专题16 生物技术与工程（选择题50道）-【刷好题】备战2025年高考生物复习选择题+大题专练（新教材新高考）

专题16 生物技术与工程 一、单选题 1．老友粉是南宁本土美食，这种粉在烹煮过程添加酸笋、豆豉、酸辣椒、香醋等佐料，从而赋予老友粉独特风味。下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（　　） A．在制作酸笋时加入“陈酸笋水”可加速发酵进程 B．发酵温度过低可能会导致酸辣椒咸而不酸 C．在香醋的发酵过程中应一直保持通气条件 D．传统发酵技术使用的菌种均为纯种微生物 【答案】D 【分析】泡菜制作的原理是乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸，为了防止微生物污染，制作泡菜过程中应进行无菌操作；泡菜盐水的浓度过高会抑制乳酸菌发酵，造成咸而不酸，盐浓度过低不足以抑制微生物生长，造成杂菌污染；为了缩短制作时间可以加入陈泡菜水，以增加乳酸菌数量。 【详解】A、在制作酸笋时加入“陈酸笋水”可增加菌种浓度，从而加速发酵进程，A正确； B、发酵温度过低，微生物代谢速率较慢，发酵效果不佳，可能会导致酸辣椒咸而不酸，B正确； C、香醋发酵的菌种是醋酸菌，属于异养需氧型，在发酵过程中应一直保持通气条件，C正确； D、传统发酵技术多使用混合菌种，D错误。 故选D。 2．科研人员以刺五加、五味子和苹果为原料，经过酒精发酵和醋酸发酵酿造复合果醋，其主要流程如下。相关叙述正确的是（    ） A．步骤b中果汁的初始糖度越高越有利于最终果醋的形成 B．步骤c和步骤 e均应在无菌环境中接种菌种，发酵温度一般设置为 18～25℃ C．步骤d所用的无菌技术为湿热灭菌，可以杀死所有微生物包括芽孢和孢子 D．步骤e中摇床转速过高会加快乙醇的挥发导致产酸量下降 【答案】C 【分析】果酒制作的菌种是酵母菌，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。酒精发酵时一般将温度控制在18～30℃。果醋制作的菌种是醋酸菌。醋酸菌是好氧菌，当氧气、糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。在果醋的制作过程中，需将培养温度控制在30～35℃范围内。 【详解】A、在一定范围内，初始糖度越高，为酵母菌提供的营养越多，越有利于酒精发酵，但初始糖度过高，则因细胞失水而不利于酵母菌进行酒精发酵，不利于最终果醋的形成，A错误； B、步骤c和步骤 e分别为酒精发酵和醋酸发酵，二者均应在无菌环境中接种菌种，酒精发酵温度一般设置为 18～30℃，醋酸发酵温度一般设置为30～35℃，B错误； C、步骤d是对发酵好的果酒过滤液进行灭菌，所用的无菌技术为湿热灭菌，可以杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子，C正确； D、步骤e为醋酸发酵，醋酸菌是一种好氧菌，步骤e中摇床转速高会为醋酸菌提供更多的氧气，有利于醋酸发酵，因此不会导致产酸量下降，D错误。 故选C。 3．生物兴趣小组利用葡萄和糯米尝试酿制葡萄糯米香醋，设计的加工工艺如图所示。下列分析正确的是（    ）    A．菌种A是酵母菌，有氧条件下有利于其将葡萄和糯米中的糖转化为酒精 B．菌种B是醋酸菌，在缺少糖源时能将乙醇直接转化为醋酸 C．酒精发酵过程中对发酵液进行取样，加入溴麝香草酚蓝溶液会呈现灰绿色 D．加入菌种B后，提高环境温度并通入充足的氧气以利于发酵过程的进行 【答案】D 【分析】醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将分解成醋酸，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。 【详解】A、菌种A是酵母菌，无氧条件下有利于其将葡萄和糯米中的糖转化为酒精，A错误； B、菌种B是醋酸菌，在缺少糖源时能将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸（醋酸），B错误； C、酒精检测需要加入酸性重铬酸钾溶液才会呈现灰绿色，溴麝香草酚蓝溶液是鉴定二氧化碳的试剂，C错误； D、菌种B是醋酸菌，属于好氧菌，最适生长温度为30~35℃，提高环境温度并通入充足的氧气以利于发酵过程的进行，D正确。 故选D。 4．生产啤酒的主要工艺流程如下图所示，下列叙述错误的是（　　） A．过程①中若用赤霉素溶液处理大麦种子，种子无需发芽就能产生淀粉酶 B．过程②中焙烤不会使酶失活，碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触有利于糖化 C．过程②煮沸时加入啤酒花可增加啤酒的苦度等风味，蒸煮后需冷却才能接种 D．过程③主发酵阶段要适时往外排气，后发酵阶段在低温、通气环境中进行 【答案】D 【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的。其中发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味要求的不同而有所差异。 【详解】A、赤霉素可以促进种子产生淀粉酶，所以用赤霉素溶液处理大麦种子，种子无需发芽就能产生淀粉酶，A正确； B 、焙烤的温度一般不会使酶失活，碾磨能增大接触面积，有利于淀粉与淀粉酶充分接触从而促进糖化，B正确； C、煮沸时加入啤酒花能增加啤酒的风味，蒸煮后温度高会使菌种失活，所以需冷却才能接种，C正确； D、后发酵阶段应在低温、密封环境中进行，不是通气环境，D错误。 故选D。 5．下列关于微生物纯化培养的叙述，错误的是（    ） A．倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行 B．微生物的纯化培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 C．用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落 D．在平板划线过程中，灼烧接种环之后，应马上划线，防止接种环被杂菌污染 【答案】D 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行，这样操作的目的是一方面该温度为刚不烫手的温度，另一方面在酒精灯火焰旁的目的是保证无菌环境，A正确； B、微生物的纯化培养的步骤包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，其目的是获得纯培养物，B正确； C、用平板划线法通过连续划线操作可得到单菌落，稀释涂布平板法在稀释倍数足够高的情况下，可知通过涂布在培养基上获得单菌落，即平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落，C正确； D、在平板划线过程中，灼烧接种环之后，应待接种环冷却后划线，否则会烫死菌种，D错误。 故选D。 6．下图是实验人员利用“影印法”初检氨基酸S缺陷型菌株的过程，影印法培养微生物可以保证不同培养基中的同种菌株有相同接种位置。结合图示分析，下列有关叙述正确的是（    ） A．对菌液进行诱变处理，可使菌种定向变异为氨基酸S缺陷型 B．图示的基本培养基既属于鉴别培养基，也属于选择培养基 C．进行过程②的操作时，应先将丝绒布转印至基本培养基上 D．图示菌落B中有氨基酸S缺陷型菌，菌落A能合成氨基酸S 【答案】C 【分析】影印培养法，是指确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落的一种微生物培养方法。主要操作方法是：用灭菌的丝绒覆盖在一块与培养皿同样大小（或略小）的木制圆柱体上，轻轻地在母种培养皿的菌苔上印一下，把细菌菌落全部转移到丝绒面上，然后将这一丝绒面再印在另外的选择性培养基平板上，获得与原始平板完全相同的接种平板。待培养后，比对各培养皿在相同位置出现相同的菌落，从而筛选出适当的菌株。 【详解】A、诱变处理可使菌种发生基因突变，基因突变具有不定向性，A错误； B、图中的基本培养基属于选择培养基，但不属于鉴别培养基，B错误； C、为避免完全培养基中的氨基酸污染丝绒布，进行过程②的操作时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，C正确； D、根据培养基上的菌落分布可知，菌落B在基本培养基（即选择培养基）和完全培养基中均有生长，菌落A不能在基本培养基（即选择培养基）中生长，因此菌落A中有氨基酸S缺陷型菌，D错误。 故选C。 7．牛津杯法可测定发酵液中抗生素的含量，具体做法是：在培养皿中倒入不含任何营养物质的琼脂凝固成底层平板，同时将牛津杯竖直立在将要凝固的底层平板上；再将含少量琼脂的培养基熔化并冷却后加入敏感指示菌，混匀后倒入底层平板上形成双层平板，后取出牛津杯，形成小孔。向A、B、C小孔中分别加入浓度不同且已知的抗生素，在小孔D、E、F中加入等量的发酵液，培养一段时间后，测量小孔周围抑菌圈的大小。下列说法错误的是（　　）    A．双层培养基灭菌均可以用湿热灭菌法，培养皿灭菌可以用干热灭菌法 B．底层培养基可以弥补培养皿底部或超净工作台不平，利于后续实验观察 C．倒入上层平板后，需使用灭菌后的涂布器将敏感指示菌均匀地涂布在培养基表面 D．通过比较D、E、F和A、B、C周围抑菌圈的大小可以比较发酵液中抗生素的浓度 【答案】C 【分析】常见物品的消毒或灭菌方法 （1）消毒方法及适用对象： ①化学药剂消毒法：操作者双手、动植物表面等。 ②煮沸消毒法：日常食品、罐装食品等。 ③巴氏消毒法：牛奶等不耐高温的液体等。 ④紫外线消毒法：接种室、接种箱或超净工作台等。 （2）灭菌方法及适用对象： ①灼烧灭菌：接种工具、其他金属用具等。 ②干热灭菌：玻璃器皿、金属用具等。 ③湿热灭菌：培养基等。 【详解】A、湿热灭菌法是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法，培养基的灭菌通常选择用湿热灭菌法。耐高温的和需要保持干燥的物品，如培养皿通常用干热灭菌法灭菌，A正确； B、加了底层培养基后，可使原来底面不平的玻璃皿的缺陷得到了弥补，使所形成的抑菌圈都接近处于同一平面上，利于后续实验观察，B正确; C、依题意，将含少量琼脂的培养基熔化并冷却后加入敏感指示菌，混匀后倒入底层平板上形成双层平板，敏感指示菌就已经接种至上层培养基中了，不用涂布器再进行涂布，C错误； D、依题意，A、B、C小孔中分别加入浓度不同且已知的抗生素，作为对照组；在小孔D、E、F中加入等量的发酵液，产生的抑菌圈与A、B、C周围对应的抑菌圈比较，就可以推断发酵液中抗生素的浓度，D正确。 故选C。 8．下列关于植物细胞工程及其应用的叙述，正确的是（    ） A．生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是进行远缘植物体细胞杂交 B．植物细胞培养技术的原理是植物细胞的全能性 C．生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响离体植物细胞的发育方向 D．进行体细胞杂交前，必须用胰蛋白酶和胶原蛋白酶去除细胞壁 【答案】C 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 【详解】A、生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是取茎尖分生组织进行培养，A错误； B、植物细胞培养技术的原理是细胞增殖，B错误； C、生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响离体植物细胞的发育方向，当生长素含量偏高时有利于生根，而生长素含量偏低时，可促进生芽，C正确； D、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故进行体细胞杂交前，必须用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，D错误。 故选C。 9．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（    ） A．图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤 B．图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行 C．若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株体细胞染色体数目最多可达到64条 D．病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例最小的植株抗病性最强 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质；植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍； 图谱分析，4号和5号个体含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质，说明是杂种细胞，而1、2、3号个体只有紫罗兰中的蛋白质，说明不是杂种细胞。 