第3章 基因工程 章末测试-【新课程能力培养】2024-2025学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程同步练习(人教版2019)

2025-03-10
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练 第 3章 基因工程 一、 单项选择题 1. 科学家培育出一种转基因山羊, 其膀胱上 皮细胞可以合成人的血清白蛋白并分泌到 尿液中。 这种转基因山羊被称为 “膀胱生 物反应器”。 下列叙述正确的是 ( ) A. 可从人体成熟的红细胞中获取血清白 蛋白基因 B. 应选用膀胱上皮细胞作为目的基因的 受体细胞 C. 人的血清白蛋白基因只存在于转基因 山羊的膀胱上皮细胞中 D. 转基因山羊将人的血清白蛋白分泌到 尿液中有利于该蛋白的收集 2. 下列关于基因工程中所用物质与其发挥的 作用不能对应的是 ( ) A. 限制酶——识别 DNA 分子特定核苷酸 序列并断开磷酸二酯键 B. 载体——携带目的基因导入受体细胞 C. 标记基因——鉴别筛选目的基因是否 导入受体细胞 D. 钙离子——增大植物细胞的通透性 3. 实验室常用 PCR 技术对 DNA 进行体外扩 增, 下列相关叙述错误的是 ( ) A. 需要在 PCR 仪中加入含 Mg 2+ 缓冲溶液 B. 需要已知目的基因的部分碱基序列 C. 需要加热至 95 ℃ 使 DNA 变性 D. 一对引物间的碱基序列应互补配对 4. 下列各项叙述, 正确的是 ( ) A. 可以根据某毒蛋白中的氨基酸序列先 推测 mRNA 中的核苷酸序列进而推测 出毒蛋白基因的核苷酸序列 B. 载体质粒通常采用抗生素合成基因作 为筛选标记基因 C. 转基因作物被动物食用后, 目的基因 会转入动物体细胞中 D. 自然界中天然存在的噬菌体自行感染 细菌后, 其 DNA 整合到细菌 DNA 上 属于基因工程 5. 下列关于生物学中常见的几种酶的叙述, 正确的是 ( ) A. DNA 连接酶将目的基因与载体通过形 成氢键黏合在一起 B. 用限制酶从质粒上切下一个目的基因 需消耗 4 个水分子 C. Taq 酶是 PCR 仪扩增 DNA 分子时常用 的一种耐高温的 DNA 连接酶 D. 在解离根尖分生区细胞时加入纤维素 酶, 有利于提高解离的效果 6. 下列不属于基因工程成果的是 ( ) A. 乳腺生物反应器生产药用蛋白 B. 培育抗除草剂的作物新品种 C. 利用微生物生产重组人干扰素 D. 用高产青霉菌生产青霉素 7. 关于 PCR 反应体系中所加物质作用的描 述, 不正确的是 ( ) A. 耐高温的 DNA 聚合酶用于催化 DNA 子链的合成 B. 引物使 Taq 酶能从引物的 3′ 端延伸 DNA 链 C. 目标 DNA 母链用作合成 DNA 复制的 第 3 章 章末测试 53 练 高中生物选择性必修 3 (人教版) 模板 D. 解旋酶用于打开 DNA 双链 8. 下图是几种不同限制酶切割 DNA 分子后 形成的部分片段。 下列的叙述, 正确的是 ( ) A. 限制酶和 DNA 连接酶作用的部位都是 磷酸二酯键 B. ①~④DNA 片段是由 4 种限制酶切割后 产生的 C. ① 和 ④ 两个片段在 DNA 聚合酶的作用 下形成的重组 DNA 分子 D. ② 片段是在酶切位点为 G A A T T C C T T A A G ↓ ↑ 的 限制酶作用下形成的 9. 基因工程的正确操作步骤是 ( ) ① 构建基因表达载体 ② 将目的基因导入 受体细胞 ③ 检测目的基因的表达是否符 合特定性状要求 ④ 获取目的基因 A. ④①②③ B. ②④①③ C. ③④①② D. ④③②① 10. 下图表示 PCR 的过程, 下列相关叙述错 误的是 ( ) A. 耐高温的 DNA 聚合酶在 B 过程起作用 B. 