达标测试卷(12) 生物技术与工程(一)-【高考总复习】2025年高考生物达标测试卷

达标测试卷(十二) 1.C　 以mRNA为模板合成cDNA的过程，属于逆转录，需要逆转录酶，A正确；pMD18­T载体一般是环状质粒分子，其化学本质是DNA，B正确；PCR技术需要耐高温的DNA聚合酶，不需要解旋酶，在高温下DNA分子可自动解开双螺旋，C错误；大肠杆菌作为受体细胞，通常先用Ca2＋处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中的DNA分子的生理状态，再将重组的基因表达载体导入其中，D正确。 2.B　乳酸菌是厌氧微生物，不能通入空气，A错误；家庭制作果酒、果醋和腐乳利用的都是自然界的菌种，通常都不是纯种发酵，B正确；果醋制作利用的是醋酸菌，醋酸菌能够产生醋酸，使溶液的pH逐渐降低；果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳与酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，随着二氧化碳浓度的增加，溶液的pH逐渐降低，因此果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低，C错误；泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是由于产膜酵母的繁殖形成的，D错误。 3.A　啤酒的工业化生产中，焙烤主要是为了杀死种子的胚而不使淀粉酶失活，所用温度不高，无法实现灭菌，A错误；抗生素能抑制细菌的繁殖，动物细胞培养液中常添加抗生素用于减少污染，B正确；泡菜制作主要依靠乳酸菌发酵，乳酸菌是厌氧生物，不会在盐水表面聚集成菌膜，因此表层菌膜的出现多为好氧型杂菌的污染，C正确；高温会使蛋白质变性，湿热灭菌过程中的高温易引起蛋白质空间结构不可逆改变，D正确。 4.D　 根据实验结果可以推断出乙平板中无精氨酸，因此精氨酸依赖型菌不能繁殖形成菌落，甲平板中含精氨酸，精氨酸依赖型菌可繁殖形成菌落，A正确；平板上的菌落分布较均匀，故菌落A是采用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果，B正确；菌落B在甲平板上不能形成，在乙平板上可形成，可判断其为精氨酸依赖型菌，可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，C正确；该培育菌种的方法为诱变育种，基因突变具有不定向性，因此不一定能筛选出精氨酸依赖型菌，D错误。 5.D　题图所示采用的接种方法为平板划线法，A错误；可用湿热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌，B错误；该实验Ⅲ区有单菌落，可以达到菌种纯化目的，C错误；培养基中的尿素被分解后呈碱性，可使酚红指示剂变为红色，D正确。 6.D　 菌落的大小、颜色、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据，但是有无荚膜通过肉眼无法观察，A错误；筛选出能高产柠檬酸的黑曲霉菌种后还需要进一步扩大化培养才能接种到发酵罐中进行发酵生产，B错误；单细胞蛋白是微生物菌体，不是从微生物细胞中提取的蛋白质，C错误；在生产酸奶时采用巴氏消毒法，比较温和的消毒方法，杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分，D正确。 7.C　 光照不利于愈伤组织形成，因此形成愈伤组织的过程中不需要光照，A错误；在动物细胞培养过程中，需用胰蛋白酶将组织分散成单个细胞，制成细胞悬液，防止接触抑制，在植物细胞培养时不用胰蛋白酶，B错误；组织培养过程中，愈伤组织易受到培养条件和外界环境的影响而发生突变，突变进而发育成为新品种，所以可通过从中筛选获得高产的突变体制备生物反应器，C正确；工厂化生产长春新碱，优化生物反应器的pH、温度等条件，通过促进细胞快速增殖来提高长春新碱的产量，不是提高单个细胞的长春新碱含量，D错误。 8.A　过程①将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中，通过电融合法使两细胞融合，A正确；②融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，通常需在液体培养基中加入血清等天然成分，不需要用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离，B错误；过程③中需要给代孕母猴注射一定量的促性腺激素，达到同期发情的目的，C错误；题图中过程需用到核移植、体外胚胎培养、胚胎移植等技术，不涉及体外受精过程，D错误。 