢类型是什么？毛霉是一种丝状真菌，其繁殖方式为孢子生殖，代谢类型是异养需氧型 4、制作泡菜用的是什么菌？来源是哪儿？乳酸链球菌和乳酸杆菌。菌种来源：植物体表面天然的乳酸菌 5、泡菜制作的原理是什么？C6H12O62C3H6O3(乳酸)＋能量 6、泡菜制作的流程是什么？配置盐水→原料处理→装坛→封坛发酵 7、乳酸菌和醋酸菌分别是什么样的菌？异养兼性厌氧型；异养需氧型 8、制作果酒的过程中对氧气的需求是？前期需氧，后期不需氧 9、制作果醋时，在氧气和糖源充足的情况下，反应原理是什么？C6H12O6＋2O22CH3COOH＋2CO2＋2H2O＋能量 10、制作果醋时，在糖源不足时，反应式是什么？C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O＋能量 11、在果酒发酵时，发酵瓶要留有1/3的空间，原因是什么？让酵母菌大量繁殖；防止发酵液溢出 12、在果酒和果醋的制作过程中，怎么对发酵瓶消毒？用洗洁精清洗干净；并用70%的酒精消毒，晾干备用 13、酒精发酵时，温度要控制在多少度？时间是多长？18--30℃；10--12d 14、果醋发酵时，需要的环境温度和时间是什么？30--35℃；7--8d 15、制作泡菜时配制的盐水为什么要先煮沸，再冷却使用？一是为了杀死盐水中的杂菌，二是为了排出溶解的氧气；冷却是防止温度过高杀死发酵所需要的乳酸菌 16、什么是发酵工程？发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品 17、发酵工程的基本环节是什么？选育菌种、扩大化培养、配置培养基、灭菌、接种、发酵、分离和提纯产物、获得产品 18、啤酒的工业化的生产流程是什么？发芽→焙烤→碾磨→糖化→蒸煮→发酵→消毒→终止 19、发酵工程的特点是什么？生产条件温和、原料丰富且价格低廉，产物专一、废弃物对环境污染小易处理 20、发酵工程的中心环节是什么？发酵罐内发酵 21、发酵产品是微生物细胞本身，如何获得发酵产品？在发酵结束以后，采取过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥 22、发酵产品是细胞代谢物，如何获得发酵产品？根据产物的性质采取适当的提取、分离、纯化的措施 23、单细胞蛋白是什么？以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得的大量的微生物菌体 24、利用发酵工程相关知识，如何大量生产新冠病毒疫苗？可将新冠病毒的抗原基因转入某种微生物体内，再通过发酵工程得到的产品可以当作新冠病毒疫苗。 25、酱油是如何生产的？利用产生蛋白酶的黑霉菌，将大豆中的蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，经淋洗、调制而成 26、啤酒的工业化生产主发酵阶段主要完成什么？酵母菌繁殖、糖的分解、代谢物的生成 27、啤酒的工业化生产后发酵阶段主要完成什么？形成成熟、澄清的啤酒 28、利用纤维素废料能生产什么？纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质 29、青霉素发酵是高耗氧的过程，如何能够保证发酵过程中给微生物持续高效供氧？用基因工程的方法，将血红蛋白基因导入青霉素生产菌，提高菌体对氧的利用率 30、在青霉素发酵的过程中总有头孢霉素产生，如何改造青霉素生产菌使其只产生青霉素，或者只生产头孢霉素？在青霉素和头孢霉素的生产过程中，他们有一个共同的前体，这个前体经不同的酶催化，分别合成2个产物。可以对两种酶的基因进行改造或敲除，从而使青霉素生产菌只能生产一种产物 31、青贮饲料中添加乳酸菌有什么意义？提高饲料的品质、使饲料保鲜、动物食用后还能提高免疫力 第2节 微生物培养技术及应用 1、什么是培养基？人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质 2、培养基的用途是什么？用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物 3、培养的主要营养物质有什么？水、碳源、氮源、无机盐 4、以下微生物培养时有什么特殊需求？ ①乳酸杆菌 添加维生素 ②霉菌 pH调至酸性 ③细菌 pH调至中性或弱碱性 ④厌氧微生物 无氧 5、无菌技术包括什么？消毒和灭菌 6、消毒的常用方法有哪些？煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒、化学药物消毒 7、灭菌常用的方法有哪些？ 湿热灭菌法、干热灭菌法、灼烧灭菌法 8、为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在哪里进行？ 超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行 9、什么是微生物的纯培养？ 获得由单一个体繁殖而来的子细胞群体 10、什么是菌落？ 分散的微生物在适宜的固体培养基表现或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体 11、微生物的纯培养包括哪些步骤？