内容正文:
练
第 3章 基因工程
一、 单项选择题
1.
科学家培育出一种转基因山羊, 其膀胱上
皮细胞可以合成人的血清白蛋白并分泌到
尿液中。 这种转基因山羊被称为 “膀胱生
物反应器”。 下列叙述正确的是 ( )
A.
可从人体成熟的红细胞中获取血清白
蛋白基因
B.
应选用膀胱上皮细胞作为目的基因的
受体细胞
C.
人的血清白蛋白基因只存在于转基因
山羊的膀胱上皮细胞中
D.
转基因山羊将人的血清白蛋白分泌到
尿液中有利于该蛋白的收集
2.
下列关于基因工程中所用物质与其发挥的
作用不能对应的是 ( )
A.
限制酶——识别
DNA
分子特定核苷酸
序列并断开磷酸二酯键
B.
载体——携带目的基因导入受体细胞
C.
标记基因——鉴别筛选目的基因是否
导入受体细胞
D.
钙离子——增大植物细胞的通透性
3.
实验室常用
PCR
技术对
DNA
进行体外扩
增, 下列相关叙述错误的是 ( )
A.
需要在
PCR
仪中加入含
Mg
2+
缓冲溶液
B.
需要已知目的基因的部分碱基序列
C.
需要加热至
95 ℃
使
DNA
变性
D.
一对引物间的碱基序列应互补配对
4.
下列各项叙述, 正确的是 ( )
A.
可以根据某毒蛋白中的氨基酸序列先
推测
mRNA
中的核苷酸序列进而推测
出毒蛋白基因的核苷酸序列
B.
载体质粒通常采用抗生素合成基因作
为筛选标记基因
C.
转基因作物被动物食用后, 目的基因
会转入动物体细胞中
D.
自然界中天然存在的噬菌体自行感染
细菌后, 其
DNA
整合到细菌
DNA
上
属于基因工程
5.
下列关于生物学中常见的几种酶的叙述,
正确的是 ( )
A. DNA
连接酶将目的基因与载体通过形
成氢键黏合在一起
B.
用限制酶从质粒上切下一个目的基因
需消耗
4
个水分子
C. Taq
酶是
PCR
仪扩增
DNA
分子时常用
的一种耐高温的
DNA
连接酶
D.
在解离根尖分生区细胞时加入纤维素
酶, 有利于提高解离的效果
6.
下列不属于基因工程成果的是 ( )
A.
乳腺生物反应器生产药用蛋白
B.
培育抗除草剂的作物新品种
C.
利用微生物生产重组人干扰素
D.
用高产青霉菌生产青霉素
7.
关于
PCR
反应体系中所加物质作用的描
述, 不正确的是 ( )
A.
耐高温的
DNA
聚合酶用于催化
DNA
子链的合成
B.
引物使
Taq
酶能从引物的
3′
端延伸
DNA
链
C.
目标
DNA
母链用作合成
DNA
复制的
第 3 章 章末测试
53
练
高中生物选择性必修 3 (人教版)
模板
D.
解旋酶用于打开
DNA
双链
8.
下图是几种不同限制酶切割
DNA
分子后
形成的部分片段。 下列的叙述, 正确的是
( )
A.
限制酶和
DNA
连接酶作用的部位都是
磷酸二酯键
B. ①~④DNA
片段是由
4
种限制酶切割后
产生的
C. ①
和
④
两个片段在
DNA
聚合酶的作用
下形成的重组
DNA
分子
D. ②
片段是在酶切位点为
G A A T T C
C T T A A G
↓
↑
的
限制酶作用下形成的
9.
基因工程的正确操作步骤是 ( )
①
构建基因表达载体
②
将目的基因导入
受体细胞
③
检测目的基因的表达是否符
合特定性状要求
④
获取目的基因
A. ④①②③ B. ②④①③
C. ③④①② D. ④③②①
10.
下图表示
PCR
的过程, 下列相关叙述错
误的是 ( )
A.
耐高温的
DNA
聚合酶在
B
过程起作用
B.
引物
a
和引物
b
的长度不宜太短
C. PCR
遵循
DNA
半保留复制原则
D. A
过程
DNA
分子中的氢键断裂
11.
下列有关以洋葱为实验材料进行 “
DNA
的粗提取与鉴定实验” 的叙述, 正确的
是 ( )
A.