9.D　抗原刺激可引起机体产生相应的B淋巴细胞，且B淋巴细胞可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等，A正确；据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷(Oua)敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感”可知，HAT培养基可去除未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，B正确；抗体是由浆细胞分泌的，杂交瘤细胞若丢失来自B淋巴细胞的染色体，可能会导致抗体产生能力下降，C正确；由于杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞染色体丢失的问题，所以有的杂交瘤细胞不一定具有持续产生抗EBV抗体的能力，D错误。 10. D　分析题图可知，b表示囊胚的内细胞，该区域的细胞具有全能性，iPS细胞是类似胚胎干细胞的一种细胞，所以iPS细胞的分裂、分化能力可能与图中b区域的细胞相当，A正确；对雌鼠注射适量的促性腺激素可以促进雌鼠超数排卵，进而获得更多的受精卵，B正确；分析题意可知，该实验目的是获得具有人类胰腺的幼鼠，所以步骤①基因编辑的目的可能是破坏受精卵中与胰腺形成有关的基因，C正确；分析题图可知，图中过程涉及转基因技术、动物细胞培养及胚胎移植等，但并未涉及动物细胞核移植技术，D错误。 11.D　动物细胞培养和植物组织培养都既含有机营养成分，又含无机营养成分，A错误；动物细胞培养要用到胰蛋白酶把细胞分散开，而植物组织培养过程不需要把细胞分散开，B错误；植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株或分化成其他各种细胞的潜能，因此植物组织培养能够产生新个体；动物细胞的全能性受到限制，因此培养中的动物体细胞难以形成新的生物个体，C错误；动物细胞培养可以用于检测有毒物质，茎尖(几乎不含病毒)培养可用于植物脱除病毒，D正确。 12.C　农杆菌中的Ti质粒上的T­DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此应该将抗虫基因插入农杆菌Ti质粒的T­DNA片段内，A正确；若在单子叶植物的伤口处涂抹酚类化合物，则可以用农杆菌侵染水稻、玉米等单子叶植物，B正确；目的基因的黏性末端与质粒的黏性末端依赖碱基互补配对原则连接在一起，C错误；转基因是否成功，最简便的方法是从个体水平上观察该植物有没有抗虫性状，D正确。 13.C　蛋白质的功能主要由其三维结构决定，而其三维结构与氨基酸序列有关。所以将未知蛋白质与已知蛋白质的氨基酸序列进行对比分析可以预测蛋白质的功能，A正确；蛋白质的功能主要由其三维结构决定，所以通过三维结构对比可以判断两个蛋白质是否有相似的功能，B正确；核苷酸序列发生突变，由于密码子具有简并性，其编码的蛋白质功能不一定发生改变，C错误；蛋白质结构相似程度越高，生物之间的相似性越大，亲缘关系越近，因此可根据蛋白质结构相似程度判断物种间亲缘关系的远近，D正确。 14.A　 在生物恐怖威胁不断上升、全球传染病疫情频发的情况下，消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面，A正确；克隆人技术并未完全成熟。中国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验，但是不反对治疗性克隆，B错误；转基因技术中，只要有证据表明产品有害，就应该禁止该产品的使用，而不是禁止转基因技术的应用，C错误；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，不需要进行基因检测；“设计试管婴儿”技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术，需要进行基因检测，D错误。 15.C　单倍体育种时，需对F1的花药进行组织培养再用秋水仙素处理后再进行筛选，A错误；制备单克隆抗体时，可利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，用抗体筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B错误；胚胎植入前筛查能够避免严重遗传疾病的患儿出生，在临床试管婴儿术中，需利用遗传学诊断的方法筛选出所需的胚胎进行移植，C正确；培育耐盐植株时，需要先将试管苗移植到含有一定盐分的培养基中，逐渐适应盐分环境，再逐步增加盐分浓度，最终筛选出耐盐植株，D错误。 16.ABD　 淀粉的糖化作用是在发酵过程中继续利用微生物所分泌的淀粉酶将碳水化合物分解成葡萄糖、麦芽糖、糊精等，便于微生物利用，A正确；发酵产物柠檬酸呈酸性，随着发酵进程的进行，柠檬酸含量增多，发酵液酸性增强，溶液pH逐渐减小，B正确；结合题干可知，发酵时采用精制糖如葡萄糖、蔗糖为原料，能够获得较高产量，故实验室配制培养基筛选黑曲霉不一定以葡萄糖为唯一碳源，C错误；如果产品是代谢物，可以根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，故发酵结束后，采用提取、分离和纯化等措施获得柠檬酸，D正确。 