引物 a 和引物 b 的长度不宜太短 C. PCR 遵循 DNA 半保留复制原则 D. A 过程 DNA 分子中的氢键断裂 11. 下列有关以洋葱为实验材料进行 “ DNA 的粗提取与鉴定实验” 的叙述, 正确的 是 ( ) A. 洋葱研磨液需要用滤纸过滤, 以保证 提取的 DNA 量 B. 滤液中加入冷酒精后, 用玻璃棒搅拌 会使 DNA 的提取量增加 C. 本实验不能用鸡的红细胞替代洋葱为 实验材料 D. 用二苯胺试剂鉴定 DNA 时, 需沸水 浴加热冷却后再观察颜色变化 12. 下列关于基因工程操作工具的说法, 正 确的是 ( ) A. 质粒只分布于原核细胞中, 限制酶也 都来自原核生物 B. 可以用同种限制酶或者同尾酶处理目 的基因和质粒 C. T4 DNA 连接酶只能连接互补的双链 DNA 黏性末端 D. 细菌内含有的限制酶能对自身的 DNA 进行剪切 二、 非选择题 13. 回答下列有关基因工程的问题: ( 1 ) 目的基因主要是指 。 ( 2 ) 获取目的基因时用不同类型的限制 酶切割 DNA 分子后, 可能产生 末端, 也可能产生 末 端。 限制酶可作用于 DNA 分子的 键。 ( 3 ) 在短时间内获取大量目的基因, 常 用的技术是 。 目的基因获 取后, 需要进行 , 此步骤 是基因工程的核心。 ③ … TG … AC ② … G … CTTAA ① … CTGCA … G ④ … G … CTGCA DNA A ℃ B ℃ C ℃ DNA b a 54 练 第 3章 基因工程 14. 艾滋病病毒 ( HIV ) 属于逆转录病毒 , 是艾滋病的病原体。 回答下列问题: ( 1 ) 用基因工程方法制备 HIV 的某蛋白 (目的蛋白) 时, 可先提取 HIV 中 的 , 以其作为模板, 在逆 转录酶的作用下合成 , 获 取该目的蛋白的基因, 然后构建基 因表达载体, 最后导入受体细胞。 ( 2 ) 从受体细胞中分离纯化出目的蛋白, 该蛋白作为抗原注入机体后, 刺激 机体产生的可与此蛋白结合的相应 分泌蛋白是 , 该分泌蛋白 可用于检测受试者血清中的 HIV , 检测的原理是 。 ( 3 ) HIV 营 生活, 主要侵入并破 坏人体的 细胞, 降低患者 免疫系统的防卫功能。 ( 4 ) 目前常用逆转录酶抑制剂治疗艾滋 病, 其治疗机理是 。 15. 乙肝病毒相关的实验室检测技术, 对乙 肝病毒的诊断与防控尤为重要。 乙肝病 毒的检测最常见方法的是荧光定量 RT- PCR (逆转录聚合酶链式反应 ), RT- PCR 的具体过程如图。 回答下列问题: ( 1 ) 过程 Ⅰ 和 Ⅱ 都需要加入缓冲液、 原 料、 酶和引物等, 其中过程 Ⅰ 加入 的酶是 。 ( 2 ) RT-PCR 过程通过对 的控 制影响酶的活性和 DNA 分子结构, 从而使得整个反应过程有序地进行。 ( 3 ) 过程 Ⅱ 拟对单链 cDNA 进行 n 次循 环的扩增, 理论上需要 个 引物 B 。 ( 4 ) 乙肝病毒的检测方法还可采用病毒 抗原检测、 病毒抗体检测, 这些检 测方法的原理是 。 检测到乙肝病毒感染者抗体 滞后于病毒核酸和抗原的理由是 , 因此病毒抗 体检测对传染性极高的乙肝病毒疑 似患者早期确诊意义不大。 Ⅱ Ⅰ 55 高中生物选择性必修 3 (人教版) 然, 属于中心法则内容的是 ①② , B 正确; 根据蛋白质 的设计思路可知, 图中 ① 代表转录, ② 代表翻译, ④ 代 表分子设计, ⑤ 代表 DNA 合成, C 正确; 蛋白质工程 的目的是对蛋白质的结构进行分子设计, 通过基因合成 或修饰实现, D 错误。 8. A 【解析】 结合分析可知, 为了提高该酶的热稳 定性, 可以采用蛋白质工程技术通过改造控制该酶合成 的基因, 来替换此酶中的少数氨基酸, 以改善其功能, A 符合题意。 