【详解】A、图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤，其中原生质体融合过程依赖膜的流动性实现，A正确； B、为保证组织细胞的活性，图1过程①应在等渗或略微高渗的溶液中进行，过程②应在液体培养基中进行，B错误； C、若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株是杂种植株，其细胞在有丝分裂后期染色体数目为64条，C正确； D、病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，若病斑面积占叶片总面积比例越小，则说明该植株抗病性越强，即病斑面积占叶片总面积比例最小的植株是抗病性最强的个体，D正确。 故选B。 10．科研人员利用两种植物进行体细胞杂交时，各组分别加入不同浓度的PEG来促进原生质体融合，其他条件均相同，结果如下表。下列叙述错误的是（    ） PEG浓度/% 25 30 35 40 45 融合率/% 10 12 15 30 20 A．植物体细胞融合前需先用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B．原生质体融合利用了细胞膜具有流动性的原理 C．低浓度PEG促进原生质体融合，高浓度则抑制融合 D．融合后的细胞经组织培养得到的一般为多倍体植株 【答案】C 【分析】植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。 【详解】A、植物体细胞融合前需先用纤维素酶和果胶酶处理细胞，去除细胞壁，A正确； B、原生质体融合的原理是细胞膜具有流动性，只有依赖于细胞膜的流动性，原生质体才能融合，B正确； C、由表可知，PEG浓度为45%时，融合率较40%时低，但仍为促进融合，C错误； D、融合后的细胞的染色体是两种植物细胞染色体的总和，经组织培养得到的一般为多倍体植株，D正确。 故选C。 11．罕见草药红景天体内的次生代谢物Sal（红景天苷）具有重要药用价值。由于稀有草药供应不足，科研人员研究了不同光照条件对红景天愈伤组织生长和Sal产生的影响，旨在寻找提高红景天体外培养产量的新途径。研究人员首先取红景天叶片诱导出愈伤组织，过程如图1所示，随后分别在红光、蓝光、绿光、RGB光（红、绿、蓝混合光）和白光的不同光照条件下培养红景天愈伤组织，并定期统计，结果如图2所示。下列叙述正确的是（    ） A．外植体需分别用70%乙醇和10%次氯酸钠进行消毒，随后用自来水清洗多次 B．图1培养基中NAA和细胞分裂素的配制比例适中时容易诱导外植体形成愈伤组织 C．接种的外植体经脱分化诱导形成愈伤组织的过程，体现了植物细胞的全能性 D．由上图可知，不同光照条件会影响红景天Sal的积累量，红光下最有利于Sal积累 【答案】B 【分析】1、外植体消毒步骤：将流水充分冲洗后的外植 体（幼嫩的茎段）用酒精消毒30 s， 然后立即用无菌水清洗2〜3次； 再用次氯酸钠溶液处理30 min后， 立即用无菌水清洗2〜3次。 2、植物细胞一般具有全能性。在一定的激 素和营养等条件的诱导下，已经分化的细胞 可以经过脱分化，即失去其特有的结构和功 能，转变成未分化的细胞，进而形成不定形 的薄壁组织团块，这称为愈伤组织。愈伤组 织能重新分化成芽、根等器官，该过程称为 再分化。植物激素中生长素和细胞分裂素是 启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素， 它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发 育方向。将愈伤组织接种到含有特定激素的 培养基上，就可以诱导其再分化成胚状体， 长出芽和根，进而发育成完整的植株。 【详解】A、外植体需分别用体积分数为70%酒精和质量分数5%次氯酸钠进行消毒，随后用无菌水清洗多次，A错误； B、植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素， 它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向；NAA为生长素类似物，图1培养基中NAA和细胞分裂素的配制比例适中时容易诱导外植体形成愈伤组织，B正确； C、细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能，即细胞具有全能性；接种的外植体经脱分化诱导形成愈伤组织的过程，并未形成完整个体或分化为各种细胞，不能体现了植物细胞的全能性，C错误； D、根据题图可知，在蓝光处理下，Sal积累量最多，可见不同光照条件会影响红景天Sal的积累量，蓝光下最有利于Sal积累，D错误。 故选B。 12．下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（　　） A．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D．通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于有性繁殖 【答案】B 【分析】植物体细胞杂交过程：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体，A错误； B、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，B正确； C、体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的的遗传物质，只有1个细胞核，C错误； D、通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于植物的组织培养，从繁殖看属于无性繁殖，D错误。 故选B。 13．甲植物的细胞质基因决定高产性状，乙植物的细胞核基因决定耐盐性状。某研究小组用一定的方法使甲植物细胞的细胞核失活、乙植物细胞的细胞质失活，之后利用植物体细胞杂交技术培育高产耐盐再生植株。下列相关叙述错误的是（    ） A．进行植物体细胞杂交之前，先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B．失活处理可使得未融合和同种融合的原生质体均不能正常生长分裂 C．愈伤组织经再分化可形成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整植株 D．再生植株含有两种优良性状的基因，一定能表现出高产耐盐的性状 【答案】D 【分析】植物体细胞杂交技术： 1、过程：先植物细胞融合（原理为细胞膜的流动性），再植物组织培养(原理为植物细胞的全能性)； 2、诱导原生质体融合的方法：物理法包括离心、振动、电激等；化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂； 3、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展杂交的亲本组合范围； 4、不足：没有完全按照人们的意愿表达出双亲的优良性状； 5、融合成功的标志是：杂种细胞再生出细胞壁，与高尔基体有关。核融合后的DNA数和染色体数、染色体组数均采取加法，会出现异源多倍体。再生细胞壁之前注意培养基的渗透压； 6．由于植物细胞有细胞壁，所以在融合之前要用纤维素和果胶酶去壁，得到球形的原生质体。 【详解】A、细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，在获取原生质体时，常采用纤维素酶和果胶酶去壁处理，A正确； B、对甲植物细胞的细胞核失活、乙植物细胞的细胞质失活进行处理，可使得未融合和同种融合的原生质体均不能正常生长分裂，从而筛选出杂种细胞，B正确； C、愈伤组织经再分化可形成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整植株，这是植物组织培养过程中的正常发育途径，C正确； D、再生植株含有两种优良性状的基因，但基因的表达是复杂的，受到多种因素的调控，不一定能表现出高产耐盐的性状，D错误。 故选D。 14．郑州大学第一附属医院研究团队首次完成了去ECMO化的“人造子宫”动物实验。医生将胎龄4个月的胎羊从母体中取出，并将其脐动脉和脐静脉与母体颈部的动脉和静脉相连，建立起一个类似于ECMO的并体循环。下列叙述错误的是（    ） A．“人造子宫”能为胎羊细胞提供氧气和营养物质，运走代谢废物 B．“人造子宫”作为液体屏障，能保护胎羊免受外界环境的直接干扰 C．“人造子宫”能与胎羊细胞进行物质和信息的双向交流 D．该实验证明维持稳态仅需分子水平上的调节，不需进行器官、系统水平上的调节 【答案】D 【分析】该实验虽然展示了“人造子宫”在分子水平上能够为胎羊细胞提供必要的生存条件，但并不能证明维持稳态仅需要分子水平上的调节。生物体的稳态调节是一个复杂的过程，涉及分子、细胞、组织、器官和系统等多个层次的相互作用和协调。 【详解】AC、“人造子宫”与母体颈部的动脉和静脉相连，通过母体的血液循环，能为胎羊细胞提供氧气和营养物质，运走代谢废物，能与胎羊细胞进行物质和信息的双向交流，AC正确； B、“人造子宫”作为液体屏障，是胎羊直接生活的环境，能保护胎羊免受外界环境的直接干扰，B正确； D、该实验虽然展示了“人造子宫”在分子水平上能够为胎羊细胞提供必要的生存条件，但并不能证明维持稳态仅需要分子水平上的调节。生物体的稳态调节是一个复杂的过程，涉及分子、细胞、组织、器官和系统等多个层次的相互作用和协调。例如，在真正的母体内，胎羊不仅依赖于母体提供的营养物质和氧气，还依赖于自身器官、系统等的调节和支持，D错误。 故选D。 15．通过胚胎工程繁殖良种牛的部分过程如图所示。下列说法正确的是（    ） A．可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理早期胚胎，使之分散 B．子代良种牛的优良性状全部遗传自供体母牛 C．受体母牛也需要注射激素，目的主要是促进其排卵 D．胚胎被移植到受体母牛体内之前，需要向受体母牛注射免疫抑制剂 【答案】A 【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括： ①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）； ②配种或人工授精； ③对胚胎的收集、检查、培养或保存； ④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 2、胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。 【详解】A、分散动物的早期胚胎，通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，A正确； B、‌子代良种牛的优良性状并不全部遗传自供体母牛，子代良种牛的遗传物质来源于良种母牛和良种公牛，因此其优良性状是由双方共同决定的‌，B错误； C、受体母牛也需要注射激素，但其目的不是促进其排卵，而是使受体同期发情，C错误； D、胚胎被移植到受体母牛体内之前，不需要免疫抑制剂，D错误。 故选A。 16．研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。据图分析，以下叙述错误的是（    ） A．实验前需要给小鼠甲多次注射病毒A，增加分泌抗病毒A抗体的浆细胞比例 B．取小鼠甲胸腺剪碎并用胰蛋白酶处理一段时间，可使其分散并制成单细胞悬液 C．筛选1所用的培养基属于选择培养基，多次传代后只有杂交瘤细胞能够生存 D．筛选2 需对杂交瘤细胞进行单克隆培养后进行抗原抗体杂交反应阳性鉴定 【答案】B 【分析】单克隆抗体的制备，用抗原刺激小鼠得到经免疫的B淋巴细胞，和骨髓瘤细胞融合，融合后的细胞经过筛选等到杂交瘤细胞，然后再经过抗原-抗体杂交选择能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、为了能得到产生特定的抗体的B淋巴细胞，就需要注入相应的抗原，启动特异性免疫，多次注射可获得更多的能产生特定抗体的浆细胞，A正确； B、胸腺中的是T淋巴细胞，活化的B淋巴细胞在脾脏中获取，B错误； C、诱导细胞融合后的第一次筛选，是用选择培养基来选择培养，只有杂交瘤细胞才能存活，C正确； D、筛选2能产出特定抗体的杂交瘤细胞，需要通过细胞克隆化培养和抗原抗体杂交反应阳性鉴定，D正确。 故选B。 17．线粒体功能同时受线粒体DNA（mtDNA）和核DNA（nDNA）的双重调控。线粒体遗传病是指由mtDNA或nDNA突变导致线粒体内的蛋白质异常，使细胞出现功能损伤。为治疗mtDNA突变导致的线粒体遗传病，科研团队于2020年通过第一极体移植得到了“三亲小猴”，过程如下图。下列有关说法正确的是（　　）    A．父亲nDNA突变不会导致线粒体遗传病，母亲mtDNA突变容易导致线粒体遗传病 B．减数分裂Ⅰ细胞质不均等分配使极体含较少细胞质，能降低子代猴携带异常染色体的风险 C．“三亲小猴”的获得需用到动物细胞融合、体外受精、胚胎移植、动物细胞培养等技术 D．“三亲小猴”能够正常发育的生理基础是受体猴对外来胚胎不发生免疫排斥反应 【答案】D 【分析】借助核移植技术，使患者的第一极体与移除原核的供体次级卵母细胞结合得到重组次级卵母细胞；通过体外受精技术使重组次级卵母细胞受精后，再借助早期胚胎培养、胚胎移植技术得到“三亲小猴”。动物细胞培养技术是核移植等技术的基础。可见，“三亲小猴”的核DNA来自患者与父亲（精子），细胞质DNA即线粒体DNA来自供体。 【详解】A、受精卵中的线粒体来自母亲（卵细胞），父亲的核DNA（nDNA）突变可以通过精子传给子代。线粒体遗传病是指由线粒体DNA（mtDNA）或核DNA（nDNA）突变导致线粒体内的蛋白质异常，使细胞出现功能损伤。