精品解析：江苏省仪征市仪征中学2023-2024学年高二下学期五一假期收心卷二生物试题

江苏省仪征中学高二生物五一假期收心卷（2） 一、单选题 1. 南极雌帝企鹅产蛋后，由雄帝企鹅负责孵蛋，孵蛋期间不进食。下列叙述错误的是（ ） A. 帝企鹅蛋的卵清蛋白中N元素的质量分数高于C元素 B. 帝企鹅的核酸、多糖和蛋白质合成过程中都有水的产生 C. 帝企鹅蛋孵化过程中有mRNA和蛋白质种类的变化 D. 雄帝企鹅孵蛋期间主要靠消耗体内脂肪以供能 2. 几丁质是昆虫外骨骼和真菌细胞壁的重要成分。中国科学家首次解析了几丁质合成酶的结构，进一步阐明了几丁质合成的过程，该研究结果在农业生产上具有重要意义。下列叙述错误的是（ ） A. 细胞核是真菌合成几丁质的控制中心 B. 几丁质是由多个单体构成的多糖物质 C. 细胞通过跨膜运输将几丁质运到胞外 D. 几丁质合成酶抑制剂可用于防治病虫害 3. 植物细胞及其部分结构如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. 主要由DNA和蛋白质组成的①只存在于细胞核中 B. 核膜及各种细胞器膜的基本结构都与②相似 C. ③的主要成分是多糖，也含有多种蛋白质 D. 植物细胞必须具备①、②和③才能存活 4. 溶酶体膜上的H+载体蛋白和Cl-/H+转运蛋白都能运输H+，溶酶体内H+浓度由H+载体蛋白维持，Cl-/H+转运蛋白在H+浓度梯度驱动下，运出H+的同时把Cl-逆浓度梯度运入溶酶体。Cl-/H+转运蛋白缺失突变体的细胞中，因Cl-转运受阻导致溶酶体内的吞噬物积累，严重时可导致溶酶体破裂。下列说法错误的是（ ） A. H+进入溶酶体的方式属于主动运输 B. H+载体蛋白失活可引起溶酶体内的吞噬物积累 C. 该突变体的细胞中损伤和衰老的细胞器无法得到及时清除 D. 溶酶体破裂后，释放到细胞质基质中的水解酶活性增强 5. 人体免疫系统在抵御病原体的侵害中发挥了重要的作用。下列相关叙述正确的是（　　） A. 人体内各种免疫细胞都分布在免疫器官和淋巴液中 B. 相同病原体侵入不同人体后激活的B细胞分泌的抗体都相同 C. 树突状细胞、辅助性T细胞和B细胞识别相同抗原的受体相同 D. 抗原呈递细胞既参与细胞毒性T细胞的活化也参与B细胞的活化 6. 我国学者首次揭示了夜间光照影响血糖代谢的机制。健康受试者于夜间分别在某波长光照和黑暗条件下口服等量葡萄糖，然后在不同时间检测血糖水平（图1）。夜间光照影响血糖代谢的过程如图2所示。下列叙述错误的是（ ） A. 在夜间光照条件下，受试者血糖代谢的调节方式是神经调节 B. 与夜间黑暗条件相比，光照条件下受试者利用葡萄糖的速率下降 C. 若受试者棕色脂肪组织的代谢被抑制，则图1两条曲线趋于重叠 D. 长期熬夜的不良生活方式可增加患糖代谢相关疾病的风险 7. 为研究马铃薯贮藏时间与内源激素含量之间的关系，研究人员测定了马铃薯块茎贮藏期间在不同温度条件下的发芽率（图1），以及20℃条件下3种内源激素的含量（图2）。下列叙述正确的是（ ） A. 贮藏第60天时，4℃下马铃薯块茎脱落酸含量可能高于20℃ B. 马铃薯块茎贮藏期间，赤霉素/脱落酸比值高抑制发芽 C. 降低温度或喷洒赤霉素均可延长马铃薯块茎的贮藏时间 D. 20℃下贮藏120天后，赤霉素促进马铃薯芽生长的作用大于生长素 8. 如图为某城市湖泊生态系统中主要食物链的部分能量流动的过程图（图中Р是浮游植物，Ⅱ～V是消费者，数字单位是t/km2·a）。下列叙述错误的是（ ） A. 当P中某种群的出生率下降、死亡率升高时，其种群密度可能在增大 B. Ⅳ同化的能量极少，原因是其通过呼吸作用消耗的能量太多 C. V中不同物种在湖泊中不同的水层分布与食物的分布有关 D. 图中后一个营养级的存在有利于增加前一个营养级的物种多样性 9. 人工防护林具有防风、固沙及保护农田等作用，对维护区域生态系统稳定具有重要意义。下列叙述正确的是（ ） A. 防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调 B. 防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的循环原理 C. 防护林建成后，若失去人类的维护将会发生初生演替 D. 防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的直接价值 10. 下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是（　　） A. 通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比 B. 