第68讲 DNA的粗提取与凝胶电泳技术-【过一轮】备战2025年高考一轮复习精讲课件（新教材新高考）

66.DNA的粗提取与凝胶电泳 鱼票出品，必属精品 2024-2025学年-高考一轮复习-高中生物学 主讲人：鱼票月半 概念图 考点一 DNA的粗提取与鉴定 01 1.实验原理 考点1.DNA的粗提取与鉴定 4 2.实验步骤 考点1.DNA的粗提取与鉴定 ①加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧 分子的断裂，导致 分子不能形成絮状沉淀。 ②本实验不能用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核(无 ，可选用鸡血细胞作为材料。 5 2.实验步骤 考点1.DNA的粗提取与鉴定 ③鉴定 时，一支试管为对照组，另一支试管为实验组。两支试管中都先加物质的量浓度为的溶液；在实验组试管中加 丝状物，对照组不加；加入二苯胺试剂后沸水浴加热。待试管冷却后，结果可以看到加 丝状物的试管呈现蓝色，对照组无色。如果实验组蓝色较浅，说明提取出的 量太少。 6 （选择性必修“探究·实践”） 的粗提取实验中过滤能否用滤纸代替纱布？ ________________________________________________________________。 不能，因为会被吸附到滤纸上而大量损失，影响最终提取的量 阐述基本原理，突破长句表达 7 （2023·广东卷）“ 粗提取与鉴定”实验的基本过程是裂解→ 分离→ 沉淀→ 鉴 定。下列叙述错误的是( ) 。 D A.裂解：使细胞破裂释放出 等物质 B.分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等 C.沉淀：可反复多次以提高 的纯度 D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色 8 解析 裂解是加蒸馏水让细胞吸水涨破，释放出等物质，A正确； 在不同浓 度的溶液中溶解度不同，能溶于的 溶液，将溶液过滤，即可将混 合物中的多糖、蛋白质等与分离，B正确； 不溶于酒精，而某些蛋白质溶于 酒精，可以反复多次用酒精沉淀出，提高纯度，C正确；将溶解于 溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴五分钟，待冷却后溶液呈现蓝色，D错误。 9 （2022·山东卷）关于“ 的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是( ) 。 B A.过滤液沉淀过程在冰箱中进行是为了防止 降解 B.离心研磨液是为了加速 的沉淀 C.在一定温度下， 遇二苯胺试剂呈现蓝色 D.粗提取的 中可能含有蛋白质 解析 离心研磨液是为了使细胞碎片沉淀，B错误。 10 DNA片段的扩增及电泳鉴定 考点二 02 （1）原理：利用了______________原理，通过调节温度来控制 双链的 解聚与结合。 （2）电泳：分子具有可解离的基团，在一定的 下，这些基团可以带上 正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷______的电 极移动，这个过程就是电泳。 （3）产物的鉴定：一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中 分子的 迁移速率与凝胶的浓度、 分子的____________等有关。 的热变性 相反 大小和构象 1.实验基础 考点2.DNA片段的扩增及电泳鉴定 12 2.PCR实验操作步骤 考点2.DNA片段的扩增及电泳鉴定 13 3.DNA的电泳鉴定 考点2.DNA片段的扩增及电泳鉴定 ①为避免外源等因素的污染， 实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理。 ②在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头必须更换，避免试剂的污染。③在进行操作时，一定要戴好一次性手套。 ④观察 条带的分布及粗细程度来评价扩增的效果。 14 （选择性必修 “探究·实践”）如果电泳鉴定的结果不止一条条带，请分析产生这 个结果的可能原因。_______________________________________________________ _________________________________________________。 引物设计不合理，它们与非目的序列有同源性或容易聚合形成 引物二聚体；复性温度过低；聚合酶的质量不好等 阐述基本原理，突破长句表达 15 （2021·湖北卷）某实验利用 技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条 带（引物与模板完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为 了减少反应非特异条带的产生，以下措施中有效的是( ) 。 D A.增加模板 的量 B.延长热变性的时间 C.延长延伸的时间 D.提高复性的温度 解析 非特异性产物增加原因可能是复性温度过低造成引物与模板的结合位点增加， 故可通过提高复性的温度来减少非特异条带的产生，D正确。 16 （2023·天津期末）用 方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以 下电泳图谱，其中1号为标准样，号为 产物；其中2号的模板 为野生型植株，号模板为转基因植株的 ，10号使用蒸馏水代替模板 。据此分析不合理的是( ) 。 B A.产物的分子大小在250至 之间 B.3号样品植株导入的目的基因一定能成功表达 C.9号样品对应植株不是所需的转基因植株 D.10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果 没有干扰 17 解析 3号结果包含 片段，包含目的基因，但导入的目的基因不一定 能成功表达，B不合理。 18 感谢观看 $$