精品解析：宁夏回族自治区石嘴山市惠农区石嘴山市第一中学2024-2025学年高三上学期开学生物试题

石嘴山市第一中学2024-2025学年第一学期高三开学考试 生物学试题 一、单选题 1. 高压蒸汽、酒精擦拭、火焰灼烧三种处理方法分别适用于哪些材料（或用具）的杀菌处理（　　） A. 接种环、培养基、超净工作台 B. 接种环、操作者的双手、培养基 C. 培养基、操作者的双手、接种环 D. 接种环、超净工作台、培养基 2. 下列有关倒平板操作的叙述，错误的是（　　） A. 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B. 使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C. 将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上 D. 等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置 3. 稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。以下相关表达错误的选项是（ ） A. 操作中需要将菌液进展一系列的浓度梯度稀释 B. 需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基外表面 C. 不同浓度的菌液均可在培养基外表形成单个的菌落 D. 操作过程中对培养基和涂布器等均需进展严格灭菌处理 4. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上 C. 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时 D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 5. 将接种后的培养基和一个未接种的培养皿都放入37℃恒温箱的目的是 （ ） A. 对比观察培养基有没有被微生物利用 B. 对比分析培养基上是否生有杂菌 C. 没必要放入未接种的培养基 D. 为了下次接种时再使用 6. 某同学设计了如图所示的发酵装置来制作果酒、果醋，下列有关叙述错误的是 A. 甲用来制作果酒，乙用来制作果醋 B. 乙装置需要的温度条件高于甲 C. 该装置便于发酵中产生气体的排出 D. 甲、乙装置排液管排出液体的pH都下降 7. 将土壤稀释液涂布于选择培养基上，若要判断选择培养基是否起到了选择作用，还需要设置的对照是（ ） A. 未接种的选择培养基 B. 未接种牛肉膏蛋白胨培养基 C. 相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D. 相同条件下接种了的选择培养基 8. 下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径，研究发现经②过程获得的幼苗脱毒效果更好。下列叙述不正确的是（ ） A. 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同 B. ②过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活 C. 过程③、④所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同 D. 上图中脱毒苗的培育过程体现了植物细胞的全能性 9. 胃癌是我国发病率很高的一种恶性疾病，制备抑制癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体的制备过程如图所示，以下说法正确的是（ ） A. 甲细胞只能产生一种抗体 B. 乙所代表的细胞中包括5种融合类型的细胞 C. 在筛选过程中，对丙细胞进行最终筛选的指标是细胞能迅速繁殖 D. 抗胃癌单克隆抗体的制备利用的生物技术有动物细胞融合和动物细胞培养 10. 目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力制备转基因动物方法之一。该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。如图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列相关说法正确的是（ ） A. 经过过程①获得的精子可以直接和卵细胞发生受精作用 B. 为了获得更多的早期胚胎，常用性激素对供体进行处理，从而获得更多的卵母细胞 C. 过程③的培养液中加入各种无机盐、有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸、激素即可 D. 为了提高转化率，必须将外源基因导入精子的头部才有可能使外源基因进入受精卵 11. 下图是研究人员利用生物工程技术培育能产生人生长激素的转基因牛的过程。下列叙述正确的是（ ） 人的生长激素基因重组DNA受精卵转基因牛 A. ①过程需要的工具有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体 B. 接受了重组DNA的受精卵可直接移植到代孕母牛的子宫 C. 若在②过程中培养到囊胚阶段，对胚胎进行酶处理，可培育出多头相同的转基因牛 D. 胚胎干细胞具有全能性，故受体细胞可用胚胎干细胞代替受精卵 12. 下图为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图下列叙述正确的是（ ） A. 过程①所用的人β-酪蛋白基因不可以从人cDNA文库中获得 B. 过程②可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植 C. 过程③可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体 D. 过程④人β-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译 13. 下列关于蛋白质工程实施叙述，不正确的是（ ） A. 可以根据人类的需要，设计并制造出自然界不存在的全新蛋白质 B. 可以根据功能的需要替代蛋白质中的某一个肽段或一个特定的结构区域 C. 可以通过基因工程间接地改造蛋白质中特定的一个或几个氨基酸 D. 可以通过人工化学合成的方法直接对蛋白质的氨基酸进行改造 14. 利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是( ) A. 过程①所需的逆转录酶可取自于抗农药马拉硫磷小菜蛾的任一细胞 B. 过程②利用 PCR 技术扩增目的基因需使用耐高温的解旋酶和引物对 C. 过程③常用 Ca2+处理大肠杆菌使其成为易于吸收 DNA 的感受态细胞 D. 过程④可利用抗原一抗体杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞 15. 下列关于生物工程的叙述，错误的是（ ） A. 可利用植物组织培养技术实现紫草素的工厂化生产 B. 由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生基因突变 C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交所依据的原理相同，都能形成杂种个体 D. 试管动物技术可以充分发挥优良动物的繁殖潜力 16. 下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（ ） A. 在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射大量的促性腺激素，促进排卵 B. 从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养获能处理后才能用于受精 C. 受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵 D. 设计试管婴儿技术，有利于生育健康的下一代，不会造成社会危害 17. 寨卡病毒是一种RNA病毒，该病毒会攻击胎儿的神经元，导致新生儿小头症等缺陷。一种新型寨卡病毒疫苗（基因疫苗）已经进入人体临床试验阶段。科学家将寨卡病毒蛋白基因与质粒结合后注入人的肌肉细胞，以期被试验者获得对寨卡病毒特异性免疫的能力。下列有关叙述不正确的是 A. 新型疫苗制备过程需使用逆转录酶 B. 基因疫苗不含病毒蛋白，但能在肌肉细胞中表达出病毒蛋白，病毒蛋白属于抗原 C. 基因疫苗能够整合到人的肌肉细胞染色体DNA中，并遗传给后代 D. 试验者获得特异性免疫能力的标志是产生特异性抗体和效应T细胞等 18. 下列有关细胞工程的叙述正确的是（ ） A. 在植物细胞工程中通常用CaCl2处理植物细胞，以增大细胞壁的通透性 B. 用以治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体作抗癌药物定向杀死癌细胞 C. 用聚乙二醇处理大量混合在一起的两种植物细胞的原生质体，所获得的融合细胞都具有双亲的遗传特性 D. 将某一种效应B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后培养，获得特异性强的单克隆抗体，但当相应抗原位于靶细胞内时，该抗体不能与之发生特异性结合 19. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图2所示情况。下列选项正确的是（　　） A. 过程①②合称为稀释涂布平板法 B. 甲乙试管中的液体均为选择培养基 C. Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法 D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种 20. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，其获得途径如下图所示。下列叙述正确的是 A. 图中愈伤组织、脱毒苗和高产细胞系的获得都体现了植物细胞的全能性 B. 图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化和再分化过程 C. ②过程中需用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理 D. 用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是纤维素酶和果胶酶 21. 下列关于克隆技术的叙述中，错误的是（ ） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B 去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交后代与两品种杂交后代的染色体数目相同 22. 下图是制备单克隆抗体流程的简明示意图。下列有关叙述错误的是（ ） A. ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B. ④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 C. ②中使用活性较强的病毒有利于杂交瘤细胞的形成 D. ③同时具有巨噬细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 23. 超氧化物歧化酶（SOD）是一种源于生命体的活性物质，在生活实践中有非常重要的应用价值。下图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述正确的是 A. ①过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞 B. ②、③分别表示脱分化、再分化，两个过程不需要无菌操作也可完成 C. SOD催化O2形成H2O2的机制是为该反应提供活化能 D. 该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性 24. 豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并定期取样观测发酵效果。以下推测不合理的是 A. 该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量 B. 大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味 C. 若容器内上层大豆发酵效果优于底层，则发酵菌为厌氧菌 D. 煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质 25. 下列关于发酵工程基本环节的叙述，错误的是（ ） A. 在发酵过程中，随时检测微生物数量，产物浓度，严格控制温度，PH溶解氧就可以马上获得大量发酵产品 B. 将菌种接入发酵罐之前，需要对菌种进行扩大培养 C. 在生产实践中，培养基的成分需要经过反复实验才能确定 D. 如果发酵产物是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤，沉淀等方法获得产物 26. 蓝藻拟核DNA上有控制叶绿素合成的ch1L基因。某科学家通过构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞，以研究ch1L基因对叶绿素合成的控制，技术路线如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. ①②过程应使用不同的限制性内切酶 B. ①②过程都要使用DNA连接酶 C. 终止密码子是基因表达载体的重要组成部分 D. 若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株 27. 据第三次全国大熊猫野外种群调查，全世界野生大熊猫不足1600只，为保护和繁殖大熊猫，科研人员进行了如图实验，相关叙述错误的是（ ） A. 克隆熊猫培育成功的部分原因是卵细胞质具有调控细胞核发育的作用 B. 图中用性激素处理可使供体超数排卵，从而可培育更多的早期胚胎 C. 图中进行胚胎移植的胚胎是原肠胚 D. 对早期胚胎进行胚胎分割产生同卵多仔，同卵多仔的表现型一定相同 28. “三亲婴儿”的培育过程的技术流程如图，下列相关叙述错误的是（　　） A. 该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植等技术 B. 该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 C. 卵母细胞捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿” D. “三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因 29. 上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛，他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药用蛋白含量多达30多倍，以下与此有关的叙述，错误的是（ ） A. 转基因动物是指体细胞中出现了新基因的动物 B. 提高基因表达水平是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 C. 只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中是纯合的 D. 转基因牛的肌肉细胞中没有人白蛋白基因，故不合成人白蛋白 30. 甲、乙、丙、丁四个生物兴趣小组分别按如下流程进行科学探究活动∶ 甲∶挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒 乙∶植物组织→形成愈伤组织→长出丛芽→生根→试管苗 丙∶让豆腐长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制→获得腐乳 丁∶剪碎动物组织→胰蛋白酶处理→细胞悬液→原代培养→传代培养 据此分析错误的是（ ） A. 甲组在发酵时打开排气口的间隔时间可逐渐延长 B. 乙组形成的愈伤组织加上人工种皮可以制成人工种子 C. 丙组所加卤汤中酒精的含量一般为12%左右 D. 丁组由原代培养到传代培养时还需用胰蛋白酶处理 二、非选择题 31. 中国科学院上海神经科学研究所仇子龙研究员等通过构建携带人类自闭症基因MECP2的转基因猴模型及对MECP2转基因猴进行分子遗传学与行为学分析，发现MECP2转基因猴表现出类似人类自闭症的刻板行为与社交障碍等行为。在该研究中，研究人员先通过精巢异种移植，将幼年食蟹猴的精巢移植到裸鼠的背部，实现了食蟹猴精巢提早成熟，从中获得精子，让其完成受精作用，并进一步培养，操作过程如图，从而获得了携带人类自闭症基因MECP2的转基因猴（Z症食蟹猴）。该工作加速了食蟹猴的精子生成速度，缩短了食蟹猴的繁殖周期，对于推动非人灵长类动物模型的应用具有重大意义。回答下列问题： （1）图中将精子注入____________细胞。 （2）丙表示的过程是____________。 （3）上述获得的Z症食蟹猴，可通过体细胞核移植技术进一步得到克隆Z症食蟹猴。该技术的原理是___________。所得到的克隆Z症食蟹猴的性状表现为________________。 32. 含有pRiA4质粒的发根农杆菌能诱导植物体长出发根，特别适合规模化生产从根中提取的物质如丹参酮，为了探究MYB98基因（丹参酮合成调控基因）对产量的影响，研究人员进行如下操作： （1）上图所示的“重组”步骤中，目的基因应选择 。 A. 丹参酮合成基因 B. 链霉素抗性基因 C. 潮霉素抗性基因 D. MYB98基因 （2）要确定图中的“导入”是否成功，培养一段时间后将含发根农杆菌的菌液稀释后接种于添加了_______的固体培养基上，也可借助_______________技术检测转录的产物。 （3）在“感染”步骤中，含有目的基因的发根农杆菌侵染经________“消毒”或“灭菌”）处理的丹参叶片细胞，目的基因整合到叶片细胞的________________中。 （4）图中的目的基因在丹参的_______细胞中进行表达，该转基因即获得了成功。丹参酮具有抑菌消炎等功能，其作为丹参的___________（“初生代谢物”或“次生代谢物”），并非丹参生命活动必需的物质。 （5）取丹参植株叶片组织，用酶解法得到大量单个细胞进行植物组织培养，该过程_______（“需要”或“不需要”或“不确定”）经历愈伤组织阶段。 33. 滁菊为菊科多年生草本植物： Ⅰ.为探究滁菊愈伤组织的培养条件，1号研究小组配制了含有两种浓度的2，4-D的培养基，然后接种初始重量相同的幼苗子叶切块并分别培养在光照及黑暗条件下，一段时间后，测量愈伤组织的生长量，结果如下图。 （1）在该实验中，自变量是______________________。进行植物组织培养的实验，要严格控制杂菌污染的原因是__________________。 （2）由图中实验数据分析，在培养基中添加2，4-D的作用是______________。 （3）为大量获得该植物的愈伤组织，适宜采取_______（填“黑暗”或“光照”）培养。 （4）光照在培养过程中不作为愈伤组织的能量来源，原因是___________________。 Ⅱ.滁菊长期营养繁殖易造成病毒积累，导致滁菊花色劣变。2号研究小组比较了3种脱毒方法对滁菊体内菊花B病毒（CVB）和菊花矮化类病毒（CSVd）脱除的效果，结果见下表；下图是对不同试管苗进行RT-PCR（逆转录PCR）后的电泳示意图（引物根据CVB的基因序列设计），根据下图表回答问题： 不同脱毒方法对“滁菊”茎尖脱毒率的影响 脱毒方法 样本数 脱除CSVd率 脱除CVB率 脱除（CSVd＋CVB）率 茎尖分生组织培养 77 20.78 44.16 16.88 热处理结合茎尖培养 71 36.62 63.38 35.21 病毒唑结合茎尖培养 71 46.48 49.30 36.62 （5）试管苗_____号已成功脱去CVB病毒。 （6）只脱除CSVd病毒时，可选择________结合茎尖分生组织培养，效果相对更好。 （7）热处理和病毒唑处理对试管苗同时脱去两种病毒的脱毒率____（有或无）显著作用，两者之间比较作用效果____（有或无）明显差异。 34. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。 （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有1L土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL样液至盛有9mL无菌水试管中，依次稀释103稀释度。各取0．1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为________ 。 （2）接种技术的核心是__________，________是研究和应用微生物的前提。只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是_____________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。 （3）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是________，有透明带菌落利用的氮源主要是________，据此可筛选出目的菌。实验结果如图显示的A～E五种菌株中，________是最理想菌株。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 石嘴山市第一中学2024-2025学年第一学期高三开学考试 生物学试题 一、单选题 1. 高压蒸汽、酒精擦拭、火焰灼烧三种处理方法分别适用于哪些材料（或用具）的杀菌处理（　　） A. 接种环、培养基、超净工作台 B. 接种环、操作者的双手、培养基 C. 培养基、操作者的双手、接种环 D. 接种环、超净工作台、培养基 【答案】C 【解析】 【分析】1、无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 2、实验室常用的消毒方法有煮沸消毒；化学药物消毒；紫外线消毒。 3、实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌，②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌）③高压蒸汽灭菌：如培养基的灭菌。 【详解】A、接种环一般采用灼烧灭菌，培养基一般采用高压蒸汽灭菌，超净工作台需要利用紫外线灭菌，A错误； B、接种环一般采用灼烧灭菌，实验操作者的双手一般用酒精消毒，培养基一般采用高压蒸汽灭菌，B错误； C、培养基一般采用高压蒸汽灭菌，实验操作者的双手一般用酒精消毒，接种环一般采用灼烧灭菌，C正确； D、接种环一般采用灼烧灭菌，超净工作台需要利用紫外线灭菌，培养基一般采用高压蒸汽灭菌，D错误。 故选C。 2. 下列有关倒平板操作的叙述，错误的是（　　） A. 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B. 使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C. 将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上 D. 等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置 【答案】C 【解析】 【分析】倒平板操作的步骤： （1）将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞； （2）右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰； （3）用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖； （4）等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。 【详解】A、整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁，A正确； B、打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰，防止杂菌污染，B正确； C、培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能将培养皿盖完全打开，C错误； D、等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置，防止皿盖上的水珠滴入培养基造成污染，D正确。 故选C。 3. 稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。以下相关表达错误的选项是（ ） A. 操作中需要将菌液进展一系列的浓度梯度稀释 B. 需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基外表面 C. 不同浓度的菌液均可在培养基外表形成单个的菌落 D. 操作过程中对培养基和涂布器等均需进展严格灭菌处理 【答案】C 【解析】 【分析】稀释涂布法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 【详解】;A、稀释涂布平板法，包括系列稀释和涂布平板两个过程，涂布平板之前需要将菌液进行系列的浓度梯度稀释，A正确； B、涂布平板时，需要将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面，才能看到菌落，B正确； C、在不同稀释度的菌液接种后，只有在一定的稀释度的菌液里聚集在一起的微生物才能分散成单个细胞，从而能够在培养基表面形成单个菌落，如果稀释度过低，将不会形成单个菌落，如果稀释度过高，可能没有菌落生成，C错误； D、操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理，以防止杂菌污染，D正确。 故选C。 4. 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上 C. 将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时 D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 【答案】D 【解析】 【详解】检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30-300的一组平板为代表进行计数。所以D不对。 5. 将接种后的培养基和一个未接种的培养皿都放入37℃恒温箱的目的是 （ ） A. 对比观察培养基有没有被微生物利用 B. 对比分析培养基上是否生有杂菌 C. 没必要放入未接种的培养基 D. 为了下次接种时再使用 【答案】B 【解析】 【分析】通过实验验证培养基是否被污染，分析实验设计的思路应是把不接种任何菌种的培养基放在恒温箱中培养，一段时间后若有菌落说明培养基被污染，若无菌落说明培养基没有被污染，然后根据选项分析判断。 【详解】将接种后的培养基和未接种的培养基同时放入37℃恒温箱，目的是作为空白对照，判断培养基是否被污染．一段时间后若未接种的培养基有菌落说明培养基被污染，则培养基不能使用，若无菌落说明培养基没有被污染，可以使用，故选B。 【点睛】本题的知识点是对培养基灭菌是否彻底或培养基是否被污染的判断，主要考查学生实验设计的能力和运用微生物知识解决问题的能力。 6. 某同学设计了如图所示的发酵装置来制作果酒、果醋，下列有关叙述错误的是 A. 甲用来制作果酒，乙用来制作果醋 B. 乙装置需要的温度条件高于甲 C. 该装置便于发酵中产生气体的排出 D. 甲、乙装置排液管排出液体的pH都下降 【答案】C 【解析】 【详解】试题分析：甲装置密封可用来制作果酒，乙装置通气可用来制作果醋，A正确；乙装置需要的温度条件为30-35℃，高于甲的18-25℃，B正确；该装置便于发酵液的连续发酵，但不利于产生CO2气体的排出，C错误；甲装置产生CO2、乙装置产生醋酸都会导致排液管排出液体的pH下降，D正确。 考点：本题考查果酒与果醋的制作，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。 7. 将土壤稀释液涂布于选择培养基上，若要判断选择培养基是否起到了选择作用，还需要设置的对照是（ ） A. 未接种选择培养基 B. 未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C. 