内容正文:
3.4通过细胞融合可产生具有新特性的细胞
一、单选题
1.动物细胞融合是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。下列关于动物细胞融合的叙述,错误的是( )
A.单克隆抗体制备的过程中需要进行动物细胞融合
B.动物细胞融合的原理与植物组织培养的原理不同
C.两个单倍体细胞融合后,形成的细胞中含有2个染色体组
D.若将两种细胞放置于培养基中进行两两细胞融合,共有3种融合类型
2.动物细胞融合的原理是( )
A.动物细胞的细胞膜无识别异物的能力 B.细胞膜具有一定的流动性
C.动物细胞容易被病毒感染 D.动物细胞的细胞膜薄,易被击穿
3.阿霉素是一种抗肿瘤抗生素,但其没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其他细胞造成伤害。构建抗体—药物偶联物(ADC)能对肿瘤细胞进行选择性杀伤,ADC通常由抗体、接头和药物(如阿霉素)三部分组成。下列叙述错误的是( )
A.将肿瘤抗原注射到小鼠体内,可从其血清中获得单克隆抗体
B.ADC中的抗体和阿霉素分别起靶向运输和治疗的作用
C.构建抗体—药物偶联物时用到的抗体应为单克隆抗体
D.利用同位素标记的单克隆抗体,可定位诊断肿瘤
4.科学家以病毒A的外壳蛋白为抗原,制备出了单克隆抗体。下列相关叙述错误的是( )
A.可利用选择培养基筛选出能产生抗体的杂交瘤细胞
B.用病毒A的外壳蛋白对小鼠进行免疫,可获得产生特定抗体的B细胞
C.用灭活的病毒诱导获得的融合细胞都具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特性
D.运用该单克隆抗体可以诊断人体是否感染病毒A
5.下列关于单克隆抗体制备的叙述,正确的是( )
A.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合
B.诱导动物细胞融合的特有的方法有PEG融合法和灭活病毒诱导法
C.用特定抗原对小鼠进行免疫后,只得到一种B淋巴细胞
D.单克隆抗体是单个B淋巴细胞增殖并产生的抗体
6.我国学者以新型冠状病毒刺突蛋白(S蛋白)为抗原制备单克隆抗体,用以阻断该病毒对人体的感染,相关叙述错误的是( )
A.产生抗体的杂交瘤细胞保留着B淋巴细胞的部分特性
B.制备杂交瘤细胞时产生特定抗体的淋巴细胞不需要传代培养
C.杂交瘤细胞的制备利用了细胞膜的流动性
D.筛选前杂交瘤细胞产生单一的新型冠状病毒抗体
7.将单克隆抗体同药物耦联可以实现对病原体或肿瘤细胞的选择性杀伤。在单克隆抗体的制备过程中不涉及的操作是( )
A.动物细胞融合 B.细胞核移植 C.动物细胞培养 D.筛选杂交瘤细胞
8.下列关于动物细胞融合技术及其意义的叙述,错误的是( )
A.动物细胞融合技术是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术
B.能克服远缘杂交不亲和的障碍获得新物种
C.杂交瘤技术是在细胞融合技术基础上发展起来的
D.灭活病毒可以诱导细胞融合与病毒表面的糖蛋白有关
9.如图所示,核苷酸合成有两个途径,物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必须的转化酶和激酶,制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。下列相关叙述正确的是( )
A.B淋巴细胞及其自身融合细胞因含有转化酶和激酶所以可在HAT培养基上大量增殖
B.杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖
C.HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞都能分泌针对同一种抗原的抗体
D.利用杂交瘤细胞制备的单抗可作为特异性探针研究相应抗原蛋白的结构
10.细胞毒素类药物能有效杀伤肿瘤细胞,但也会对健康细胞造成伤害,科学家将细胞毒素与单克隆抗体结合制成抗体药物偶联物(ADC),ADC又被称作“生物导弹”,通常由抗体、接头和药物三部分组成,如图所示。下列相关叙述错误的是( )
A.杂交瘤细胞释放单克隆抗体,体现了细胞膜具有一定的流动性
B.ADC中的抗体能特异性识别并杀伤肿瘤细胞
C.接头既要在内环境中保持稳定,又要能在细胞内被断开
D.利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病
二、多选题
11.抗体—药物偶联物(ADC)能对肿瘤细胞进行选择性杀伤,该物质由抗体、药物(如细胞毒素)和接头三部分组成,其作用机制如图所示。下列叙述错误的是( )
A.ADC通过胞吞进入肿瘤细胞,需要消耗ATP但不需要蛋白质的参与
B.ADC中药物的特异性是ADC能选择性作用于肿瘤细胞的关键
C.制备ADC中的单克隆抗体时,第2次筛选是从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
D.可以将ADC中的药物换成放射性同位素,标记单克隆抗体进行靶向放疗
12.如图表示核苷酸合成的两个途径,物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶,制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。下列相关叙述错误的是( )
A.HAT培养基中,未融合的B淋巴细胞仍具有增殖能力,可持续进行细胞分裂
B.HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞在物质A的阻遏下因不能合成DNA而死亡
C.细胞融合是一个随机的过程,培养基中加入物质A的目的是筛选杂交瘤细胞
D.HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞,既能大量增殖又能产生较高纯度的目标抗体
三、读图填空题
13.若下图表示细胞工程操作中的某些过程,请回答下列问题。
(1)如果A、B分别是白菜和甘蓝的原生质体,则C细胞再生出细胞壁后需要通过什么技术才能发育成杂种植株“白菜—甘蓝”?若白菜和甘蓝杂交产生了子代,该子代是否可育?为什么?
