内容正文:
第3节 发酵工程及应用导学案
任务一:了解发酵工程的基本环节
发酵工程的基本环节:发酵工程一般包括 、 、 、 、接种、 、 等方面。选育菌种,扩大培养,培养基的配置,灭菌,接种,发酵产品的分离、纯化
1、 选育菌种
思考1:某镇独产一种美酒,以下是对该镇环境的描述:四面环山,地势低洼,气候炎热,具有独特的微生物群,因为与外界的空气对流循环较缓慢,所以微生物种群较稳定,这对你理解发酵工程中菌种选育的重要性有什么启示?
菌种选择时考虑哪些因素:温度、pH值、营养、o2
思考2:如何获得性状优良的菌种?
自然界中筛选
诱变育种或基因工程育种
2、扩大培养、配制培养基、灭菌、接种
①工业发酵罐的体积一般为几十到几百立方米,接入的菌种总体积需要几立方米到几十立方米。所以,在发酵之前还需要对菌种进行 。扩大培养
②发酵工程中所用的菌种大多是 菌种。一旦有杂菌污染,可能导致产量大大下降。例如,在青霉素生产过程中如果污染了杂菌,某些杂菌会分泌 将青霉素分解掉。因此, 和 都必须经过严格的 。单一 青霉素酶 培养基 发酵设备 灭菌
3、发酵罐内发酵
思考1:怎样控制发酵条件?
提示:一方面要随时检测培养液中微生物数量、产物浓度以了解发酵进程;另一方面要及时添加必备的营养物质来延长菌体生长稳定期的时间,以便得到更多的发酵产品;同时要严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条件,来保证产品的产量和质量。
思考2:以谷氨酸的发酵为例,说明不同酸碱条件对发酵过程影响如何?
提示:在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺
思考3:现代发酵工程使用的大型发酵罐均有计算机控制系统,作用如何?
提示:能对发酵过程中的温度、pH、溶解氧、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养等进行监测和控制;还可以进行反馈控制,使发酵全过程处于最佳状态。
思考4:在进行发酵生产时,排出的气体和废气培养液等能直接排放到外界环境中吗?为什么?
提示:不能 污染环境
4、产品的分离、提纯
如果发酵产品是微生物细胞本身,可在发酵结束之后,采用 、 等方法将菌体分离和干燥,即可得到产品。如果产品是代谢物,可根据产物的性质采取适当的 、 和 措施来获得产品。过滤 沉淀 提取 分离 纯化
自我总结:
流程中最重要的环节是 ;使用 菌种发酵; 和 都需灭菌处理;计算机控制发酵过程,可以进行 控制,不同发酵产品,分离纯化方法 (填“不同”或“相同”)。发酵罐中的发酵 单一 培养基 发酵设备 反馈 不同
任务六:了解发酵工程的应用
1、在食品工业上的应用
①生产传统的发酵产品:如酱油、各种酒类等。发酵工程使这些产品的产量和质量明显提高。
实例:以大豆为主要原料,利用产生 的霉菌(如黑曲霉),将原料中的蛋白质水解成小分子的 和 ,然后经淋洗、调制成的酱油产品。以谷物或水果等为原料,利用 发酵生产的各种酒类。蛋白酶 肽 氨基酸 酿酒酵母
②生产各种各样的食品添加剂。食品添加剂不仅可以增加食品的 ,改善食品的口味、色泽和 ,有时还可以延长食品的保存期。实例:柠檬酸是一种广泛应用的食品 调节剂,可以通过黑曲霉的发酵制得;由 发酵可以得到谷氨酸,谷氨酸经过一系列处理就能制作 。营养 品质 酸度 谷氨酸棒状杆菌 味精
③生产酶制剂。常用的酶制剂如α-淀粉酶、β-淀粉酶、 酶、氨基肽酶和脂肪酶等。食品的直接生产、改进 、简化生产过程、改善产品的品质和口味、延长食品储存期和提高产品产量等方面。少数由 生产,绝大多数通过 生产。果胶酶 生产工艺 动植物 发酵工程
2、 在医药工业上的应用
①采用 的方法,将植物或动物的基因转移到微生物中,获得具有某种药物生产能力的微生物。基因工程
②直接对菌种进行改造,再通过 大量生产所需要的产品。利用基因工程,将病原体的某个或某几个抗原基因转入适当的微生物细胞,获得的 可以作为疫苗使用。发酵技术 表达产物