17.A　实验中所用水样不能提前灭菌，A错误；EMB培养基含有琼脂，属于固体培养基，大肠杆菌菌落在EMB培养基上呈深紫色，说明EMB培养基属于鉴定培养基，B正确；参照稀释涂布平板法计数原则，应选择菌落数为30～300的平板进行计数，C正确；理论上菌落是由单个活菌形成的，实际上也可能是由相邻的两个或多个菌体形成的，所以以菌落数代表菌体数，数值可能偏低，D正确。 18.ABC　 卵母细胞进行减数分裂时停止在减数第二次分裂中期，因此接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期，A正确；显微镜下可以通过显微操作去核，B正确；题图中形成的器官来源于病人的细胞，用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确；治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术，不用进行胚胎移植技术，D错误。 19.ABD　启动子是一段特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，故构建表达载体时需将EPO基因(目的基因)插入乳腺蛋白基因的启动子的下游，A正确；某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO，所以一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达，B正确；用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的受精卵(将来发育成雌性个体)中，待其发育到一定阶段，方可合成EPO，C错误；用PCR扩增人EPO基因，前提是需要一段已知的EPO基因核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，D正确。 20.AB　 据题图甲可知，酶D基因和转运肽基因上都有限制酶Cla Ⅰ切割位点，会产生相同的末端，再利用DNA连接酶连接获得融合的基因，A正确；根据A项的结果获得重组的目的基因上，含有Xba Ⅰ和Sac Ⅰ两种限制酶的切割位点，结合图乙，目的基因必修插在启动子和终止子之间，用Xba Ⅰ和Sac Ⅰ同时切割目的基因和载体片段，连接后获得重组Ti质粒，B正确；根据图乙可知，T­DNA不含卡那霉素抗性基因，可将油菜细胞接种在含潮霉素的固体培养基上筛选成功导入融合基因的细胞，C错误；由题意可知，叶绿体转运肽是引导合成的蛋白质进入叶绿体，由于酶D基因与叶绿体转运肽基因重组形成新的目的基因，转基因油菜的酶D基因可以在其他细胞中表达，叶绿体转运肽会引导合成的蛋白质进入叶绿体，D错误。 21.解析　(1)培养基的成分一般都有碳源、氮源、水和无机盐，图示培养基中NaNO3的作用有提供氮源，并维持培养液一定的渗透压；为增大扩展青霉的浓度，接种至苹果前用该培养基培养。(2)104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为32、40和36，则每毫升菌液中扩展青霉的数量为(32＋40＋36)÷3÷0.1×104＝3.6×106个；由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。(3)①据题图可知，不同病斑直径的苹果中，①号部位的Pat含量最高，离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低。②据题图可知，腐烂苹果去除腐烂部位后不建议食用，这是因为Pat是一种具有致突变作用的毒素，将腐烂苹果的腐烂部位去除后，结合图2可知，未腐烂部位仍含一定量的Pat，食用仍存在健康风险。 答案　(1)提供氮源和无机盐(维持培养液一定的渗透压)　 增大扩展青霉的浓度(扩大培养)　(2)3.6×106　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落　(3)①不同病斑直径的苹果中，(①号部位的Pat含量最高)离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低　②不建议食用，未腐烂部位仍含有一定量的Pat，食用仍存在健康风险 22.解析　(1)据题图判断，在肿瘤细胞外，Fe必须先和转铁蛋白结合，再进入细胞；因肿瘤细胞增长快速，其所需要的Fe元素增加，由于肿瘤细胞表面TfR能够与Tf结合，若需要运输更多的Fe元素，用以适应肿瘤细胞的快速增长，那么肿瘤细胞表面的TfR表达量会上升；利用单克隆抗体技术，制备抗TfR抗体，抗TfR抗体可以与TfR特异性结合，便会与Tf竞争结合TfR，致使肿瘤细胞对Fe元素的摄取受到抑制，以达到抑制肿瘤细胞增殖的作用。(2)若要获得抗TfR的单克隆抗体，可用接种过TfR的免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，继而筛选出既能无限增殖又能分泌抗TfR抗体的杂交瘤细胞，大量培养该细胞获得相应抗体，由于该抗体来源于小鼠，称为鼠源单克隆抗体。(3)由题意可知，可选用荧光素标记抗TfR抗体，与人的癌细胞混合培养，观察荧光点出现的位置，追踪TfR的去向，若发现荧光点出现在细胞膜上和细胞内，则此实验结果支持该假说。 