(2)若该图表示抗丙肝病毒的单克隆抗体制备过程中的一环,A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞表示什么?符合要求的C细胞应具有哪些特点?
(3)如果A、B分别是取自优良奶牛的卵细胞和精子,在进行体外受精时,一般要把A细胞培养到什么时期?B细胞则要经过什么处理才能与A细胞结合为受精卵?
14.美西螈具有很强的再生能力。研究表明,美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制,科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体。抗CD14单克隆抗体的制备流程如图2所示。回答下列问题:
(1)步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是______________________。
(2)吸取③中的上清液到④的培养孔中,根据抗原—抗体杂交原理,需加入_______________进行专一抗体检测,检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体,原因是____________________________________。
(3)步骤⑤向小鼠注射________________________。
(4)步骤⑥从_____________________中提取到大量的抗CD14抗体,用于检测巨噬细胞。
参考答案
1.答案:C
解析:
2.答案:B
解析:动物细胞的融合的原理是细胞膜具有一定的流动性,才能够实现细胞融合,故B正确。
3.答案:A
解析:A、将肿瘤抗原反复注射到小鼠体内,从小鼠的血清中分离出的抗体为血清抗体,单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌的特异性抗体,A错误;B、ADC中的抗体可以和肿瘤细胞特异性结合,靶向运输阿霉素,阿霉素是一种抗肿瘤抗生素,起到治疗作用,B正确;C、构建抗体药物偶联物(ADC)能对肿瘤细胞进行选择性杀伤,ADC中的抗体应为特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体,C正确;D、单克隆抗体特异性强,利用同位素标记的单克隆抗体在特定组织中的成像技术,可定位诊断肿瘤,D正确。故选A。
4.答案:C
解析:A、可利用选择培养基筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,A正确;B、用病毒A的外壳蛋白对小鼠进行免疫,经过筛选培养及抗体检测,可获得产生特定抗体的B细胞,B正确;C、融合的细胞可能是浆细胞与浆细胞的融合、也可能是骨髓瘤与骨髓瘤细胞的融合,因此不一定都具有浆细胞和骨髓瘤细胞特性,C错误;D、单克隆抗体可制作成诊断盒,可以诊断人体是否感染病毒A,D正确。故选C。
5.答案:A
解析:动物细胞融合特有的诱导因素为灭活的病毒;免疫后的小鼠从脾脏中获取的是多种B淋巴细胞;单克隆抗体是杂交瘤细胞增殖并产生的抗体。
6.答案:D
解析:A、杂交瘤细胞由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,因此保留着B淋巴细胞的部分特性,A正确;B、产生特定抗体的B淋巴细胞即浆细胞不能分裂,因此不需要传代培养,B正确;C、杂交瘤细胞的制备需要进行动物细胞融合,利用了细胞膜的结构特点,即膜具有一定的流动性,C正确;D、筛选前的杂交瘤细胞不都能产生单一的新型冠状病毒抗体,D错误。
7.答案:B
解析:克隆抗体制备过程包括:特定抗原免疫小鼠、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合、杂交瘤细胞筛选、单一抗体阳性检测、将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养(即动物细胞培养),或注射到小鼠腹腔内增殖、提取单克隆抗体等,该制备过程中不涉及体细胞核移植操作,B符合题意,ACD不符合题意。故选B。
8.答案:B
解析:A、根据分析可知,动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个单核细胞的过程,A正确;
B、动物细胞融合后由于不能表现全能性,所以不能获得新物种,B错误;
C、杂交瘤细胞就是将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合形成的,所以杂交瘤技术是在细胞融合技术基础上发展起来的,C正确;
D、灭活的病毒可以诱导细胞融合原理是:病毒表面的糖蛋白与细胞膜上糖蛋白发生作用,使细胞融合,D正确。
故选B。
9.答案:D
解析:A、B细胞及其互相融合细胞因均属于成熟的高度分化细胞,不能增殖,A错误;B、杂交瘤细胞因为可以进行补救合成途径,所以能够在HAT培养基上大量增殖,B错误;C、由于参与杂交的B细胞不一定只有一种,虽然HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞能大量增殖,也能产生抗体,但不一定产生同一种抗体,C错误;D、单克隆抗体的作用之一是采用抗原-抗体杂交技术,利用抗体作为特异性探针,研究相应的抗原蛋白,D正确。故选D。