洋葱研磨液需要用滤纸过滤, 以保证
提取的
DNA
量
B.
滤液中加入冷酒精后, 用玻璃棒搅拌
会使
DNA
的提取量增加
C.
本实验不能用鸡的红细胞替代洋葱为
实验材料
D.
用二苯胺试剂鉴定
DNA
时, 需沸水
浴加热冷却后再观察颜色变化
12.
下列关于基因工程操作工具的说法, 正
确的是 ( )
A.
质粒只分布于原核细胞中, 限制酶也
都来自原核生物
B.
可以用同种限制酶或者同尾酶处理目
的基因和质粒
C. T4 DNA
连接酶只能连接互补的双链
DNA
黏性末端
D.
细菌内含有的限制酶能对自身的
DNA
进行剪切
二、 非选择题
13.
回答下列有关基因工程的问题:
(
1
) 目的基因主要是指
。
(
2
) 获取目的基因时用不同类型的限制
酶切割
DNA
分子后, 可能产生
末端, 也可能产生 末
端。 限制酶可作用于
DNA
分子的
键。
(
3
) 在短时间内获取大量目的基因, 常
用的技术是 。 目的基因获
取后, 需要进行 , 此步骤
是基因工程的核心。
③
…
TG
…
AC
②
…
G
…
CTTAA
①
…
CTGCA
…
G
④
…
G
…
CTGCA
DNA
A
℃
B
℃
C
℃
DNA
b
a
54
练
第 3章 基因工程
14.
艾滋病病毒 (
HIV
) 属于逆转录病毒 ,
是艾滋病的病原体。 回答下列问题:
(
1
) 用基因工程方法制备
HIV
的某蛋白
(目的蛋白) 时, 可先提取
HIV
中
的 , 以其作为模板, 在逆
转录酶的作用下合成 , 获
取该目的蛋白的基因, 然后构建基
因表达载体, 最后导入受体细胞。
(
2
) 从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,
该蛋白作为抗原注入机体后, 刺激
机体产生的可与此蛋白结合的相应
分泌蛋白是 , 该分泌蛋白
可用于检测受试者血清中的
HIV
,
检测的原理是 。
(
3
)
HIV
营 生活, 主要侵入并破
坏人体的 细胞, 降低患者
免疫系统的防卫功能。
(
4
) 目前常用逆转录酶抑制剂治疗艾滋
病, 其治疗机理是
。
15.
乙肝病毒相关的实验室检测技术, 对乙
肝病毒的诊断与防控尤为重要。 乙肝病
毒的检测最常见方法的是荧光定量
RT-
PCR
(逆转录聚合酶链式反应 ),
RT-
PCR
的具体过程如图。 回答下列问题:
(
1
) 过程
Ⅰ
和
Ⅱ
都需要加入缓冲液、 原
料、 酶和引物等, 其中过程
Ⅰ
加入
的酶是 。
(
2
)
RT-PCR
过程通过对 的控
制影响酶的活性和
DNA
分子结构,
从而使得整个反应过程有序地进行。
(
3
) 过程
Ⅱ
拟对单链
cDNA
进行
n
次循
环的扩增, 理论上需要 个
引物
B
。
(
4
) 乙肝病毒的检测方法还可采用病毒
抗原检测、 病毒抗体检测, 这些检
测方法的原理是
。 检测到乙肝病毒感染者抗体
滞后于病毒核酸和抗原的理由是
, 因此病毒抗
体检测对传染性极高的乙肝病毒疑
似患者早期确诊意义不大。
Ⅱ
Ⅰ
55
高中生物选择性必修 3 (人教版)
然, 属于中心法则内容的是
①②
,
B
正确; 根据蛋白质
的设计思路可知, 图中
①
代表转录,
②
代表翻译,
④
代
表分子设计,
⑤
代表
DNA
合成,
C
正确; 蛋白质工程
的目的是对蛋白质的结构进行分子设计, 通过基因合成
或修饰实现,
D
错误。
8. A
【解析】 结合分析可知, 为了提高该酶的热稳
定性, 可以采用蛋白质工程技术通过改造控制该酶合成
的基因, 来替换此酶中的少数氨基酸, 以改善其功能,
A
符合题意。
提升练习
1. ABD
【解析】
S
蛋白的抗体能与
S
蛋白
RBD
特
异性结合, 而根据题干可知:
LCB1
可与
S
蛋白
RBD
紧
密结合, 说明
LCB1
可能与
S
蛋白的抗体在结构上类
似 ,
A
正确 ; 由于
