精品解析：江苏省如皋中学2024-2025学年高三上学期期初考试生物试题

江苏省如皋中学2024—2025学年度高三年级测试 生物试卷 一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 种子萌发形成幼苗离不开糖类等能源物质，也离不开水和无机盐。下列叙述正确的是（ ） A. 种子吸收的水与多糖等物质结合后，水仍具有溶解性 B. 种子萌发过程中糖类含量逐渐下降，有机物种类不变 C. 幼苗细胞中的无机盐可参与细胞构建，水不参与 D. 幼苗中的水可参与形成NADPH，也可参与形成NADH 【答案】D 【解析】 【分析】1、有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和［ H]],合成少量 ATP ；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和［ H ]，合成少量 ATP ；第三阶段是氧气和［ H ］反应生成水，合成大量 ATP 。 2、光合作用：①光反应场所在叶绿体类囊体薄膜，发生水的光解、 ATP 和 NADPH 的生成；②暗反应场所在叶绿体的基质，发生CO2的固定和C3的还原，消耗 ATP 和 NADPH 。 【详解】A、种子吸收的水与多糖等物质结合后，这部分水为结合水，失去了溶解性，A错误； B、种子萌发过程中糖类含量逐渐下降，有机物种类增加，B错误； C、水也参与细胞构成，如结合水是细胞的重要组成成分，C错误； D、幼苗中的水可参与光合作用形成NADPH，也可通过有氧呼吸第二阶段丙酮酸和水生成NADH，D正确。 故选D。 2. 植物液泡中部分离子与蔗糖的转运机制如图所示。白天光合作用合成的蔗糖可富集在液 泡中，夜间这些蔗糖运到胞质溶胶。下列叙述错误的是（ ） A. Na+、Ca2+进入液泡需要载体蛋白协助不需要消耗能量 B. Cl-、通过离子通道进入液泡不需要 ATP 直接供能 C. 液泡通过主动运输方式维持膜内外的 H+浓度梯度 D. 白天液泡富集蔗糖有利于光合作用的持续进行 【答案】A 【解析】 【分析】液泡内的细胞液中H+浓度大于细胞质基质，说明H+运出液泡是顺浓度梯度，因此方式是协助扩散；液泡膜上的载体蛋白能将H+转运出液泡的同时将细胞质基质中的Na+、Ca2+转运到液泡内，说明Na+、Ca2+进入液泡的直接驱动力是液泡膜两侧的H+电化学梯度，因此该过程Na+、Ca2+的进入液泡的方式为主动运输。 【详解】A、液泡膜上的载体蛋白能将H+转运出液泡的同时将细胞质基质中的Na+、Ca2+转运到液泡内，说明Na+、Ca2+进入液泡的直接驱动力是液泡膜两侧的H+电化学梯度，因此该过程Na+、Ca2+的进入液泡的方式为主动运输，A错误； B、通过离子通道运输为协助扩散，Cl-、 NO3- 通通过离子通道进入液泡属于协助扩散，不需要ATP直接供能，B正确； C、由图可知，细胞液的pH3-6，胞质溶胶的pH7.5，说明细胞液的H+浓度高于细胞溶胶，若要长期维持膜内外的H+浓度梯度，需通过主动运输将细胞溶胶中的H+运输到细胞液中，C正确； D、白天蔗糖进入液泡，使光合作用产物及时转移，减少光合作用产物蔗糖在细胞质基质中过度积累，有利于光合作用的持续进行，D正确。 故选A。 3. 肿瘤所处环境中的细胞毒性T细胞存在题图所示代谢过程。其中，PC酶和PDH酶控制着丙酮酸产生不同的代谢产物，进入有氧呼吸三羧酸循环。增加PC酶的活性会增加琥珀酸的释放，琥珀酸与受体结合可增强细胞毒性T细胞的杀伤能力，若环境中存在乳酸，PC酶的活性会被抑制。下列叙述正确的是（ ） A. 图中三羧酸循环的代谢反应直接需要氧 B. 图中草酰乙酸和乙酰辅酶A均产生于线粒体内膜 C. 肿瘤细胞无氧呼吸会增强细胞毒性T细胞的杀伤能力 D. 葡萄糖有氧呼吸的所有代谢反应中至少有5步会生成［H］ 【答案】D 【解析】 【分析】由题意可知，若环境中存在乳酸，PC酶的活性会被抑制，而增加PC酶的活性会增加琥珀酸的释放，琥珀酸与受体结合可增强细胞毒性T细胞的杀伤能力，肿瘤细胞无氧呼吸会增加细胞中乳酸含量，从而抑制PC酶活性，从而减弱细胞毒性T细胞的杀伤能力。 【详解】A、由图可知，图中三羧酸循环的代谢反应无直接需氧环节，A错误； B、草酰乙酸和乙酰辅酶A均产生于线粒体基质，B错误； C、由题意可知，若环境中存在乳酸，PC酶的活性会被抑制，而增加PC酶的活性会增加琥珀酸的释放，琥珀酸与受体结合可增强细胞毒性T细胞的杀伤能力，肿瘤细胞无氧呼吸会增加细胞中乳酸含量，从而抑制PC酶活性，减弱细胞毒性T细胞的杀伤能力，C错误； D、葡萄糖有氧呼吸的所有代谢反应中至少有5步会生成［H］，分别是有氧呼吸第一阶段及图中的4步，D正确。 故选D。 4. 下列有关细胞生命历程的叙述，正确的是（　　） A. 抑癌基因甲基化导致基因突变或降低基因表达 B. 脑部血液循环障碍导致局部神经细胞死亡属于细胞坏死 C. 肝脏细胞不能合成血红蛋白的原因是没有与血红蛋白合成有关的基因 D. 自由基学说认为自由基通过攻击磷脂直接导致核糖体损伤而使细胞衰老 【答案】B 【解析】 【分析】自由基学说：各种氧化反应产生自由基，辐射以及有害物质入侵也会产生自由基，这些自由基攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子，对生物膜损伤比较大，如当自由基攻击生物膜的组成成分磷脂分子时，产物同样是自由基；自由基还会攻击DNA，可能引起基因突变；攻击蛋白质，使蛋白质活性下降，导致细胞衰老。 【详解】A、抑癌基因甲基化不会导致基因碱基序列改变，不会导致基因突变，但会影响基因的表达，进而引起表型改变，A错误； B、细胞坏死是指在种种不利因素影响下，由细胞正常代谢活动受损或中断引起的细胞损伤和死亡，脑部血液循环障碍导致局部神经细胞死亡属于细胞坏死，B正确； C、肝脏细胞不能合成血红蛋白的原因是血红蛋白基因没有表达，C错误； D、自由基学说认为，自由基会攻击和破坏细胞内各种执行正常功能的生物分子，如磷脂、DNA、蛋白质等引起细胞衰老，核糖体无膜结构不含磷脂，D错误。 故选B。 5. 玉米叶片的横切结构及相关代谢过程与场所如图所示，从结构与功能统一的角度，分析下列说法错误的是（ ） A. 除叶肉细胞外，维管束鞘细胞中也含有叶绿体 B. 若抑制PEP羧化酶活性，光合作用会明显降低 C. 如果提供14CO2，14C首先出现在叶肉细胞的C3中 D. 玉米的叶片结构，体现对高温干旱环境的适应 【答案】C 【解析】 【分析】光合作用的过程及场所：光反应发生在类囊体薄膜中，主要包括水的光解和ATP的合成两个过程；暗反应发生在叶绿体基质中，主要包括CO2的固定和C3的还原两个过程。 【详解】A、图中维管束鞘细胞也含有叶绿体，可以进行暗反应，A正确； B、图中抑制PEP羧化酶活性，会抑制暗反应的进行，光合作用会明显降低，B正确； C、如果提供14CO2，14CO2首先和C3反应生成C4，14C首先出现在叶肉细胞的C4中，C错误； D、玉米叶片特殊的结构和功能，使其在气孔关闭的条件下仍能有效利用低浓度的CO2，既减少了蒸腾作用，又保证了光合作用的进行，所以它们对高温干旱环境有更好的适应，D正确。 故选C。 6. 若利用紫色洋葱的鳞片叶、管状叶、根尖进行以下实验：①绿叶中色素的提取和分离、②探究植物细胞的吸水和失水、③观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂、④检测生物组织中还原糖。下列说法正确的是（ ） A. 用管状叶进行实验①时，滤纸条上未出现色素带，说明管状叶中不含色素 B. 用鳞片叶进行实验②时，发生质壁分离时，水分子通过原生质层是单向的 C. 用根尖进行实验③时，显微镜下可观察到纺锤丝牵引染色体向细胞两极移动 D. 用鳞片叶进行实验④时，除去鳞片叶外表皮制备组织样液，便于现象观察 【答案】D 【解析】 【分析】1、观察植物细胞的失水和吸水实验，一般选择成熟的植物细胞，液泡本身有颜色的细胞进行观察。 2、色素提取的原理是：色素溶解于 有机溶剂。分离光合色素的原理是：不同色素在层析液中的溶解度不同，溶解度大的随层析液扩散速度快，反之则慢。 3、观察洋葱根尖有丝分裂实验流程为：解离→漂洗→染色→制片。 【详解】A、用管状叶进行实验①时，滤纸条上未出现色素带，可能是研磨不充分，色素未释放出来，也可能是滤液细线画得过粗，色素扩散后分离不开，A错误； B、用鳞片叶进行实验②时，细胞发生质壁分离时，水分子通过原生质层是双向的，只是进细胞的水分子少于出细胞的水分子，B错误； C、用根尖进行实验③时，细胞在染色时已经杀死，不能观察到染色体移动，C错误； D、用鳞片叶进行实验④时，鳞片叶外表皮细胞含有紫色大液泡，对实验有干扰，制备样液时需去除鳞片叶外表皮，便于观察实验结果，D正确。 