相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D. 相同条件下接种了的选择培养基 【答案】C 【解析】 【分析】对照实验是指除所控因素外其他条件对与被对照组实验完全对等的实验，判断选择培养基是否起到选择作用，则接种了的选择培养基为实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基为对照组。 【详解】对照实验是指除所控因素外其他条件对与被对照组实验完全对等的实验，判断选择培养基是否起到选择作用，则接种了的选择培养基为实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基为对照组，将菌液稀释相同的倍数，在相同培养条件下，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目。因此，应设置相同条件下接种了的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，C正确， 故选C。 8. 下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径，研究发现经②过程获得的幼苗脱毒效果更好。下列叙述不正确的是（ ） A. 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同 B. ②过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活 C. 过程③、④所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同 D. 上图中脱毒苗的培育过程体现了植物细胞的全能性 【答案】A 【解析】 【详解】植物的茎尖或根尖不带病毒或病毒极少，其他部位带的病毒很多，带叶原基的芽是茎尖，A项符合题意；②过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活，B项不符合题意；③是脱分化、④是再分化，两个过程所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同，C项不符合题意；细胞的全能性是已经分化的细胞发育成完整个体的潜能。图示过程是离体的带叶原基的芽脱分化形成愈伤组织，再分化形成幼苗，体现了植物细胞的全能性，D项不符合题意。 【名师点睛】解答本题的关键有：一是看懂图、二是能利用植物组织培养的原理和条件的有关知识解题。 9. 胃癌是我国发病率很高的一种恶性疾病，制备抑制癌细胞增殖的单克隆抗体对治疗胃癌具有重要意义。抗胃癌单克隆抗体的制备过程如图所示，以下说法正确的是（ ） A. 甲细胞只能产生一种抗体 B. 乙所代表的细胞中包括5种融合类型的细胞 C. 在筛选过程中，对丙细胞进行最终筛选的指标是细胞能迅速繁殖 D. 抗胃癌单克隆抗体的制备利用的生物技术有动物细胞融合和动物细胞培养 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。图中甲是效应B细胞；乙是融合后培养基中存在各种细胞，包括杂交瘤细胞；丙是经过筛选后可以产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【详解】A、甲是效应B细胞，可能不止一种，因此可能会产生多种抗体，A错误； B、乙所代表的细胞中包括3种融合类型的细胞，B错误； C、在筛选过程中，对丙细胞进行最终筛选的指标是细胞能无限增殖又能产生特定的抗体，C错误； D、抗胃癌单克隆抗体的制备利用的生物技术有动物细胞融合和动物细胞培养，D正确。 故选D。 10. 目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一。该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。如图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列相关说法正确的是（ ） A. 经过过程①获得的精子可以直接和卵细胞发生受精作用 B. 为了获得更多的早期胚胎，常用性激素对供体进行处理，从而获得更多的卵母细胞 C. 过程③的培养液中加入各种无机盐、有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸、激素即可 D. 为了提高转化率，必须将外源基因导入精子的头部才有可能使外源基因进入受精卵 【答案】D 【解析】 【分析】本题结合图解，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的细节问题；识记动物细胞培养的过程、条件等知识，能结合所学的知识准确答题。 分析题图：图示首先通过转基因技术将目的基因导入到成熟精子的染色体中，再通过体外受精作用将目的基因移入到受精卵中，再通过早期胚胎培养和胚胎移植，最终获得转基因鼠。因此①是转化目的基因进入精子的染色体上，②是体外受精，③是早期胚胎培养，④是胚胎移植。 【详解】A、精子必须获能才可以与卵细胞发生受精作用，A错误； B、促进雌性动物产卵常用促性腺激素处理，以获得更多的卵母细胞，B错误； C、过程③为早期的胚胎培养，培养液中除加入各种无机盐、有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸、激素等，还要添加血清等物质，C错误； D、精子与卵细胞受精时，精子的头部进入卵细胞中，并释放其细胞核进入卵细胞，但细胞质未进入，所以为了提高转化率，必须将外源基因整合到精子头部的染色体中，才可以使外源基因进入受精卵中，D正确。 故选D。 11. 下图是研究人员利用生物工程技术培育能产生人生长激素的转基因牛的过程。下列叙述正确的是（ ） 人的生长激素基因重组DNA受精卵转基因牛 A. ①过程需要的工具有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体 B. 接受了重组DNA的受精卵可直接移植到代孕母牛的子宫 C. 若在②过程中培养到囊胚阶段，对胚胎进行酶处理，可培育出多头相同的转基因牛 D. 胚胎干细胞具有全能性，故受体细胞可用胚胎干细胞代替受精卵 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传，表达出新产物或新性状。据图分析可知：①表示基因表达载体构建，②表是胚胎发育和胚后发育过程。 【详解】A、①过程表示基因表达载体的构建，需限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体，A正确； B、接受了重组DNA的受精卵需要在体外培养至桑葚胚或者囊胚阶段，再移植到代孕母牛的子宫，B错误； C、若在②过程中培养到囊胚阶段，对胚胎进行胚胎分割处理，可培育出多头相同的转基因牛，C错误； D、胚胎干细胞具有发育的全能性，能够形成所需的各种组织和器官，但是一般不易形成个体，因此不能用胚胎干细胞代替受精卵，D错误。 故选A。 12. 下图为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图下列叙述正确的是（ ） A. 过程①所用的人β-酪蛋白基因不可以从人cDNA文库中获得 B. 过程②可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植 C. 过程③可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体 D. 过程④人β-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译 【答案】C 【解析】 【分析】据题意和图示分析可知：①过程表示基因表达载体的构建，②表示胚胎移植，③表示胚胎分割移植，④表示人β-酪蛋白基因表达。 【详解】A、由图可知，①过程表示基因表达载体的构建，获取目的基因（人β-酪蛋白基因）的方法之一就是从人cDNA文库中获取，A错误； B、过程②为胚胎移植，山羊的胚胎移植应选用桑椹胚（桑葚胚）或囊胚期的胚胎进行移植，B错误； C、③表示胚胎分割移植，胚胎分割技术可以得到多个遗传性状相同个体，在③过程中可以应用，C正确； D、④表示人β-酪蛋白基因表达，包括转录和翻译两个过程，对于真核生物而言，转录主要发生在细胞核中，翻译过程发生在细胞质中，D错误。 故选C。 13. 下列关于蛋白质工程实施的叙述，不正确的是（ ） A. 可以根据人类的需要，设计并制造出自然界不存在的全新蛋白质 B. 可以根据功能的需要替代蛋白质中的某一个肽段或一个特定的结构区域 C. 可以通过基因工程间接地改造蛋白质中特定的一个或几个氨基酸 D. 可以通过人工化学合成的方法直接对蛋白质的氨基酸进行改造 【答案】D 【解析】 【分析】蛋白质工程是以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 【详解】A. 蛋白质工程是在原有蛋白质的基础上，根据人们的需求对蛋白质分子作出的定向的改造，可以设计并制造出自然界不存在的全新蛋白质，A正确； B. 蛋白质工程可以根据功能的需要替代蛋白质中的某一个肽段或一个特定的结构区域，B正确； C. 蛋白质工程较小的改造是改造蛋白质分子中某些活性部位的1个或几个氨基酸残基通过定点诱变技术，以获得人类所需要的目的蛋白质，C正确； D. 蛋白质工程不能通过人工化学合成的方法直接对蛋白质的氨基酸进行改造，D错误。 14. 利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是( ) A. 过程①所需的逆转录酶可取自于抗农药马拉硫磷小菜蛾的任一细胞 B. 过程②利用 PCR 技术扩增目的基因需使用耐高温的解旋酶和引物对 C. 