LCB1
可与
S
蛋白
RBD
紧密结合 ,
故
LCB1
可依据
S
蛋白的
RBD
结构进行设计,
B
正确;
由题干信息分析可知, 新冠病毒是通过其表面的
S
蛋白
的
RBD
与人体细胞表面的
ACE2
受体相互作用; 而人
工合成的
LCB1
可识别并紧密结合
S
蛋白的
RBD
, 阻止
S
蛋白的
RBD
与
ACE2
受体结合, 由此说明
LCB1
可能
与
ACE2
受体的某些区域结构类似,
C
错误; 可用蛋白
质工程进行
LCB1
的设计和生产, 而蛋白质工程是建立
在基因工程的基础之上的, 因此生产
LCB1
用到了基因
工程的操作技术,
D
正确。
2. BC
【解析】 人体中的浆细胞不能识别抗原,
A
错
误; 注射疫苗后, 人体产生特异性免疫反应, 并产生相
应记忆细胞, 保持对抗原的记忆,
B
正确; 基因的表达
产物是蛋白质, 其他生物的蛋白质可成为人体的抗原,
C
正确; 基因疫苗的本质是
DNA
或
RNA
, 不是蛋白质,
D
错误。
3. ACD
【解析】 图中
①
表示从预期的蛋白质功能出
发, 设计预期的蛋白质结构, 这目前是蛋白质工程难度
最大的环节,
A
正确;
④
是转录过程,
⑤
是翻译过程,
这两个过程的原料依次是核糖核苷酸和氨基酸 ,
B
错
误; 若使
③
设计的基因能表达和发挥作用, 必须在基因
的两端添加调控序列 , 如启动子和终止子 ,
C
正确 ;
通过蛋白质工程可以获得自然界不存在的蛋白质 ,
D
正确。
4. BCD
【解析】 蛋白质工程能通过基因修饰或基因
合成, 定向对现有蛋白质分子的结构进行改造, 使之更
加符合人类需要,
A
正确; 蛋白质工程的实质是通过改
变基因的结构达到改变蛋白质功能的目的,
B
错误; 当
前限制蛋白质工程发展的关键因素是对蛋白质的高级结
构了解不够,
C
错误; 蛋白质工程技术中的操作对象是
控制蛋白质合成的基因,
D
错误。
5.
(
1
)
①
预期蛋白质的功能
②
预期的蛋白质结构
③
应有的氨基酸序列
④
相应的脱氧核苷酸序列 (基
因) 或合成新基因
(
2
) 自然界已存在 人类生产和生活 基因修饰
基因合成 改造
(
3
) 高级
【解析】 (
1
) 由蛋白质工程的基本途径可知图中的
①
为预期蛋白质的功能;
②
为设计预期的蛋白质结构;
③
为推测应有的氨基酸序列;
④
为找到相应的脱氧核苷
酸序列 (基因) 或合成新基因。
(
2
) 基因工程和蛋白质工程相比较, 基因工程将一
种生物已有的基因转移到另一种生物中, 在原则上只能
生产自然界中存在的蛋白质, 且不一定符合人类生产生
活需要。 而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其
与生物功能的关系作为基础, 通过基因的修饰或基因合
成, 对现有蛋白质进行改造, 或制造一种新的蛋白质,
以满足人类的生产和生活需要。 蛋白质工程实质上也是
对基因进行操作, 因而蛋白质工程又被称为 “第二代基
因工程”。
(
3
) 蛋白质工程实施的难度很大, 原因是蛋白质具
有十分复杂的高级结构, 而且蛋白质的功能也具有多
样性。
第 3章 章末测试
1. D
【解析】 本题考查生物反应器。 生物反应器是
利用生物体所具有的生物功能, 在体外或体内通过生化
反应或生物自身的代谢获得目标产物的装置系统、 细
胞、 组织器官等。 科学家利用转基因山羊, 生产血清蛋
白, 既可以大量生产, 又方便了蛋白的提取。 人体成熟
的红细胞细胞核退化消失, 细胞中无
DNA
, 无基因,
A
错误; 由于膀胱上皮细胞没有全能性, 应选用受精卵作
为目的基因的受体细胞, 以培育得到转基因羊 ,
B
错
误; 由于体细胞都是有丝分裂而来, 遗传物质没有改
变, 因此人体所有体细胞均含有血清白蛋白基因 (红细
36
参考答案与解析
胞在成熟前也有),
C