故选D。 7. 一个基因型为AaXBY的精原细胞进行减数分裂，下列叙述不正确的是（　　） A. 减数分裂I中期、减数分裂Ⅱ后期，细胞中的染色体组数相同 B. 若产生的精子为AXB：aXB：AY：aY＝1：1：1：1，则可能发生了互换 C. 若产生的精子为AXB：aXB：aY＝1：1：2，则可能的原因是同源染色体未分离 D. 若细胞中无染色单体，基因组成为AAYY，则该细胞可能处于减数分裂Ⅱ后期 【答案】C 【解析】 【分析】减数分裂过程：（1）减数第一次分裂前的间期：染色体的复制。（2）减数第一次分裂：①前期：联会，同源染色体上的非姐妹染色单体互换；②中期：同源染色体成对的排列在赤道板上；③后期：同源染色体分离，非同源染色体自由组合；④末期：细胞质分裂。（3）减数第二次分裂过程：①前期：染色体散乱分布；②中期：染色体排列在赤道板上；③后期：着丝粒分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；④末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。 【详解】A、减数第一次分裂中期、减数第二次分裂后期，一个细胞中的染色体组数相同，都是2个染色体组，A正确； B、一个精原细胞减数分裂应该产生2种比例相等的精子，若产生的精子为AXB：aXB：AY：aY＝1：1：1：1，则可能发生了染色体互换，B正确； C、若产生的精子为AXB：aXB：aY＝1：1：2，则可能的原因是一个A发生基因突变成了a，C错误； D、若细胞基因组成为AAYY，则不含同源染色体，同时不含染色单体，则该细胞可能处于减数第二次分裂后期，D正确。 故选C 8. 下图1是某单基因遗传病的遗传系谱图，在人群中的患病率为1/8100，科研人员提取了四名女性的DNA，用PCR扩增了与此基因相关的片段，并对产物酶切后进行电泳（正常基因含有一个限制酶切位点，突变基因增加了一个酶切位点）。结果如图2，相关叙述正确的是（　　） A. 该病的遗传方式是伴X染色体隐性遗传 B. Ⅱ-1与Ⅱ-2婚配生一个患病男孩的概率是1/8 C. 该突变基因新增的酶切位点位于310bp中 D. 扩增Ⅱ-2与此基因相关的片段，酶切后电泳将产生2种条带 【答案】C 【解析】 【分析】分析图1，Ⅰ-1和Ⅰ-2表现正常，但生下了Ⅱ-2的患病女性，所以该病是常染色体隐性遗传病，用A/a表示控制该病的基因，所以，Ⅰ-1和Ⅰ-2基因型是Aa。从图2中可以看出，Ⅱ-3、Ⅱ-4和Ⅰ-2电泳图相同，所以基因型都是Aa，Ⅱ-5与他们不同，但表现正常，基因型是AA。 【详解】A、Ⅰ-1和Ⅰ-2表现正常，但生下了Ⅱ-2的患病女性，所以该病是常染色体隐性遗传病，A错误； B、该病在人群中的患病率为1/8100，则致病基因频率为1/90，正常基因频率为89/90，根据基因平衡定律，Ⅱ-1表现正常，基因型为Aa的概率=Aa/AA+Aa=(2×A基因频率×a基因频率)/(A基因频率×A基因频率+2×A基因频率×a基因频率)=(2×1/90×89/90)/（1/90×1/90+2×1/90×89/90）=2/91，其与Ⅱ-2Aa婚配生一个患病男孩的概率为2/91×1/4=1/182，B错误； C、结合图2可知，正常基因酶切后可形成长度为310bp和118bp的两种DNA片段，而基因突变酶切后可形成长度为217bp、93bp和118bp的三种DNA片段，这说明突变基因新增的酶切位点位于长度为310bp（217+93）的DNA片段中，C正确； D、基因突变酶切后可形成长度为217bp、93bp和118bp的三种DNA片段，Ⅱ-2基因型是aa，只含有突变基因，所以酶切后电泳将产生三种条带，D错误。 故选C。 9. 如图表示细胞内的两种生理过程，下列叙述错误的是（ ） A. 图2表示翻译，上每个密码子不能都结合相应的 B. 图1所示过程与图2所示过程中发生的碱基配对方式不完全相同 C. 图1所示过程中酶的移动方向与图2所示过程中核糖体的移动方向不同 D. 图1表示转录，该过程发生时模板与产物间有氢键的形成与断裂 【答案】C 【解析】 【分析】题图分析：图1表示细胞中遗传信息转录过程，转录从左侧起始。图2表示遗传信息翻译过程，且翻译从左侧起始。 【详解】A、图2表示翻译，mRNA上的终止密码子没有相应的tRNA结合，A正确； B、图1所示过程碱基互补关系是：A-U、G-C、T-A，图2过程的碱基互补关系是：A-U、G-C，故二者不完全相同，B正确； C、图1中RNA单链左侧脱离，右侧仍结合，说明从左侧起始转录；图2中tRNA从右侧进入，说明核糖体从左向右移动，所以转录和翻译都是从左侧开始，C错误； D、图1表示转录，转录过程中mRNA上的碱基与DNA模板链的碱基互补配对，有氢键形成；转录结束，RNA链脱离模板，有氢键的断裂，D正确。 故选C。 10. 关于证明蛋白质和核酸哪一种是遗传物质的系列实验，下列叙述正确的是（ ） A. 烟草花叶病毒实验中，以病毒颗粒的 RNA 和蛋白质互为对照进行侵染，结果发现 自变量 RNA 分子可使烟草出现花叶病斑性状 B. 肺炎链球菌体内转化实验中，加热致死的 S 型菌株的 DNA 分子在小鼠体内可使 R 型活菌的相对性状从无致病性转化为有致病性 C. 肺炎链球菌体外转化实验中，利用自变量控制的“加法原理”，将“S 型菌 DNA+DNA 酶”加入 R 型活菌的培养基中，结果证明 DNA 是转化因子 D. 噬菌体侵染实验中，用放射性同位素分别标记了噬菌体的蛋白质外壳和 DNA，发 现其 DNA 进入宿主细胞后，利用自身原料和酶完成自我复制 【答案】A 【解析】 【分析】肺炎链球菌转化实验包括格里菲思体内转化实验和艾弗里体外转化实验，其中格里菲思体内转化实验证明S型细菌中存在某种“转化因子”，能将R型细菌转化为S型细菌；艾弗里体外转化实验证明DNA是遗传物质。 【详解】A、在进行烟草花叶病毒感染实验中，将病毒颗粒的RNA和蛋白质分离开来分别侵染，两者之间互为对照，结果发现RNA分子可使烟草出现花叶病斑性状，而蛋白质不能使烟草出现花叶病斑性状，A正确； B、格里菲思的肺炎链球菌体内转化实验没有单独研究每种物质的作用，在艾弗里的肺炎链球菌体外转化实验中，S型菌株的DNA分子可使R型活菌的相对性状从无致病性转化为有致病性，B错误； C、在肺炎链球菌的体外转化实验中，利用自变量控制中的“减法原理”设置对照实验，通过观察只有某种物质存在时，R型菌的转化情况，最终证明了DNA是遗传物质，C错误； D、噬菌体为DNA病毒，其DNA进入宿主细胞后，利用宿主细胞的原料和酶完成自我复制，D错误。 故选A。 11. 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B. ②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 【答案】C 【解析】 【分析】由图可知，所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂。图中②筛选的是不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验。 【详解】A、平板划线法无需稀释，A错误； B、由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误； C、所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确； D、由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株使甲能够产生NH3，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 故选C。 12. 下列相关实验操作正确的是（ ） A. 配制PCR反应体系时，加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料 B. 利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果 C. 将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D. 将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落 【答案】B 【解析】 【分析】PCR的原理是DNA复制，DNA的单体是脱氧核糖核苷酸。琼脂糖凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合，利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果。 