可见，父亲nDNA突变和母亲mtDNA突变都容易导致线粒体遗传病，A错误； B、“三亲小猴”通过第一极体移植得到的，染色体存在于细胞核中，减数分裂Ⅰ细胞质不均等分配使极体含较少细胞质，这不能降低子代猴携带异常染色体的风险，B错误； C、患者的第一极体与移除原核的供体次级卵母细胞借助核移植技术得到的重组次级卵母细胞受精后，再经过早期胚胎培养、胚胎移植得到“三亲小猴”，因此“三亲小猴”的获得需用到核移植、体外受精、胚胎移植、动物细胞培养等技术，但没有用到动物细胞融合技术，C错误； D、“三亲小猴”能够正常发育，其生理基础是受体猴对外来胚胎不发生免疫排斥反应，D正确。 故选D。 18．猪逐渐成为异种器官移植的主要供体，科学家利用基因工程方法对猪器官进行改造，欲培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆器官，提高异种器官移植的成功率，设计操作过程如图所示，下列叙述正确的是（    ） 注：Gal蛋白为免疫排斥反应的主要抗原；人体补体调节蛋白可有效降低免疫排斥 A．①过程利用胃蛋白酶进行酶解时，需控制酶解反应时间 B．Cas9酶可能有限制酶的功能，作用于磷酸二酯键以敲除基因 C．③过程利用DNA聚合酶使人体补体调节蛋白基因与核DNA连接 D．④过程需要去核的心肌细胞，可利用物理方法激活重组细胞 【答案】B 【分析】题图分析，利用基因工程技术，供体细胞经过改造修饰（Gal抗原基因敲除）后，导入目的基因（人类补体调节蛋白基因），再经过核移植技术培养成克隆供体，诱导分化出所需的器官。 【详解】A、图中①过程是利用胶原蛋白进行酶解获得单细胞悬液的过程，该过程需控制酶解反应时间，A错误； B、Cas9酶可能有限制酶的功能，作用于磷酸二酯键以敲除基因，进而获得了不能表达抗原蛋白的细胞，B正确； C、③过程利用DNA连接酶使人体补体调节蛋白基因与核DNA连接，C错误； D、④过程需要去核的卵母细胞进而获得重组细胞，而后可利用物理方法或化学方法激活重组细胞，D错误。 故选B。 19．科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 B．重组胚胎移植到代孕母牛体内之前不需要进行性别鉴定 C．可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D．将重组胚胎移到雌性水牛体内之前，需要进行同期发情处理 【答案】D 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、在进行细胞培养时，取材的动物组织可以用机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理一段时间，将组织分散成单个细胞，A正确； B、供核奶牛细胞来自雌性奶牛，所以重组胚胎一定是雌性，不需要进行性别鉴定，B正确； C、可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚，C正确； D、胚胎移植的受体母牛应该是同种生物，奶牛和水牛是不同物种，D错误。 故选D。 20．小鼠胚胎干细胞经定向诱导获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．胚胎干细胞分化成的细胞形态结构不同是因为基因突变 B．细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同 C．用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞 D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养 【答案】D 【分析】分析图可知，细胞a为内细胞团细胞，细胞b为滋养层细胞。 【详解】A、胚胎干细胞分化成的细胞形态结构不同这属于细胞分化，是因为基因选择性表达的结果，不是基因突变，A错误； B、细胞a为内细胞团细胞，细胞b为滋养层细胞，它们是同一个受精卵分裂和分化形成的，所含的核基因相同，B错误； C、用胰蛋白酶处理的目的是分解细胞间的蛋白质，而不是细胞上的膜蛋白，C错误； D、胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养，以维持培养液的酸碱平衡，D正确。 故选D。 21．模型构建是开展生物学研究的常用方法。关于下图所示的概念模型的叙述错误的是（    ） A．若为体细胞核移植技术模型，B可能为去核的卵母细胞 B．若为转基因技术模型，C为重组质粒，D为受体细胞 C．若为动物细胞融合模型，形成C的过程离不开膜的流动性 D．若为植物体细胞杂交技术模型，需对A、B去分化后再诱导融合 【答案】D 【分析】据图可知，A和B可融合成为C，C再经过发育或培养可成为D，据此分析作答。 【详解】A、体细胞核移植是将细胞核移植到去核的卵母细胞中，若为体细胞核移植技术模型，B可能为去核的卵母细胞，A正确； B、若为转基因技术模型，C为重组质粒，是目的基因和载体相连形成的，则D为受体细胞，为重组质粒的表达提供条件，B正确； C、若图示为动物细胞融合技术，涉及细胞膜的融合，形成C的过程离不开膜的流动性，C正确； D、若为植物体细胞杂交技术模型，需对A、B去除植物细胞壁（而非去分化）后再诱导融合，此后融合的原生质体经脱分化形成愈伤组织，D错误。 故选D。 22．《本草纲目》曾提到：“羊乳甘温无毒、润心肺、补肺肾气。”下图为研究人员培育高产的优质奶羊的过程，下列相关说法正确的是（    ） A．4号羊的DNA全部来自2号羊 B．采集2号羊的组织块，用纤维素酶处理获得分散的成纤维细胞进行培养 C．对1号羊使用促性腺激素处理，收集并选取处在M II期的卵母细胞用于核移植 D．可用抗原—抗体杂交技术检测产奶量高的基因是否被导入4号羊 【答案】C 【分析】1、卵母细胞只有处于减数第二次分裂中期才可进行细胞核移植。 2、动物细胞培养箱中气体环境为含95%空气加5%CO2的混合气体，其中氧气是细胞有氧呼吸的必需成分，二氧化碳的作用是维持培养液的pH。 【详解】A、分析题图可知，1号羊提供去核的卵母细胞，2号羊提供细胞核，可见4号羊的核DNA全部来自2号羊，但细胞质中的DNA来自1号羊，A错误； B、将2号羊的组织块分散成单个的成纤维细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，该细胞的培养应在37℃含含95%空气加5%的CO2的恒温培养箱中进行，B错误； C、据图分析可知，1号羊提供的是卵母细胞，对其注射促性腺激素可使其超数排卵，获得的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才能进行核移植，C正确； D、检测产奶量高的基因（目的基因）是否导入4号羊，可以采用DNA分子杂交法检测目的基因的序列，目的基因表达的最终产物是蛋白质，可以利用抗原一抗体杂交法进行检测导入的基因是否表达，D错误。 故选C。 23．下图为肾脏上皮细胞培养过程示意图。下列有关叙述错误的是（    ）    A．甲→乙过程可用机械法或酶解法处理获得单个细胞 B．丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养 C．丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象 D．丁过程为传代培养，细胞都能进行无限增殖 【答案】D 【分析】题图分析，图甲操作位剪碎的组织块，乙为用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成的单个细胞悬液，丙图为转入培养液中进行原代培养的过程，该过程中细胞会表现为贴壁生长以及接触抑制的特点，丁图为将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞培养，该过程为传代培养过程，传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了，一般情况下，细胞传至10~50代时增殖会逐渐缓慢，以至完全停止。 【详解】A、甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得单细胞悬液然后进行细胞培养，也可用酶解法处理获得单个细胞，A正确； B、丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养的过程，属于获取单细胞悬液的初次培养，B正确； C、丙过程为原代培养，该过程中会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，C正确； D、丁过程为传代培养，细胞传至10~50代会逐渐缓慢，直到完全停止，当继续传代培养时少部分细胞会获得不死性，这些细胞已经发生了突变，D错误。 故选D。 24．2023年11月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌合猴，该研究部分过程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。下列有关叙述正确的是（    ） （注：GFP指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分化、分布情况。） A．具有清晰GFP信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴 B．代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理 C．由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴 D．图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术 【答案】A 【分析】胚胎干细胞（简称ES细胞）存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。 【详解】A、具有清晰GFP信号的囊胚，说明此囊胚被成功导入供体猴ES细胞，才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴，A正确； B、代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促孕激素的饲料进行同期发情处理，而不是促性腺激素，B错误； C、据图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中既有供体猴的细胞、也有受体猴的细胞，故细胞中的核遗传物质源于受体猴或源于供体猴，C错误； D、据图可知，图示过程没有涉及体外受精技术，D错误。 故选A。 25．我国科学家应用体细胞核移植技术首次成功克隆了非人灵长类动物——食蟹猕猴，并取名为“中中”和“华华”，在世界上引起轰动。下列叙述错误的是（    ） A．克隆猴的遗传性状由供体细胞的遗传物质决定，与去核卵母细胞无关 B．体细胞核移植不经过两性生殖细胞的融合，此过程属于无性生殖 C．克隆猴的成功体现了已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性 D．该技术涉及卵母细胞去核、供体细胞注入、重构胚的激活和培养等操作 【答案】A 【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体。 【详解】A、虽然克隆猴的主要遗传物质来自供体细胞的细胞核，但卵母细胞的线粒体DNA也会传递给克隆个体。线粒体DNA对细胞能量代谢等功能有重要影响，因此去核卵母细胞并非完全无关，A错误； B、体细胞核移植技术不涉及精子和卵子的结合，因此属于无性生殖，B正确； C、克隆猴的成功表明，即使是已分化的体细胞，其细胞核在适当的条件下仍然具有发育成完整个体的能力，这体现了细胞核的全能性，C正确； D、体细胞核移植技术的关键步骤包括去除卵母细胞的细胞核、注入供体细胞的细胞核、激活重构胚胎并进行培养，D正确。 故选A。 26．“悬浮培养”的植物细胞是相对均一、脱分化的单细胞或小细胞团，直接从人工配制的培养液中吸收营养物质和排出废物。下图为制备植物悬浮细胞的简易流程，下列说法中正确的是（    ）    A．外植体需要进行灭菌后置于无菌的培养基中培养 B．外植体诱导形成愈伤组织的过程体现了植物细胞的全能性 C．愈伤组织细胞能通过胰蛋白酶分散处理后形成悬浮细胞 D．植物悬浮细胞培养有利于植物细胞次生代谢物的工厂化生产 【答案】D 【分析】1、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，其过程是：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。 2、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。 【详解】A、外植体在诱导形成愈伤组织前需进行消毒处理而非灭菌，灭菌处理会导致外植体时失去其活性，A错误； B、外植体诱导形成愈伤组织的过程未分化成各种细胞或得到完整植株，故不能体现植物细胞的全能性，B错误； C、使用胰蛋白酶进行处理细胞将细胞分散的对象是动物细胞而非植物细胞 ，C错误； D、使用液体培养基并振荡可增大培养基溶氧量，使细胞与培养基充分接触，有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长和代谢，进而有利于植物细胞次生代谢物的工厂化生产，D正确。 故选D。 27．下列有关细胞工程的叙述，错误的是（    ） A．在植物组织培养过程中，细胞一直处于不断增殖状态，容易受到培养条件中诱变因素的影响而产生突变 B．用某种特定抗原反复注射小鼠的目的是产生足够多的已免疫的B淋巴细胞 C．