通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大 C. 通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌 D. 血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定 11. 垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（ ） A. 压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品 B. 添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源 C. X中需要添加合适的菌种，才能产生沼气 D. 为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动 12. 某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是（ ） A. 其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇ B. 步骤①所用的酶是SpeI和CfoI C. 用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段 D. 酶切片段和载体连接时，可使用E．coli连接酶或T4连接酶 13. CD163蛋白是PRRSV病毒感染家畜的受体。为实时监控CD163蛋白的表达和转运过程，将红色荧光蛋白RFP基因与CD163基因拼接在一起（如下图），使其表达成一条多肽。该拼接过程的关键步骤是除去（ ） A. CD163基因中编码起始密码子的序列 B. CD163基因中编码终止密码子的序列 C. RFP基因中编码起始密码子的序列 D. RFP基因中编码终止密码子的序列 14. 某小组以拟南芥原生质体为材料，研究了生长素（IAA）、组蛋白乙酰化及R基因对原生质体形成愈伤组织的影响。野生型（WT）和R基因突变型（rr）的原生质体分别经下表不同条件培养相同时间后，检测培养材料中R基因表达量，并统计愈伤组织形成率，结果如图所示。据此推断，下列叙述正确的是（ ） 编号 原生质体 培养条件 ① WT 培养基 ② WT 培养基+合适浓度的IAA ③ rr 培养基 ④ rr 培养基+合适浓度的IAA ⑤ WT 培养基+组蛋白乙酰化抑制剂 A. 组蛋白乙酰化有利于WT原生质体形成愈伤组织 B. R基因通过促进IAA的合成提高愈伤组织形成率 C. 组蛋白乙酰化通过改变DNA碱基序列影响R基因表达量 D. 若用IAA合成抑制剂处理WT原生质体，愈伤组织形成率将升高 15. 利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”。我国科研人员将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞后（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 体外培养卵母细胞时，为防止污染需将培养皿密闭培养在二氧化碳培养箱中 B. 胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应 C. 甲基化会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化后该基因可正常表达 D. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同 二、多选题 16. 在盐化土壤中，大量Na＋迅速流入细胞，形成胁迫，影响植物正常生长。耐盐植物可通过Ca2＋介导的离子跨膜运输，减少Na＋在细胞内的积累，从而提高抗盐胁迫的能力，其主要机制如下图。下列说法正确的是（ ） A. 在盐胁迫下，Na＋进出细胞的运输方式是主动运输 B. 使用ATP抑制剂处理细胞，Na＋的排出量会明显减少 C. 在高盐胁迫下，胞外Ca2＋抑制转运蛋白A，胞内Ca2＋促进转运蛋白C D. 转运蛋白C能同时转运H＋和Na＋，故其不具有特异性 17. 1937年霍奇金以蛙坐骨神经为材料，研究冷却阻滞对动作电位在神经纤维上传导的影响，记录距冷却阻滞点不同距离处膜内电位变化，结果如下图。相关叙述正确的是（ ） A. 实验中坐骨神经应始终置于无菌水中 B. 实验刺激和测量的部位应选择神经元轴突 C. 冷却阻滞影响细胞膜上钠离子通道的开放 D. 