配制培养基→灭菌→倒平板→接种和分离→培养 12、用什么培养基培养酵母菌？ 马铃薯培养基 13、根据此图，回答平板划线法的正确流程是？ d→b→f→a→e→c→h→g 14、划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？ 在第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？需要。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者；能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落 接种结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养，未接种的培养基表面如果有菌落生长，说明了什么？对照，未接种的培养基经过培养后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的；若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底，或培养基被污染了，需要重新制备。 15、怎么培养固氮微生物？缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中N2的微生物 16、什么是选择培养基？允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长 17、什么是鉴别培养基？根据微生物的代谢特点在培养基中加入某种指示剂或化学药品，进而产生特定的颜色或其他变化 18、怎么从微生物中筛选出真菌？在培养基中加入抗生素 19、怎么筛选出自养微生物？无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物 20、在稀释涂布平板法中，系列稀释操作的目的是什么？通过液体稀释的方法分散细胞，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散 21、涂布平板的操作步骤是什么？取菌液→涂布器消毒→涂布器灭菌→涂布平板 22、微生物数量的测定方法是？显微镜计数法；活菌计数法（稀释涂布平板法） 23、为了保证结果准确，一般选择菌落数在多少的平板进行计数？30---300 24、怎样分离尿素分解菌？配制以尿素为唯一氮源的培养基，能在该培养基中生长的细菌为尿素分解菌 25、稀释涂布平板法，统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，原因是什么？因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 26、在泡菜腌制过程中坛、蔬菜等均未进行严格灭菌，而在发酵过程中一般不会出现其他杂菌大量繁殖，其原因是？乳酸菌产生的酸性及厌氧环境不利于其他杂菌的生长 27、所以发酵过程中一般不用严格灭菌，泡菜坛内表面会长出一层白膜，白膜是怎么产生的？大量酵母菌聚集在发酵液表面形成的 第二章 细胞工程 第一节 植物细胞工程 1、植物细胞工程包括哪些技术？植物组织培养、植物体细胞杂交 2、什么是细胞的全能性？细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能 3、细胞的全能性在什么情况下能表现出来？离体、营养物质、激素、适宜的温度和pH 4、什么是植物组织培养？将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术 5、植物组织培养的基本过程是？接种外植体诱导愈伤组织诱导生芽诱导生根移栽成活 6、什么是脱分化？在一定的激素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，进而形成愈伤组织的过程 7、什么是愈伤组织？脱分化产生的不定形的薄壁组织团块 8、什么是再分化？愈伤组织重新分化成芽、根等器官的过程 9、怎么对外植体进行消毒？酒精消毒30s→无菌水冲洗2-3次→次氯酸钠溶液处理30min→无菌水冲洗2-3次 10、长出完整试管苗以后，需将其移植到什么样的环境中，待其长壮后在移栽入土？将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中 11、在植物组织培养的过程中需要用到几种培养基？3种培养基。诱导愈伤组织的培养基，诱导生芽的培养基，诱导生根的培养基 12、诱导愈伤组织形成需不需要光照？诱导形成愈伤组织不需要光照 13、在培养基中，什么样的植物激素比例促进生根？什么样的比例促进生芽？什么样的比例促进愈伤组织形成？①适当提高生长素与细胞分裂素的比例容易生根。 ②适当提高细胞分裂素与生长素的比例容易生芽。③比例适中诱导产生愈伤组织 14、选用菊花的外植体时，一般选用形成层细胞或组织块，其原因是什么？形成层细胞由于分裂旺盛，全能性高，容易诱导形成愈伤组织，其他部分如叶、花全能性低，不易培养成完整植株 15、为什么说从繁殖方式上看，植物组织培养的繁殖方式是无性繁殖？