答案　(1)上升　与Tf竞争结合TfR，抑制了肿瘤细胞摄取铁元素　(2)骨髓瘤细胞　既能无限增殖又能分泌抗TfR抗体　(3)将抗TfR的抗体用荧光素标记，与人的癌细胞混合培养，观察荧光点出现的位置，追踪TfR的去向 23.解析　(1)基因工程的核心步骤是：基因表达载体的构建。过程①是将目的基因与运载体结合，需要的酶有限制酶、DNA连接酶。启动子上具有RNA聚合酶识别位点，结合后启动转录过程。过程②是将目的基因导入受体细胞，常采用的是显微注射法。(2)来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此为了获得多头相同的转基因动物，人们可以在囊胚或桑葚胚时期采用胚胎分割技术。(3)Ⅲ是能够产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，它既能无限增殖又能产生特异性抗体，还可以通过动物细胞融合方法获得具有此类功能的细胞。(4)在转基因植物的培养过程中，常采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞。将转基因植物细胞培养成一个完整的个体采用的是植物组织培养技术，具体过程是： 受体细胞愈伤组织胚状体或丛芽―→幼苗 答案　(1)基因表达载体的构建　 限制酶、DNA连接酶 RNA聚合酶识别和结合，启动转录过程　 显微注射法　 (2)桑葚胚或囊胚　胚胎分割　(3)既能无限增殖又能产生特异性抗体　动物细胞融合　 (4)农杆菌转化法　受体细胞愈伤组织胚状体或丛芽―→幼苗 24.解析　(1)据题图分析，sgRNA与Cas9蛋结合后，通过sgRNA识别基因组中特定的DNA序列并与之结合，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置切割DNA以敲除目标基因或插入新的基因，最终实现对靶基因序列的编辑。由于其他DNA序列可能含有与sgRNA互补配对的序列，所以基因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”，故sgRNA的序列长短影响成功率，越短脱靶率越高。(2)Cas9蛋白在功能上属于限制(性内切核酸)酶，切割的是DNA中的磷酸二酯键。结合题干信息可知， 构建好的SIMAPK4基因编辑载体需要满足的条件：能在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；sgRNA相应基因和Cas9基因能够正常表达和发挥作用；具有标记基因，便于重组DNA分子的筛选。(3)构建好的基因编辑载体需要通过一定方式才能进入受体细胞，针对植物细胞常用的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法。分析题干信息可知，成功导入了基因编辑载体的番茄中含有HPT基因，而SIMAPK4基因被敲除的番茄中没有SIMAPK4基因。因此，通过PCR技术检测某番茄中SIMAPK4基因是否被敲除的实验思路是提取待检测番茄植株的DNA，对HPT基因和SIMAPK4基因进行PCR扩增，筛选PCR结果为HPT基因呈阳性、SIMAPK4基因呈阴性的番茄植株。 答案　(1)sgRNA能识别特定的DNA序列并与之结合，从而引导Cas9蛋白结合到相应位置切割DNA以敲除目标基因或插入新的基因，最终实现靶向编辑　 高　 (2)限制(性内切核酸)　 磷酸二酯　 能在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；sgRNA相应基因和Cas9基因能够正常表达和发挥作用；具有标记基因，便于重组DNA分子的筛选　(3)农杆菌转化法(或花粉管通道法)　 提取待检测番茄植株的DNA，对HPT基因和SIMAPK4基因进行PCR扩增，筛选PCR结果为HPT基因呈阳性、SIMAPK4基因呈阴性的番茄植株 25.解析　(1)由题图可知，质粒上的限制酶有HindⅢ和BamHⅠ，因此为了正确扩增Bt毒蛋白基因并能与图中质粒正确连接(为保证正确连接，需要用两种不同的限制酶切割)，需根据Bt毒蛋白基因两端的核苷酸序列，Hind Ⅲ和BamHⅠ识别核苷酸序列设计两种引物。PCR时，需要一对引物，其作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′­端开始连接脱氧核糖核苷酸。(2)PCR扩增产物为DNA，可用琼脂糖凝胶电泳技术鉴定，其原理是不同DNA分子由于大小和构象(电荷)不同，在电场中的泳动速率也不同。引物特异性不强、退火温度过低(引物无法结合到模板链上)、模板DNA污染等都有可能导致目的基因以外的杂带存在，故选ABC。引物一般设计在目的基因上、下游，以便表达一段完整的基因。(3)图中①为限制酶切割目的基因(Bt毒蛋白基因)产生的黏性末端，使用的酶为限制酶。②过程表示将目的基因与质粒重组在一起，为基因表达载体的构建，是基因工程的核心，此过程需要DNA连接酶。结合质粒上Hind Ⅲ和BamHⅠ的切点可知，Bt毒蛋白基因的左边为Hind Ⅲ的识别序列，右边为BamHⅠ的识别序列，因此Hind Ⅲ和BamHⅠ的识别序列分别是5′­AAGCTT 3′、5′­GGATCC­3′。