【详解】A、PCR的原理是DNA复制，DNA的单体是脱氧核糖核苷酸，配制PCR反应体系时，加入4种脱氧核糖核苷酸的等量混合液作为扩增原料，A错误； B、琼脂糖凝胶制备中加入的核酸染料能与DNA分子结合，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，B正确； C、将配制的酵母培养基高压灭菌并冷却到不烫手（50℃左右）后，在酒精灯火焰旁倒平板，C错误； D、将接种环烧红，待冷却后（避免菌种被烫死），蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落，D错误。 故选B。 13. 三白草和鱼腥草因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. ①过程可用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成 B. ②过程通常在略高渗溶液中采用灭活病毒诱导原生质体融合 C. ③过程融合的原生质体需先形成细胞壁再进行有丝分裂 D. ④过程配制培养基时需要添加植物生长调节剂和琼脂 【答案】C 【解析】 【分析】图示为三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③脱分化形成愈伤组织，④是植物细胞培养并提取代谢产物。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①三白草和鱼腥草体细胞杂交过程中要利用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁获得原生质体，盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液会杀死细胞，A错误； B、过程②通常在等渗或略高渗溶液中，不能用低渗溶液，否则，原生质体会吸水涨破；可以采用化学法（PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法）或物理法诱导原生质体融合，不能灭活病毒诱导，B错误； C、杂种原生质体再生出细胞壁是杂种细胞形成的标志，只有先形成杂种细胞，才能进行有丝分裂，C正确； D、植物细胞培养用的是液体培养基，能够使分散开的植物细胞充分与营养液混合，有利于细胞对营养物质的吸收和利用，D错误。 故选C。 14. 为了降低免疫排斥反应，研究者借助 CRISPR/Cas9 技术对移植的猪心脏进行了基因编辑。CRISPR/Cas9 系统主要由向导 RNA（sgRNA）和 Cas9 蛋白两部分组成，sgRNA 可引导 Cas9 蛋白到特定基因位点进行切割、其机制如图所示。下列说法错误的是（ ） A. Cas9 蛋白作用于磷酸二酯键 B. sgRNA 通过与目标 DNA 碱基互补配对引导 Cas9 蛋白到位 C. sgRNA 会因错误结合而出现 “脱靶”现象，一般 sgRNA 序列越短，脱靶率越低 D. 经过改造的转基因猪，可以利用核移植、胚胎分割得到更多的可移植器官供体 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程中的操作工具及其作用： ①“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶），能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 ②“分子缝合针”——DNA连接酶，E·coliDNA连接酶，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合黏性末端和平末端。 ③“分子运输车”——载体。移植的器官会被人的免疫系统视作抗原加以攻击，使用免疫抑制剂可以减轻免疫排斥反应。 【详解】A、由于DNA和RNA之间可进行碱基互补配对，因而sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键进而可以将目标基因剪切下来，A正确； B、由于DNA和RNA之间可进行碱基互补配对，因而sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，进而引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，B正确； C、sgRNA序列越短，DNA分子上与其互补的特定序列会越多，错误结合概率越高，C错误； D、经过改造的转基因猪，可以利用核移植，胚胎分割得到更多的可移植器官供体，D正确。 故选C。 二、多项选择题：本部分包括 4 题，每题 3 分，共计 l2 分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对的得 3 分，选对但不全的得 1 分，错选或不答的得 0 分。 15. 果蝇的肠吸收细胞中有一种储存Pi的全新细胞器—PXo小体（一种具多层膜的椭圆形结构）。PXo蛋白分布在PXo小体膜上，可将Pi转运进入PXo小体后，再将Pi转化为膜的主要成分磷脂进行储存。当食物中磷酸盐不足时，PXo小体中的膜成分显著减少，最终PXo小体被降解，释放出磷酸盐供细胞使用。下列分析正确的是（ ） A. PXo蛋白的合成起始于附着于内质网上的核糖体 B. 可用差速离心法将PXo小体与其他细胞器分离 C. PXo小体的膜结构上可能含有催化磷酸盐转化为磷脂的酶 D. 当食物中磷酸盐不足时，果蝇的肠吸收细胞中PXo小体的降解需要溶酶体的参与 【答案】BCD 【解析】 【分析】据题意可知，当食物中磷酸盐过多时，PXo蛋白分布在PXo小体膜上，可将Pi转运进入PXo小体后，再将Pi转化为膜的主要成分磷脂进行储存。当食物中的磷酸盐不足时，PXo小体中的膜成分显著减少，最终PXo 小体被降解并释放出磷酸盐供细胞使用。 【详解】A、据题意可知，PXo蛋白分布在PXo小体膜上，属于膜蛋白，蛋白的合成起始于游离的核糖体，A错误； B、差速离心主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离不同大小的细胞器，因此可用差速离心法将PXo 小体与其他细胞器分离，B正确; C、由题意知，PXo蛋白分布在PXo小体膜上，当食物中磷酸盐过多时，将Pi转运进入PXo小体后，再将Pi转化为膜的主要成分磷脂进行储存，因此PXo小体的膜结构上可能含有催化磷酸盐转化为磷脂的酶，C正确； D、溶酶体内含多种水解酶，能分解衰老、损伤的细胞器，吞噬并杀死侵入细胞的病毒或病菌，因此当食物中磷酸盐不足时果蝇肠吸收细胞中 PXo小体的降解可能需要溶酶体的参与，D正确。 故选BCD。 16. 同种的二倍体雄、雌动物减数分裂某时期的细胞分裂图像如甲、 乙所示。雄性动物的基因型为 AAXBY，雌性动物的基因型为 AaXBX。不考虑除图示之外的其他变异，下列分 析正确的是（ ） A. 与甲细胞同时产生的另一个细胞的基因型是 AXB B. 甲、 乙细胞①②染色体上出现 a 基因的原因相同 C. 若甲、 乙细胞继续分裂，一共可产生 3 种配子 D. 乙细胞除图示之外还可以产生其他的基因重组 【答案】CD 【解析】 【分析】分析图可知，甲细胞中无同源染色体，且着丝粒（着丝点）排列在赤道板上，处于减数第二次分裂中期；乙细胞中同源染色体联会，处于减数第一次分裂前期。 【详解】A、甲细胞中无同源染色体，且着丝粒（着丝点）排列在赤道板上，该细胞处于减数第二次分裂中期，又因为其含有Y染色体，表示雄性动物，名称是次级精母细胞，与甲细胞同时产生的另一个细胞的基因型是AAXBXB，A错误； B、雄性动物的基因型为AAXBY，甲细胞中存在A、a，故动物体产生①甲细胞的过程中发生了基因突变，雌性动物的基因型为AaXBXb，乙细胞②染色体上出现a基因的原因可能是基因重组（同源染色体非姐妹染色单体的互换），B错误； C、甲细胞是次级精母细胞可产生两种配子，而乙细胞初级卵母细胞只能产生一种配子，一共可产生3种配子，C正确； D、乙细胞中A和a所在的同源染色体发生了互换，属于基因重组，此后细胞继续分裂，在减数第一次分裂后期还可发生非同源染色体的非等位基因的自由组合，也属于基因重组，D正确。 故选CD。 17. 某XY型性别决定雌雄异株植物，圆叶和长叶由不位于Y染色体上的一对等位基因A/a控制。已知携带a基因的花粉成活率为50%，无其他致死现象。取部分圆叶雌、雄植株杂交，子一代雌株均为圆叶，雄株中圆叶占3/4，其余为长叶。下列叙述正确的是（ ） A. A、a基因位于常染色体上 B 亲代圆叶雌株中杂合子占1/2 C. 子一代中A基因的频率为5/6 D. 