植物组织培养是在细胞有丝分裂和细胞分化的基础上实现的，此过程并没有生殖细胞的产生，所以是无性繁殖 16、在植物组织培养的过程中，为什么要求无菌操作？培养物一旦受到微生物的污染，这些微生物会和外植体争夺培养基中的营养物质，并且产生大量对外植体有害的物质，导致外植体死亡 17、原生质体怎么获得？去除细胞壁获得原生质体，用到的酶是纤维素酶和果胶酶 18、诱导原生质体融合的物理方法有哪些？化学方法有哪些？人工诱导的物理法包括电融合法、离心法，化学法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2＋—高pH融合法 19、原生质体融合成功的标志是什么？融合的原生质体再生出细胞壁，这是原生质体融合成功的标志 20、植物体细胞杂交技术的优势是什么？打破生殖隔离，实现远缘杂交育种 21、植物体细胞杂交实现的基础和植物组织培养的理论基础分别是什么？细胞膜的流动性；植物细胞的全能性 22、植物细胞工程的应用有哪四个方面？快速繁殖、作物脱毒、作物新品种的培育、细胞产物的工厂化生产 23、什么是初生代谢物？初生代谢是生物生长和生存所必需的代谢活动，因此在整个生命过程中它一直进行着 24、什么是次生代谢物？次生代谢不是生物生长所必需的，一般在特定的组织和器官中，并在一定的环境和时间条件下才进行 25、植物体细胞杂交形成的杂种植株是几倍体？染色体组数＝两种植物体细胞内染色体组数之和。 ②植物体细胞杂交形成的杂种植株，有几个染色体组就称为几倍体 26、植物细胞培养是什么？在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术 第二节 动物细胞工程 1、动物细胞工程包括哪些技术？动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞工程、动物细胞融合、动物细胞核移植 2、什么是动物细胞培养？从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术 3、动物细胞培养需要的营养条件是什么？①营养条件：糖类、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、微量元素、血清 4、动物细胞培养怎么创造无菌、无毒的条件？无菌、无毒：培养液和培养用具进行无菌处理、培养液定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 5、动物细胞培养的温度和pH分别是？温度、pH和渗透压：温度36.5℃，pH7.2-7.4 6、动物细胞培养所需的气体环境是什么？气体环境：95%的空气和5%的CO2的混合气体的CO2培养箱 7、5%的CO2的作用是什么？维持培养液的pH 8、 动物细胞培养的过程是什么？ 9、 如何制备细胞悬液？首先对新鲜取材的动物组织进行处理，或用机械方法，或用胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理一段时间将细胞分散成单个细胞，然后加入培养液制成细胞悬液 10、 动物细胞培养的原理是什么？细胞分裂的原理 11、 体外培养的动物细胞由哪两大类？体外培养的细胞包括体细胞培养和干细胞培养 12、 什么是细胞贴壁？细胞贴壁是指体外培养的细胞贴附在瓶壁生长的现象 13、 什么是接触抑制？接触抑制是指当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象 14、 干细胞存在于哪儿？包括哪些类型？干细胞存在于早期胚胎、骨髓、脐带血等多种的组织和器官 15、 什么是胚胎干细胞？简称ES细胞，存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体所有组织和器官甚至个体的潜能 16、 什么是成体干细胞？成体组织或器官内的干细胞，包括骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞。具有组织特异性，只能分化成特定的组织或细胞，不具有发育成完整个体的潜能。 17、 获取iPS细胞的方法？借助载体将特定基因导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞 18、 胚胎干细胞为什么可以解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题？其应用有什么限制因素？通过胚胎干细胞体外诱导分化，可以培育出人造组织器官，从而解决供体器官不足问题，另一方面，由于是自身细胞经诱导分化形成的，所以无免疫排斥反应。胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了应用 19、 为什么科学家认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞？iPS细胞的诱导过程无需破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应 20、 什么是动物细胞融合技术？