3、 在农牧业上的应用
①生产微生物肥料。利用了微生物在代谢过程中产生的 、 等来增进土壤肥力,改良土壤结构,促进植物生长,常见的有根瘤菌肥、固氮菌肥等。有的微生物肥料还可以 土壤中病原微生物的生长,从而减少病害的发生。
②生产微生物农药。与传统的化学农药不同,微生物农药是利用 或其 来防治病虫害的。微生物农药作为 防治的重要手段。
③生产微生物饲料。微生物含有丰富的 ,且生长繁殖速度 。
4、其他方面的应用
①利用纤维废料发酵生产 、 等能源物质。乙醇 乙烯
②极端微生物的应用: 、 可以用来生产洗涤剂,嗜低温菌有助于提高热敏性产品的产量。嗜热菌 嗜盐菌
拓展知识:工业啤酒与精酿啤酒
1、啤酒发酵的工业化生产流程及操作目的
提示
2、 “精酿”啤酒与“工业”啤酒的区别
提示
延伸应用
1、 青霉素发酵是高耗氧过程,如何能够在发酵过程中给微生物持续高效地供氧呢?(提示:血红蛋白具有携带O2的能力。)
提示 可以用基因工程的方法,将血红蛋白基因转入青霉素生产菌来提高菌体对氧的吸收和利用率。
2、引起全球新冠肺炎大流行的元凶是新冠病毒,利用发酵工程相关知识,如何大量生产新冠病毒疫苗?
提示 可将新冠病毒的抗原基因转入某种微生物体内,再通过发酵工程大量生产新冠病毒疫苗。
课堂练习
纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,在地球上含量丰富。土壤中某些微生物能够产生纤维素酶分解利用纤维素,帮助人们利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。某科研小组为了将土壤中的分解纤维素细菌纯化培养,进行了如下操作。请回答相关问题:
成分
纤维素粉
NANO3
KH2PO4
KCl
酵母膏
水解酪素
含量(g)
5.0
1.0
1.2
0.9
0.5
0.5
0.5
0.5
操作
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL
(1)上表是纤维素分解菌的选择培养基配方,若根据物理性质划分,该培养基属于 培养基。在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,操作者的双手需要进行清洗和 。液体 (酒精)消毒
(2)刚果红(简称CR)是一种染料,在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—纤维素的复合物就无法形成。下表为鉴别纤维素分解菌培养基配方。
成分
羧甲基纤维素钠
酵母膏
KH2PO4
琼脂
土豆汁
配制浓度为10mg/mL的CR溶液,灭菌后按照每200mL培养基加入1mL的比例加入CR溶液
含量(g)
5.0~10.0
1
0.25
15
100mL
操作
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL
用该培养基来培养纤维素分解菌,培养结果如图(黑点代表菌落)。其中分解纤维素能力最强的是菌落 ,原因是 。
E 刚果红与纤维素反应形成红色复合物,纤维素分解菌能够分解纤维素,因此纤维素分解菌周围会形成透明圈,且分解能力越强透明圈越大
(3)图中图1和图2是分离培养纤维素分解菌的结果图,其对应的接种方法分别是 和 ,接种过程中,图2所示方法接种工具至少需灼烧灭菌 次。
稀释涂布平板法 平板划线法 5
(4)将5g土壤溶于45mL无菌水,再稀释104倍,分别按图1接种方式将0.1mL样品接种到5个培养基上,统计菌落数目为156、158、160,据此可得出每克土壤中的纤维素分解菌活菌数约为 个。若某同学利用相同样品进行接种,只统计出25个菌落,出现该结果的原因是 。
1.58×108 涂布器灼烧后未冷却即涂布,高温下纤维素分解菌被烫死;培养液未摇匀即取样,样品中纤维素分解菌过少(其他答案合理即可)
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