子一代雌雄个体随机杂交，子二代中圆叶雄株占7/16 【答案】BC 【解析】 【分析】基因分离定律实质：在杂合子细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，具有一定的独立性；当细胞进行减数分裂，等位基因会随着同源染色体的分开而分离，分别进入两个配子当中，独立地随配子遗传给后代。 【详解】A、取部分圆叶雌、雄植株杂交，子一代雌株均为圆叶，雄株中圆叶占3/4，其余为长叶，雌雄性状表现不一致，说明基因位于X染色体上，A错误； B、取部分圆叶雌、雄植株杂交，子一代雌株均为圆叶，雄株中圆叶占3/4，其余为长叶，说明圆叶为显性，长叶为隐性，亲代雌株基因型为XAX-，雄株基因型为XAY，由于子一代中雄株中圆叶（XAY）占3/4，长叶（XaY）占1/4，说明亲代雌株产生配子为3/4XA，1/4Xa，则亲本雌株的基因型为1/2XAXA，1/2XAXa，故亲代圆叶雌株中杂合子占1/2，B正确； C、子一代的基因型及比例为XAXA：XAXa：XAY：XaY=3：1：3：1，假设XAXA、XAXa、XAY、XaY的个数分别为3、1、3、1，子一代中A基因的频率为（6+1+3）/（6+2+3+1）=5/6，C正确； D、子一代的基因型及比例为XAXA：XAXa：XAY：XaY=3：1：3：1，子一代产生的雌配子为7/8XA，1/8Xa，产生的雄配子为3/8XA、1/8Xa、1/2Y，携带a基因的花粉成活率为50%，则产生的雄配子为6/15XA、1/15Xa、8/15Y，子二代中圆叶雄株（XAY）占7/8×8/15=7/15，D错误。 故选BC。 18. 科研人员利用下图所示的流程，将雄鼠多能干细胞（PSC）诱导产生精子，并使其成功与卵细胞受精，得到正常后代，这项研究给男性无精症导致的不孕不育带来了福音。下列分析错误的是（ ） A. PSC经诱导分化成精原细胞的过程中，会发生染色体数目的变化 B. 步骤④只能加入一个分化出的精子，以避免多个精子和卵细胞融合 C. 步骤⑤受精卵在体外培养时需提供95%氧气和5%CO2的混合气体环境 D. 上述流程利用了动物细胞培养、体外受精和胚胎移植等生物技术 【答案】ABC 【解析】 【分析】分析题图：图中①为细胞分化，②为减数分裂，③为卵细胞的采集和培养，④为体外受精，⑤为早期胚胎培养，⑥为胚胎移植。 【详解】A、PSC经诱导分化成精原细胞的过程中，根本原因是发生了基因的选择性表达，该过程中染色体数目不变，A错误； B、为保证受精的成功，步骤④可加入多个分化出的精子，卵细胞受精后会发生相应的变化避免多精入卵，B错误； C、动物细胞培养需要一定的气体环境，即95%空气和5%的CO2，C错误； D、上述流程利用了动物细胞培养（如精子、卵细胞和精原细胞等培养）、体外受精（精子和卵细胞结合成为受精卵）和胚胎移植等生物技术，D正确。 故选ABC。 三、非选择题：本部分包括 5 题，共计 60 分。 19. 莱因衣藻可进行光合作用将太阳能转化为氢能，其光合电子传递和产氢过程如下图1所示，PSI、PSII、Cytb6f表示结构。请回答下列问题： （1）菜因衣藻光合作用产生氢气的场所是____。在光合作用的光反应阶段，类囊体薄膜上的____吸收光能，并将光能转化为____中活跃的化学能参与到暗反应阶段。 （2）氢酶对氧气极其敏感，当氧分压达到2%时即可迅速失活。在光合作用过程中衣藻通常产氢量较低，原因是____。 （3）在早晚弱光环境及夜晚条件下，无氧呼吸方式对于莱因衣藻的生存很重要，无氧呼吸过程中丙酮酸能够进一步代谢产生甲酸、乙酸等各种弱酸（HA），导致了类囊体腔的酸化。研究人员根据多项研究提出了“离子陷阱”模型（如图2）。 ①在光照较弱的时候，莱茵衣藻进行无氧呼吸产生HA的场所是____，HA可进入类囊体腔，并解离出氢离子，由于____，导致腔内氢离子不断积累，出现酸化。 ②下列可作为证据支持无氧呼吸产生弱酸导致类囊体腔酸化的有____。 A．类囊体腔内的酸化程度与无氧呼吸产生弱酸的总积累量呈正相关 B．外源添加甲酸、乙酸等弱酸后衣藻均出现类囊体腔酸化的现象 C．无氧呼吸过程中不产生弱酸的突变体在强光条件下未发现类囊体腔酸化 （4）研究人员用TAP培养液和TAP-S培养液（缺硫）并优化培养条件，研究莱因衣藻的光合产氢量，结果如图3所示。光照72h，产氢量更多的是____培养液培养的莱因衣藻。推测硫可能____（填“促进”或“抑制”）了PSII或Cytb6f的功能，使类囊体腔中的H+浓度____。 【答案】（1） ①. 叶绿体基质 ②. 光合色素（或PSⅠ、PSⅡ） ③. ATP和NADPH （2）光合作用的光反应阶段会产生氧气，氧气浓度升高使氢酶失活而不能生成氢气 （3） ①. 细胞质基质 ②. 氢离子无法直接穿过类囊体膜 ③. AB （4） ①. TAP-S ②. 抑制 ③. 降低 【解析】 【分析】光合作用包括光反应和暗反应两个阶段。光反应发生场所在叶绿体的类囊体薄膜上，色素吸收、传递和转换光能，并将一部分光能用于水的光解生成NADPH和氧气，另一部分光能用于合成ATP，暗反应发生场所是叶绿体基质中，首先发生二氧化碳的固定，即二氧化碳和五碳化合物结合形成两分子的三碳化合物，三碳化合物利用光反应产生的NADPH和ATP被还原。 【小问1详解】 由题图可知，类囊体腔内建立了高浓度的H+，H+除了来源于水的光解，还来源于Cytb6f的传递，图上方表示叶绿体基质，因此衣藻光合作用产生氢气的场所是叶绿体基质；光反应阶段，类囊体薄膜上的光合色素（或PSⅠ、PSⅡ）吸收光能，并将光能转化为ATP和NADPH中活跃的化学能参与到暗反应阶段。 【小问2详解】 分析题意，氢酶对氧气极其敏感，当氧分压达到2%时即可迅速失活，光合作用的光反应阶段会产生氧气，氧气浓度升高使氢酶失活而不能生成氢气，故在光合作用过程中衣藻通常产氢量较低。 【小问3详解】 ①下标无氧呼吸的场所是细胞质基质；由图可知，弱酸分子可进入类囊体腔，并解离出氢离子，由于氢离子无法直接穿过类囊体膜，且类囊体腔内的缓冲能力有限，导致腔内氢离子不断积累，出现酸化。 ②A、类囊体腔内的酸化程度与无氧呼吸产生弱酸的总积累量呈正相关，即无氧呼吸产生弱酸的总积累量多，进而类囊体腔内的酸化程度高，可说明无氧呼吸产生弱酸导致类囊体腔酸化，A正确； B、甲酸、乙酸都是弱酸，外源添加弱酸后衣藻均出现类囊体腔酸化的现象，可说明无氧呼吸产生弱酸导致类囊体腔酸化，B正确； C、无氧呼吸过程中不产生弱酸的突变体在黑暗条件下未发现类囊体腔酸化，可能与突变等现象有关，不能直接证明无氧呼吸产生弱酸导致类囊体腔酸化，C错误。 故选AB。 小问4详解】 据图可知，实验的自变量是关照时间和培养液类型，因变量是光合产氢量，据图可知，光照72h，产氢量更多的是TAP-S培养液培养的莱因衣藻；结合（1）可知，Cytb6f能促进H+的传递，而TAP-S培养液（缺硫）条件下光合产氢量更大，说明硫可能抑制了PSII或Cytb6f的功能，使类囊体腔中的H+浓度降低。 20. RNA 干扰（RNAi）主要是对 mRNA 进行干 扰，起作用的有 miRNA 和 siRNA。miRNA 是由基因组内源 DNA 编码产生，其可与 目标 mRNA 配对，作用过程如图 1；siRNA 主要来源于外来生物，例如寄生在宿主体 内的病毒会产生异源双链 RNA（dsRNA），dsRNA 经过酶 2（只能识别双链 RNA）的 加工后成为 siRNA，可引起基因沉默，作用过程如图 2。回答下列问题： （1）有科学家将能引起 RNA 干扰的 dsRNA 的两条单链分别注入细胞，结果却没有引起 RNA 干扰现象，最可能的原因是_____________。 （2）过程③中 miRNA 可与目标 mRNA 配对，进而会导致_______________ 终止。过程④复合 体 2 能使目标 mRNA 水解，而不能水解其他 mRNA，原因是________________。 （3）若 miRNA 基因中腺嘌呤有 m 个，占该基因全部碱基的比例为 n，则该 miRNA 基 因中胞嘧啶为_____个，该基因第 4 代复制所需的腺嘌呤脱氧核苷酸为_____________ 个。与 miRNA 相比，miRNA 基因在化学组成上的区别在于__________。 （4）研究发现，RNA 介导的基因沉默是可以遗传给子代的，这____________（填“属于”或 “不属于”）表观遗传，理由是_____。 【答案】（1）酶2具有专一性，只能识别并切割异源双链RNA（dsRNA） （2） ①. 翻译 ②. 复合体2中的RNA可以与目标RNA之间碱基互补配对，但不可以与其他mRNA的碱基互补配对 （3） ①. m(1/2n-1) ②. 8m ③. miRNA基因中含有脱氧核糖和胸腺嘧啶 （4） ①. 属于 ②. 