用于治疗癌症的“生物导弹”是以单克隆抗体作抗癌药物定向杀死癌细胞的 D．用聚乙二醇处理大量混合在一起的两个物种植物细胞的原生质体，所获得的融合细胞不都含有两个物种的遗传物质 【答案】C 【分析】单克隆抗体制备流程为，先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。生物导弹可借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，位置准确。 【详解】A、在植物组织培养过程， 细胞处于不断分裂状态，细胞中进行旺盛的DNA复制，易受到培养条件的诱变发生复制错误而产生突变，A正确； B、用某种特定抗原反复注射小鼠的目的是产生足够多的已免疫的B淋巴细胞，为杂交瘤细胞的筛选提供足够的B淋巴细胞，B正确； C、用于治疗癌症的“生物导弹”包括单克隆抗体、连接物和药物三部分，其中单克隆抗体可将抗癌药物定向转运至癌细胞部位，而后用其携带的药物将癌细胞杀死，即生物导弹是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞的，C错误； D、用聚乙二醇处理大量混合在一起的两种植物细胞的原生质体，由于同种细胞原生质体融合，因而所获得的融合细胞不都具备双亲的遗传特性，D正确。 故选C。 28．乳腺癌细胞的HER2蛋白是正常组织中的100倍以上，可作为理想的肿瘤治疗靶标。科研人员通过接头将抗HER2抗体与细胞毒素结合，制备出ADC来治疗乳腺癌。ADC的作用机制如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．HER2蛋白不是乳腺癌细胞膜上特有的蛋白 B．可运用动物细胞培养和动物细胞融合技术制备抗HER2抗体 C．ADC被溶酶体酶降解，释放出抗体和细胞毒素使乳腺癌细胞凋亡 D．荧光标记的抗HER2单克隆抗体可用于乳腺癌的定位诊断 【答案】C 【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点； 2、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选。 【详解】A、HER2是一种位于细胞表面的蛋白质，它是一种生长因子受体，主要在细胞生长、分化和存活过程中发挥作用，因此HER2蛋白不是乳腺癌细胞特有的蛋白，A正确； B、动物细胞培养技术可用于培养能产生抗体的细胞，动物细胞融合技术可将能产生抗体的细胞与骨髓瘤细胞融合，从而制备抗HER2抗体，B正确； C、据图可知，ADC被溶酶体酶降解，释放出的是药物，药物使乳腺癌细胞裂解死亡，C错误； D、荧光标记的抗HER2单克隆抗体能特异性地与乳腺癌细胞表面的HER2蛋白结合，从而可用于乳腺癌的定位诊断，D正确。 故选C。 29．DNA粗提取和DNA的PCR扩增是常用的生物技术。下列相关原理及过程叙述正确的是（    ） A．DNA在冷酒精溶液中溶解度较大，蛋白质在冷酒精中溶解度较小，可利用溶解度差异初步分离DNA B．采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，在同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快 C．PCR的每次循环包括变性、复性、延伸3个阶段，在复性阶段引物与模板DNA链之间形成磷酸二酯键 D．利用引物A和B对双链DNA进行PCR扩增时，经3次循环需消耗7个A引物 【答案】D 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺试剂溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。 【详解】A、DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，据此可以初步分离DNA，A错误； B、在琼脂糖凝胶电泳中，当电场作用时，DNA片段实际上是向正极迁移的，而不是向负极迁移，同时，DNA片段的迁移速率与其大小成反比，即DNA片段越长，迁移速率越慢，B错误； C、复性阶段引物与模板DNA链之间形成氢键，C错误； D、经3次循环产生的DNA分子数目为23=8，则需消耗引物A的数目为（8×2-2）÷2=7，D正确。 故选D。 30．反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列进行扩增的技术，其过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A．应选择引物2和引物3进行PCR扩增 B．设计的引物中GC碱基含量越高，变性的温度越高 C．PCR产物是包含所有已知序列和未知序列的链状DNA分子 D．整个过程需用到限制酶、DNA连接酶、耐高温DNA聚合酶及逆转录酶 【答案】C 【分析】1、PCR只能扩增两端序列已知的基因片段，反向PCR可扩增一段已知序列的两端未知序列。反向PCR的目的在于扩增一段已知序列旁侧的DNA，也就是说这一反应体系不是在一对引物之间而是在引物外侧合成DNA。 2、如图所示，DNA分子被限制酶切割，然后环化并加入已知序列合成的引物，再通过PCR扩增得到中间是未知序列两侧是已知序列的DNA分子。 【详解】A、DNA子链合成的方向为5'端到3'端，因此要通过已知序列设计引物对未知序列进行扩增应选择引物1和引物4进行PCR扩增，A错误； B、复性过程中引物与模板链结合，GC碱基含量越高，碱基对间氢键的含量越多，复性的温度越高，B错误； C、根据题意和图示可知，DNA分子被限制酶切割，然后环化并加入已知序列合成的引物，再通过PCR扩增得到中间是未知序列两侧是已知序列的DNA分子PCR产物是包含所有已知序列和未知序列的链状DNA分子，C正确； D、整个过程需用到限制酶、DNA连接酶和耐高温DNA聚合酶，不需要逆转录酶，D错误。 故选C。 31．研究人员欲将某动物体内基因X导入大肠杆菌的质粒中保存，质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述错误的是（　　）    A．使用HindⅢ和XbaI进行酶切能避免基因X与质粒反向连接 B．目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶 C．Ca2+处理大肠杆菌能降低细胞膜通透性，有利于重组质粒导入受体细胞 D．含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长 【答案】C 【分析】基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、分析题图可知，使用HindⅢ和XbaI进行酶切会产生不同的粘性末端，故能避免基因X与质粒反向连接，A正确； B、目的基因X与质粒用HindⅢ和XbaI酶切会产生粘性末端，E.coliDNA连接酶可连接粘性末端，故目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶，B正确； C、用Ca2+处理大肠杆菌，能提高细胞膜的通透性，使细胞处于感受态即能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，有利于重组质粒导入受体细胞，C错误； D、分析题图可知，重组质粒上含有氨苄青霉素抗性基因，故含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长，D正确。 故选C。 32．干扰素（W）是一种具有特定功能的人体蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症。图甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。为使目的基因连接方向正确，对W基因和质粒都分别用两种不同的限制酶切割然后拼接，下列叙述正确的是（　　）    A．选用HindⅢ和BamH Ⅰ切割质粒 B．选用BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ切割含W基因的DNA片段 C．利用PCR技术扩增目的基因时，选择引物A和引物D D．若受体细胞表现出X抗生素抗性和Y抗生素抗性，表明重组质粒成功导入受体细胞 【答案】A 【分析】基因表达载体的构建： （1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 （2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。 【详解】AB、目的基因需插入到质粒的启动子与终止子之间，据图甲可知，不可用Bcl Ⅰ切割质粒，结合图乙中目的基因的转录方向及限制酶识别序列，应选用HindⅢ和BamH Ⅰ切割质粒，选用HindⅢ和Sau3A Ⅰ切割W基因所在的DNA片段，A正确，B错误； C、PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿5'→3'方向合成子链，故所用的引物组成为图乙中引物B和引物C，C错误； D、由于选用HindⅢ和BamH Ⅰ切割质粒，Y抗生素抗性基因被破坏，故受体细胞不会表现出Y抗生素抗性，D错误。 故选A。 33．下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是（    ）    注：AmpR：氨苄青霉素抗性基因；TetR：四环素抗性基因。 A．用含氨苄青霉素的培养基筛选出的是含重组质粒的受体菌 B．应选择的限制酶组合是酶F和酶G C．pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因 D．同时用三种限制酶处理图中质粒，完全反应后可得到4种长度DNA 【答案】A 【分析】题图分析，切割目的基因和质粒最好用酶F和酶G，这样可以获得不同的黏性末端，而且目的基因的两端也具有这两种限制酶的切割位点，既避免切割后DNA片段的自身环化，又保留质粒上的标记基因，由图可知构建基因表达载体破坏了四环素抗性基因，保留了氨苄青霉素抗性基因。 【详解】AB、酶E会破坏两种标记基因，为避免切割后DNA片段的自身环化，又保留质粒上的标记基因，切割时应选择的限制酶组合是酶F和酶G；由于酶F会破坏四环素抗性基因，故应使用含氨苄青霉素的培养基筛选出的有导入重组质粒的受体菌和导入原质粒的受体菌，A错误，B正确； C、pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因，以便于对含有目的基因的受体菌的选择，C正确； D、据图可知，同时用三种限制酶处理图中质粒，因酶E有两个作用位点，故同时用三种限制酶处理图中质粒，完全反应后可得到4种长度DNA，D正确。 故选A。 34．人血清白蛋白（HSA）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用转基因技术获得转HSA基因的大肠杆菌，通过发酵工程，实现HSA的大量生产。下图表示HSA基因，有关叙述正确的是（    ）    A．PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是第三步 B．扩增出HSA基因并用于表达载体的构建，应选择引物Ⅱ和引物Ⅲ C．在PCR反应缓冲液中加入Ca²⁺的作用是激活耐高温的DNA聚合酶 D．基因工程的核心环节是目的基因导入受体细胞 【答案】B 【分析】聚合酶链式反应（PCR）是一项根据DNA半保留复制原理进行的体外DNA复制技术。包括变性（90℃左右）、复性（50℃左右）和延伸（72℃左右）三步。 【详解】A、PCR过程每次循环一 般可以分为变性、复性和延伸三步，变性温度一般是90℃左右，复性温度一般是50℃左右，延伸温度一般是72℃左右，可见温度最低的一步是第二步：复性，A错误； B、引物结合在模板链的3'端，使子链从5'→3'延伸，扩增出HSA基因并用于表达载体的构建，应选择引物Ⅱ和引物Ⅲ，B正确； C、在PCR反应缓冲液中加入Mg2+的作用是激活耐高温的DNA聚合酶，催化脱氧核苷酸之间磷酸二酯键的形成，C错误； D、基因工程的核心环节是构建重组DNA，D错误。 故选B。 35．融合 PCR 技术是采用具有互补末端的引物，将不同来源的扩增片段连接起来的方法，其过程如下图所示。下列说法错误的是（    ） A．对基因B进行PCR 需至少进行3次循环，才能获得含引物3且双链等长的DNA B．若通过融合PCR 技术将启动子、目的基因、终止子拼接成类似上图所示的融合基因，需要设计6种引物，其中能够起着“搭桥”作用的引物有3种 C．将第一阶段的产物（图中ab和cd）混合，先变性再复性，使能够互补配对的DNA单链相互结合，理论上有4种结合的可能，其中在PCR体系中能进一步延伸的有2种 D．引物2和引物3部分核苷酸序列碱基互补配对，因此二者不能共存于同一PCR体系中 【答案】ABC 【分析】PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。 【详解】A、对基因B进行PCR 的过程中，由于引物4位于基因的一端，因此需要至少两次循环即可获得含引物3且双链等长的DNA，A错误； B、结合图示可以看出，通过融合PCR技术，每一次将两个DNA片段拼接起来，需要4个引物，其中有2个起着“搭桥”作用。依此类推，若通过融合PCR技术将启动子、目的基因、终止子拼接起来，需要设计6种引物，其中能够起着“搭桥”作用的引物有4种，B错误； C、将第一阶段的产物（图中ab和cd）混合，先变性再复性，使能够互补配对的DNA单链相互结合，理论上有2种结合的可能，其中在PCR体系中能进一步延伸的有1种，C错误； D、引物2和引物3部分核苷酸序列碱基互补配对，因此二者不能共存于同一PCR体系中，否则可能会因为引物之间发生碱基互补配对导致没有产物出现，D正确。 