错误; 转基因山羊将人的血清白
蛋白分泌到尿液中, 只要收集尿液即可收集该蛋白,
D
正确。
2. D
【解析】 本题考查基因工程的基本工具。 限制
酶能识别
DNA
分子特定核苷酸序列, 并且使每一条链
中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,
A
正
确; 载体是基因的运输工具, 作用是携带目的基因导入
受体细胞中, 使之稳定存在并表达,
B
正确; 存在于运
载体上的标记基因, 作用是鉴别筛选目的基因是否导入
受体细胞 ,
C
正确 ; 钙离子不能增大植物细胞的通透
性, 用
CaCl
2
处理细菌的目的是增加细菌细胞壁的通透
性, 有利于目的基因的导入,
D
错误。
3. D
【解析 】
PCR
技术是生物体外复制特定
DNA
的核酸合成技术。
DNA
复制为原理, 模板
DNA
、 四种
脱氧核苷酸、 一对引物、 热稳定
DNA
聚合酶 (
Taq
酶)
为基本条件。
PCR
仪中需要含
Mg
2+
缓冲溶液,
A
正确;
需要知道目的基因前后的序列用以设计引物,
B
正确;
95 ℃
时
DNA
的氢键断开, 两条链解开螺旋 ,
C
正确 ;
两引物分别与
DNA
的两条互补单链结合, 是子链延伸
的起点, 其引物间碱基序列不能互补配对, 否则会形成
引物二聚体, 不能有效扩增目的基因,
D
错误。
4. A
【解析】 本题考查基因工程技术操作步骤。 可
以根据某毒蛋白中的氨基酸序列推断
mRNA
中的核糖
核苷酸序列, 进而推测出毒蛋白基因的核苷酸序列, 但
由于密码子的简并性, 这个核苷酸序列并不唯一,
A
正
确; 运载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基
因, 以便筛选含有目的基因的受体细胞,
B
错误; 动物
取食转基因作物后, 要经过消化吸收才进入身体, 目的
基因不可能直接进入动物体细胞中,
C
错误; 基因工程
是按照人们的意愿, 对生物进行的定向改造, 而自然界
中天然存在的噬菌体自行感染细菌后, 其
DNA
整合到
细菌
DNA
上不符合基因工程的概念,
D
错误。
5. B
【解析】 本题考查不同酶的作用。
DNA
连接酶
是将目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间黏合形
成磷酸二酯键, 碱基之间的氢键自动形成,
A
错误; 用
限制酶从质粒上切下一个目的基因需打开
2
个切口, 破
坏
4
个磷酸二酯键, 消耗
4
个水分子,
B
正确;
Taq
酶
是
PCR
仪扩增
DNA
分子时常用的一种耐高温
DNA
聚
合酶,
C
错误; 在解离根尖分生区细胞时加入盐酸使植
物细胞相互分散开,
D
错误。
6. D
【解析】 乳腺生物反应器生产药用蛋白属于动
物基因工程成果,
A
不符合题意; 培育抗除草剂的作物
新品种属于植物基因工程成果,
B
不符合题意; 利用微
生物生产重组人干扰素属于基因工程成果,
C
不符合题
意; 用高产青霉菌生产青霉素属于诱变育种, 不属于基
因工程成果,
D
符合题意。
7. D
【解析 】 本题考查
PCR
技术 (聚合酶链式反
应)。 通过
PCR
技术扩增目的基因时, 需要用耐高温的
DNA
聚合酶催化单个脱氧核苷酸聚合形成
DNA
长链,
A
正确; 在复制时, 引物与
DNA
母链通过碱基配对结
合后,
DNA
聚合酶从引物的
3′
端开始延伸
DNA
链, 因
此
DNA
合成方向总是从子链的
5′
端向
3′
端延伸,
B
正
确;
PCR
技术的原理是
DNA
复制,
DNA
复制时两条链
均作为复制的模板 ,
C
正确 ;
PCR
扩增中双链
DNA
解开不需要解旋酶 , 高温条件下氢键可自动解开 ,
D
错误。
8. A
【解析】 分析题图: 图示为几种不同限制性核
酸内切酶切割