(4)个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定等，因此过程③筛选抗虫能力强的大豆，应从个体水平上检测。 答案　(1)Bt毒蛋白基因两端的核苷酸序列　Hind Ⅲ和BamHⅠ识别核苷酸序列　 使DNA聚合酶能够从引物的3′­端开始连接脱氧核糖核苷酸　(2)DNA分子的大小和构象(电荷)　 琼脂糖凝胶电泳 ABC　上、下游　(3)5′­AAGCTT­3′　5′­GGATCC­3′　限制酶和DNA连接酶　 (4)个体 学科网（北京）股份有限公司 $$ 达标测试卷(十二)　生物技术与工程(一) (本试卷满分100分) 一、选择题(本题共15小题，每小题2分，共30分，每小题只有一个选项符合题目要求) 1.科学家以两周大的整株玉米幼苗的cDNA为模板，设计全长引物进行PCR扩增，然后利用琼脂糖凝胶电泳检测获得了1个目的基因的片段，再将目的基因连接到pMD18­T载体，同时转化大肠杆菌DH5a。下列说法错误的是(　　) A.cDNA是以mRNA为模板通过逆转录的过程合成的 B.pMD18­T载体的化学本质是DNA C.PCR技术需要解旋酶和DNA聚合酶 D.若以大肠杆菌作为受体细胞，需先用Ca2＋处理 2.(2023·日照三模)传统发酵技术是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵，制作食品的技术。通常是家庭式或作坊式的，可以用于腐乳、酱、酱油、醋、泡菜和豆豉等的加工。下列相关叙述正确的是(　　) A.在制作酸奶过程中需先通气培养，后密封发酵 B.传统发酵技术制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵 C.在一段时间内，果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中pH升高 D.泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是产膜乳酸菌繁殖形成的 3.随着人们对微生物认识的加深，无菌技术在食品保存与医疗等各个领域被广泛使用，下列关于无菌技术的叙述，错误的是(　　) A.啤酒的工业化生产过程中，通过焙烤可实现麦芽的无菌化 B.动物细胞培养中常在培养基中添加抗生素以减少污染 C.泡菜制作时盐水表层发现白色菌膜表明出现了杂菌污染 D.湿热灭菌过程中微生物蛋白质空间结构发生了不可逆的改变 4.(2023·秦皇岛二模)精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在甲平板上，培养至菌落不再增加时，平板上的菌落如图所示。过程②是将甲平板中菌落利用影印接种法(一种能达到在一系列培养皿的相同位置上出现相同遗传型菌落的接种方法)接种到乙平板，继续培养相同时间。下列相关叙述错误的是(　　) A.与甲平板中成分相比，乙平板中不含精氨酸 B.菌落A是采用稀释涂布平板法接种后培养得到的 C.菌落B可能是鸟氨酸发酵的优良菌种 D.野生型菌经过紫外线处理后一定能获得精氨酸依赖型菌 5.(2023·苏州三模)为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A.图示采用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法 B.可用干热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌 C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的 D.培养基中的尿素被分解后，可使酚红指示剂变为红色 6.(2023·苏州三模)发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。 下列叙述正确的是(　　) A.菌落的大小、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据 B.筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产 C.单细胞蛋白是从微生物细胞中提取的蛋白质，常用作微生物饲料等 D.在生产酸奶时采用巴氏消毒法，杀死大部分微生物但基本不破坏营养成分 7.(2023·日照三模)长春新碱是存在于夹竹桃长春花属植物体内的一种次级代谢产物，具有高抗肿瘤活性。利用植物细胞培养生产长春新碱的基本过程如下图所示。下列叙述正确的是(　　) →→→→ A.为提高愈伤组织的诱导速率，诱导时应给予适当时间和强度的光照 B.悬浮振荡培养前，需用胰蛋白酶从愈伤组织中分离出具活性的单个细胞 C.植物细胞培养时易发生突变，需筛选出高产突变体才能用来制备生物反应器 D.工厂化生产中可以通过优化pH、温度等条件，提高单个细胞中长春新碱含量 8.我国科学家培育出轰动世界的体细胞克隆猴“中中”和“华华”，如图为其培育流程。下列叙述正确的是(　　) A.过程①是将成纤维细胞注射到去核的卵母细胞中 B.