过程③常用 Ca2+处理大肠杆菌使其成为易于吸收 DNA 的感受态细胞 D. 过程④可利用抗原一抗体杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞 【答案】C 【解析】 【分析】分析题图：图中过程①表示通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。 【详解】A、过程① 表示通过反转录法合成目的基因，该过程需要逆转录酶，但逆转录酶不是抗农药马拉硫磷小菜蛾提供的，A错误； B、过程② 表示利用PCR技术对目的基因进行扩增，该过程中解旋是通过高温解链实现的，不需要利用解旋酶，B错误； C、过程③ 常用Ca2+处理大肠杆菌使其成为易于吸收DNA的感受态细胞，C正确； D、过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞，D错误。 故选C。 【考点定位】基因工程的原理及技术 15. 下列关于生物工程的叙述，错误的是（ ） A. 可利用植物组织培养技术实现紫草素的工厂化生产 B. 由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生基因突变 C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交所依据的原理相同，都能形成杂种个体 D. 试管动物技术可以充分发挥优良动物的繁殖潜力 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。“试管动物”与“试管婴儿”一样，是将哺乳动物的卵子和精子，在体外条件下完成受精过程，并培养成胚胎，移植入雌性动物生殖道内而获得后代。 【详解】A、可利用植物组织培养技术获得愈伤组织，实现紫草素的工厂化生产，A正确； B、由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生基因突变，B正确； C、动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均不完全相同，动物细胞融合不能形成杂种个体，而植物细胞融合能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，C错误； D、试管动物技术是进行体外受精，可以充分发挥优良动物的繁殖潜力，D正确。 故选C。 16. 下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（ ） A. 在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射大量的促性腺激素，促进排卵 B. 从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养获能处理后才能用于受精 C. 受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵 D. 设计试管婴儿技术，有利于生育健康的下一代，不会造成社会危害 【答案】C 【解析】 【分析】卵母细胞的采集和培养 对于实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等，采用的主要方法是：用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精；对于大家畜或大型动物，如牛，采用的主要方法是：从屠宰场已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞，或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。 【详解】A、在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A错误； B、从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误； C、受精过程中，卵母细胞会发生透明带反应和卵细胞膜反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确； D、以治疗为目的的设计试管婴儿技术，是救治患者最好、最快捷的办法之一，不是有利于生育健康的下一代，并存在伦理问题，D错误。 故选C。 17. 寨卡病毒是一种RNA病毒，该病毒会攻击胎儿的神经元，导致新生儿小头症等缺陷。一种新型寨卡病毒疫苗（基因疫苗）已经进入人体临床试验阶段。科学家将寨卡病毒蛋白基因与质粒结合后注入人的肌肉细胞，以期被试验者获得对寨卡病毒特异性免疫的能力。下列有关叙述不正确的是 A. 新型疫苗制备过程需使用逆转录酶 B. 基因疫苗不含病毒蛋白，但能在肌肉细胞中表达出病毒蛋白，病毒蛋白属于抗原 C. 基因疫苗能够整合到人的肌肉细胞染色体DNA中，并遗传给后代 D. 试验者获得特异性免疫能力的标志是产生特异性抗体和效应T细胞等 【答案】C 【解析】 【分析】1、体液免疫过程为：（1）感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；（2）反应阶段：B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；（3）效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应。 2、细胞免疫过程为：（1）感应阶段：吞噬细胞摄取和处理抗原，并暴露出其抗原决定簇，然后将抗原呈递给T细胞；（2）反应阶段：T细胞接受抗原刺激后增殖、分化形成记忆细胞和效应T细胞，同时T细胞能合成并分泌淋巴因子，增强免疫功能；（3）效应阶段：效应T细胞发挥效应。 【详解】A. 根据题干，寨卡病毒是一种RNA病毒，新型寨卡病毒疫苗属于基因疫苗，应以RNA为模板合成DNA，故新型疫苗制备过程需使用逆转录酶，A正确；B.基因疫苗是将寨卡病毒蛋白基因与质粒结合后注入人的肌肉细胞，不含病毒蛋白，但卡病毒蛋白基因能在肌肉细胞中表达出病毒蛋白，病毒蛋白属于抗原，B正确；C.基因疫苗能够整合到人的肌肉细胞染色体DNA中，人的原始生殖细胞的遗传物质并未改变，不能通过有性生殖遗传给后代，C错误；D. 特异性免疫在接受特定的抗原刺激之后能产生特定的抗体和效应T细胞，故试验者获得特异性免疫能力的标志是产生特异性抗体和效应T细胞等，D正确。故选C。 18. 下列有关细胞工程的叙述正确的是（ ） A. 在植物细胞工程中通常用CaCl2处理植物细胞，以增大细胞壁的通透性 B. 用以治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体作抗癌药物定向杀死癌细胞 C. 用聚乙二醇处理大量混合在一起的两种植物细胞的原生质体，所获得的融合细胞都具有双亲的遗传特性 D. 将某一种效应B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后培养，获得特异性强的单克隆抗体，但当相应抗原位于靶细胞内时，该抗体不能与之发生特异性结合 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程中通常用CaCl2处理微生物细胞，以增大细胞壁的通透性，使其成为易于吸收周围环境中DNA的感受态；单克隆抗体是由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体；生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，位置准确）。 【详解】A、基因工程中通常用CaCl2处理微生物细胞，而植物细胞工程中不需要，A错误； B、“生物导弹”是单抗上连接抗癌药物，利用抗体和相应抗原（癌细胞）特异性结合的能力，利用抗癌药物或毒素杀伤和破坏癌细胞，B错误； C、用聚乙二醇处理大量混合在一起的两种植物的细胞原生质体，所获得的融合细胞并非都具有双亲的遗传性状，C错误； D、某一种效应B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后培养，获得特异性强的单克隆抗体，但当相应抗原位于靶细胞内时，该抗体不能与之发生特异性结合，需要经过细胞免疫使抗原暴露，D正确。故选D。 【点睛】本题主要考查单克隆抗体的制备以及细胞融合的相关知识，识记单克隆抗体的制备过程以及细胞融合的处理方法等知识点是解答本题的关键。 19. 高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图2所示情况。下列选项正确的是（　　） A. 过程①②合称为稀释涂布平板法 B. 甲乙试管中的液体均为选择培养基 C. Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法 D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种 【答案】ACD 【解析】 【分析】接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法； 稀释涂布线法：逐步稀释菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养； 平板划线法由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。 【详解】A、根据I号培养基上菌落分布均匀，可知①②过程为稀释涂布平板法，A正确； B、甲乙试管中的液体是用于样品稀释，应为无菌水，B错误； C、由Ⅱ号培养基上上的划线区域可知从I号培养基上挑选的菌落进行接种的方法是平板划线法，C正确； D、淀粉与碘液反应呈蓝色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，因此周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，D正确。 