生物体基因的碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化 【解析】 【分析】基因表达是指将来自基因的遗传信息合成功能性基因产物的过程。基因表达产物通常是蛋白质，所有已知的生命，都利用基因表达来合成生命的大分子。转录过程由RNA聚合酶（RNAP）进行，以DNA为模板，产物为RNA。RNA聚合酶沿着一段DNA移动，留下新合成的RNA链。翻译是以mRNA为模板合成蛋白质的过程，场所在核糖体。 【小问1详解】 酶2具有专一性，只能识别并切割异源双链RNA（dsRNA），因此将能引起RNA干扰的dsRNA的两条单链分别注入细胞，结果却没有引起RNA干扰现象。 【小问2详解】 mRNA是翻译的模板，miRNA可与目标mRNA配对，进而会导致翻译停止；复合体2中的RNA可以与目标RNA之间碱基互补配对，但不可以与其他mRNA的碱基互补配对，因此过程④复合体2能使目标mRNA水解，而不能水解其他mRNA。 【小问3详解】 腺嘌呤有m个，占该基因全部碱基的比例为n，因此该基因的碱基总数为m/n，基因为一段DNA，DNA中A=T，G=C，A+C=T+G=50%，因此C的数目为1/2（m/n）-m=m(1/2n-1)；第3代复制完的DNA有8个，因此第4次复制时需要合成8个DNA，所需的腺嘌呤脱氧核苷酸为8m；miRNA基因是DNA，其中含有脱氧核糖和胸腺嘧啶，miRNA中含有核糖和尿嘧啶。 【小问4详解】 表观遗传是指生物体基因碱基序列保持不变，但基因表达和表型发生可遗传变化；RNA 介导的基因沉默可以遗传给子代，基因的碱基序列不变，因此属于表观遗传。 21. 番茄是雌雄同株的植物，其紫茎和绿茎（由D、d控制）是一对相对性状，缺刻叶和马铃薯叶（由H、h控制）是一对相对性状，两对基因独立遗传。现利用三种不同基因型的番茄进行两组杂交，实验结果如表所示。据表分析回答下列问题。 实验编号 亲本表型 子代表型及比例 实验一 紫茎缺刻叶①×绿茎缺刻叶② 紫茎缺刻叶：紫茎马铃薯叶=3：1 实验二 紫茎缺刻叶③×绿茎缺刻叶② 紫茎缺刻叶：紫茎马铃薯叶：绿茎缺刻叶；绿茎马铃薯叶=3：1：3：1 （1）仅根据实验一的杂交的结果，能判断出________（填“0”或“1”或“2”）对相对性状的显隐性关系，隐性性状是________，根据实验一、二的结果可知，这两对等位基因的遗传遵循________定律。 （2）亲本的紫茎缺刻叶①、紫茎缺刻叶③的基因型依次是________。 （3）紫茎缺刻叶①与紫茎缺刻叶③杂交，后代的表型及比例为________，后代的紫茎缺刻叶中能稳定遗传的个体占________。 （4）若番茄的果实颜色由两对等位基因（A和a、B和b）控制，且基因的表达与性状的关系如图1所示，为探究这两对等位基因是否位于同一对同源染色体上，某生设计了如下实验： 实验步骤：让基因型为AaBb的植株自交，观察并统计子代植株上番茄果实的颜色和比例（不考虑染色体互换）。实验预测及结论： ①若子代番茄果实颜色红色：黄色为________，则A、a和B、b基因分别在两对同源染色体上。 ②若子代番茄果实颜色红色：黄色为________，则A、a和B、b基因在一对同源染色体上，且A和B在一条染色体上。 ③若子代番茄果实颜色红色：黄色为________，则A、a和B、b基因在一对同源染色体上，且A和b在一条染色体。 【答案】（1） ①. 2 ②. 绿茎和马铃薯叶 ③. 自由组合 （2）DDHh DdHh （3） ①. 紫茎缺刻叶：紫茎马铃薯叶=3：1 ②. 1/6 （4） ①. 3：13 ②. 0：4 ③. 1：3 【解析】 【分析】分析题意可知：实验一中，紫茎缺刻叶植株和绿茎缺刻叶植株杂交，后代全为紫茎，缺刻叶：马铃薯叶=3：1，说明紫茎和缺刻叶为显性性状。两对基因独立遗传，这两对基因的遗传遵循基因的自由组合定律。 【小问1详解】 实验一中，紫茎缺刻叶植株和绿茎缺刻叶植株杂交，后代全为紫茎，说明紫茎是显性性状，缺刻叶：马铃薯叶=3：1，说明缺刻叶为显性性状，因此仅根据实验一的杂交的结果，能判断出2对相对性状的显隐性关系，隐性性状是绿茎和马铃薯叶。根据实验一、二的结果可知，这两对等位基因的遗传遵循自由组合定律。 【小问2详解】 分析由实验一可知，紫茎×绿茎→紫茎，可知紫茎①为DD，绿茎②为dd，缺刻叶×缺刻叶→缺刻叶∶马铃薯叶=3∶1，可知缺刻叶①为Hh，故①为DDHh；分析实验二可知紫茎×绿茎→紫茎∶绿茎=1∶1，可知紫茎③为Dd，缺刻叶×缺刻叶→缺刻叶∶马铃薯叶=3：∶1，可知缺刻叶③为Hh，故③为DdHh。 【小问3详解】 紫茎缺刻叶①为DDHh，紫茎缺刻叶③为DdHh，二者杂交后代中，均为紫茎，且有缺刻叶：马铃薯叶=3∶1，故后代表现型为紫茎缺刻叶∶紫茎马铃薯叶=3∶1；后代紫茎缺刻叶基因型为D-H-，能稳定遗传的基因型为DDHH，后代紫茎缺刻叶中能稳定遗传的个体所占比例为DDHH/D-H-=1/8÷3/4=1/6。 【小问4详解】 据图1分析，红色基因型为A_bb；黄色基因型为A_B_、aa_ _。 ①若A、a和B、b基因分别在两对同源染色体上，则满足自由组合定律，基因型为AaBb的植株自交，子代红色基因型为A_bb概率为3/4×1/4=3/16，黄色基因型为A_B_、aa_ _，概率为1-3/16=13/16，红色：黄色=3:13。 ②若A、a和B、b基因在一对同源染色体上，且A和B在一条染色体上，基因型为AaBb的植株只能产生两种配子，AB：ab=1:1，雌雄配子随机结合后，子代基因型为AABB：AaBb：aabb=1:2:1，均为黄色，即红色：黄色=0:4。 ③若A、a和B、b基因在一对同源染色体上，且A和b在一条染色体，基因型为AaBb的植株只能产生两种配子，Ab：aB=1:1，雌雄配子随机结合后，子代基因型为AAbb：AaBb：aaBB=1:3，即红色：黄色=1:3。 22. 黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的代谢产 物。为准确检测食品中残留的 AFB，科研人员开展下列研究。 （1）科研人员利用小鼠制备抗 AFB 的单克隆抗体（AFB 单抗），过程如图 1，过程 Ⅰ可以 采用的化学诱导试剂是_____________________ , 杂交瘤细胞需进行步骤Ⅱ_____________________ 和Ⅲ_____ 检 测，经过多次筛选。 （2）食品中的有害残留毒素还可能有黄绿青霉素（CIT）、伏马菌素（FB）。若想确认上述 流程获得的 AFB 单抗具有极强的特异性，应补充的检测是_____, 预测相应的实验 结果是_____。 （3）科研人员拟将抗 AFB 单抗固定在一种新材料上，制备为“检测探针”。已知材料 M 稳 定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质 P 可以提高材料 M 对抗 体的亲和力。制备检测探针的流程如图 2，探针发光性能与物质 P 的浓度关系如图 3。 依据图 3 结果，科研人员选择物质 P 的浓度为 0.8mg/mL 作为生产检测探针的条件，原 因是在该浓度下，探针发光性能与更高浓度时_____ , 而该浓度可节省成本。 （4）科研人员制备定量检测 AFB 的免疫试纸，如图 4。测定样品前，先配制一系列不同浓 度的 AFB 标准溶液，分别与等量 “MP-抗 AFB 单抗探针”混合均匀，滴至加样处。 科研人员测定了 T 线、C 线的发光值，从而绘制出特定范围 AFB 浓度的线性标准曲线_______ （选填字母），作为后续检测食品中是否含有 AFB 的参照曲线。 （5）单克隆抗体除了上述功能，还有哪些作用？_________ 【答案】（1） ①. 聚乙二醇（PEG） ②. 克隆化培养 ③. 抗体（阳性） （2） ①. AFB单抗与黄绿青霉素（或“CIT”）、伏马菌素（或“FB”）进行抗原-抗体杂交 ②. 结果为不能杂交（或“阴性”“无杂交带”） （3）差异较小（或“相近”） （4）D （5）治疗疾病、运载药物 【解析】 【分析】由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有增殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。 【小问1详解】 图中过程 Ⅰ是动物细胞融合过程，促进该过程的化学诱导试剂是聚乙二醇（PEG） , 通过过程Ⅰ获得的杂交瘤细胞需进行步骤Ⅱ克隆化培养抗体（阳性 和Ⅲ克隆化培养抗体（阳性）检 测，经过多次筛选获得能产生目标抗体的杂交瘤细胞，而后对该细胞进行体外或体内培养。 【小问2详解】 食品中的有害残留毒素还可能有黄绿青霉素（CIT）、伏马菌素（FB）。