故选ABC。 二、多选题 36．大头菜是中国四大名腌菜之一，其制作流程为：鲜菜→整理清洗→下缸→一次转缸→二次转缸→三次转缸→一次腌晒（盐水\卤水）→二次腌晒（盐水\卤水）（盐水\卤水）→四次腌晒（盐水\卤水）→五次腌晒（盐水\卤水），盐水用量从20%逐渐上升到28%，卤水单次用量基本相同。下列叙述正确的是（    ） A．在高盐密闭环境下，农家腌制大头菜的过程为单一菌种发酵 B．卤水可提升大头菜的色香，同时具有抑菌作用 C．多次转缸可使各层大头菜均匀发酵，同时避免热量积累 D．第五次腌晒时盐水用量达到28%，有利于延长大头菜保质期 【答案】BCD 【分析】泡菜使用低浓度的盐水，或用少量食盐来腌渍各种鲜嫩的蔬菜，再经乳酸菌发酵，制成一种带酸味的腌制品，只要乳酸含量达到一定的浓度，并使产品隔绝空气，就可以达到久贮的目的。 【详解】A、农家腌制大头菜的过程没有经过严格杀菌，仍然是混合菌种发酵，A错误； B、卤水由多种香辛料熬制形成，可提升大头菜的色香，同时具有抑菌作用，B正确； C、多次转缸可使各层大头菜均匀发酵，呼吸产生的热量也均匀，这样可以避免热量积累，C正确； D、第五次腌晒时盐水用量达到28%，在高浓度盐的作用下，微生物难以生存，有利于延长大头菜保质期，D正确。故选BCD。 37．研究者用酸笋开发具有降低胆固醇功能的益生菌。先将酸笋发酵液接种到含有CaCO3的固体培养基上，筛选出乳酸菌，然后将乳酸菌接种到含有胆固醇的培养液中，筛选出能够降解胆固醇的乳酸菌。相关叙述正确的是（    ） A．腌制酸笋需要水封，为乳酸菌发酵提供无菌环境 B．乳酸菌细胞内能进行碱基互补配对的细胞器有线粒体和核糖体 C．菌落直径与溶钙圈直径比值大的菌落为目标菌落 D．胆固醇既可以为乳酸菌的生长提供碳源，也可以参与动物细胞膜的组成 【答案】D 【分析】酸笋制作的原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。乳酸能与CaCO3发生反应，使CaCO3分解成可溶性物质乳酸钙和CO2，导致菌落周围出现溶钙圈。 【详解】A、乳酸菌是厌氧菌，腌制酸笋需要水封，为乳酸菌发酵提供无氧环境，A错误； B、乳酸菌是由原核细胞构成的原核生物，原核细胞中没有线粒体，但有核糖体，B错误； C、乳酸菌发酵产生的乳酸能与CaCO3发生反应，使CaCO3分解成可溶性物质乳酸钙和CO2，导致菌落周围出现溶钙圈，故溶钙圈直径与菌落直径的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，所以溶钙圈直径与菌落直径比值大的菌落为目标菌落，C错误； D、胆固醇属于脂质，含有C、H、O元素，主要为微生物的生长提供碳源，胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，D正确。 故选D。 38．为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变，实验方案如图所示。图中③平板影印是指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上进行接种的方法。下列叙述正确的是（    ） A．进行扩大培养的培养基配制过程不添加琼脂，但需进行干热灭菌 B．②过程接种方法为稀释涂布平板法，此法可用于微生物的分离和计数 C．B组培养基中应添加青霉素，且培养过程中应进行倒置培养 D．该实验结果说明青霉素起到了选择作用 【答案】BCD 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落； ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、进行扩大培养若为液体培养基则可不添加琼脂，通常采用高压蒸汽灭菌，而非干热灭菌，A错误； B、②过程接种方法为稀释涂布平板法，该方法可用于微生物的分离和计数，B正确； C、B 组培养基中应添加青霉素，以观察青霉素对细菌的作用，培养过程中倒置培养可以防止污染，C正确； D、从实验设计和结果可以看出，青霉素起到了选择作用，使得原本就具有抗药性的细菌存活下来，D正确。 故选BCD。 39．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（    ） A．图中培养基在各种成分都溶化后且分装前进行灭菌 B．将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C．将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 D．若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 【答案】ABD 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、图中培养基在各种成分都溶化且分装后进行灭菌，A错误； B、将菌种接种至A培养基时，应该将接种环使用前需在火焰上灼烧而不是涂布器，B错误； C、将菌种转接至B培养基是将菌种转接至新的培养基，目的是为了进行扩大培养，从而增加菌种的数量，C正确； D、以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌(如黑曲霉)，将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制可以制成酱油产品，D错误。 故选ABD。 40．如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1-4在含有目的基因的DNA上的结合位置如甲图所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindIII在质粒上的识别位点如乙图所示。以下说法中错误的是（    ） A．PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物28个 B．若已经合成了甲图所示4种引物，应选择引物2和3扩增目的基因 C．过程①中应使用限制酶BamHI切割质粒 D．对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其污染环境 【答案】AB 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、PCR 技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n+1-2，因此PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物24+1-2=30个，A错误； B、由于DNA聚合酶只能从5′→3′延伸子链，因此扩增目的基因时应选择引物1和4，B错误； C、①是基因表达载体的构建过程，若使用EcoRⅠ切割质粒会将目的基因插入启动子上游，目的基因不能正确表达，若使用HamdⅢ切割质粒将破坏标记基因，不利于目的基因的鉴定和筛选，因此该过程中应使用限制酶 BamHⅠ切割质粒，C正确； D、为了防止污染环境，对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，D正确。 故选AB。 41．萤火虫的荧光素酶能催化ATP激活的荧光素氧化发光，这一现象在生物检测和成像方面有重要的应用价值。为了解决天然荧光素酶不能高效催化人工合成的荧光素DTZ发光的问题，研究人员采用蛋白质工程（又称为第二代基因工程）对它进行了改造。下列关于蛋白质工程改造天然荧光素酶的叙述，正确的是（    ） A．通过化学诱变剂可定向改造天然荧光素酶的基因序列 B．改造天然荧光素酶所用的基因表达载体不需要启动子和终止子 C．PCR技术可用于检测染色体DNA上是否插入荧光素酶基因 D．改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能 【答案】CD 【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。 2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因），以上是蛋白质工程特有的途径；后续按照基因工程的一般步骤进行。 【详解】A、通过化学诱变剂可以让天然荧光素酶的基因序列进行随机突变，但化学诱变通常是不定向的，A错误； B、改造天然荧光素酶所用的基因表达载体必须包含启动子和终止子，启动子是驱动基因转录的元件，而终止子是指示转录终止的位置，B错误； C、PCR 方法主要用于检测 DNA 的存在或者染色体 DNA 上是否插入目的基因，因此PCR技术可用于检测染色体DNA上是否插入荧光素酶基因，C正确； D、改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能，D正确。 故选CD。 42．通过基因工程获取的致病模型动物有助于研究目的基因的特性，在生命科学领域得到广泛应用。利用正常大鼠制备致病转基因模型大鼠的流程如图所示。下列说法中错误的是（    ） A．构建表达载体时，应选用PstI和SmaI两种限制酶对含致病基因的DNA和质粒进行切割 B．将表达载体导入细胞A中时常用Ca2+处理，使其处于能吸收周围环境中DNA分子的状态 C．可通过检测早期胚胎中荧光蛋白的表达情况，对转基因胚胎进行筛选 D．胚胎能在代孕母鼠子宫中存活的生理学基础是早期胚胎细胞保持着细胞全能性 【答案】ABD 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：包括分子水平上的检测和个体水平上的鉴定，其中分子水平检测的目的是检测目的基因是否成功导入和表达，后者主要是鉴定是否表现出应有的性状。 【详解】A、构建表达载体时，应选用PstI和EcoRI两种限制酶对含致病基因的DNA和质粒进行切割，因为SamⅠ会切割目的基因，A错误； B、将表达载体导入微生物时常用Ca2+处理，使其处于能吸收周围环境中DNA分子的状态，进而提高转化效率，B错误； C、图中基因表达载体中带有的标记基因是荧光蛋白基因，因而可通过检测早期胚胎中荧光蛋白的表达情况，对转基因胚胎进行筛选，C正确； D、胚胎能在代孕母鼠子宫中存活的生理学基础是受体胚胎对移入的早期胚胎不会发生免疫排斥，D错误。 故选ABD。 43．青花菜甲具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。相关叙述错误的是（    ）    A．过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得抗毒苗 B．过程B中常用PEG诱导原生质体融合 C．过程D通常在有光的条件下培养，且需要合适比例的生长素和细胞分裂素 D．杂种植株抗除草剂基因的遗传遵循孟德尔遗传规律 【答案】ACD 【分析】分析题图：该图为植物体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可用酶解法；B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理；C为培养筛选出所需的杂种细胞；D为脱分化。 【详解】A、茎尖或芽尖（分生组织）没有病毒，因此利用顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗，A错误； B、B为诱导原生质体融合，常用聚乙二醇（PEG）处理，诱导原生质体融合，B正确； C、过程D是诱导外植体脱分化获得愈伤组织的过程，需要在黑暗下进行，C错误； D、杂种植株的抗除草剂基因位于细胞质内，不遵循孟德尔遗传定律，D错误。 故选ACD。 44．植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖（niè枝芽）能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述正确的是（    ） A．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B．过程②中常采用离心、振动、电激或PEG诱导原生质体融合 C．过程③成功的标志是甲、乙原生质体的细胞核完成融合 D．过程④和⑤的培养基中添加生长素和细胞分裂素的比例有差异 【答案】ABD 【分析】1、植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。 2、分析题图：图示为甲、乙两种植物细胞融合并培育新植株的过程，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②③表示人工诱导原生质体融合以及再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织；⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。 【详解】A、据图可知，过程①表示去壁获取原生质体的过程，酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，该过程酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构可能有差异，A正确； B、据图可知，过程②表示人工诱导原生质体融合，常用离心、‌振动、‌电激等物理方法和PEG等化学方法诱导原生质体融合，B正确； C、据图可知，过程③表示再生出新细胞壁的过程，该过程成功的标志是再生出新的细胞壁，C错误； D、据图可知，过程④表示脱分化形成愈伤组织，过程⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，D正确。 