两个或多个细胞融合形成一个细胞的技术 21、 怎么样诱导动物细胞融合？PEG、电融合、灭活的病毒 22、 灭活病毒诱导细胞融合的原理是？灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 23、 B淋巴细胞的特点是什么？能分泌抗体，但不具有分裂能力 24、 骨髓瘤细胞的特点是什么？能无限增殖 25、 杂交瘤细胞的特点是什么？既能无限增殖又能产生特异性抗体 26、 单克隆抗体的制备过程？ 27、 单克隆抗体的制备需要两次筛选，目的是什么？ 第一次筛选：特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞（“B—B”细胞、“瘤—瘤”细胞）都会死亡，只有杂交瘤细胞（“B—瘤”细胞）才能生长 第二次筛选：用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群 28、 动物细胞完成融合的标志是什么？当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞，则标志着动物细胞融合的完成 29、 什么是动物细胞核移植？将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育为动物个体的技术 30、 动物细胞核移植技术的原理是什么？动物体细胞核具有全能性 31、 哺乳动物核移植分为哪两种？哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植 32、 体细胞核移植的过程是？ 33、 什么是抗体---药物偶联物？将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤 34、 怎么激活重构胚？用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂 35、 什么是重构胚？人工重新构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力 36、 动物细胞核移植技术中的去核方法有哪些？显微操作去核法、梯度离心、紫外线短时间照射 37、 生物反应器怎么获得？将药用蛋白基因与在乳腺中特异性表达的基因的启动子连接在一起 38、 MII的卵母细胞的核是什么？纺锤体---染色体的复合物 第3节 胚胎工程 1、胚胎工程是什么？对生殖细胞、受精卵或早期胚胎细胞进行多种显微操作和处理，然后将获得的胚胎移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求 2、胚胎工程技术包括什么？体外受精、胚胎移植、胚胎分割 3、胚胎工程的目的是什么？然后将获得的胚胎移植到雌性动物体内生产后代，以满足人类的各种需求 4、受精是什么？精子与卵子结合形成合子(即受精卵)的过程 5、受精的准备阶段包括？包括精子获能，卵子培养成熟到MII中期 6、受精阶段包括哪四步？ 7、获能液的作用是使精子获能，包括哪两种？肝素、Ca2＋载体 8、受精的标志是什么？观察到两个极体或者雌、雄原核作为受精的标志 9、防止多精入卵受精的生理反应有哪些？有什么意义？一是透明带发生生理反应，二是卵细胞膜发生生理反应。防止多精入卵，保证受精卵中遗传物质与亲代体细胞一致，从而保证遗传的稳定性 10、胚胎发育包括哪些阶段？ 11、囊胚阶段包括哪些结构？滋养层、内细胞团 12、原肠胚包括哪些胚层？外胚层、内胚层、中胚层 13、什么是孵化？囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来的过程 14、孵化的意义是什么？如果不能正常孵化，胚胎就无法继续发育 15、将体外培养的胚胎移植到子宫时，应选择至少发 到什么阶段的胚胎：小鼠？绵羊？猪？马？牛？小鼠：桑葚胚；绵羊：16细胞；猪：4～6细胞；马：囊胚；牛：8～16细胞。 16、胚胎早期发育过程中，具有全能性的时期有哪些？桑葚胚期及之前的时期 17、卵母细胞要培养到什么时期才具备受精能力？MII 18、胚胎移植的概念？通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术 19、胚胎移植中的供体是？提供胚胎的遗传性状优良的、生产能力强的个体 20、胚胎移植中的受体是？接受胚胎的具有健康体质和正常繁殖能力的个体 21、胚胎移植的操作过程是？ 22、胚胎移植的生理学基础是？ 23、胚胎分割选择什么样的材料？发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚 24、胚胎分割的操作要求是？分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割 25、胚胎移植时怎样才能做到超数排卵？对供体母畜用促性腺激素处理 26、胚胎移植时怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致？对供体和受体母畜进行同期发情处理 27、胚胎移植的优势是什么？可以发挥雌性优良个体的繁殖能力 28、胚胎分割是指什么？