10.答案:B
解析:A、单克隆抗体由杂交瘤细胞通过胞吐的方式释放,体现了细胞膜具有一定的流动性,A正确;B、单克隆抗体能与抗原特异性结合,这种靶向作用使ADC中的药物对肿瘤细胞具有杀伤能力,不是抗体杀伤肿瘤细胞,B错误;C、接头既要在内环境中保持稳定,又要能在细胞内被断开,才能在肿瘤细胞中起作用,C正确;D、利用放射性同位素或荧光标记的单克隆抗体可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。该过程利用抗原-抗体特异性结合原理来实现,D正确。故选B。
11.答案:AB
解析:A、由图可知,ADC通过胞吞作用进入肿瘤细胞,需要消耗能量,不需要载体蛋白,但需要膜上蛋白质的参与,A错误;B、ADC能对肿瘤细胞进行选择性杀伤是因为抗体能特异性识别肿瘤细胞表面的抗原,B错误;C、制备单克隆抗体时,第二次筛选是进行克隆化培养和抗体检测,是从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞,C正确;D、用放射性同位素标记的单克隆抗体用于定位诊断肿瘤细胞,进行靶向治疗,D正确。故选AB,
12.答案:ACD
解析:A、未融合的B淋巴细胞高度分化而不能增殖,A错误;B、HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞一方面不含有转化酶无法通过补救合成途径合成DNA,另一方面在物质A的阻断下无法通过全合成途径合成DNA,因此在HAT培养基上会死亡,B正确;C、细胞融合是一个随机的过程,培养基中加入物质A、H、T的目的是筛选出杂交瘤细胞,C错误;D、HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞能大量增殖,但并不都能产生高纯度的目标抗体,需要进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞,才可产生高纯度的目标抗体,D错误。故选ACD。
13.答案:(1)植物组织培养技术。“白菜—甘蓝”子代可育,但白莱和甘蓝杂交子代不可育,因为白菜和甘蓝都是二倍体,二者的杂交子代是异源二倍体,细胞中无同源染色体,减数分裂时无法联会,无法产生正常配子,所以不可育。
(2)B细胞代表能产生特定抗体的B淋巴细胞。C细胞既能无限增殖,又能产生抗丙肝病毒的专一抗体。
(3)A细胞要培养到减数分裂Ⅱ中期,B细胞要进行获能处理。
解析:(1)植物体细胞杂交包括原生质体融合和植物组织培养两个阶段,如果A、B分别是白菜和甘蓝的原生质体,则C细胞为杂种细胞,杂种细胞再生出细胞壁后,需要通过植物组织培养技术才能发育成杂种植株白菜——甘蓝。由于白菜和甘蓝都是二倍体,二者的杂交子代是异源二倍体,细胞中无同源染色体,减数分裂时无法联会,无法产生正常配子,所以白菜和甘蓝杂交产生的子代不可育。
(2)若该图表示抗丙肝病毒的单克隆抗体制备过程中的一环,根据单克隆抗体由杂交瘤细胞产生,若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞代表小鼠体内能产生特定抗体的B淋巴细胞(浆细胞),C细胞为杂交瘤细胞,符合要求的杂交瘤细胞具有的特点是既能无限增殖,又能产生抗丙肝病毒的专一抗体。
(3)若A.B分别是优良奶牛的精子和卵细胞,在进行体外受精时,一般要把A卵细胞培养到减数分裂Ⅱ中期,因为刚排出的卵子尚未完全成熟,一般仅完成减数第一次分裂,直到减数第二次分裂中期,卵细胞才具备与精子受精的能力。精子需进行获能处理后才具有受精能力,才能与A细胞结合为受精卵,本题结合图解,考查植物体细胞杂交、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、体外受精等知识,明确植物体细胞杂交的过程,动物细胞融合的过程、单克隆抗体制备的原理及过程,体外受精的过程等是解答本题的关键。
14.答案:(1)能在体外无限增殖
(2)CD14(CD14蛋白/CD14抗原);与形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多,有的不能分泌抗CD14抗体
(3)分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞
(4)小鼠腹水
解析:(1)步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞,特点是能在体外无限增殖。
(2)根据抗原—抗体杂交原理,应该用CD14蛋白检测其中是否含抗CD14蛋白的抗体。因为形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多,因此有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体。
(3)步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养,以获得大量单克隆抗体。
(4)从制备单克隆抗体的流程可知,将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔后,最终要从小鼠的腹水中提取抗CD14抗体。
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