故选ABD。 45．克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细胞核吸出并注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴，如图是它们的培育流程简图。下列说法正确的是（　　）    A．以克隆猴为模型研发新型药物可以有效缩短研发进程 B．供体细胞注入去核卵母细胞透明带内后需经诱导才能形成重构胚 C．“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴共同决定 D．相比之下，细胞质内注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小 【答案】ABC 【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电刺激等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。 【详解】A、克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程，A正确； B、供体细胞注入卵母细胞透明带内后，还需要电融合法诱导才能使两细胞融合形成重构胚，B正确； C、“中中”和“华华”是由透明带下注射法形成的，核DNA均来自供体细胞，但质DNA来自去核卵母细胞和供体细胞，因此“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴共同决定，C正确； D、透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核，操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，对卵母细胞的损伤更小，D错误。 故选ABC。 46．研究发现，免疫抑制受体TREM2（髓系细胞触发受体2）在肿瘤免疫逃逸过程中发挥了重要作用，TREM2抗体有望提高肿瘤治疗的效果。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列有关叙述错误的是（    ）    A．SP2/0细胞能在体外大量增殖，步骤②中融合的细胞都有此特性 B．步骤②常用的方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导融合法等 C．通过步骤③即可获得所需的杂交瘤细胞，步骤⑤⑥是克隆化培养过程 D．制备的TREM2单克隆抗体特异性强，能精准杀死免疫逃逸的肿瘤细胞 【答案】ACD 【分析】单克隆抗体的制备过程： （1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞； （2）获得杂交瘤细胞： ①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合； ②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体； （3）克隆化培养和抗体检测； （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖； （5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、据图可知，步骤②中融合的细胞中包含两个B淋巴细胞融合而来的细胞，这种融合细胞没有大量增殖的特性，A错误； B、据图可知，步骤②是动物细胞融合过程，常用的技术有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导融合法等，B正确； C、据图可知，步骤③是用特定培养基进行“第一次筛选”，得到的是多种类型的杂交瘤细胞，步骤④进行用专一抗体进行“第二次筛选”，得到能产生TREM2单克隆抗体的杂交瘤细胞，步骤⑤⑥是将能产生TREM2单克隆抗体的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔或者体外进行克隆化培养，C错误； D、TREM2单克隆抗体具有强特异性，能与TREM2特异性结合，削弱肿瘤细胞的免疫逃逸能力，但不能直接杀死肿瘤细胞，D错误。 故选ACD。 47．下图为我国科学家获得克隆猴“中中”和“华华”的具体过程。研究发现，重构胚中基因A的正常表达是克隆成功的关键；重构胚基因组中大量被甲基化的组蛋白H3会抑制核的全能性；组蛋白H3的乙酰化能使小鼠克隆成功率提高5倍以上。下列叙述正确的是（    ）    注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶；TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。 A．细胞a指的是培养到MⅡ期的卵母细胞，通过显微操作去掉的是完整细胞核 B．用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是促进两细胞融合，也可用电融合法促融 C．Kdm4d可使H3去甲基化，TSA可使H3保持乙酰化，进而促进了基因A的正常表达 D．“中中”和“华华”的培育用到了体细胞核移植技术，培育过程属于有性生殖 【答案】BC 【分析】1、克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。 【详解】A、图中细胞a指的是卵母细胞，待其培养到MⅡ期（减数第二次分裂中期）后再通过显微操作去掉纺锤体—染色体复合物，A错误； B、用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是促进两细胞（体细胞和卵母细胞）融合，通过电融合法也能使两细胞融合，B正确； C、研究显示，重构胚中基因A的正常表达是克隆成功的关键，重构胚基因组中大量H3被甲基化是克隆成功的巨大阻碍，H3乙酰化能使小鼠克隆成功率提高5倍以上，因此图中将Kdm4d的mRNA注入重构胚和用TSA处理重构胚后，能激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程的机制可能是Kdm4d使H3去甲基化，TSA使H3保持乙酰化，进而促进了基因A的正常表达，C正确； D、“中中”和“华华”的培育用到了体细胞核移植技术，培育过程属于无性生殖，D错误。 故选BC。 48．研究人员利用含绿色荧光蛋白基因（GFP）的胚胎干细胞构建发荧光的嵌合体猴，下图为其操作流程和发育过程示意图。相关叙述错误的有（    ） A．胚胎干细胞会与桑葚胚的细胞发生融合形成四倍体嵌合体猴 B．嵌合囊胚中的滋养层细胞将来可发育为嵌合体猴的肝脏等组织 C．嵌合原肠胚移植前需要对受体猴进行同期发情处理 D．不发出绿色荧光的体细胞可能含GFP基因 【答案】ABC 【分析】胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。胚胎干细胞，是高度未分化的细胞。如果进行体外培养，能够无限的增殖和分化。胚胎肝细胞还可以分化成多功能的细胞。胚胎干细胞具有多能性，可以分化成多种组织的能力但是无法独自发育成一个个体细胞。胚胎里的干细胞被称为一种“全能”细胞，可以分化成所有类型的细胞，并且携带生物体的全套遗传信息。 【详解】A、在胚胎发育过程中，胚胎干细胞会与桑葚胚（桑椹胚）的细胞发生整合，但不会形成四倍体嵌合体。正常情况下，桑葚胚中的细胞与胚胎干细胞结合形成的嵌合体仍然是二倍体，A错误； B、嵌合胚胎中的内细胞团细胞将发育为嵌合体猴的肝脏等组织，B错误； C、胚胎移植应选择桑葚胚或囊胚而不是原肠胚，C错误； D、有些纯体细胞即使含有绿色荧光蛋白基因（GFP），但由于基因未表达或表达水平过低，不一定会发出绿色荧光，D正确。 故选ABC。 49．2018年中科院动物研究所科学家利用基因修饰和编辑技术，将雌性印记基因被敲除的孤雌单倍体胚胎干细胞注射进入卵母细胞，最终创造出完全正常的“孤雌生殖”小鼠，实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（　　）    A．本实验中，孤雌胚胎干细胞的功能相当于精子 B．在本实验中，使用的ES细胞可从雌性小鼠的早期胚胎中获取 C．③过程是胚胎移植，移植前不需要对乙鼠进行发情处理 D．孤雌小鼠的性染色体组成只能是XX 【答案】ABD 【分析】题图分析，从卵泡中取出卵母细胞，将经过基因修饰和基因编辑处理的孤雌胚胎干细胞注入卵母细胞，进行早期胚胎培养、胚胎移植等获得孤雌小鼠。 【详解】A、由图示可知，早期胚胎相当于卵母细胞与孤雌胚胎干细胞融合形成的，相当于精卵结合，孤雌胚胎干细胞的功能相当于精子，A正确； B、ES细胞，即‌胚胎干细胞，是从早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，具有发育的全能性，因此在本实验中，使用的ES细胞可从雌性小鼠的早期胚胎中获取，B正确； C、胚胎移植是在胚胎在相同生理条件下空间位置上的转移，因此移植前要对乙鼠进行发情处理，使其与供体处于相同的生理状态，C错误； D、注入卵母细胞的孤雌胚胎干细胞的性染色体组成为X，卵母细胞的性染色体组成为X，因此孤雌小鼠的性染色体组成只能是XX，D正确。 故选ABD。 50．下图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是（　　） A．构建重组质粒时需要的限制酶有PstⅠ、XhoⅠ和EcoRⅠ B．在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌 C．用农杆菌转化植物愈伤组织选择呈现蓝色的组织进行培养 D．为进一步改良品种，可将启动子替换为除草剂诱导型启动子 【答案】AC 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、由图可知，首先，Ω和polyA之间原本是Bt基因，构建过程中需要将Bt基因切除，重新将A基因连接到Ω和polyA之间，因此需要限制酶PstⅠ和XhoⅠ，再将“启动子-Ω-A基因-polyA-终止子”连接到含NptⅡ基因的质粒上时，需要限制酶HindⅢ（或BamHⅠ）和EcoRⅠ，因此构建重组质粒时需要的限制酶有PstⅠ、XhoⅠ、HindⅢ（或BamHⅠ）和EcoRⅠ，A错误； B、由图可知，在构建基因表达载体时，质粒中的NptⅡ基因保留下来作为标记基因，GUS基因被切除，因此在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌，B正确； C、构建成功的含有A基因的基因表达载体因构建基因表达载体时GUS基因被切除，使细胞中无蓝色，因此呈现蓝色的组织说明细胞中含有GUS基因，则该细胞中导入的是不含目的基因的空白质粒，因此不能选择呈蓝色的组织进一步培养，C错误； D、启动子若为除草剂诱导启动子，则在无除草剂环境中该基因不表达，在有除草剂的环境中可表达，表达后具有了除草剂的功能，将减少细胞物质和能量浪费，D正确。 故选AC。 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！20 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题16 生物技术与工程 一、单选题 1．老友粉是南宁本土美食，这种粉在烹煮过程添加酸笋、豆豉、酸辣椒、香醋等佐料，从而赋予老友粉独特风味。下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（　　） A．在制作酸笋时加入“陈酸笋水”可加速发酵进程 B．发酵温度过低可能会导致酸辣椒咸而不酸 C．在香醋的发酵过程中应一直保持通气条件 D．传统发酵技术使用的菌种均为纯种微生物 2．科研人员以刺五加、五味子和苹果为原料，经过酒精发酵和醋酸发酵酿造复合果醋，其主要流程如下。相关叙述正确的是（    ） A．步骤b中果汁的初始糖度越高越有利于最终果醋的形成 B．步骤c和步骤 e均应在无菌环境中接种菌种，发酵温度一般设置为 18～25℃ C．步骤d所用的无菌技术为湿热灭菌，可以杀死所有微生物包括芽孢和孢子 D．步骤e中摇床转速过高会加快乙醇的挥发导致产酸量下降 3．生物兴趣小组利用葡萄和糯米尝试酿制葡萄糯米香醋，设计的加工工艺如图所示。下列分析正确的是（    ）    A．菌种A是酵母菌，有氧条件下有利于其将葡萄和糯米中的糖转化为酒精 B．菌种B是醋酸菌，在缺少糖源时能将乙醇直接转化为醋酸 C．酒精发酵过程中对发酵液进行取样，加入溴麝香草酚蓝溶液会呈现灰绿色 D．加入菌种B后，提高环境温度并通入充足的氧气以利于发酵过程的进行 4．生产啤酒的主要工艺流程如下图所示，下列叙述错误的是（　　） A．过程①中若用赤霉素溶液处理大麦种子，种子无需发芽就能产生淀粉酶 B．过程②中焙烤不会使酶失活，碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触有利于糖化 C．过程②煮沸时加入啤酒花可增加啤酒的苦度等风味，蒸煮后需冷却才能接种 D．过程③主发酵阶段要适时往外排气，后发酵阶段在低温、通气环境中进行 5．下列关于微生物纯化培养的叙述，错误的是（    ） A．倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行 B．微生物的纯化培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 C．