故选ACD。 20. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，其获得途径如下图所示。下列叙述正确的是 A. 图中愈伤组织、脱毒苗和高产细胞系的获得都体现了植物细胞的全能性 B. 图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化和再分化过程 C. ②过程中需用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理 D. 用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是纤维素酶和果胶酶 【答案】BCD 【解析】 【分析】根据植物组织培养的过程：外植体经脱分化形成愈伤组织，经再分化形成根、芽，进一步培育形成新个体。植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础。根据植物细胞全能性的概念分析B。根据植物组织培养过程所需的条件分析C。根据酶的专一性分析D。 【详解】A、细胞的全能性是指已经分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能，图中脱毒苗的获得体现了植物细胞的全能性，愈伤组织和高产细胞系的获得都没有体现植物细胞的全能性，A错误； B、图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的脱分化和再分化过程，B正确； C、再分化过程中需用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理，乙诱导细胞分化的方向，C正确； D、用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是纤维素酶和果胶酶，以分解植物细胞之间的成分，D正确。 故选BCD。 21. 下列关于克隆技术的叙述中，错误的是（ ） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交后代与两品种杂交后代的染色体数目相同 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物细胞工程的基本技术有：植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术。促进植物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电刺激）、化学法(聚乙二醇)。 2、动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。促进动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电刺激）、化学法和生物法（灭活的病毒）。 【详解】A、电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合，A正确； B、去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理，前者需要纤维素酶和果胶酶处理，后者需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，B正确； C、小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可获得杂交瘤细胞，用于制备单克隆抗体，C正确； D、假设甲染色体数目2M，乙为2N，体细胞杂交后代染色体数目为2M＋2N，甲乙两品种杂交后代的染色体数目为M+N，D错误。 故选D。 22. 下图是制备单克隆抗体流程的简明示意图。下列有关叙述错误的是（ ） A. ①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B. ④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 C. ②中使用活性较强的病毒有利于杂交瘤细胞的形成 D. ③同时具有巨噬细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 【答案】ACD 【解析】 【分析】1、杂交瘤技术的目的是制备对抗原有特异性的单克隆抗体，所以融合一方必须是经过抗原刺激产生的效应B淋巴细胞（浆细胞）。 2、使用细胞融合剂造成细胞膜一定程度的损伤，使细胞易于相互粘连而融合在一起。最佳的融合效果应是最低程度的细胞损伤而又产生最高频率的融合。聚乙二醇是目前最常用的细胞融合剂。 3、细胞融合是一个随机的物理过程，在小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合细胞悬液中，经融合后细胞将以多种形式出现。如融合的脾细胞和瘤细胞、融合的脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以及细胞的多聚体形式等。在选择培养基的作用下，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。 【详解】A、①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞，A错误； B、④表示用选择培养基筛选出的能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞群，B正确； C、在动物细胞融合过程中，可用物理法、化学法、生物法，②中使用灭活的病毒有利于杂交瘤细胞的形成，C错误； D、杂交瘤细胞同时具有效应B细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性，D错误。 故选ACD。 23. 超氧化物歧化酶（SOD）是一种源于生命体的活性物质，在生活实践中有非常重要的应用价值。下图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述正确的是 A. ①过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞 B. ②、③分别表示脱分化、再分化，两个过程不需要无菌操作也可完成 C. SOD催化O2形成H2O2的机制是为该反应提供活化能 D. 该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性 【答案】D 【解析】 【分析】据图分析，图中①过程表示将目的基因（SOD基因）导入植物细胞的过程；②表示脱分化形成愈伤组织的过程；③过程表示再分化形成胚状体的过程。 【详解】①过程表示将目的基因（SOD基因）导入植物细胞的过程，常用农杆菌转化法，A错误；②、③分别表示脱分化、再分化过程，需要在严格无菌操作就可以完成，B错误；SOD催化O2形成H2O2的机制是降低化学反应的活化能，不能为该反应提供能量，C错误；据图分析可知，该育种方式利用了细胞工程和基因工程，通过离体细胞发育成完整的植株的过程体现了植物细胞具有全能性，D正确。 24. 豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并定期取样观测发酵效果。以下推测不合理的是 A. 该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量 B. 大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味 C. 若容器内上层大豆发酵效果优于底层，则发酵菌为厌氧菌 D. 煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质 【答案】C 【解析】 【详解】根据题干信息分析，该实验的自变量是菌种的种类（甲乙两种菌种），而温度属于无关变量，A正确；大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味，B正确；若容器内上层大豆发酵效果优于底层，说明发酵菌为需氧型，C错误；煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质，D正确。 25. 下列关于发酵工程基本环节的叙述，错误的是（ ） A. 在发酵过程中，随时检测微生物数量，产物浓度，严格控制温度，PH溶解氧就可以马上获得大量发酵产品 B. 将菌种接入发酵罐之前，需要对菌种进行扩大培养 C. 在生产实践中，培养基的成分需要经过反复实验才能确定 D. 如果发酵产物是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤，沉淀等方法获得产物 【答案】A 【解析】 【分析】发酵菌种可以来源于自然界，也可以使人工改造后的优良菌种。 【详解】A、在发酵过程中，通过随时检测微生物数量，产物浓度，严格控制温度，pH溶解氧了解发酵进程，并不是马上获得大量发酵产品，A错误； B、将菌种接入发酵罐之前，需要对菌种进行扩大培养，已获得足够的数量，B正确； C、在生产实践中，培养基的成分需要经过反复实验才能确定，C正确； D、如果发酵产物是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤，沉淀等方法获得产物，D正确。 故选A 26. 蓝藻拟核DNA上有控制叶绿素合成的ch1L基因。