DNA
分子后形成的部分片段, 其中
①④
是同一种限制酶切割形成的, 具有相同的黏性末端;
②
经过限制酶切割后形成的是黏性末端;
③
经过限制酶切
割后形成的是平末端。 限制酶和
DNA
连接酶作用的部
位都是磷酸二酯键, 其中限制酶能将磷酸二酯键切断,
而
DNA
连接酶能将磷酸二酯键连接起来,
A
正确; 图
中只有
①④
是同一种限制酶切割形成的 , 因此
①~④
DNA
片段是由
3
种限制酶切割后产生的,
B
错误; 由于
①④
具有相同的黏性末端, 所以能用
DNA
连接酶连接
起来, 形成重组
DNA
分子,
C
错误;
②
片段是在酶切
位点为
G A A T T C
C T T A A G
的限制酶作用下形成的,
D
错误。
9. A
【解析】 本题考查基因工程技术的基本步骤 。
基因工程的基本操作步骤主要包括四步: 目的基因的获
取, 即
④
获取目的基因; 基因表达载体的构建, 即
①
构
建基因表达载体; 将目的基因导入受体细胞, 即
②
; 目
的基因的检测与表达, 即
③
检测目的基因的表达是否符
合特定性状要求, 故
A
符合题意。
10. A
【解析】 反应体系中需加入耐高温的
DNA
聚
合酶, 该酶的作用是催化合成
DNA
子链, 在
C
过程中
37
高中生物选择性必修 3 (人教版)
起作用,
A
错误; 引物是一小段能与
DNA
母链的一段
碱基序列互补配对的短单链核酸, 用于
PCR
的引物长
度通常为
20~30
个核苷酸 ,
B
正确 ; 根据图示可知 ,
PCR
扩增遵循
DNA
半保留复制原则,
C
正确;
A
过程
为
DNA
变性过程, 该过程通过高温破坏
DNA
分子中的
氢键, 双链
DNA
解聚为单链,
D
正确。
11. D
【解析】 洋葱研磨液用两层纱布过滤, 以保证
提取的
DNA
量,
A
错误;
DNA
在冷酒精中的溶解度很
低 , 蛋白质在冷酒精中的溶解度较高 , 故可以利用
DNA
不溶于冷酒精的原理, 提纯
DNA
, 但提取量不变,
B
错误 ; 鸡是鸟类 , 红细胞含
DNA
, 可以作为提取
DNA
的实验材料,
C
错误; 在沸水浴条件下,
DNA
遇
二苯胺会被染成蓝色, 用二苯胺试剂鉴定
DNA
时, 需
沸水浴加热冷却后再观察颜色变化,
D
正确。
12. B
【解析】 质粒主要分布于原核生物中, 在真核
生物酵母菌细胞内也有分布, 限制酶主要来源于原核生
物,
A
错误; 构建基因表达载体时, 常用相同的限制酶
(或者是同尾酶) 处理目的基因和质粒, 这样才能产生
相同的黏性末端, 便于二者的连接,
B
正确;
T4 DNA
连接酶既可以连接双链
DNA
互补黏性末端, 也可以用
于连接平末端 ,
C
错误; 细菌内的限制酶能限制异源
DNA
的侵入并使之失活, 即能将外源
DNA
切断, 从而
保护自身的遗传特性,
D
错误。
13.
(
1
) 编码蛋白质的结构基因, 也可能是一些具
有调控作用的因子
(
2
) 黏性 平 磷酸二酯
(
3
)
PCR
扩增技术 目的基因表达载体的构建
【解析】 (
1
) 目的基因主要是指编码蛋白质的结构
基因, 也可能是一些具有调控作用的因子。
(
2
) 限制酶能够识别双链
DNA
分子的某种特定核
苷酸序列, 并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之
间的磷酸二酯键断裂, 形成黏性末端和平末端两种, 若
要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,
则应选择能使二者产生相同黏性末端的限制酶。
(
3
) 在短时间内获取大量目的基因, 常用的技术是
PCR
扩增。 用该技术获得目的基因后, 为了保证目的基
因在受体细胞中正常表达, 需要进行构建目的基因表达
载体, 这是基因工程的核心步骤。
14.