用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落 D．在平板划线过程中，灼烧接种环之后，应马上划线，防止接种环被杂菌污染 6．下图是实验人员利用“影印法”初检氨基酸S缺陷型菌株的过程，影印法培养微生物可以保证不同培养基中的同种菌株有相同接种位置。结合图示分析，下列有关叙述正确的是（    ） A．对菌液进行诱变处理，可使菌种定向变异为氨基酸S缺陷型 B．图示的基本培养基既属于鉴别培养基，也属于选择培养基 C．进行过程②的操作时，应先将丝绒布转印至基本培养基上 D．图示菌落B中有氨基酸S缺陷型菌，菌落A能合成氨基酸S 7．牛津杯法可测定发酵液中抗生素的含量，具体做法是：在培养皿中倒入不含任何营养物质的琼脂凝固成底层平板，同时将牛津杯竖直立在将要凝固的底层平板上；再将含少量琼脂的培养基熔化并冷却后加入敏感指示菌，混匀后倒入底层平板上形成双层平板，后取出牛津杯，形成小孔。向A、B、C小孔中分别加入浓度不同且已知的抗生素，在小孔D、E、F中加入等量的发酵液，培养一段时间后，测量小孔周围抑菌圈的大小。下列说法错误的是（　　）    A．双层培养基灭菌均可以用湿热灭菌法，培养皿灭菌可以用干热灭菌法 B．底层培养基可以弥补培养皿底部或超净工作台不平，利于后续实验观察 C．倒入上层平板后，需使用灭菌后的涂布器将敏感指示菌均匀地涂布在培养基表面 D．通过比较D、E、F和A、B、C周围抑菌圈的大小可以比较发酵液中抗生素的浓度 8．下列关于植物细胞工程及其应用的叙述，正确的是（    ） A．生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是进行远缘植物体细胞杂交 B．植物细胞培养技术的原理是植物细胞的全能性 C．生长素和细胞分裂素的浓度和比例会影响离体植物细胞的发育方向 D．进行体细胞杂交前，必须用胰蛋白酶和胶原蛋白酶去除细胞壁 9．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（    ） A．图1包括原生质体融合和植物组织培养等步骤 B．图1过程①是在无菌水中进行，过程②是在固体培养基中进行 C．若只考虑原生质体两两融合，图2中4、5植株体细胞染色体数目最多可达到64条 D．病菌接种到杂种植株叶片一段时间后，病斑面积占叶片总面积比例最小的植株抗病性最强 10．科研人员利用两种植物进行体细胞杂交时，各组分别加入不同浓度的PEG来促进原生质体融合，其他条件均相同，结果如下表。下列叙述错误的是（    ） PEG浓度/% 25 30 35 40 45 融合率/% 10 12 15 30 20 A．植物体细胞融合前需先用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B．原生质体融合利用了细胞膜具有流动性的原理 C．低浓度PEG促进原生质体融合，高浓度则抑制融合 D．融合后的细胞经组织培养得到的一般为多倍体植株 11．罕见草药红景天体内的次生代谢物Sal（红景天苷）具有重要药用价值。由于稀有草药供应不足，科研人员研究了不同光照条件对红景天愈伤组织生长和Sal产生的影响，旨在寻找提高红景天体外培养产量的新途径。研究人员首先取红景天叶片诱导出愈伤组织，过程如图1所示，随后分别在红光、蓝光、绿光、RGB光（红、绿、蓝混合光）和白光的不同光照条件下培养红景天愈伤组织，并定期统计，结果如图2所示。下列叙述正确的是（    ） A．外植体需分别用70%乙醇和10%次氯酸钠进行消毒，随后用自来水清洗多次 B．图1培养基中NAA和细胞分裂素的配制比例适中时容易诱导外植体形成愈伤组织 C．接种的外植体经脱分化诱导形成愈伤组织的过程，体现了植物细胞的全能性 D．由上图可知，不同光照条件会影响红景天Sal的积累量，红光下最有利于Sal积累 12．下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（　　） A．用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体 B．融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织 C．体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核 D．通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于有性繁殖 13．甲植物的细胞质基因决定高产性状，乙植物的细胞核基因决定耐盐性状。某研究小组用一定的方法使甲植物细胞的细胞核失活、乙植物细胞的细胞质失活，之后利用植物体细胞杂交技术培育高产耐盐再生植株。下列相关叙述错误的是（    ） A．进行植物体细胞杂交之前，先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 B．失活处理可使得未融合和同种融合的原生质体均不能正常生长分裂 C．愈伤组织经再分化可形成胚状体，长出芽和根，进而发育成完整植株 D．再生植株含有两种优良性状的基因，一定能表现出高产耐盐的性状 14．郑州大学第一附属医院研究团队首次完成了去ECMO化的“人造子宫”动物实验。医生将胎龄4个月的胎羊从母体中取出，并将其脐动脉和脐静脉与母体颈部的动脉和静脉相连，建立起一个类似于ECMO的并体循环。下列叙述错误的是（    ） A．“人造子宫”能为胎羊细胞提供氧气和营养物质，运走代谢废物 B．“人造子宫”作为液体屏障，能保护胎羊免受外界环境的直接干扰 C．“人造子宫”能与胎羊细胞进行物质和信息的双向交流 D．该实验证明维持稳态仅需分子水平上的调节，不需进行器官、系统水平上的调节 15．通过胚胎工程繁殖良种牛的部分过程如图所示。下列说法正确的是（    ） A．可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理早期胚胎，使之分散 B．子代良种牛的优良性状全部遗传自供体母牛 C．受体母牛也需要注射激素，目的主要是促进其排卵 D．胚胎被移植到受体母牛体内之前，需要向受体母牛注射免疫抑制剂 16．研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。据图分析，以下叙述错误的是（    ） A．实验前需要给小鼠甲多次注射病毒A，增加分泌抗病毒A抗体的浆细胞比例 B．取小鼠甲胸腺剪碎并用胰蛋白酶处理一段时间，可使其分散并制成单细胞悬液 C．筛选1所用的培养基属于选择培养基，多次传代后只有杂交瘤细胞能够生存 D．筛选2 需对杂交瘤细胞进行单克隆培养后进行抗原抗体杂交反应阳性鉴定 17．线粒体功能同时受线粒体DNA（mtDNA）和核DNA（nDNA）的双重调控。线粒体遗传病是指由mtDNA或nDNA突变导致线粒体内的蛋白质异常，使细胞出现功能损伤。为治疗mtDNA突变导致的线粒体遗传病，科研团队于2020年通过第一极体移植得到了“三亲小猴”，过程如下图。下列有关说法正确的是（　　）    A．父亲nDNA突变不会导致线粒体遗传病，母亲mtDNA突变容易导致线粒体遗传病 B．减数分裂Ⅰ细胞质不均等分配使极体含较少细胞质，能降低子代猴携带异常染色体的风险 C．“三亲小猴”的获得需用到动物细胞融合、体外受精、胚胎移植、动物细胞培养等技术 D．“三亲小猴”能够正常发育的生理基础是受体猴对外来胚胎不发生免疫排斥反应 18．猪逐渐成为异种器官移植的主要供体，科学家利用基因工程方法对猪器官进行改造，欲培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆器官，提高异种器官移植的成功率，设计操作过程如图所示，下列叙述正确的是（    ） 注：Gal蛋白为免疫排斥反应的主要抗原；人体补体调节蛋白可有效降低免疫排斥 A．①过程利用胃蛋白酶进行酶解时，需控制酶解反应时间 B．Cas9酶可能有限制酶的功能，作用于磷酸二酯键以敲除基因 C．③过程利用DNA聚合酶使人体补体调节蛋白基因与核DNA连接 D．④过程需要去核的心肌细胞，可利用物理方法激活重组细胞 19．科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，利用其乳腺生产人生长激素，为加速转基因奶牛的繁育，对此转基因奶牛进行克隆，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A．细胞培养前，可采用酶解法将动物组织分散成单个细胞 B．重组胚胎移植到代孕母牛体内之前不需要进行性别鉴定 C．可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D．将重组胚胎移到雌性水牛体内之前，需要进行同期发情处理 20．小鼠胚胎干细胞经定向诱导获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．胚胎干细胞分化成的细胞形态结构不同是因为基因突变 B．细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同 C．用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞 D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养 21．模型构建是开展生物学研究的常用方法。关于下图所示的概念模型的叙述错误的是（    ） A．若为体细胞核移植技术模型，B可能为去核的卵母细胞 B．若为转基因技术模型，C为重组质粒，D为受体细胞 C．若为动物细胞融合模型，形成C的过程离不开膜的流动性 D．若为植物体细胞杂交技术模型，需对A、B去分化后再诱导融合 22．《本草纲目》曾提到：“羊乳甘温无毒、润心肺、补肺肾气。”下图为研究人员培育高产的优质奶羊的过程，下列相关说法正确的是（    ） A．4号羊的DNA全部来自2号羊 B．采集2号羊的组织块，用纤维素酶处理获得分散的成纤维细胞进行培养 C．对1号羊使用促性腺激素处理，收集并选取处在M II期的卵母细胞用于核移植 D．可用抗原—抗体杂交技术检测产奶量高的基因是否被导入4号羊 23．下图为肾脏上皮细胞培养过程示意图。下列有关叙述错误的是（    ）    A．甲→乙过程可用机械法或酶解法处理获得单个细胞 B．丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养 C．丙过程会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象 D．丁过程为传代培养，细胞都能进行无限增殖 24．2023年11月，我国科研人员利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干细胞高贡献的活体嵌合猴，该研究部分过程如图所示，由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。下列有关叙述正确的是（    ） （注：GFP指表达绿色荧光标记蛋白，可监测供体干细胞的存活情况以及其在嵌合体不同组织中的分化、分布情况。） A．具有清晰GFP信号的囊胚才能被转移至代孕雌猴体内，否则难以获得嵌合猴 B．代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要饲喂含促性腺激素的饲料进行同期发情处理 C．由图可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质的一半来源于代孕雌猴 D．图示过程中涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等工程技术 25．我国科学家应用体细胞核移植技术首次成功克隆了非人灵长类动物——食蟹猕猴，并取名为“中中”和“华华”，在世界上引起轰动。下列叙述错误的是（    ） A．克隆猴的遗传性状由供体细胞的遗传物质决定，与去核卵母细胞无关 B．体细胞核移植不经过两性生殖细胞的融合，此过程属于无性生殖 C．克隆猴的成功体现了已分化的动物体细胞的细胞核具有全能性 D．该技术涉及卵母细胞去核、供体细胞注入、重构胚的激活和培养等操作 26．“悬浮培养”的植物细胞是相对均一、脱分化的单细胞或小细胞团，直接从人工配制的培养液中吸收营养物质和排出废物。下图为制备植物悬浮细胞的简易流程，下列说法中正确的是（    ）    A．外植体需要进行灭菌后置于无菌的培养基中培养 B．外植体诱导形成愈伤组织的过程体现了植物细胞的全能性 C．愈伤组织细胞能通过胰蛋白酶分散处理后形成悬浮细胞 D．植物悬浮细胞培养有利于植物细胞次生代谢物的工厂化生产 27．下列有关细胞工程的叙述，错误的是（    ） A．在植物组织培养过程中，细胞一直处于不断增殖状态，容易受到培养条件中诱变因素的影响而产生突变 B．用某种特定抗原反复注射小鼠的目的是产生足够多的已免疫的B淋巴细胞 C．用于治疗癌症的“生物导弹”是以单克隆抗体作抗癌药物定向杀死癌细胞的 D．用聚乙二醇处理大量混合在一起的两个物种植物细胞的原生质体，所获得的融合细胞不都含有两个物种的遗传物质 28．乳腺癌细胞的HER2蛋白是正常组织中的100倍以上，可作为理想的肿瘤治疗靶标。科研人员通过接头将抗HER2抗体与细胞毒素结合，制备出ADC来治疗乳腺癌。ADC的作用机制如图所示。下列相关叙述错误的是（    ） A．HER2蛋白不是乳腺癌细胞膜上特有的蛋白 B．可运用动物细胞培养和动物细胞融合技术制备抗HER2抗体 C．ADC被溶酶体酶降解，释放出抗体和细胞毒素使乳腺癌细胞凋亡 D．荧光标记的抗HER2单克隆抗体可用于乳腺癌的定位诊断 29．DNA粗提取和DNA的PCR扩增是常用的生物技术。