提升练习 1. ABD 【解析】 S 蛋白的抗体能与 S 蛋白 RBD 特 异性结合, 而根据题干可知: LCB1 可与 S 蛋白 RBD 紧 密结合, 说明 LCB1 可能与 S 蛋白的抗体在结构上类 似 , A 正确 ; 由于 LCB1 可与 S 蛋白 RBD 紧密结合 , 故 LCB1 可依据 S 蛋白的 RBD 结构进行设计, B 正确; 由题干信息分析可知, 新冠病毒是通过其表面的 S 蛋白 的 RBD 与人体细胞表面的 ACE2 受体相互作用; 而人 工合成的 LCB1 可识别并紧密结合 S 蛋白的 RBD , 阻止 S 蛋白的 RBD 与 ACE2 受体结合, 由此说明 LCB1 可能 与 ACE2 受体的某些区域结构类似, C 错误; 可用蛋白 质工程进行 LCB1 的设计和生产, 而蛋白质工程是建立 在基因工程的基础之上的, 因此生产 LCB1 用到了基因 工程的操作技术, D 正确。 2. BC 【解析】 人体中的浆细胞不能识别抗原, A 错 误; 注射疫苗后, 人体产生特异性免疫反应, 并产生相 应记忆细胞, 保持对抗原的记忆, B 正确; 基因的表达 产物是蛋白质, 其他生物的蛋白质可成为人体的抗原, C 正确; 基因疫苗的本质是 DNA 或 RNA , 不是蛋白质, D 错误。 3. ACD 【解析】 图中 ① 表示从预期的蛋白质功能出 发, 设计预期的蛋白质结构, 这目前是蛋白质工程难度 最大的环节, A 正确; ④ 是转录过程, ⑤ 是翻译过程, 这两个过程的原料依次是核糖核苷酸和氨基酸 , B 错 误; 若使 ③ 设计的基因能表达和发挥作用, 必须在基因 的两端添加调控序列 , 如启动子和终止子 , C 正确 ; 通过蛋白质工程可以获得自然界不存在的蛋白质 , D 正确。 4. BCD 【解析】 蛋白质工程能通过基因修饰或基因 合成, 定向对现有蛋白质分子的结构进行改造, 使之更 加符合人类需要, A 正确; 蛋白质工程的实质是通过改 变基因的结构达到改变蛋白质功能的目的, B 错误; 当 前限制蛋白质工程发展的关键因素是对蛋白质的高级结 构了解不够, C 错误; 蛋白质工程技术中的操作对象是 控制蛋白质合成的基因, D 错误。 5. ( 1 ) ① 预期蛋白质的功能 ② 预期的蛋白质结构 ③ 应有的氨基酸序列 ④ 相应的脱氧核苷酸序列 (基 因) 或合成新基因 ( 2 ) 自然界已存在 人类生产和生活 基因修饰 基因合成 改造 ( 3 ) 高级 【解析】 ( 1 ) 由蛋白质工程的基本途径可知图中的 ① 为预期蛋白质的功能; ② 为设计预期的蛋白质结构; ③ 为推测应有的氨基酸序列; ④ 为找到相应的脱氧核苷 酸序列 (基因) 或合成新基因。 ( 2 ) 基因工程和蛋白质工程相比较, 基因工程将一 种生物已有的基因转移到另一种生物中, 在原则上只能 生产自然界中存在的蛋白质, 且不一定符合人类生产生 活需要。 而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其 与生物功能的关系作为基础, 通过基因的修饰或基因合 成, 对现有蛋白质进行改造, 或制造一种新的蛋白质, 以满足人类的生产和生活需要。 蛋白质工程实质上也是 对基因进行操作, 因而蛋白质工程又被称为 “第二代基 因工程”。 ( 3 ) 蛋白质工程实施的难度很大, 原因是蛋白质具 有十分复杂的高级结构, 而且蛋白质的功能也具有多 样性。 第 3章 章末测试 1. D 【解析】 本题考查生物反应器。 生物反应器是 利用生物体所具有的生物功能, 在体外或体内通过生化 反应或生物自身的代谢获得目标产物的装置系统、 细 胞、 组织器官等。 科学家利用转基因山羊, 生产血清蛋 白, 既可以大量生产, 又方便了蛋白的提取。 人体成熟 的红细胞细胞核退化消失, 细胞中无 DNA , 无基因, A 错误; 由于膀胱上皮细胞没有全能性, 应选用受精卵作 为目的基因的受体细胞, 以培育得到转基因羊 , B 错 误; 由于体细胞都是有丝分裂而来, 遗传物质没有改 变, 因此人体所有体细胞均含有血清白蛋白基因 (红细 36 参考答案与解析 胞在成熟前也有), C 错误; 转基因山羊将人的血清白 蛋白分泌到尿液中, 只要收集尿液即可收集该蛋白, D 正确。 