某科学家通过构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞，以研究ch1L基因对叶绿素合成的控制，技术路线如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） A. ①②过程应使用不同的限制性内切酶 B. ①②过程都要使用DNA连接酶 C. 终止密码子是基因表达载体的重要组成部分 D. 若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株 【答案】C 【解析】 【分析】分析题图：图示为变异株培育过程。①是chIL基因与质粒重组形成质粒1的过程；②是红霉素抗性基因和质粒1重组形成质粒2的过程；③是将重组质粒2导入有chIL基因的蓝藻细胞，并同源替换chIL基因，最终获得无chIL基因的蓝细菌。 【详解】A、①②过程切割的位点不同，应该使用不同的限制性核酸内切酶，A正确； B、①②过程都是形成重组质粒的过程，因此都要使用限制酶和DNA连接酶，B正确； C、终止子是基因表达载体的重要组成部分，终止密码子在mRNA上，不在基因上，C错误； D、②过程插入了红霉素抗性基因，可作为标记基因，若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株，D正确。 故选C。 27. 据第三次全国大熊猫野外种群调查，全世界野生大熊猫不足1600只，为保护和繁殖大熊猫，科研人员进行了如图实验，相关叙述错误的是（ ） A. 克隆熊猫培育成功的部分原因是卵细胞质具有调控细胞核发育的作用 B. 图中用性激素处理可使供体超数排卵，从而可培育更多的早期胚胎 C. 图中进行胚胎移植的胚胎是原肠胚 D. 对早期胚胎进行胚胎分割产生同卵多仔，同卵多仔的表现型一定相同 【答案】BCD 【解析】 【分析】图示为克隆熊猫和试管熊猫的形成过程，为了得到更多的早期胚胎，可以对供体使用超数排卵法处理，使供体排出更多的卵子。卵母细胞核与早期胚胎细胞的细胞质融合形成重组细胞，经过早期胚胎培养形成早期胚胎，并通过胚胎移植移到代孕母体中，产生克隆熊猫。获得的卵母细胞与获能的精子结合形成受精卵，经过早期胚胎培养后，然后将早期胚胎通过胚胎移植移入代孕母体中，胚胎移植过程中，代孕受体在移植前需要经过同期发情处理，以便早期胚胎成功植入或着床。 【详解】A、核移植时卵细胞具有调控细胞核发育的作用是克隆成功的部分原因，A正确； B、常用促性腺激素处理使供体超数排卵，B错误； C、受精卵发育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植，C错误； D、虽然这些胚胎来自同一受精卵，遗传物质相同，但环境因素对其性状表现也有一定的影响，故表现型未必完全一致，D错误。 故选BCD。 【点睛】本题考查细胞核移植、胚胎移植和胚胎分割的相关知识，意在考查考生对所学知识的识记和应用能力。 28. “三亲婴儿”的培育过程的技术流程如图，下列相关叙述错误的是（　　） A. 该培育过程涉及动物细胞培养、细胞核移植等技术 B. 该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 C. 卵母细胞捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿” D. “三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因 【答案】C 【解析】 【分析】核移植技术：将供体细胞核注入去核卵母细胞，通过电激等使细胞融合，得到重组细胞，激活得到重组胚胎，将胚胎移植到受体雌性动物体内。 【详解】A、由图可知，“三亲婴儿”的培育过程涉及动物细胞培养（图中卵母细胞和重组细胞的培养）、细胞核移植（母亲卵母细胞的核移入捐献者去核卵母细胞中）、体外受精以及胚胎移植等技术，A正确； B、该技术没有用到母亲的细胞质，可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，B正确； C、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故卵母细胞捐献者的红绿色盲基因不能够传递给“三亲婴儿”，C错误； D、“三亲婴儿”同时拥有自己父亲（提供一半核DNA）、母亲（提供一半核DNA）及卵母细胞捐献者（提供细胞质基因）的部分基因，D正确。 故选C。 29. 上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛，他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药用蛋白含量多达30多倍，以下与此有关的叙述，错误的是（ ） A. 转基因动物是指体细胞中出现了新基因的动物 B. 提高基因表达水平是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 C. 只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中是纯合的 D. 转基因牛的肌肉细胞中没有人白蛋白基因，故不合成人白蛋白 【答案】ABCD 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等； （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法； （4）目的基因的检测与鉴定： 分子水平上的检测： ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术； ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术； ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术； 个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、转基因动物是指体细胞中出现了外源基因的动物，A错误； B、提高基因表达水平是指设法提高牛的乳腺细胞合成人白蛋白的能力，B错误； C、只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中选择性表达，C错误； D、转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不合成人白蛋白，D错误。 故选ABCD。 【点睛】本题考查基因工程的应用等相关知识，考查考生的理解能力和综合分析能力，难度适中。 30. 甲、乙、丙、丁四个生物兴趣小组分别按如下流程进行科学探究活动∶ 甲∶挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒 乙∶植物组织→形成愈伤组织→长出丛芽→生根→试管苗 丙∶让豆腐长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制→获得腐乳 丁∶剪碎动物组织→胰蛋白酶处理→细胞悬液→原代培养→传代培养 据此分析错误的是（ ） A. 甲组在发酵时打开排气口的间隔时间可逐渐延长 B. 乙组形成的愈伤组织加上人工种皮可以制成人工种子 C. 丙组所加卤汤中酒精的含量一般为12%左右 D. 丁组由原代培养到传代培养时还需用胰蛋白酶处理 【答案】B 【解析】 【分析】 1、酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵。 2、植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株。 3、腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。 【详解】A、果酒需酵母菌的无氧呼吸产生，在产生酒精的同时还产生CO2，故要打开排气口，随发酵时间延长，发酵过程逐渐减缓直至停止，可逐渐延长打开排气口的间隔时间，A正确； B、乙组形成的愈伤组织再分化形成的胚状体加上人工胚乳和人工种皮可形成人工种子，B错误； C、密封腌制时添加卤汤，为防止酒精含量过高而影响腐乳的风味，卤汤中酒精的含量应控制在12%左右，C正确； D、传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，D正确。 故选B。 二、非选择题 31. 中国科学院上海神经科学研究所仇子龙研究员等通过构建携带人类自闭症基因MECP2的转基因猴模型及对MECP2转基因猴进行分子遗传学与行为学分析，发现MECP2转基因猴表现出类似人类自闭症的刻板行为与社交障碍等行为。在该研究中，研究人员先通过精巢异种移植，将幼年食蟹猴的精巢移植到裸鼠的背部，实现了食蟹猴精巢提早成熟，从中获得精子，让其完成受精作用，并进一步培养，操作过程如图，从而获得了携带人类自闭症基因MECP2的转基因猴（Z症食蟹猴）。该工作加速了食蟹猴的精子生成速度，缩短了食蟹猴的繁殖周期，对于推动非人灵长类动物模型的应用具有重大意义。回答下列问题： （1）图中将精子注入____________细胞。 （2）丙表示的过程是____________。 （3）上述获得的Z症食蟹猴，可通过体细胞核移植技术进一步得到克隆Z症食蟹猴。该技术的原理是___________。所得到的克隆Z症食蟹猴的性状表现为________________。 【答案】（1）次级卵母 （2）胚胎移植 （3） ①. 细胞核的全能性 ②. 绝大多数性状与Z症食蟹猴相同，少数性状与受体的性状相同 【解析】 【分析】胚胎的早期培养：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程。供体胚胎获得的途径可以指转基因、核移植或体外受精方式得到的。 