过程②通常需用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离 C.过程③中需要给代孕母猴饲喂一定量的促性腺激素 D.图中过程需用到体外受精、细胞培养、胚胎移植等技术 9.(2023·郴州模拟)为解决杂交瘤细胞在传代培养过程中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞用EBV(一种病毒颗粒)感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷(Oua)敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程，下列相关分析错误的是(　　) A.B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等 B.HAT培养基可去除未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞 C.杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降 D.杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力 10.大鼠早期胚胎可以利用细胞竞争机制“杀死”外来的人类干细胞，从而导致人—鼠嵌合胚胎的嵌合率低下。科学家拟通过以下途径获得具有人类胰腺的幼鼠，下列分析不合理的是(　　) A.iPS细胞的分裂、分化能力可能与图中b区域的细胞相当 B.为获得更多的受精卵，可对雌鼠注射适量的促性腺激素 C.步骤①基因编辑的目的可能是破坏受精卵中与胰腺形成有关的基因 D.图中过程涉及转基因技术、动物细胞培养及核移植、胚胎移植等 11.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是(　　) A.前者培养基中只含有机营养成分，后者培养基中只含无机营养成分 B.动物细胞培养和植物组织培养前都需要将细胞分散开 C.动物细胞培养和植物组织培养都能够产生新个体 D.前者可用于检测有毒物质，后者可用于作物脱除病毒 12.(2023·沧州三模)基因工程中常采用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。某科研小组欲将某抗虫基因导入某植物，下列分析错误的是(　　) A.应该将抗虫基因插入农杆菌Ti质粒的T­DNA片段内 B.可以用农杆菌侵染水稻、玉米等单子叶植物 C.目的基因与Ti质粒的结合未涉及碱基互补配对原则 D.转基因是否成功，最简便的方法是观察该植物有没有抗虫性状 13.(2023·张家口三模)科研人员利用不同算法，可依据蛋白质结构预测其功能。下列有关说法错误的是(　　) A.将未知蛋白质与已知蛋白质的氨基酸序列进行对比分析可以预测蛋白质的功能 B.通过三维结构对比可以判断两个蛋白质是否有相似的功能 C.核苷酸序列发生突变，其编码的蛋白质功能就会发生改变 D.可根据蛋白质结构相似程度判断物种间亲缘关系的远近 14.下列关于生物安全的叙述，正确的是(　　) A.消除生物武器威胁、防止生物武器及其技术和设备扩散是生物安全防控的重要方面 B.生殖性克隆和治疗性克隆都涉及细胞核移植技术，中国政府不接受任何克隆实验 C.只要有证据表明某种转基因产品有害，就应该全面禁止转基因技术的应用 D.“设计试管婴儿”与试管婴儿技术技术流程基本相同，都需要进行特定基因的检测 15.(2023·苏州三模)“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列相关叙述正确的是(　　) A.单倍体育种时，需对F1的花药筛选后再继续进行组织培养 B.制备单克隆抗体时，可利用选择培养基筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞 C.在临床试管婴儿术中，需利用遗传学诊断的方法筛选出所需的胚胎进行移植 D.培育耐盐植株时，必须在获得试管苗后才可用盐水浇灌进行筛选 二、选择题(本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全选对得3分，选对但不全得1分，选错得0分。) 16.利用黑曲霉发酵可获得柠檬酸。发酵时采用精制糖如葡萄糖、蔗糖为原料，能够获得较高产量，但是成本较高。采用淀粉质原料甚至农产品加工废物替代精制糖来生产柠檬酸，可以降低成本。下列叙述正确的是(　　) A.以玉米粉为原料时，一般需经糖化获得精制糖 B.随着发酵的进行，发酵液的pH值会逐渐变小 C.实验室可配制以葡萄糖为唯一碳源的培养基筛选黑曲霉 D.发酵结束后，采用提取、分离和纯化等措施获得柠檬酸 17.(2023·济宁三模)测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红—亚甲蓝琼脂培养基(EMB培养基)上培养→统计菌落数目(在EMB培养基上大肠杆菌菌落呈深紫色)，如图所示。下列叙述错误的是(　　) A.实验用到的滤杯、滤膜、滤瓶和水样都需要提前灭菌 B.EMB培养基属于鉴定性固体培养基 C.