2. D 【解析】 本题考查基因工程的基本工具。 限制 酶能识别 DNA 分子特定核苷酸序列, 并且使每一条链 中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂, A 正 确; 载体是基因的运输工具, 作用是携带目的基因导入 受体细胞中, 使之稳定存在并表达, B 正确; 存在于运 载体上的标记基因, 作用是鉴别筛选目的基因是否导入 受体细胞 , C 正确 ; 钙离子不能增大植物细胞的通透 性, 用 CaCl 2 处理细菌的目的是增加细菌细胞壁的通透 性, 有利于目的基因的导入, D 错误。 3. D 【解析 】 PCR 技术是生物体外复制特定 DNA 的核酸合成技术。 DNA 复制为原理, 模板 DNA 、 四种 脱氧核苷酸、 一对引物、 热稳定 DNA 聚合酶 ( Taq 酶) 为基本条件。 PCR 仪中需要含 Mg 2+ 缓冲溶液, A 正确; 需要知道目的基因前后的序列用以设计引物, B 正确; 95 ℃ 时 DNA 的氢键断开, 两条链解开螺旋 , C 正确 ; 两引物分别与 DNA 的两条互补单链结合, 是子链延伸 的起点, 其引物间碱基序列不能互补配对, 否则会形成 引物二聚体, 不能有效扩增目的基因, D 错误。 4. A 【解析】 本题考查基因工程技术操作步骤。 可 以根据某毒蛋白中的氨基酸序列推断 mRNA 中的核糖 核苷酸序列, 进而推测出毒蛋白基因的核苷酸序列, 但 由于密码子的简并性, 这个核苷酸序列并不唯一, A 正 确; 运载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基 因, 以便筛选含有目的基因的受体细胞, B 错误; 动物 取食转基因作物后, 要经过消化吸收才进入身体, 目的 基因不可能直接进入动物体细胞中, C 错误; 基因工程 是按照人们的意愿, 对生物进行的定向改造, 而自然界 中天然存在的噬菌体自行感染细菌后, 其 DNA 整合到 细菌 DNA 上不符合基因工程的概念, D 错误。 5. B 【解析】 本题考查不同酶的作用。 DNA 连接酶 是将目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间黏合形 成磷酸二酯键, 碱基之间的氢键自动形成, A 错误; 用 限制酶从质粒上切下一个目的基因需打开 2 个切口, 破 坏 4 个磷酸二酯键, 消耗 4 个水分子, B 正确; Taq 酶 是 PCR 仪扩增 DNA 分子时常用的一种耐高温 DNA 聚 合酶, C 错误; 在解离根尖分生区细胞时加入盐酸使植 物细胞相互分散开, D 错误。 6. D 【解析】 乳腺生物反应器生产药用蛋白属于动 物基因工程成果, A 不符合题意; 培育抗除草剂的作物 新品种属于植物基因工程成果, B 不符合题意; 利用微 生物生产重组人干扰素属于基因工程成果, C 不符合题 意; 用高产青霉菌生产青霉素属于诱变育种, 不属于基 因工程成果, D 符合题意。 7. D 【解析 】 本题考查 PCR 技术 (聚合酶链式反 应)。 通过 PCR 技术扩增目的基因时, 需要用耐高温的 DNA 聚合酶催化单个脱氧核苷酸聚合形成 DNA 长链, A 正确; 在复制时, 引物与 DNA 母链通过碱基配对结 合后, DNA 聚合酶从引物的 3′ 端开始延伸 DNA 链, 因 此 DNA 合成方向总是从子链的 5′ 端向 3′ 端延伸, B 正 确; PCR 技术的原理是 DNA 复制, DNA 复制时两条链 均作为复制的模板 , C 正确 ; PCR 扩增中双链 DNA 解开不需要解旋酶 , 高温条件下氢键可自动解开 , D 错误。 