下列相关原理及过程叙述正确的是（    ） A．DNA在冷酒精溶液中溶解度较大，蛋白质在冷酒精中溶解度较小，可利用溶解度差异初步分离DNA B．采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，在同一电场作用下，DNA片段越长，向负极迁移速率越快 C．PCR的每次循环包括变性、复性、延伸3个阶段，在复性阶段引物与模板DNA链之间形成磷酸二酯键 D．利用引物A和B对双链DNA进行PCR扩增时，经3次循环需消耗7个A引物 30．反向PCR是一种通过已知序列设计引物对未知序列进行扩增的技术，其过程如下图所示。下列叙述正确的是（　　） A．应选择引物2和引物3进行PCR扩增 B．设计的引物中GC碱基含量越高，变性的温度越高 C．PCR产物是包含所有已知序列和未知序列的链状DNA分子 D．整个过程需用到限制酶、DNA连接酶、耐高温DNA聚合酶及逆转录酶 31．研究人员欲将某动物体内基因X导入大肠杆菌的质粒中保存，质粒含有抗性基因与酶切位点，目的基因两端酶切位点如下图所示，下列叙述错误的是（　　）    A．使用HindⅢ和XbaI进行酶切能避免基因X与质粒反向连接 B．目的基因X与质粒连接可使用E.coliDNA连接酶 C．Ca2+处理大肠杆菌能降低细胞膜通透性，有利于重组质粒导入受体细胞 D．含有基因X的大肠杆菌能在氨苄青霉素选择培养基中生长 32．干扰素（W）是一种具有特定功能的人体蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症。图甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。为使目的基因连接方向正确，对W基因和质粒都分别用两种不同的限制酶切割然后拼接，下列叙述正确的是（　　）    A．选用HindⅢ和BamH Ⅰ切割质粒 B．选用BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ切割含W基因的DNA片段 C．利用PCR技术扩增目的基因时，选择引物A和引物D D．若受体细胞表现出X抗生素抗性和Y抗生素抗性，表明重组质粒成功导入受体细胞 33．下图表示pBR322质粒和人生长激素基因所在片段的结构信息，将二者构建的重组质粒导入受体菌并进行筛选。下列叙述错误的是（    ）    注：AmpR：氨苄青霉素抗性基因；TetR：四环素抗性基因。 A．用含氨苄青霉素的培养基筛选出的是含重组质粒的受体菌 B．应选择的限制酶组合是酶F和酶G C．pBR322质粒含有的AmpR基因和TetR基因都属于标记基因 D．同时用三种限制酶处理图中质粒，完全反应后可得到4种长度DNA 34．人血清白蛋白（HSA）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用转基因技术获得转HSA基因的大肠杆菌，通过发酵工程，实现HSA的大量生产。下图表示HSA基因，有关叙述正确的是（    ）    A．PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是第三步 B．扩增出HSA基因并用于表达载体的构建，应选择引物Ⅱ和引物Ⅲ C．在PCR反应缓冲液中加入Ca²⁺的作用是激活耐高温的DNA聚合酶 D．基因工程的核心环节是目的基因导入受体细胞 35．融合 PCR 技术是采用具有互补末端的引物，将不同来源的扩增片段连接起来的方法，其过程如下图所示。下列说法错误的是（    ） A．对基因B进行PCR 需至少进行3次循环，才能获得含引物3且双链等长的DNA B．若通过融合PCR 技术将启动子、目的基因、终止子拼接成类似上图所示的融合基因，需要设计6种引物，其中能够起着“搭桥”作用的引物有3种 C．将第一阶段的产物（图中ab和cd）混合，先变性再复性，使能够互补配对的DNA单链相互结合，理论上有4种结合的可能，其中在PCR体系中能进一步延伸的有2种 D．引物2和引物3部分核苷酸序列碱基互补配对，因此二者不能共存于同一PCR体系中 二、多选题 36．大头菜是中国四大名腌菜之一，其制作流程为：鲜菜→整理清洗→下缸→一次转缸→二次转缸→三次转缸→一次腌晒（盐水\卤水）→二次腌晒（盐水\卤水）（盐水\卤水）→四次腌晒（盐水\卤水）→五次腌晒（盐水\卤水），盐水用量从20%逐渐上升到28%，卤水单次用量基本相同。下列叙述正确的是（    ） A．在高盐密闭环境下，农家腌制大头菜的过程为单一菌种发酵 B．卤水可提升大头菜的色香，同时具有抑菌作用 C．多次转缸可使各层大头菜均匀发酵，同时避免热量积累 D．第五次腌晒时盐水用量达到28%，有利于延长大头菜保质期 37．研究者用酸笋开发具有降低胆固醇功能的益生菌。先将酸笋发酵液接种到含有CaCO3的固体培养基上，筛选出乳酸菌，然后将乳酸菌接种到含有胆固醇的培养液中，筛选出能够降解胆固醇的乳酸菌。相关叙述正确的是（    ） A．腌制酸笋需要水封，为乳酸菌发酵提供无菌环境 B．乳酸菌细胞内能进行碱基互补配对的细胞器有线粒体和核糖体 C．菌落直径与溶钙圈直径比值大的菌落为目标菌落 D．胆固醇既可以为乳酸菌的生长提供碳源，也可以参与动物细胞膜的组成 38．为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变，实验方案如图所示。图中③平板影印是指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上进行接种的方法。下列叙述正确的是（    ） A．进行扩大培养的培养基配制过程不添加琼脂，但需进行干热灭菌 B．②过程接种方法为稀释涂布平板法，此法可用于微生物的分离和计数 C．B组培养基中应添加青霉素，且培养过程中应进行倒置培养 D．该实验结果说明青霉素起到了选择作用 39．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（    ） A．图中培养基在各种成分都溶化后且分装前进行灭菌 B．将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C．将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 D．若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 40．如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1-4在含有目的基因的DNA上的结合位置如甲图所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindIII在质粒上的识别位点如乙图所示。以下说法中错误的是（    ） A．PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物28个 B．若已经合成了甲图所示4种引物，应选择引物2和3扩增目的基因 C．过程①中应使用限制酶BamHI切割质粒 D．对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其污染环境 41．萤火虫的荧光素酶能催化ATP激活的荧光素氧化发光，这一现象在生物检测和成像方面有重要的应用价值。为了解决天然荧光素酶不能高效催化人工合成的荧光素DTZ发光的问题，研究人员采用蛋白质工程（又称为第二代基因工程）对它进行了改造。下列关于蛋白质工程改造天然荧光素酶的叙述，正确的是（    ） A．通过化学诱变剂可定向改造天然荧光素酶的基因序列 B．改造天然荧光素酶所用的基因表达载体不需要启动子和终止子 C．PCR技术可用于检测染色体DNA上是否插入荧光素酶基因 D．改造后的荧光素酶在一定条件下催化DTZ发光是将化学能转化为光能 42．通过基因工程获取的致病模型动物有助于研究目的基因的特性，在生命科学领域得到广泛应用。利用正常大鼠制备致病转基因模型大鼠的流程如图所示。下列说法中错误的是（    ） A．构建表达载体时，应选用PstI和SmaI两种限制酶对含致病基因的DNA和质粒进行切割 B．将表达载体导入细胞A中时常用Ca2+处理，使其处于能吸收周围环境中DNA分子的状态 C．可通过检测早期胚胎中荧光蛋白的表达情况，对转基因胚胎进行筛选 D．胚胎能在代孕母鼠子宫中存活的生理学基础是早期胚胎细胞保持着细胞全能性 43．青花菜甲具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。相关叙述错误的是（    ）    A．过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得抗毒苗 B．过程B中常用PEG诱导原生质体融合 C．过程D通常在有光的条件下培养，且需要合适比例的生长素和细胞分裂素 D．杂种植株抗除草剂基因的遗传遵循孟德尔遗传规律 44．植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖（niè枝芽）能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述正确的是（    ） A．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异 B．过程②中常采用离心、振动、电激或PEG诱导原生质体融合 C．过程③成功的标志是甲、乙原生质体的细胞核完成融合 D．过程④和⑤的培养基中添加生长素和细胞分裂素的比例有差异 45．克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细胞核吸出并注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴，如图是它们的培育流程简图。下列说法正确的是（　　）    A．以克隆猴为模型研发新型药物可以有效缩短研发进程 B．供体细胞注入去核卵母细胞透明带内后需经诱导才能形成重构胚 C．“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴共同决定 D．相比之下，细胞质内注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小 46．研究发现，免疫抑制受体TREM2（髓系细胞触发受体2）在肿瘤免疫逃逸过程中发挥了重要作用，TREM2抗体有望提高肿瘤治疗的效果。下图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列有关叙述错误的是（    ）    A．SP2/0细胞能在体外大量增殖，步骤②中融合的细胞都有此特性 B．步骤②常用的方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导融合法等 C．通过步骤③即可获得所需的杂交瘤细胞，步骤⑤⑥是克隆化培养过程 D．制备的TREM2单克隆抗体特异性强，能精准杀死免疫逃逸的肿瘤细胞 47．下图为我国科学家获得克隆猴“中中”和“华华”的具体过程。研究发现，重构胚中基因A的正常表达是克隆成功的关键；重构胚基因组中大量被甲基化的组蛋白H3会抑制核的全能性；组蛋白H3的乙酰化能使小鼠克隆成功率提高5倍以上。下列叙述正确的是（    ）    注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶；TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。 A．细胞a指的是培养到MⅡ期的卵母细胞，通过显微操作去掉的是完整细胞核 B．用灭活的仙台病毒短暂处理的目的是促进两细胞融合，也可用电融合法促融 C．Kdm4d可使H3去甲基化，TSA可使H3保持乙酰化，进而促进了基因A的正常表达 D．“中中”和“华华”的培育用到了体细胞核移植技术，培育过程属于有性生殖 48．研究人员利用含绿色荧光蛋白基因（GFP）的胚胎干细胞构建发荧光的嵌合体猴，下图为其操作流程和发育过程示意图。相关叙述错误的有（    ） A．胚胎干细胞会与桑葚胚的细胞发生融合形成四倍体嵌合体猴 B．嵌合囊胚中的滋养层细胞将来可发育为嵌合体猴的肝脏等组织 C．嵌合原肠胚移植前需要对受体猴进行同期发情处理 D．不发出绿色荧光的体细胞可能含GFP基因 49．2018年中科院动物研究所科学家利用基因修饰和编辑技术，将雌性印记基因被敲除的孤雌单倍体胚胎干细胞注射进入卵母细胞，最终创造出完全正常的“孤雌生殖”小鼠，实验过程如下图所示。下列相关叙述正确的是（　　）    A．本实验中，孤雌胚胎干细胞的功能相当于精子 B．在本实验中，使用的ES细胞可从雌性小鼠的早期胚胎中获取 C．③过程是胚胎移植，移植前不需要对乙鼠进行发情处理 D．孤雌小鼠的性染色体组成只能是XX 50．下图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程，其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因，GUS基因仅在真核细胞中表达，表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是（　　） A．构建重组质粒时需要的限制酶有PstⅠ、XhoⅠ和EcoRⅠ B．在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌 C．用农杆菌转化植物愈伤组织选择呈现蓝色的组织进行培养 D．为进一步改良品种，可将启动子替换为除草剂诱导型启动子 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！10 学科网（北京）股份有限公司 $$