【小问1详解】 受精时所用的卵母细胞是处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞。 【小问2详解】 乙过程为早期胚胎培养的过程，受精卵在发育培养液中培养为早期胚胎。丙表示的过程是胚胎移植。 【小问3详解】 利用以上技术获得的Z症食蟹猴，可通过体细胞核移植技术得到克隆Z症食蟹猴，该技术利用的原理是动物细胞核具有全能性。克隆Z症食蟹猴的性状中，绝大多数性状与Z症食蟹猴相同，少数性状与受体的性状相同。 32. 含有pRiA4质粒的发根农杆菌能诱导植物体长出发根，特别适合规模化生产从根中提取的物质如丹参酮，为了探究MYB98基因（丹参酮合成调控基因）对产量的影响，研究人员进行如下操作： （1）上图所示的“重组”步骤中，目的基因应选择 。 A. 丹参酮合成基因 B. 链霉素抗性基因 C. 潮霉素抗性基因 D. MYB98基因 （2）要确定图中的“导入”是否成功，培养一段时间后将含发根农杆菌的菌液稀释后接种于添加了_______的固体培养基上，也可借助_______________技术检测转录的产物。 （3）在“感染”步骤中，含有目基因的发根农杆菌侵染经________“消毒”或“灭菌”）处理的丹参叶片细胞，目的基因整合到叶片细胞的________________中。 （4）图中的目的基因在丹参的_______细胞中进行表达，该转基因即获得了成功。丹参酮具有抑菌消炎等功能，其作为丹参的___________（“初生代谢物”或“次生代谢物”），并非丹参生命活动必需的物质。 （5）取丹参植株叶片组织，用酶解法得到大量单个细胞进行植物组织培养，该过程_______（“需要”或“不需要”或“不确定”）经历愈伤组织阶段。 【答案】（1）D （2） ①. 潮霉素 ②. PCR （3） ①. 消毒 ②. 染色体DNA（基因组） （4） ①. 根 ②. 次生代谢物 （5）需要 【解析】 【分析】基因工程的步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 【小问1详解】 根据题意可知，图示过程为了为了探究MYB98基因对产量的影响，所以目的基因应选择MYB98基因，ABC错误，D正确。 故选D。 【小问2详解】 据图可知，运载目的基因的载体中有潮霉素抗性基因，且结构完整，接种方式是稀释涂布平板法，培养一段时间后将含发根农杆菌的菌液稀释，接种于添加潮霉素的固体培养基上，也可以借助PCR检测目的基因是否在发根农杆菌中完成转录，通过以上方式来确定图中的“导入”是否成功。 【小问3详解】 在“感染”步骤中，含有目的基因的发根农杆菌侵染经消毒处理的丹参叶片细胞，目的基因整合到叶片细胞的染色体DNA中，之后对丹参叶片进行除去农杆菌处理，以利于叶片组织的存活。 【小问4详解】 根据“从根中提取的物质如丹参酮”可知，图中的目的基因在丹参的根细胞中进行表达，该转基因即获得了成功。丹参酮具有抑菌消炎等功能，其作为丹参的次级代谢产物，并非丹参生命活动必需的物质。 【小问5详解】 植物组织培养过程需要经历愈伤组织阶段。 33. 滁菊为菊科多年生草本植物： Ⅰ.为探究滁菊愈伤组织的培养条件，1号研究小组配制了含有两种浓度的2，4-D的培养基，然后接种初始重量相同的幼苗子叶切块并分别培养在光照及黑暗条件下，一段时间后，测量愈伤组织的生长量，结果如下图。 （1）在该实验中，自变量是______________________。进行植物组织培养的实验，要严格控制杂菌污染的原因是__________________。 （2）由图中实验数据分析，在培养基中添加2，4-D的作用是______________。 （3）为大量获得该植物的愈伤组织，适宜采取_______（填“黑暗”或“光照”）培养。 （4）光照在培养过程中不作为愈伤组织的能量来源，原因是___________________。 Ⅱ.滁菊长期营养繁殖易造成病毒积累，导致滁菊花色劣变。2号研究小组比较了3种脱毒方法对滁菊体内菊花B病毒（CVB）和菊花矮化类病毒（CSVd）脱除的效果，结果见下表；下图是对不同试管苗进行RT-PCR（逆转录PCR）后的电泳示意图（引物根据CVB的基因序列设计），根据下图表回答问题： 不同脱毒方法对“滁菊”茎尖脱毒率的影响 脱毒方法 样本数 脱除CSVd率 脱除CVB率 脱除（CSVd＋CVB）率 茎尖分生组织培养 77 20.78 44.16 16.88 热处理结合茎尖培养 71 36.62 63.38 35.21 病毒唑结合茎尖培养 71 46.48 49.30 36.62 （5）试管苗_____号已成功脱去CVB病毒。 （6）只脱除CSVd病毒时，可选择________结合茎尖分生组织培养，效果相对更好。 （7）热处理和病毒唑处理对试管苗同时脱去两种病毒的脱毒率____（有或无）显著作用，两者之间比较作用效果____（有或无）明显差异。 【答案】（1） ①. 光照的有无、2，4-D的浓度、培养天数 ②. 杂菌可以在培养基上生长争夺营养；杂菌产生的物质影响植物组织的生长 （2）促进愈伤组织的生长 （3）黑暗 （4）愈伤组织细胞中不含叶绿体，无法利用光能进行光合作用 （5）3、4 （6）病毒唑 （7） ①. 有 ②. 无 【解析】 【分析】植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 【小问1详解】 分析题意，本实验的目的是探究滁菊愈伤组织的培养条件，结合坐标曲线图可知，本实验的自变量有：光照的有无和2，4-D的浓度及培养天数；植物组织培养需要在无菌条件下进行，防止杂菌的污染，因为杂菌可以在培养基上生长争夺营养，杂菌产生的物质影响植物组织的生长。 【小问2详解】 分析曲线图，与对照相比，加入2，4-D溶液后，愈伤组织生长更快，所以在培养基中添加2，4-D的作用是促进愈伤组织的生长。 【小问3详解】 幼苗子叶切块转变成愈伤组织的过程称脱分化，为大量获得该植物的愈伤组织适宜采取黑暗培养，因为光照会促进叶绿体的形成，促进组织的分化。 【小问4详解】 在脱分化形成愈伤组织及愈伤组织的增殖阶段，细胞中均不含叶绿体，无法利用光能进行光合作用，光照在培养过程中不作为愈伤组织的能量来源。 【小问5详解】 据图可知，2、5电泳结果显示标准片段之外的阳性结果，3，4则没有，说明3、4成功脱去CVB病毒，2、5未能脱去CVB病毒。 【小问6详解】 据表可知，只脱除CSVd病毒时，病毒唑结合茎尖培养的脱毒率最高，是46.48%，效果相对更好。 【小问7详解】 据表可知，热处理和病毒唑处理对试管苗同时脱去两种病毒的脱毒率分别是35.21、36.62，与对照组16.88相比，有显著作用；两者之间的脱毒率分别是35.21、36.62，作用效果无明显差异。 34. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。 （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有1L土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL样液至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。各取0．1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为________ 。 （2）接种技术的核心是__________，________是研究和应用微生物的前提。只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是_____________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。 （3）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是________，有透明带菌落利用的氮源主要是________，据此可筛选出目的菌。实验结果如图显示的A～E五种菌株中，________是最理想菌株。 【答案】（1） （2） ①. 防止杂菌污染，保证培养物的纯度 ②. 稀释获得单个菌落 ③. 培养基中缺少这些细菌可利用的氮源 （3） ①. 氮气 ②. 该除草剂 ③. E 【解析】 【分析】1、选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长。 2、每克样品中的菌落数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下的平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释的倍数。 【小问1详解】 图中稀释的倍数是103，三个菌落的平均数=（55+56+57）÷3=56，则每毫升原土壤浸出液样中菌株数=56÷0.1×103=5.6×105个，所以每升土壤浸出液中的菌株数=5.6×105×103=5.6×108个。 【小问2详解】 接种技术的核心是无菌操作，防止杂菌污染，保证培养物的纯度。在实验室培养微生物，稀释获得单个菌落是研究和应用微生物的前提。在以该除草剂作为唯一氮源的培养基上，不能降解该除草剂的大部分细菌是不能生长的，因此大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是培养基中缺少这些细菌可利用的氮源或有氧条件抑制了这些细菌的生长。 【小问3详解】 由于该除草剂的培养基不透明，被菌落分解后可产生透明圈，无透明圈说明除草剂未被分解，菌落利用的氮源就只能是空气中的氮气；而出现透明圈说明除草剂被分解，菌落是分解该除草剂的细菌繁殖产生的，氮源是该除草剂；E透明圈（或透明圈与菌落的比值）最大，说明其降解除草剂的能力最强，故是最理想菌株。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$