8. A 【解析】 分析题图: 图示为几种不同限制性核 酸内切酶切割 DNA 分子后形成的部分片段, 其中 ①④ 是同一种限制酶切割形成的, 具有相同的黏性末端; ② 经过限制酶切割后形成的是黏性末端; ③ 经过限制酶切 割后形成的是平末端。 限制酶和 DNA 连接酶作用的部 位都是磷酸二酯键, 其中限制酶能将磷酸二酯键切断, 而 DNA 连接酶能将磷酸二酯键连接起来, A 正确; 图 中只有 ①④ 是同一种限制酶切割形成的 , 因此 ①~④ DNA 片段是由 3 种限制酶切割后产生的, B 错误; 由于 ①④ 具有相同的黏性末端, 所以能用 DNA 连接酶连接 起来, 形成重组 DNA 分子, C 错误; ② 片段是在酶切 位点为 G A A T T C C T T A A G 的限制酶作用下形成的, D 错误。 9. A 【解析】 本题考查基因工程技术的基本步骤 。 基因工程的基本操作步骤主要包括四步: 目的基因的获 取, 即 ④ 获取目的基因; 基因表达载体的构建, 即 ① 构 建基因表达载体; 将目的基因导入受体细胞, 即 ② ; 目 的基因的检测与表达, 即 ③ 检测目的基因的表达是否符 合特定性状要求, 故 A 符合题意。 10. A 【解析】 反应体系中需加入耐高温的 DNA 聚 合酶, 该酶的作用是催化合成 DNA 子链, 在 C 过程中 37 高中生物选择性必修 3 (人教版) 起作用, A 错误; 引物是一小段能与 DNA 母链的一段 碱基序列互补配对的短单链核酸, 用于 PCR 的引物长 度通常为 20~30 个核苷酸 , B 正确 ; 根据图示可知 , PCR 扩增遵循 DNA 半保留复制原则, C 正确; A 过程 为 DNA 变性过程, 该过程通过高温破坏 DNA 分子中的 氢键, 双链 DNA 解聚为单链, D 正确。 11. D 【解析】 洋葱研磨液用两层纱布过滤, 以保证 提取的 DNA 量, A 错误; DNA 在冷酒精中的溶解度很 低 , 蛋白质在冷酒精中的溶解度较高 , 故可以利用 DNA 不溶于冷酒精的原理, 提纯 DNA , 但提取量不变, B 错误 ; 鸡是鸟类 , 红细胞含 DNA , 可以作为提取 DNA 的实验材料, C 错误; 在沸水浴条件下, DNA 遇 二苯胺会被染成蓝色, 用二苯胺试剂鉴定 DNA 时, 需 沸水浴加热冷却后再观察颜色变化, D 正确。 12. B 【解析】 质粒主要分布于原核生物中, 在真核 生物酵母菌细胞内也有分布, 限制酶主要来源于原核生 物, A 错误; 构建基因表达载体时, 常用相同的限制酶 (或者是同尾酶) 处理目的基因和质粒, 这样才能产生 相同的黏性末端, 便于二者的连接, B 正确; T4 DNA 连接酶既可以连接双链 DNA 互补黏性末端, 也可以用 于连接平末端 , C 错误; 细菌内的限制酶能限制异源 DNA 的侵入并使之失活, 即能将外源 DNA 切断, 从而 保护自身的遗传特性, D 错误。 13. ( 1 ) 编码蛋白质的结构基因, 也可能是一些具 有调控作用的因子 ( 2 ) 黏性 平 磷酸二酯 ( 3 ) PCR 扩增技术 目的基因表达载体的构建 【解析】 ( 1 ) 目的基因主要是指编码蛋白质的结构 基因, 也可能是一些具有调控作用的因子。 ( 2 ) 限制酶能够识别双链 DNA 分子的某种特定核 苷酸序列, 并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之 间的磷酸二酯键断裂, 形成黏性末端和平末端两种, 若 要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接, 则应选择能使二者产生相同黏性末端的限制酶。 ( 3 ) 在短时间内获取大量目的基因, 常用的技术是 PCR 扩增。 