内容正文:
第一节
DNA是主要的遗传物质
第三章基因的本质
为什么后代与亲代如此相似呢?
科学家在研究有丝分裂、减数分裂和受精作用时发现染色体发挥着重要的作用,为什么?
染色体的结构
染色体是由什么物质组成?
蛋白质
DNA与蛋白质究竟谁是遗传物质?
DNA和蛋白质
口说无凭,实验见分晓
对遗传物质的早期推测
早期大多数科学家认为生物的遗传物质是什么?理由是什么?
蛋白质是生物体的遗传物质。
一、肺炎双球菌的转化实验
(一)格里菲思的肺炎双球菌体内转化实验
1、实验材料:
2、实验过程及现象分析:
3、推论:
加热杀死的S型细菌中含有“转化因子”,
能将R型活菌转化为S型活菌。
小鼠、肺炎双球菌
R型活菌 + S型死菌
S型活菌
转化
转化因子是什么物质呢?你认为应该怎样设计实验,确定转化因子?
几个问题:
①加热杀死的S型细菌中可能有哪些物质?
②这些物质是同时进行实验还是分别实验?
③什么样的结果能够说明它是转化因子?
[设计实验]
(二)艾弗里的肺炎双球菌体外转化实验
选用肺炎双球菌
为了弄清转化因子到底是什么?
将S型细菌中的多糖、 蛋白质、脂类和DNA等分离提取出来,分别与R 型细菌进行混合培养。
1、实验材料:
2、实验目的:
3、实验操作:
(二)艾弗里的的肺炎球菌体外转化实验:
4、实验过程:
[思考与讨论]
在实验中设置DNA酶处理DNA目的是什么?
说明DNA的分解产物不是转化因子,反证DNA是转化因子
R
R
R
R
R
R
S
R
S
S型活细菌
分别与R型活细菌混合培养
多糖 脂类 蛋白质 RNA DNA DNA+DNA酶
DNA是遗传物质。蛋白质不是遗传物质
6、结论:
5、实验现象:
加入DNA,R型菌才转化为S型菌,且与纯度有关;
加入其它物质,不能使R型细菌发生转化。
这种性状的转化可以遗传。
7、这个实验最关键的实验设计思路:
设法将S型活菌中各种物质分开,单独地、直接
研究它们各自的作用。
为什么人们对艾弗里的实验结论还表示怀疑?
艾弗里提取的DNA中还含有少量的蛋白质(至少含0.02%)。
为此,谁又设计了什么实验来证明艾弗里的结论?
背景资料:
可是,艾弗里的实验不但没有使科学界接受
反而引起了科学界许多人怀疑。
终于在1952年,由美国科学家赫尔希和蔡斯找到了一种理想的实验材料——T2噬菌体,通过噬菌体侵染细菌的实验从而证实了… …
科学界的怀疑、否定,不但没有能动摇艾弗里等人继续探索的坚定信心,反而加强了他们的信念,为进一步明确、探索而奋斗。
在1949年艾弗里及同事将DNA中蛋白质的污染降到0.02%,但仍未能改变人们的观点。
是否有更好的实验材料,可以不用经过人工
提纯DNA,就能单独地去观察DNA或蛋白质的作
用呢?
噬菌体
细 菌
噬菌体侵染细菌图
噬菌体侵染细菌实验
1952, 赫尔希和蔡斯
二、噬菌体侵染细菌的实验
(一)实验材料:
T2噬菌体 、大肠杆菌
(二)实验方法:
放射性同位素标记法
35S:标记蛋白质、32P:标记DNA
(三)噬菌体侵染细菌的过程——
1、吸附
2、注入DNA
3、复制DNA及蛋白质外壳的合成
4、组装成新噬菌体
5、细菌裂解,新噬菌体释放
复制模板:
原料:
噬菌体的DNA
细菌的脱氧核苷酸和氨基酸
合成装置:
细菌的核糖体
(四)实验步骤
1、分别培养含35S标记的亲代噬菌体和32P标记的亲代噬菌体
2、将亲代噬菌体分别与大肠杆菌在适宜混合培养一段时间
3、搅拌
4、离心
5、观察放射性出现的位置和强度
用蛋白质外壳被35S标记的噬菌体去感染未被标记的大肠杆菌
实验结果:上清液放射性很高,沉淀物放
射性很低。
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通过搅拌可使被感染的大肠杆菌与噬菌体分开
用DNA被32P标记的噬菌体去感染未被标记的大肠杆菌
实验结果:上清液放射性很低,沉淀物放
射性很高。
亲代噬菌体 宿主细胞内 子代噬菌体
35S标记蛋白质
32P标记DNA
放射性的分布情况说明:
DNA是真正的遗传物质。
结果分析
实验结论
外壳蛋白无35S标记
DNA中有32P标记
外壳蛋白无35S标记
DNA中有32P标记
蛋白质外壳未进入大肠杆菌中,DNA进入到细胞中。
噬菌体侵染细菌实验
深入探讨:
虽然艾弗里与赫尔希等人的实验方法不同,
但是实验设计思路却有共同之处。思考一下,
他们最关键的实验设计思路是什么?