应选取菌落数为30～300的平板进行计数 D.滤膜法统计的大肠杆菌数值为活菌数，数值可能偏低 18.(2024·烟台模拟)如图所示为治疗性克隆的基本过程，首先取病人的体细胞核，移植到去核的卵母细胞中，在早期胚胎形成后，从中分离获得胚胎干细胞(ES细胞)，对ES细胞进行基因修饰和定向分化处理，将定向分化后的细胞移植给病人，从而达到治疗疾病的目的。下列相关叙述正确的是(　　) A.接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期 B.获得图中去核的卵母细胞时，可通过显微操作去核 C.图中形成的器官用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应 D.治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术和胚胎移植技术 19.红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列有关叙述正确的是(　　) A.构建表达载体时需将EPO基因插入乳腺蛋白基因的启动子的下游 B.一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达 C.用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中可合成并提取EPO D.用PCR扩增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核苷酸序列 20.为增加油菜种子含油量，科研人员尝试将酶D基因(图甲左)与叶绿体转运肽(引导合成的蛋白质进入叶绿体)基因(图甲右)连接，构建融合基因后导入Ti质粒(图乙)，最终获得转基因油菜品种，下列叙述正确的是(　　) 　 甲　　　　　　　　　　　　　　乙　　　　 A.用ClaⅠ切割酶D基因和转运肽基因所在片段，再利用DNA连接酶连接获得融合基因 B.用Xba Ⅰ和Sac Ⅰ同时切割融合基因所在片段和载体片段，连接后获得重组Ti质粒 C.将油菜细胞接种在含卡那霉素的固体培养基上筛选成功导入融合基因的细胞 D.转基因油菜的酶D基因只表达于含叶绿体的细胞，并在叶绿体内转录、翻译 三、非选择题(本题共5小题，共55分) 21.(12分)(2023·潍坊模拟)扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一，其次级代谢产物棒曲霉素(Pat)是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，研究人员进行了如图所示的实验，其中“病健交界处”为腐烂部位(病斑)与未腐烂部位的交界处。 (1)活化扩展青菌种使用的培养基成分如表所示，其中NaNO3的作用有______________。接种至苹果前用该培养基培养的目的是________________。 蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCl FeSO4 KH2PO4 蒸馏水 30 g 2 g 0.5 g 0.5 g 0.01 g 1 g 1 000 mL (2)取10 mL活化的菌液加入90 mL无菌水进行梯度稀释，取0.1 mL稀释液涂布于培养基上。104倍稀释对应的三个平板菌落数量分别为32、40和36，每毫升菌液中扩展青霉的数量为________个，实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，其原因是________________________________。 (3)研究人员测定病斑直径为1、2、3 cm的苹果中①～⑤号部位的Pat 含量，结果如图。 ①由图可知实验结论为____________________________________________________________。 ②去除腐烂部位后的苹果是否建议食用？请结合图中信息分析________________________________________________________________________。 22.(10分)(2023·临沂模拟)依据已知肿瘤发生中涉及的异常分子和基因，设计针对这些特定分子和基因靶点的药物，选择性杀伤肿瘤细胞。这种治疗方法称为肿瘤药物的分子靶向治疗。近年来兴起的肿瘤分子靶向治疗药物——单克隆抗体，在临床上治疗肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤中发挥着举足轻重的作用。 (1)如图表示细胞表面的转铁蛋白受体(TfR)与转铁蛋白(Tf)结合，将Fe元素运输至细胞内的过程。肿瘤细胞快速增殖时需要更多的铁元素，因此肿瘤细胞表面TfR表达量________(填“上升”或“下降”)。利用单克隆抗体技术研制相应的抗TfR抗体抑制肿瘤细胞增殖的作用机制是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)在制备抗TfR抗体时，将免疫接种过TfR的小鼠的B细胞与________融合，继而筛选出________________________的杂交瘤细胞。 (3)将抗TfR抗体与人的癌细胞混合后培养，发现该抗体对人的癌细胞增殖无显著影响，可能原因是该抗体与TfR结合后同样会被细胞内吞，最终抗TfR抗体被水解，TfR仍会返回到细胞膜表面，保持肿瘤细胞对Fe元素的正常摄取。为验证该假说成立，请简要写出实验设计思路(提示：可用荧光素标记抗体)：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 23.(9分)(2023·郑州模拟)应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品，是生物科学技术转化为生产力的重要体现。请据图回答下列问题： (1)获得转生长激素基因牛的核心步骤是________，过程①需要的工具酶是________________________________________________________________________， 人生长激素基因的首端必须有启动子，其作用是_______________________________________。 过程②常采用的方法是__________________________________________________________。 (2)如欲得到基因型相同的两头牛犊，可在________阶段，采用________技术达到此目的。 (3)将prG导入浆细胞制备单克隆抗体的过程，Ⅲ代表的细胞具有____________________的特点，具有此类功能的细胞还可以通过______________(技术)方法获得。 (4)过程④常用的方法是________，简述⑤的培养流程___________________________________。 24.(12分)科研人员采用CRISPR/Cas9基因编辑技术，探究敲除SIMAPK4基因对番茄果实抗冻性的影响。CRISPR/Cas9基因编辑技术可实现对基因组特定位点的靶向编辑(工作原理如图所示)，其中Cas9蛋白由Cas9基因指导合成sgRNA是单链RNA。请回答下列问题： (1)据图分析，CRISPR/Cas9基因编辑技术可实现靶向编辑的原因是_______________________ ________________________________________________________________________。 但该技术有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”，实验发现sgRNA的序列长短影响成功率，越短脱靶率越________(填“高”或“低”)。 (2)Cas9蛋白在功能上属于________酶，切割的是DNA中的________键。番茄细胞中不具有Cas9蛋白和sgRNA及相关基因。在敲除SIMAPK4基因前，科研人员需要构建SIMAPK4基因编辑载体，从而合成Cas9蛋白和sgRNA，构建好的SIMAPK4基因编辑载体需要满足的条件：________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________(答出两点即可)。 (3)构建好的基因编辑载体进入番茄细胞常用的方法有________________________________ (答出一点即可)。已知SIMAPK4基因编辑载体上有潮霉素抗性基因(HPT)，且野生植株不含有HPT基因。请写出通过PCR技术筛选SIMAPK4基因被敲除的番茄的实验思路：________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 25.(12分)(2023·扬州三模)某科研人员从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因，并将其导入大豆叶肉细胞，培育出抗虫的转基因大豆，主要过程如下图。请回答下列问题： (1)为了正确扩增Bt毒蛋白基因，并能与图中质粒正确连接，需根据________________________、________________________设计两种引物。PCR时引物的作用是_____________________________ ________________________________________________________________________。 (2)PCR扩增产物可根据________不同，可以用________技术鉴定。结果发现有目的基因以外的杂带存在，分析可能的原因有________。解决方案一般是在目的基因的________(填“内部”或“上、下游”)重新设计引物进行PCR。 A.引物特异性不强　 B.退火温度过低 C.模板DNA污染 D.引物碱基序列过长 (3)图中①为请写出Hind Ⅲ和BamH Ⅰ的识别序列分别是________、________。①②过程所需要用到的酶有________。 (4)过程③筛选抗虫能力强的大豆，应从________水平上检测。 学科网（北京）股份有限公司 $$