用该技术获得目的基因后, 为了保证目的基 因在受体细胞中正常表达, 需要进行构建目的基因表达 载体, 这是基因工程的核心步骤。 14. ( 1 ) RNA cDNA (或 DNA ) ( 2 ) 抗体 抗原抗体特异性结合 (或抗原—抗体 杂交) ( 3 ) 寄生 辅助性 T ( 4 ) 逆转录抑制剂抑制了逆转录酶的活性 , 抑制 HIV 的逆转录过程, 进而抑制了 HIV 的增殖 【解析】 艾滋病是因为感染人类免疫缺陷病毒, HIV 主要感染和破坏了患者的辅助性 T 细胞, 降低患者免疫 系统的防卫功能。 艾滋病的传播途径有性传播、 血液传 播和母婴传播等。 ( 1 ) HIV 的遗传物质是 RNA , 因此用基因工程方法 制备 HIV 的某蛋白 (目的蛋白) 时, 可先提取 HIV 中 的 RNA , 以其作为模板 , 在逆转录酶的作用下合成 cDNA (或 DNA ), 获取该目的蛋白的基因, 然后构建 基因表达载体, 最后导入受体细胞中。 ( 2 ) 将抗原注入机体后, 会刺激机体产生可与该抗 原结合的相应抗体, 抗体属于分泌蛋白之一。 用抗体检 测受试者血清中的 HIV 的原理是抗原抗体特异性结合。 ( 3 ) 病毒必须寄生在活细胞中 , 才能进行生命活 动, 故 HIV 营寄生生活; HIV 主要感染和破坏了患者的 辅助性 T 细胞, 降低了患者免疫系统的防卫功能。 ( 4 ) 目前常用逆转录酶抑制剂治疗艾滋病, 其治疗 机理是逆转录抑制剂抑制了逆转录酶的活性, 抑制 HIV 的逆转录过程, 进而抑制了 HIV 的增殖。 15. ( 1 ) 逆 (反) 转录酶 ( 2 ) 温度 (或温度、 pH ) ( 3 ) 2n-1 ( 4 ) 抗原和抗体发生特异性结合 病毒进入人体 后, 刺激人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时间 【解析】 分析题图: 过程 Ⅰ 是由 mRNA 形成 cDNA 的过程, 表示逆转录; 过程 Ⅱ 先使 mRNA-cDNA 杂合 双链解开, 再以单链的 DNA 合成双链的 DNA , 最后利 用 PCR 技术进行 DNA 复制 (扩增)。 PCR 技术的原理 是模拟生物体内 DNA 分子复制的过程, 利用 DNA 分子 热变形原理, 通过控制温度控制 DNA 分子的解聚和结 合; DNA 分子体内复制过程中 DNA 的解旋是在解旋酶 的作用下实现的; PCR 扩增 DNA 片段过程经过 n 次扩 增, 形成的 DNA 分子数是 2n 个。 ( 1 ) 过程 Ⅰ 是由 mRNA 形成 cDNA 的过程 , 表示 逆转录过程, 需要加入逆 (反) 转录酶。 38 参考答案与解析 ( 2 ) RT-PCR 过程通过对温度 (或温度、 pH ) 的控 制影响酶的活性和 DNA 分子结构 (高温解旋、 降温恢 复双螺旋结构), 从而使得整个反应过程有序地进行。 ( 3 ) 据图分析, 过程 Ⅱ 拟对单链 cDNA 进行 n 次循 环的扩增, 形成的 DNA 分子数是 2n-1 个, 每个 DNA 分子带一个引物 B , 根据 DNA 半保留复制特点, 因此 该过程理论上至少需要 2n-1 个引物 B 。 ( 4 ) 乙肝病毒的检测方法还可采用病毒抗原—抗体 检测, 其原理是抗原和抗体发生特异性结合; 病毒进入 人体后, 刺激人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时 间, 故检测到乙肝病毒感染者抗体滞后于病毒核酸和抗 原, 因此病毒抗体检测对传染性极高的乙肝病毒疑似患 者早期确诊意义不大。 