若想确认上述 流程获得的 AFB 单抗具有极强的特异性，则可用AFB单抗与黄绿青霉素（或“CIT”）、伏马菌素（或“FB”）进行抗原-抗体杂交，由于抗原和抗体杂交的特异性，因此该实验的结果是不能杂交（或“阴性”“无杂交带”）。 【小问3详解】 图3结果表明，在物质P浓度为0.8mg/mL时，探针发光性能与更高浓度时差异很小，因此科研时可选择该浓度（0.8mg/mL）作为生产检测探针的条件，可节省成本。 【小问4详解】 根据科研人员制备免疫试纸和检测AFB的原理：用不同浓度的AFB标准溶液分别与等量“MP-抗AFB单抗探针”混合，可推知，随着AFB浓度增加，与之结合的探针增加，导致T线/C线的发光值比下降，从而绘制出特定范围AFB浓度的线性标准曲线（即标准曲线D）作为后续检测食品中是否含有AFB的参照曲线。 【小问5详解】 单克隆抗体特异性强、灵敏度高，据此可用单克隆抗体和相应药物结合通过单克隆抗体的作用将药物定点到病灶部位进行定向治疗，可以减轻药物的副作用，另外单克隆抗体还可疾病的诊断和治疗。 23. 胶原蛋白在维持器官、组织、细胞等方面发挥着关键性作用，传统提取方法得到的胶原蛋白成分复杂，还可能携带动物病毒等。科学家将合成胶原蛋白的基因kit导入大肠杆菌构建基因工程菌，过程如下图所示。请据图回答下列问题： （1）图中①过程需要使用__________酶，②过程需要用到的酶有__________和__________，前者可以切断两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。 （2）用图中方法得到的kit基因较少，可以采用PCR技术进行扩增，已知kit基因的部分序列如下： 5'-CGGGATCCALLAGAATTCCG-3' 3'-GCCCTAGGTLLTCTTAAGGC-5' 根据上述序列设计引物为__________（填字母），以_________________（填限制酶）进行双酶切kit基因与质粒pET-28a（+），为了实现目的基因与运载体的连接，则需要在引物的__________端添加限制酶识别序列。 A.5'-GCCCTAGGT-3' B.5'-CGGAATTCT-3' C.5'-CGGGATCCA-3' D.5'-GCCTTAAGA-3' （3）双酶切kit基因，与质粒pET-28a（+）长度为170bp片段进行置换，构建重组质粒pET-28a（+）-kit，上述两种质粒在HindIII酶切后片段长度如下表所示， 质粒类型 pET-28a（+） pET-28a（+）-kit HindIII酶切片段 1000bp、2550bp 1000bp、2000bp、700bp 则kit基因长度为__________，由此判定kit基因上有2个HindIII酶切位点，原因是____________。 （4）菌液PCR是直接以菌体热解后的DNA为模板、以目的基因两端序列为引物进行扩增的方法，根据凝胶电泳结果可初步鉴定菌落是否含有目的基因。对构建的基因工程菌进行菌液PCR验证，根据初步验证的结果提取大肠杆菌的质粒进行双酶切再验证，结果如下图所示。分析可知，基因工程菌的构建__________（选填“是”或“否”）成功，原因是_____________。 【答案】（1） ①. 逆转录 ②. 限制酶 ③. DNA连接酶 （2） ①. BC ②. BamHⅠ和EcoRⅠ ③. 5’ （3） ①. 320bp（必须写bp） ②. pET-28a（+）原有的两个HindⅢ位点被目的基因置换走一个后，得到环状的pET-28a（+）-kit仍然被HindⅢ限制酶切割成3段 （4） ①. 是 ②. 菌落PCR与质粒双酶切均获得大小约为320bp的基因片段 【解析】 【分析】1、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。选择合适的限制酶对目的基因和质粒进行切割的原则：①不能破坏目的基因；②不能破坏所有的抗性基因（至少保留一个）；③最好选择两种限制酶分别切割质粒和目的基因，防止目的基因和质粒反向连接，同时要防止目的基因自身环化和质粒的自身环化。 2、引物是根据一段已知目的基因的核苷酸序列来设计的，其作用是使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸。 3、将基因表达载体导入微生物细胞前，常常用钙离子处理受体细胞，使其细胞壁的通透性增大，处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，便于重组质粒的导入。 【小问1详解】 由题图可知，过程①由mRNA生成基因（即DNA），因此代表逆转录过程，需要用到逆转录酶。过程②代表构建基因表达载体的过程，因此需要用到限制酶和DNA连接酶，前者可以切断两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。 【小问2详解】 在PCR中，引物与模板链的3'端碱基互补配对，并且引物的方向与模板链走向相反，因此与图中kit 基因上面一条链结合的引物，其序列应为5'-CGGAATTCT-3'，与kit 基因下面一条链结合的引物其序列应为5' -CGGGATCCA-3'，综上所述，AD错误，BC正确。故选BC。 由于ori复制原点中含有限制酶HindⅢ的识别序列，因此不能用限制酶HindⅢ来切割质粒，否则会破坏复制原点，只能用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ对质粒 pET-28a(+)进行双酶切，同时要在 kit 基因两端也连上限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列，由于DNA聚合酶只能从引物的3'端连接脱氧核苷酸延伸子链，因此必须将限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ的识别序列连接至引物的5'端，这样经过PCR和双酶切后，才能保证 kit 基因以正确的方向与运载体连接。 【小问3详解】 观察质粒 pET-28a(+) 图可知，在该质粒上有两个HindⅢ的识别序列，一个在启动子和终止子之间，一个在复制原点ori中，因此用HindⅢ切割质粒 pET-28a(+)后，可得到两个片段，通过表格可知，这两个片段长度分别为1000bp和2550bp，说明质粒pET-28a(+) 总长度是1000bp+2550bp=3550bp；利用双酶切法将 kit 基因与质粒 pET-28a(+) 长度为170bp片段进行置换后，形成的重组质粒 pET-28a（+）-kit 能被HindⅢ切割成三个片段，长度分别是1000bp、2000bp、700bp，说明置换后的kit 基因上含有两个HindⅢ的识别序列，再加上复制原点ori中的一个HindⅢ的识别序列，共三个HindⅢ的识别序列，经HindⅢ酶切后才能将重组质粒pET-28a（+）-kit 切成3段。利用这三段的长度可计算出重组质粒 pET-28a（+）-kit 的总长度为1000bp+2000bp+700bp=3700bp，由于kit 基因与长度为170bp片段进行置换，设kit 基因长度为n，可列出等式：3550+n-170=3700bp，故可计算出kit 基因长度为n=320bp。 【小问4详解】 由上面分析可知，kit 基因（即目的基因）的长度是320bp，根据电泳图可知，在约320bp处，菌落PCR组与质粒双酶切组均得到条带，说明目的基因成功导入大肠杆菌中。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 江苏省如皋中学2024—2025学年度高三年级测试 生物试卷 一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 种子萌发形成幼苗离不开糖类等能源物质，也离不开水和无机盐。下列叙述正确的是（ ） A. 种子吸收的水与多糖等物质结合后，水仍具有溶解性 B. 种子萌发过程中糖类含量逐渐下降，有机物种类不变 C. 幼苗细胞中的无机盐可参与细胞构建，水不参与 D. 幼苗中的水可参与形成NADPH，也可参与形成NADH 2. 植物液泡中部分离子与蔗糖的转运机制如图所示。白天光合作用合成的蔗糖可富集在液 泡中，夜间这些蔗糖运到胞质溶胶。下列叙述错误的是（ ） A. Na+、Ca2+进入液泡需要载体蛋白协助不需要消耗能量 B. Cl-、通过离子通道进入液泡不需要 ATP 直接供能 C. 液泡通过主动运输方式维持膜内外的 H+浓度梯度 D. 白天液泡富集蔗糖有利于光合作用的持续进行 3. 肿瘤所处环境中的细胞毒性T细胞存在题图所示代谢过程。其中，PC酶和PDH酶控制着丙酮酸产生不同的代谢产物，进入有氧呼吸三羧酸循环。