(
1
)
RNA cDNA
(或
DNA
)
(
2
) 抗体 抗原抗体特异性结合 (或抗原—抗体
杂交)
(
3
) 寄生 辅助性
T
(
4
) 逆转录抑制剂抑制了逆转录酶的活性 , 抑制
HIV
的逆转录过程, 进而抑制了
HIV
的增殖
【解析】 艾滋病是因为感染人类免疫缺陷病毒,
HIV
主要感染和破坏了患者的辅助性
T
细胞, 降低患者免疫
系统的防卫功能。 艾滋病的传播途径有性传播、 血液传
播和母婴传播等。
(
1
)
HIV
的遗传物质是
RNA
, 因此用基因工程方法
制备
HIV
的某蛋白 (目的蛋白) 时, 可先提取
HIV
中
的
RNA
, 以其作为模板 , 在逆转录酶的作用下合成
cDNA
(或
DNA
), 获取该目的蛋白的基因, 然后构建
基因表达载体, 最后导入受体细胞中。
(
2
) 将抗原注入机体后, 会刺激机体产生可与该抗
原结合的相应抗体, 抗体属于分泌蛋白之一。 用抗体检
测受试者血清中的
HIV
的原理是抗原抗体特异性结合。
(
3
) 病毒必须寄生在活细胞中 , 才能进行生命活
动, 故
HIV
营寄生生活;
HIV
主要感染和破坏了患者的
辅助性
T
细胞, 降低了患者免疫系统的防卫功能。
(
4
) 目前常用逆转录酶抑制剂治疗艾滋病, 其治疗
机理是逆转录抑制剂抑制了逆转录酶的活性, 抑制
HIV
的逆转录过程, 进而抑制了
HIV
的增殖。
15.
(
1
) 逆 (反) 转录酶
(
2
) 温度 (或温度、
pH
)
(
3
)
2n-1
(
4
) 抗原和抗体发生特异性结合 病毒进入人体
后, 刺激人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时间
【解析】 分析题图: 过程
Ⅰ
是由
mRNA
形成
cDNA
的过程, 表示逆转录; 过程
Ⅱ
先使
mRNA-cDNA
杂合
双链解开, 再以单链的
DNA
合成双链的
DNA
, 最后利
用
PCR
技术进行
DNA
复制 (扩增)。
PCR
技术的原理
是模拟生物体内
DNA
分子复制的过程, 利用
DNA
分子
热变形原理, 通过控制温度控制
DNA
分子的解聚和结
合;
DNA
分子体内复制过程中
DNA
的解旋是在解旋酶
的作用下实现的;
PCR
扩增
DNA
片段过程经过
n
次扩
增, 形成的
DNA
分子数是
2n
个。
(
1
) 过程
Ⅰ
是由
mRNA
形成
cDNA
的过程 , 表示
逆转录过程, 需要加入逆 (反) 转录酶。
38
参考答案与解析
(
2
)
RT-PCR
过程通过对温度 (或温度、
pH
) 的控
制影响酶的活性和
DNA
分子结构 (高温解旋、 降温恢
复双螺旋结构), 从而使得整个反应过程有序地进行。
(
3
) 据图分析, 过程
Ⅱ
拟对单链
cDNA
进行
n
次循
环的扩增, 形成的
DNA
分子数是
2n-1
个, 每个
DNA
分子带一个引物
B
, 根据
DNA
半保留复制特点, 因此
该过程理论上至少需要
2n-1
个引物
B
。
(
4
) 乙肝病毒的检测方法还可采用病毒抗原—抗体
检测, 其原理是抗原和抗体发生特异性结合; 病毒进入
人体后, 刺激人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时
间, 故检测到乙肝病毒感染者抗体滞后于病毒核酸和抗
原, 因此病毒抗体检测对传染性极高的乙肝病毒疑似患
者早期确诊意义不大。
感知高考 3
1. A
【解析】 洋葱鳞片叶内表皮的原生质层具有选
择透过性, 可代替半透膜探究质膜的透性,
A
正确; 洋
葱匀浆中加入新配制的斐林试剂, 需要水浴加热才可能
出现砖红色沉淀, 若出现砖红色, 则可说明洋葱匀浆中
含有还原糖 ,
B
错误 ; 制作根尖有丝分裂装片时 , 解
离、 按压盖玻片的目的都是为了获得单层细胞, 即这些
操作均能更好地将细胞分散开,
C
错误; 粗提取的
DNA
溶于
2 mol/L NaCl
溶液中, 加入二苯胺试剂后经过水浴
加热可显蓝色,
D
错误。
2.