感知高考 3 1. A 【解析】 洋葱鳞片叶内表皮的原生质层具有选 择透过性, 可代替半透膜探究质膜的透性, A 正确; 洋 葱匀浆中加入新配制的斐林试剂, 需要水浴加热才可能 出现砖红色沉淀, 若出现砖红色, 则可说明洋葱匀浆中 含有还原糖 , B 错误 ; 制作根尖有丝分裂装片时 , 解 离、 按压盖玻片的目的都是为了获得单层细胞, 即这些 操作均能更好地将细胞分散开, C 错误; 粗提取的 DNA 溶于 2 mol/L NaCl 溶液中, 加入二苯胺试剂后经过水浴 加热可显蓝色, D 错误。 2. ( 1 ) 蛋白质 ( 2 ) ③ ( 3 ) ②③ ( 4 ) 标记基因 ( 5 ) 筛选导入目的基因的大肠杆菌 5.7 ( 6 ) 逆转录 【解析】 ( 1 ) 根据蛋白质的功能改变基因的结构, 最终获得耐高温的 β- 淀粉酶, 这属于蛋白质工程。 ( 2 ) PCR 的原理是 DNA 双链复制, 利用的酶是耐 热的 DNA 聚合酶, 合成子链时是以 DNA 为模板。 ( 3 ) 根据 β- 淀粉酶的编码序列, 替换的碱基在编 码序列中, 则利用的引物应该把编码序列全部扩增在 内, 则所用的引物是 ②③ 。 ( 4 ) 作为基因工程载体的质粒应该包含复制原点、 限制酶的切割位点 、 标记基因、 启动子和终止子 , 根 据图示的表达载体可知应还要包括目的基因和标记 基因。 ( 5 ) 目的基因通过表达载体导入大肠杆菌中, 大肠 杆菌菌落的质粒 DNA , 经琼脂糖凝胶电泳确定 DNA 片 段长度, 这一操作的目的是筛选出导入目的基因的大肠 杆菌。 正确连接的基因表达载体只有一个 EcoRⅠ 酶切 位点, 则切割后的长度为 4.2+1.5=5.7 ( kb )。 ( 6 ) 转录是以 DNA 为模板合成 RNA 的过程, 通过 PCR 在分子水平上确定目的基因是否转录 , 则需要以 RNA 为模板逆转录出 DNA 作为 PCR 反应的模板。 3. ( 1 ) RNA 聚合酶 限制酶切割位点、 标记基因、 复制原点等 (答出 2 点即可) ( 2 ) F 2 和 R 1 或 F 1 与 R 2 a 链 ( 3 ) J-V5 融合蛋白 不是 【解析】 ( 1 ) 基因表达载体的构建启动子是为了启 动下游基因的 “表达”, 表达首先需要转录, 因此 RNA 聚合酶识别和结合的部位才是转录的起始。 作为运载体 必须具备的条件: ① 要具有限制酶的切割位点; ② 要有 标记基因 (如抗性基因), 以便于重组后重组子的筛选; ③ 能在宿主细胞中稳定存在并复制; ④ 是安全的, 对受 体细胞无害, 而且要易从供体细胞分离出来, 图中甲有 启动子和终止子等, 因此质粒还需具备的结构有限制酶 的切割位点、 标记基因、 复制原点等。 ( 2 ) 据图甲可知, 引物 F 2 与 R 1 或 F 1 与 R 2 结合部位 包含 J 基因的碱基序列, 因此推测为了确定 J 基因连接 到质粒中且插入方向正确, 进行 PCR 检测时, 若仅用 一对引物, 应选择图甲中的引物 F 2 和 R 1 或 F 1 与 R 2 。 b 是模板链, 而根据图上启动子和终止子的位置可知转录 方向是图上从左向右, 对应的模板链方向应该是 3′-5′ , 非模板链 (也就是 a 链) 是 5′-3′ ; 考虑到 DNA 复制的 方向是子链的 5′-3′ , 引物基础上延伸的方向肯定是 5′- 3′ , 所以引物结合的单链其方向是 3′-5′ ; 图中 F 1 是前 引物, 在左侧, 所以其配对的单链是 3′-5′ 的 b 链, 故 其序列应该与 a 链相应部分的序列相同。 ( 3 ) 据图乙可知, 用抗 J 蛋白抗体和抗 V5 抗体分 别检测, 均出现条带 1 , 说明条带 1 是 J-V5 融合蛋白。 抗 J 蛋白抗体检测出现条带 2 , 抗 V5 抗体检测不出现条 带 2 , 说明条带 2 所检出的蛋白不是由重组质粒上的 J 基因表达的。 4. ( 1 ) 黄化叶 ( 2 ) 用限制酶 B 处理 3 39

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