增加PC酶的活性会增加琥珀酸的释放，琥珀酸与受体结合可增强细胞毒性T细胞的杀伤能力，若环境中存在乳酸，PC酶的活性会被抑制。下列叙述正确的是（ ） A. 图中三羧酸循环的代谢反应直接需要氧 B 图中草酰乙酸和乙酰辅酶A均产生于线粒体内膜 C. 肿瘤细胞无氧呼吸会增强细胞毒性T细胞的杀伤能力 D. 葡萄糖有氧呼吸的所有代谢反应中至少有5步会生成［H］ 4. 下列有关细胞生命历程的叙述，正确的是（　　） A. 抑癌基因甲基化导致基因突变或降低基因表达 B. 脑部血液循环障碍导致局部神经细胞死亡属于细胞坏死 C. 肝脏细胞不能合成血红蛋白的原因是没有与血红蛋白合成有关的基因 D. 自由基学说认为自由基通过攻击磷脂直接导致核糖体损伤而使细胞衰老 5. 玉米叶片的横切结构及相关代谢过程与场所如图所示，从结构与功能统一的角度，分析下列说法错误的是（ ） A. 除叶肉细胞外，维管束鞘细胞中也含有叶绿体 B. 若抑制PEP羧化酶活性，光合作用会明显降低 C. 如果提供14CO2，14C首先出现在叶肉细胞的C3中 D. 玉米的叶片结构，体现对高温干旱环境的适应 6. 若利用紫色洋葱的鳞片叶、管状叶、根尖进行以下实验：①绿叶中色素的提取和分离、②探究植物细胞的吸水和失水、③观察根尖分生区组织细胞的有丝分裂、④检测生物组织中还原糖。下列说法正确的是（ ） A. 用管状叶进行实验①时，滤纸条上未出现色素带，说明管状叶中不含色素 B. 用鳞片叶进行实验②时，发生质壁分离时，水分子通过原生质层是单向的 C. 用根尖进行实验③时，显微镜下可观察到纺锤丝牵引染色体向细胞两极移动 D. 用鳞片叶进行实验④时，除去鳞片叶外表皮制备组织样液，便于现象观察 7. 一个基因型为AaXBY的精原细胞进行减数分裂，下列叙述不正确的是（　　） A. 减数分裂I中期、减数分裂Ⅱ后期，细胞中的染色体组数相同 B. 若产生的精子为AXB：aXB：AY：aY＝1：1：1：1，则可能发生了互换 C. 若产生的精子为AXB：aXB：aY＝1：1：2，则可能的原因是同源染色体未分离 D. 若细胞中无染色单体，基因组成为AAYY，则该细胞可能处于减数分裂Ⅱ后期 8. 下图1是某单基因遗传病的遗传系谱图，在人群中的患病率为1/8100，科研人员提取了四名女性的DNA，用PCR扩增了与此基因相关的片段，并对产物酶切后进行电泳（正常基因含有一个限制酶切位点，突变基因增加了一个酶切位点）。结果如图2，相关叙述正确的是（　　） A. 该病的遗传方式是伴X染色体隐性遗传 B. Ⅱ-1与Ⅱ-2婚配生一个患病男孩的概率是1/8 C. 该突变基因新增的酶切位点位于310bp中 D. 扩增Ⅱ-2与此基因相关的片段，酶切后电泳将产生2种条带 9. 如图表示细胞内的两种生理过程，下列叙述错误的是（ ） A. 图2表示翻译，上每个密码子不能都结合相应的 B. 图1所示过程与图2所示过程中发生的碱基配对方式不完全相同 C. 图1所示过程中酶的移动方向与图2所示过程中核糖体的移动方向不同 D. 图1表示转录，该过程发生时模板与产物间有氢键的形成与断裂 10. 关于证明蛋白质和核酸哪一种是遗传物质的系列实验，下列叙述正确的是（ ） A. 烟草花叶病毒实验中，以病毒颗粒的 RNA 和蛋白质互为对照进行侵染，结果发现 自变量 RNA 分子可使烟草出现花叶病斑性状 B. 肺炎链球菌体内转化实验中，加热致死的 S 型菌株的 DNA 分子在小鼠体内可使 R 型活菌的相对性状从无致病性转化为有致病性 C. 肺炎链球菌体外转化实验中，利用自变量控制的“加法原理”，将“S 型菌 DNA+DNA 酶”加入 R 型活菌的培养基中，结果证明 DNA 是转化因子 D. 噬菌体侵染实验中，用放射性同位素分别标记了噬菌体的蛋白质外壳和 DNA，发 现其 DNA 进入宿主细胞后，利用自身原料和酶完成自我复制 11. 养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（ ） A. ①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B. ②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C. ③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D. 粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 12. 下列相关实验操作正确的是（ ） A. 配制PCR反应体系时，加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料 B. 利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果 C. 将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板 D. 将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落 13. 三白草和鱼腥草因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（　　） A. ①过程可用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成 B. ②过程通常在略高渗溶液中采用灭活病毒诱导原生质体融合 C. ③过程融合的原生质体需先形成细胞壁再进行有丝分裂 D. ④过程配制培养基时需要添加植物生长调节剂和琼脂 14. 为了降低免疫排斥反应，研究者借助 CRISPR/Cas9 技术对移植的猪心脏进行了基因编辑。CRISPR/Cas9 系统主要由向导 RNA（sgRNA）和 Cas9 蛋白两部分组成，sgRNA 可引导 Cas9 蛋白到特定基因位点进行切割、其机制如图所示。下列说法错误的是（ ） A. Cas9 蛋白作用于磷酸二酯键 B. sgRNA 通过与目标 DNA 碱基互补配对引导 Cas9 蛋白到位 C. sgRNA 会因错误结合而出现 “脱靶”现象，一般 sgRNA 序列越短，脱靶率越低 D. 经过改造的转基因猪，可以利用核移植、胚胎分割得到更多的可移植器官供体 二、多项选择题：本部分包括 4 题，每题 3 分，共计 l2 分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对的得 3 分，选对但不全的得 1 分，错选或不答的得 0 分。 15. 果蝇的肠吸收细胞中有一种储存Pi的全新细胞器—PXo小体（一种具多层膜的椭圆形结构）。PXo蛋白分布在PXo小体膜上，可将Pi转运进入PXo小体后，再将Pi转化为膜的主要成分磷脂进行储存。当食物中磷酸盐不足时，PXo小体中的膜成分显著减少，最终PXo小体被降解，释放出磷酸盐供细胞使用。下列分析正确的是（ ） A. PXo蛋白的合成起始于附着于内质网上的核糖体 B. 可用差速离心法将PXo小体与其他细胞器分离 C. PXo小体的膜结构上可能含有催化磷酸盐转化为磷脂的酶 D. 当食物中磷酸盐不足时，果蝇的肠吸收细胞中PXo小体的降解需要溶酶体的参与 16. 同种的二倍体雄、雌动物减数分裂某时期的细胞分裂图像如甲、 乙所示。雄性动物的基因型为 AAXBY，雌性动物的基因型为 AaXBX。不考虑除图示之外的其他变异，下列分 析正确的是（ ） A. 与甲细胞同时产生的另一个细胞的基因型是 AXB B. 甲、 乙细胞①②染色体上出现 a 基因的原因相同 C. 若甲、 乙细胞继续分裂，一共可产生 3 种配子 D. 乙细胞除图示之外还可以产生其他的基因重组 17. 某XY型性别决定雌雄异株植物，圆叶和长叶由不位于Y染色体上的一对等位基因A/a控制。已知携带a基因的花粉成活率为50%，无其他致死现象。取部分圆叶雌、雄植株杂交，子一代雌株均为圆叶，雄株中圆叶占3/4，其余为长叶。下列叙述正确的是（ ） A. A、a基因位于常染色体上 B. 亲代圆叶雌株中杂合子占1/2 C. 子一代中A基因的频率为5/6 D. 子一代雌雄个体随机杂交，子二代中圆叶雄株占7/16 18. 科研人员利用下图所示的流程，将雄鼠多能干细胞（PSC）诱导产生精子，并使其成功与卵细胞受精，得到正常后代，这项研究给男性无精症导致的不孕不育带来了福音。下列分析错误的是（ ） A. PSC经诱导分化成精原细胞的过程中，会发生染色体数目的变化 B. 步骤④只能加入一个分化出的精子，以避免多个精子和卵细胞融合 C. 步骤⑤受精卵在体外培养时需提供95%氧气和5%CO2的混合气体环境 D. 上述流程利用了动物细胞培养、体外受精和胚胎移植等生物技术 三、非选择题：本部分包括 5 题，共计 60 分。 19. 