采用机械的方法将早期胚胎分割成2等份、4等份、或8等份，经移植获得同卵双胎或者多胎的技术 第三章 基因工程 第一节 重组DNA技术的基本工具 1、基因工程的概念？按照人们的意愿，通过转基因等技术手段，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的生物类型和生物产品。 2、重组DNA技术的基本工具有哪些？限制酶、DNA连接酶、载体 3、限制性内切核酸酶的来源是？主要来自于原核生物 4、限制酶的作用是什么？识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。 5、DNA连接酶的作用是什么？将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 6、连接酶有哪两种？分别连接什么末端？E·coli DNA连接酶，连接黏性末端；T4DNA连接酶，连接黏性末端和平末端 7、常见的载体有哪些？质粒、噬菌体、动植物病毒 8、载体的特点是什么？有一个至多个限制酶切割位点；携带外源DNA片段的质粒进入到受体细胞后，能在细胞内进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制；常有特殊的标记基因，便于重组DNA分子的筛选 9、限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰 10、选择限制酶对DNA进行切割时，怎么确保出现相同黏性末端？用相同的限制酶去切割质粒或目的基因 11、为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接，应该怎么样选择限制酶？也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒 12、与DNA有关的几种酶的比较？ ①限制酶的作用是什么？将DNA分子切成两个或多个DNA片段 ②DNA连接酶的作用是什么？将两个DNA片段连接成一个DNA分子 ③DNA聚合酶的作用是什么？以DNA单链为模版，依次将单个脱氧核苷酸连接到单链的末端 ④解旋酶的作用是什么？将双链DNA分子的局部解旋为单链，形成两条长链 ⑤DNA水解酶的作用是什么？将DNA片段水解为单个的脱氧核苷酸 13、 基因拼接的理论基础是什么？①DNA的基本单位都是脱氧核苷酸；②DNA分子都遵循碱基互补配对原则；③双链DNA分子的结构都是双螺旋结构 第二节 基因工程的基本操作程序 1、什么是目的基因？在基因工程的设计和操作中，用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因 2、PCR是什么？（聚合酶链式反应)：是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术 3、PCR反应的条件是什么？一定的缓冲溶液、DNA模板、2种引物、4种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶，以及能自动调控温度的仪器 4、PCR的过程是？高温变性→低温复性→适温延伸 5、PCR过程中加入的既能充当原料，又能提供能量的物质是什么？dNTP（即dATP、dGTP、dTTP、dCTP），既可作为合成DNA子链的原料，又可为DNA的合成提供能量。 6、PCR中的引物是什么？引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。 7、PCR扩增过程中的循环图示与规律 8、PCR进行n次，共消耗的引物的数量是多少？2n＋1－2 9、DNA粗提取的原理是什么？DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精；DNA溶于2mol/L的NaCl溶液 10、DNA怎么鉴定？DNA与二苯胺试剂在沸水浴的条件下呈蓝色 11、电泳的原理是什么？DNA分子具有可解离的基团，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。 12、PCR的产物一般怎样鉴定？PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定 13、在凝胶中DNA分子的迁移速率与哪些因素有关？在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。 14、DNA电泳如何鉴定？凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300_nm的紫外灯下被检测出来。 15、基因工程的核心是什么？基因表达载体的构建 16、基因表达载体的作用及其组成？ 17、启动子的作用是什么？位于基因的上游，RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA 18、终止子的作用是什么？位于基因的下游，使转录在所需要的地方停下来 19、起始密码子的作用是什么?翻译的起始信号(编码氨基酸)，位于mRNA上 20、终止密码子的作用是什么？