设法把DNA与蛋白质分开,单独地、直接地去观察DNA或蛋白质的作用。
假设某种病毒(例如烟草花叶病毒)中不含DNA,只含RNA与蛋白质,那么什么才是遗传物质呢?你可以设计怎样的实验来证实?
烟草花叶病毒(TMV)
病毒RNA
病毒蛋白质
正常的烟草叶
感染病毒的烟草叶
烟草花叶病毒
三、烟草花叶病毒的感染和重建实验
感染实验:
烟草花叶病毒的重建实验:
RNA是遗传物质
实验结论:
TMV A
TMV B
降解
降解
蛋白A
蛋白B
RNA A
RNA B
重组
病毒
重组
病毒
感染
烟草
感染
烟草
A型病毒
B型病毒
烟草花叶病毒的重建实验
结论:新病毒类型取决于所提供的RNA。
总结:细胞生物,以DNA为遗传物质
非细胞生物(病毒),以DNA或
RNA为遗传物质
总之:核酸是一切生物的遗传物质
DNA是主要的遗传物质
小 结
DNA是主要的遗传物质
核心问题:谁在充当生物的遗传物质角色?
说明DNA是遗传物质的实验证据:
▲肺炎双球菌的转化实验
▲噬菌体侵染细菌的实验
说明DNA不是唯一遗传物质的实验证据:
▲ 烟草花叶病毒的感染和重建实验
重点内容:
DNA与染色体
的关系
技术与科学
的关系
2、噬菌体侵染细菌的实验中,标记蛋白质和
DNA应该分别用放射性元素( )
A、C与H B、P与N C、S与P D、O与N
C
某科学家用噬菌体侵染大肠杆菌,并用同位素32P和35S 作了如下标记:
子代噬菌体的外壳上将会含有上述___ 元素,原因是 。
子代噬菌体的DNA分子中将会含有上述的____元素,原因是 。
31P
32P
35S
R型菌
S型菌
菌落 荚膜 毒性
S型细菌 表面
R型细菌 表面
光滑
有
有
粗糙
无
无
比较两种肺炎双球菌的不同:
(一)格里菲斯的肺炎双球菌体内转化实验
1.将R型的活细菌注射到小鼠体内,小鼠不死亡。
2.将S型的活细菌注射到小鼠体内,小鼠患败血症死亡。
结论:
S型的活细菌对小鼠有毒,而R型的活细菌无毒。
实验设计
实验3说明:
加热杀死的S型细菌对小鼠无毒害作用。
实验4说明:小鼠体内R型活细菌在加热杀死的S型细菌的作用下可以转化为S型活细菌。
在加热杀死的S型细菌中,必然存在某种活性物质——转化因子,促使小鼠体内R型活细菌转化为S型活细菌。
第一组现象说明:
第三组现象说明:
第四组现象说明:
第二组现象说明:
R型细菌无毒性。
S型细菌有毒性。
加热杀死的S型细菌失去毒性。
1)无毒性的R型细菌在与被加热杀死的S型细菌混合后,变成为有毒性的S型活细菌;
转化
2)这种性状的转化是可以遗传。
实验现象的分析
S型
活菌
培养
第四组
[思考与讨论]
(1)小鼠体内分离出的S型活细菌
是怎样产生的?
(2)分离出的S型活细菌的后代也
是有毒性的S型细菌,说明什么?
1、结构:
T2噬菌体
2、增殖特点:
T2噬菌体侵染大肠杆菌后,在 的
作用下,利用 的物质
来合成 ,进行增殖。当噬菌体增殖到一定数量后,大肠杆菌裂解,释放出大量的噬菌体。
自身遗传物质
大肠杆菌体内
自身的组成成分
外壳:
内部:
蛋白质
DNA
受精卵
1
1’
2’
2
受精卵中的染色体有一半来自父方,一半来自母方。
遗传物质能指导子代噬菌体合成
如何证明T2噬菌体的遗传物质是蛋白质还是DNA?
(证明蛋白质/DNA谁能指导子代噬菌体合成)
如何观察蛋白质/DNA谁能指导子代噬菌体合成?
(放射性同位素标记)
蛋白质、DNA分别选择何种元素标记?选择的理由是什么?
35S:标记蛋白质、32P:标记DNA
蛋白质元素组成:
C、H、O、N、S等
DNA元素组成:
C、H、O、N、P等
怎样使噬菌体外壳带上35S标记?
怎样使噬菌体DNA带上32P标记?
要使噬菌体带有放射性标记,必须使噬菌体的生活环境中带有放射性,而噬菌体又是寄生生活(寄生在细菌体内),所以应先使细菌带有放射性,要使细菌带有放射性,必须使细菌的生活环境中带有射性,即将细菌分别放在带有35S和32P培养液中培养一段时间,使细菌分别带上35S和32P标记,再用噬菌体分别去感染这两种细菌,就能使噬菌体分别带上这两种放射性。
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