(
1
) 蛋白质 (
2
)
③
(
3
)
②③
(
4
) 标记基因
(
5
) 筛选导入目的基因的大肠杆菌
5.7
(
6
) 逆转录
【解析】 (
1
) 根据蛋白质的功能改变基因的结构,
最终获得耐高温的
β-
淀粉酶, 这属于蛋白质工程。
(
2
)
PCR
的原理是
DNA
双链复制, 利用的酶是耐
热的
DNA
聚合酶, 合成子链时是以
DNA
为模板。
(
3
) 根据
β-
淀粉酶的编码序列, 替换的碱基在编
码序列中, 则利用的引物应该把编码序列全部扩增在
内, 则所用的引物是
②③
。
(
4
) 作为基因工程载体的质粒应该包含复制原点、
限制酶的切割位点 、 标记基因、 启动子和终止子 , 根
据图示的表达载体可知应还要包括目的基因和标记
基因。
(
5
) 目的基因通过表达载体导入大肠杆菌中, 大肠
杆菌菌落的质粒
DNA
, 经琼脂糖凝胶电泳确定
DNA
片
段长度, 这一操作的目的是筛选出导入目的基因的大肠
杆菌。 正确连接的基因表达载体只有一个
EcoRⅠ
酶切
位点, 则切割后的长度为
4.2+1.5=5.7
(
kb
)。
(
6
) 转录是以
DNA
为模板合成
RNA
的过程, 通过
PCR
在分子水平上确定目的基因是否转录 , 则需要以
RNA
为模板逆转录出
DNA
作为
PCR
反应的模板。
3.
(
1
)
RNA
聚合酶 限制酶切割位点、 标记基因、
复制原点等 (答出
2
点即可)
(
2
)
F
2
和
R
1
或
F
1
与
R
2
a
链
(
3
)
J-V5
融合蛋白 不是
【解析】 (
1
) 基因表达载体的构建启动子是为了启
动下游基因的 “表达”, 表达首先需要转录, 因此
RNA
聚合酶识别和结合的部位才是转录的起始。 作为运载体
必须具备的条件:
①
要具有限制酶的切割位点;
②
要有
标记基因 (如抗性基因), 以便于重组后重组子的筛选;
③
能在宿主细胞中稳定存在并复制;
④
是安全的, 对受
体细胞无害, 而且要易从供体细胞分离出来, 图中甲有
启动子和终止子等, 因此质粒还需具备的结构有限制酶
的切割位点、 标记基因、 复制原点等。
(
2
) 据图甲可知, 引物
F
2
与
R
1
或
F
1
与
R
2
结合部位
包含
J
基因的碱基序列, 因此推测为了确定
J
基因连接
到质粒中且插入方向正确, 进行
PCR
检测时, 若仅用
一对引物, 应选择图甲中的引物
F
2
和
R
1
或
F
1
与
R
2
。
b
是模板链, 而根据图上启动子和终止子的位置可知转录
方向是图上从左向右, 对应的模板链方向应该是
3′-5′
,
非模板链 (也就是
a
链) 是
5′-3′
; 考虑到
DNA
复制的
方向是子链的
5′-3′
, 引物基础上延伸的方向肯定是
5′-
3′
, 所以引物结合的单链其方向是
3′-5′
; 图中
F
1
是前
引物, 在左侧, 所以其配对的单链是
3′-5′
的
b
链, 故
其序列应该与
a
链相应部分的序列相同。
(
3
) 据图乙可知, 用抗
J
蛋白抗体和抗
V5
抗体分
别检测, 均出现条带
1
, 说明条带
1
是
J-V5
融合蛋白。
抗
J
蛋白抗体检测出现条带
2
, 抗
V5
抗体检测不出现条
带
2
, 说明条带
2
所检出的蛋白不是由重组质粒上的
J
基因表达的。
4.
(
1
) 黄化叶
(
2
) 用限制酶
B
处理
3
39