翻译的结束信号(不编码氨基酸)，位于mRNA上 21、如何将目的基因导入植物细胞？将目的基因插入Ti质粒的T－DNA中→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的染色体DNA上→表达 22、农杆菌转化法中的两次拼接和两次导入分别是什么？第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T－DNA上，第二次拼接(非人工操作)是指插入目的基因的T－DNA拼接到受体细胞的染色体DNA上；第一次导入是将含目的基因的Ti质粒导入农杆菌，第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T－DNA导入受体细胞。 23、转化是什么？目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。此处“转化”与肺炎链球菌转化实验中的“转化”含义相同，实质都是基因重组。 24、如何将目的基因导入动物细胞？将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 25、如何将目的基因导入微生物细胞？Ca2＋处理细胞→细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态→基因表达载体导入 26、如何在分子水平进行目的基因的检测与鉴定？PCR等技术、抗原抗体杂交 27、如何在个体生物学水平进行目的基因的检测与鉴定？抗虫抗病接种实验 28、PCR技术为什么要用耐高温的DNA聚合酶？PCR的步骤里第一步需要高温变性，普通的DNA聚合酶会变性失活 29、PCR技术为什么需要引物？DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链。 30、利用PCR技术扩增目的基因时需要两种引物，原因是什么？目的基因的两条反向平行的链都作为模板，其碱基序列不同。 31、在PCR扩增目的基因之前，需先设计引物，对设计的两种引物之间的碱基序列的要求是什么？两种引物之间不能互补配对。 32、在PCR的反应体系里为什么要加入Mg2+？真核生物和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活 33、质粒上的标记基因的作用是什么？便于重组质粒的筛选和鉴定 第三节 基因工程的应用 1、如何获得抗虫植物？从某些生物体内分离出抗虫功能的基因 2、如何利用基因工程的方法提高动物的生长速率？给动物导入外源生长激素基因 3、如何利用基因工程，改善畜产品的品质？将肠乳糖酶基因导入奶牛的基因组，使获得的转基因牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，而其他成分不受影响。 4、如何制作乳腺生物反应器？将药用蛋白基因与乳腺中特异性表达的基因的启动子等调控原件重组在一起，通过显微注射的方法导入哺乳动物的受精卵中 5、如何培育出不会引起免疫排斥反应的转基因克隆器官？利用基因工程技术对猪的器官进行改造，在器官供体的基因组中导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出不会引起免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。 6、种植转基因抗虫棉若干年后，害虫会不会对转基因抗虫棉产生抗性？为什么？会。害虫会因遗传物质发生改变产生对转基因抗虫棉的抗性。 7、为提高动物的生长速度，需将外源生长激素基因导入动物体内，应该选择的受体细胞是什么？并说明理由。受精卵。受精卵体积较大，操作较容易，营养物质含量丰富，也能保障发育成的个体所有细胞都含有外源生长激素基因，全能性较高 8、什么是基因工程菌？用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类一般称为基因工程菌 第四节 蛋白质工程的原理和应用 1、蛋白质工程的过程是什么？从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质 2、蛋白质工程的实质是什么？定向改造或生产人类所需要的蛋白质 3、蛋白质工程的结果是什么？可生产自然界中不存在的蛋白质 4、基因工程的步骤包括哪几步？目的基因的筛选与获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 5、基因工程的实质是什么？定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品 6、基因工程的结果是什么？只能生产自然界中已存在的蛋白质 7、对天然蛋白质进行改造，你认为应该是直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？原因是什么？应该通过对基因的操作来实现对天然蛋白质的改造。主要原因：①蛋白质具有十分复杂的空间结构，基因的结构相对简单，容易改造；②改造后的基因可以遗传给下一代，被改造的蛋白质无法遗传。 1 学科网（北京）股份有限公司 $$