莱因衣藻可进行光合作用将太阳能转化为氢能，其光合电子传递和产氢过程如下图1所示，PSI、PSII、Cytb6f表示结构。请回答下列问题： （1）菜因衣藻光合作用产生氢气的场所是____。在光合作用的光反应阶段，类囊体薄膜上的____吸收光能，并将光能转化为____中活跃的化学能参与到暗反应阶段。 （2）氢酶对氧气极其敏感，当氧分压达到2%时即可迅速失活。在光合作用过程中衣藻通常产氢量较低，原因是____。 （3）在早晚弱光环境及夜晚条件下，无氧呼吸方式对于莱因衣藻的生存很重要，无氧呼吸过程中丙酮酸能够进一步代谢产生甲酸、乙酸等各种弱酸（HA），导致了类囊体腔的酸化。研究人员根据多项研究提出了“离子陷阱”模型（如图2）。 ①在光照较弱的时候，莱茵衣藻进行无氧呼吸产生HA的场所是____，HA可进入类囊体腔，并解离出氢离子，由于____，导致腔内氢离子不断积累，出现酸化。 ②下列可作为证据支持无氧呼吸产生弱酸导致类囊体腔酸化的有____。 A．类囊体腔内的酸化程度与无氧呼吸产生弱酸的总积累量呈正相关 B．外源添加甲酸、乙酸等弱酸后衣藻均出现类囊体腔酸化现象 C．无氧呼吸过程中不产生弱酸的突变体在强光条件下未发现类囊体腔酸化 （4）研究人员用TAP培养液和TAP-S培养液（缺硫）并优化培养条件，研究莱因衣藻的光合产氢量，结果如图3所示。光照72h，产氢量更多的是____培养液培养的莱因衣藻。推测硫可能____（填“促进”或“抑制”）了PSII或Cytb6f的功能，使类囊体腔中的H+浓度____。 20. RNA 干扰（RNAi）主要是对 mRNA 进行干 扰，起作用的有 miRNA 和 siRNA。miRNA 是由基因组内源 DNA 编码产生，其可与 目标 mRNA 配对，作用过程如图 1；siRNA 主要来源于外来生物，例如寄生在宿主体 内的病毒会产生异源双链 RNA（dsRNA），dsRNA 经过酶 2（只能识别双链 RNA）的 加工后成为 siRNA，可引起基因沉默，作用过程如图 2。回答下列问题： （1）有科学家将能引起 RNA 干扰的 dsRNA 的两条单链分别注入细胞，结果却没有引起 RNA 干扰现象，最可能的原因是_____________。 （2）过程③中 miRNA 可与目标 mRNA 配对，进而会导致_______________ 终止。过程④复合 体 2 能使目标 mRNA 水解，而不能水解其他 mRNA，原因________________。 （3）若 miRNA 基因中腺嘌呤有 m 个，占该基因全部碱基的比例为 n，则该 miRNA 基 因中胞嘧啶为_____个，该基因第 4 代复制所需的腺嘌呤脱氧核苷酸为_____________ 个。与 miRNA 相比，miRNA 基因在化学组成上的区别在于__________。 （4）研究发现，RNA 介导基因沉默是可以遗传给子代的，这____________（填“属于”或 “不属于”）表观遗传，理由是_____。 21. 番茄是雌雄同株的植物，其紫茎和绿茎（由D、d控制）是一对相对性状，缺刻叶和马铃薯叶（由H、h控制）是一对相对性状，两对基因独立遗传。现利用三种不同基因型的番茄进行两组杂交，实验结果如表所示。据表分析回答下列问题。 实验编号 亲本表型 子代表型及比例 实验一 紫茎缺刻叶①×绿茎缺刻叶② 紫茎缺刻叶：紫茎马铃薯叶=3：1 实验二 紫茎缺刻叶③×绿茎缺刻叶② 紫茎缺刻叶：紫茎马铃薯叶：绿茎缺刻叶；绿茎马铃薯叶=3：1：3：1 （1）仅根据实验一的杂交的结果，能判断出________（填“0”或“1”或“2”）对相对性状的显隐性关系，隐性性状是________，根据实验一、二的结果可知，这两对等位基因的遗传遵循________定律。 （2）亲本的紫茎缺刻叶①、紫茎缺刻叶③的基因型依次是________。 （3）紫茎缺刻叶①与紫茎缺刻叶③杂交，后代的表型及比例为________，后代的紫茎缺刻叶中能稳定遗传的个体占________。 （4）若番茄的果实颜色由两对等位基因（A和a、B和b）控制，且基因的表达与性状的关系如图1所示，为探究这两对等位基因是否位于同一对同源染色体上，某生设计了如下实验： 实验步骤：让基因型为AaBb的植株自交，观察并统计子代植株上番茄果实的颜色和比例（不考虑染色体互换）。实验预测及结论： ①若子代番茄果实颜色红色：黄色为________，则A、a和B、b基因分别在两对同源染色体上。 ②若子代番茄果实颜色红色：黄色为________，则A、a和B、b基因在一对同源染色体上，且A和B在一条染色体上。 ③若子代番茄果实颜色红色：黄色为________，则A、a和B、b基因在一对同源染色体上，且A和b在一条染色体。 22. 黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的代谢产 物。为准确检测食品中残留的 AFB，科研人员开展下列研究。 （1）科研人员利用小鼠制备抗 AFB 的单克隆抗体（AFB 单抗），过程如图 1，过程 Ⅰ可以 采用的化学诱导试剂是_____________________ , 杂交瘤细胞需进行步骤Ⅱ_____________________ 和Ⅲ_____ 检 测，经过多次筛选。 （2）食品中的有害残留毒素还可能有黄绿青霉素（CIT）、伏马菌素（FB）。若想确认上述 流程获得的 AFB 单抗具有极强的特异性，应补充的检测是_____, 预测相应的实验 结果是_____。 （3）科研人员拟将抗 AFB 单抗固定在一种新材料上，制备为“检测探针”。已知材料 M 稳 定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质 P 可以提高材料 M 对抗 体的亲和力。制备检测探针的流程如图 2，探针发光性能与物质 P 的浓度关系如图 3。 依据图 3 结果，科研人员选择物质 P 的浓度为 0.8mg/mL 作为生产检测探针的条件，原 因是在该浓度下，探针发光性能与更高浓度时_____ , 而该浓度可节省成本。 （4）科研人员制备定量检测 AFB 的免疫试纸，如图 4。测定样品前，先配制一系列不同浓 度的 AFB 标准溶液，分别与等量 “MP-抗 AFB 单抗探针”混合均匀，滴至加样处。 科研人员测定了 T 线、C 线的发光值，从而绘制出特定范围 AFB 浓度的线性标准曲线_______ （选填字母），作为后续检测食品中是否含有 AFB 的参照曲线。 （5）单克隆抗体除了上述功能，还有哪些作用？_________ 23. 胶原蛋白在维持器官、组织、细胞等方面发挥着关键性作用，传统提取方法得到的胶原蛋白成分复杂，还可能携带动物病毒等。科学家将合成胶原蛋白的基因kit导入大肠杆菌构建基因工程菌，过程如下图所示。请据图回答下列问题： （1）图中①过程需要使用__________酶，②过程需要用到酶有__________和__________，前者可以切断两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。 （2）用图中方法得到的kit基因较少，可以采用PCR技术进行扩增，已知kit基因的部分序列如下： 5'-CGGGATCCALLAGAATTCCG-3' 3'-GCCCTAGGTLLTCTTAAGGC-5' 根据上述序列设计引物为__________（填字母），以_________________（填限制酶）进行双酶切kit基因与质粒pET-28a（+），为了实现目的基因与运载体的连接，则需要在引物的__________端添加限制酶识别序列。 A.5'-GCCCTAGGT-3' B.5'-CGGAATTCT-3' C.5'-CGGGATCCA-3' D.5'-GCCTTAAGA-3' （3）双酶切kit基因，与质粒pET-28a（+）长度为170bp片段进行置换，构建重组质粒pET-28a（+）-kit，上述两种质粒在HindIII酶切后片段长度如下表所示， 质粒类型 pET-28a（+） pET-28a（+）-kit HindIII酶切片段 1000bp、2550bp 1000bp、2000bp、700bp 则kit基因长度为__________，由此判定kit基因上有2个HindIII酶切位点，原因是____________。 （4）菌液PCR是直接以菌体热解后的DNA为模板、以目的基因两端序列为引物进行扩增的方法，根据凝胶电泳结果可初步鉴定菌落是否含有目的基因。对构建的基因工程菌进行菌液PCR验证，根据初步验证的结果提取大肠杆菌的质粒进行双酶切再验证，结果如下图所示。分析可知，基因工程菌的构建__________（选填“是”或“否”）成功，原因是_____________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$