本研究还可证明神经纤维上兴奋传导是双向的 18. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 为获得更多的囊胚，可采用激素注射以促进雄鼠产生更多的精子 B. 用胰蛋白酶将细胞间的蛋白纤维消化后可获得分散的胚胎干细胞 C. 细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同 D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养 19. 通常植物主茎的顶端生长很快，侧芽生长很慢或潜伏不生长称为顶端优势，如图为顶端优势的原理图。下列有关分析错误的是（　　） A. 生长素在植物主茎中的运输方式是极性运输，在尖端不可以横向运输 B. 图示表明植物的生命活动往往受多种激素和其他因子的共同调节 C. 该植物去顶后IPT基因才能表达，在IPT作用下CK形成并激活侧芽的发育 D. 图示表明生长素既能催化也能抑制细胞分裂素的合成 三、非选择题 20. 某小组为研究真菌基因m的功能，构建了融合表达蛋白M和tag标签的质粒，请结合实验流程回答下列问题： （1）目的基因的扩增 ①提取真菌细胞______，经逆转录获得cDNA，进一步获得基因m片段。 ②为了获得融合tag标签的蛋白M，设计引物P2时，不能包含基因m终止密码子的编码序列，否则将导致______。 ③热启动PCR可提高扩增效率，方法之一是：先将除TaqDNA聚合酶（Taq酶）以外的各成分混合后，加热到80℃以上再混入酶，然后直接从94℃开始PCR扩增，下列叙述正确的有______ A．Taq酶最适催化温度范围为50～60℃ B．与常规PCR相比，热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物 C．两条子链的合成一定都是从5′端向3′端延伸 D．PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了Taq酶的特异性 （2）重组质粒的构建 ①将Sma I切开的载体A与添加同源序列的m混合，用特定DNA酶处理形成黏性末端，然后降温以促进______，形成A-m结合体。将A-m结合体导入大肠杆菌，利用大肠杆菌中的DNA聚合酶及______酶等，完成质粒的环化。 ②若正确构建的重组质粒A—m仍能被Sma I切开，则Sma I的酶切位点可能在______。 （3）融合蛋白的表达 ①用含有尿嘧啶的培养基培养URA3基因缺失型酵母，将其作为受体菌，导入质粒A-m，然后涂布于无尿嘧啶的培养基上，筛选获得目的菌株，其机理是______。 ②若通过抗原一抗体杂交实验检测到酵母蛋白中含tag标签，说明______，后续实验可借助tag标签进行蛋白M的分离纯化。 21. 为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒，如图1所示。请回答下列问题： （1）分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时，配制的两个反应体系中不同的有______，扩增程序中最主要的不同是______。 （2）有关基因序列如图2，引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用______。 A. ATGGTG------CAACCA B. TGGTTG------CACCAT C. GACGAG------CTGCAG D. CTGCAG------CTCGTC （3）将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有_______。 （4）转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，下列叙述错误的有_______。 A. 稀释涂布平板需控制每个平板30~300个菌落 B. 抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高 C. 抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落 D. 抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化 （5）为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3．根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有______。 （6）对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒，通常需进一步通过基因测序确认，原因是______。 22. 长时程增强（LTP）是突触前纤维受到高频刺激后，突触传递强度增强且能持续数小时至几天的电现象，与人的长时记忆有关。下图是海马区某侧支LTP产生机制示意图，回答下列问题： （1）依据以上机制示意图，LTP的发生属于______ （填“正”或“负”）反馈调节。 （2）若阻断NMDA受体作用，再高频刺激突触前膜，未诱发LTP，但出现了突触后膜电现象。据图推断，该电现象与_______内流有关。 （3）为了探讨L蛋白的自身磷酸化位点（图中α位和β位）对L蛋白自我激活的影响，研究人员构建了四种突变小鼠甲、乙、丙和丁，并开展了相关实验，结果如表所示： 正常 小鼠 甲 乙 丙 丁 α位突变为缬氨酸，该位点不发生自身磷酸化 α位突变为天冬氨酸，阻断Ca2+/钙调蛋白复合体与L蛋白结合 β位突变为丙氨酸，该位点不发生自身磷酸化 L蛋白编码基因确缺失 L蛋白活性 + ++++ ++++ + - 高频刺激 有LTP 有LTP ? 无LTP 无LTP 注：“+”多少表示活性强弱，“-”表示无活性。 据此分析： ①小鼠乙在高频刺激后______（填“有”或“无”）LTP现象，原因是___________ ; ②α位的自身磷酸化可能对L蛋白活性具有________作用。 ③在甲、乙和丁实验组中，无L蛋白β位自身磷酸化的组是__________。 23. 手指割破时机体常出现疼痛、心跳加快等症状。下图为吞噬细胞参与痛觉调控的机制示意图请回答下列问题。 （1）下图中，手指割破产生的兴奋传导至T处，突触前膜释放的递质与突触后膜___________结合，使后神经元兴奋，T处（图中显示是突触）信号形式转变过程为___________。 （2）伤害性刺激使心率加快的原因有:交感神经的兴奋，使肾上腺髓质分泌肾上腺素；下丘脑分泌的___________，促进垂体分泌促肾上腺皮质激素，该激素使肾上腺皮质分泌糖皮质激素；肾上腺素与糖皮质激素经体液运输作用于靶器官。 （3）皮肤破损，病原体入侵，吞噬细胞对其识别并进行胞吞，胞内___________（填细胞器）降解病原体，这种防御作用为______________________。 （4）如图所示，病原体刺激下，吞噬细胞分泌神经生长因子（NGF），NGF作用于感受器上的受体，引起感受器的电位变化，进一步产生兴奋传导到___________形成痛觉。该过程中，Ca2+的作用有___________。 （5）药物MNACI3是一种抗NGF受体的单克隆抗体，用于治疗炎性疼痛和神经病理性疼痛。该药的作用机制是_________________________________。 24. 科学家研发了多种RNA药物用于疾病治疗和预防，图中①～④示意4种RNA药物的作用机制。请回答下列问题。 （1）细胞核内RNA转录合成以___________为模板，需要___________的催化。前体mRNA需加工为成熟的mRNA，才能转运到细胞质中发挥作用，说明___________对大分子物质的转运具有选择性。 （2）机制①:有些杜兴氏肌营养不良症患者DMD蛋白基因的51外显子片段中发生___________，提前产生终止密码子，从而不能合成DMD蛋白。为治疗该疾病，将反义RNA药物导入细胞核，使其与51外显子转录产物结合形成___________，DMD前体mRNA剪接时，异常区段被剔除，从而合成有功能的小DMD蛋白，减轻症状。 （3）机制②:有些高胆固醇血症患者的PCSK9蛋白可促进低密度脂蛋白的内吞受体降解，血液中胆固醇含量偏高。转入与PCSK9mRNA特异性结合的siRNA，导致PCSK9mRNA被剪断，从而抑制细胞内的___________合成，治疗高胆固醇血症。 （4）机制③:mRNA药物进入患者细胞内可表达正常的功能蛋白，替代变异蛋白发挥治疗作用。通常将mRNA药物包装成脂质体纳米颗粒，目的是___________。 （5）机制④:编码新冠病毒S蛋白的mRNA疫苗，进入人体细胞，在内质网上的核糖体中合成S蛋白，经过___________修饰加工后输送出细胞，可作为___________诱导人体产生特异性免疫反应。 （6）接种了两次新型冠状病毒灭活疫苗后，若第三次加强接种改为重组新型冠状病毒疫苗，根据人体特异性免疫反应机制分析，进一步提高免疫力的原因有: ______________________。 25. 科研人员在杂交瘤细胞的基础上，获得了双杂交瘤细胞，每种杂交瘤细胞产生的抗体结构、与抗原结合的情况如下图1所示。请回答下列问题。 （1）科研人员将抗原ɑ、β分别注射到不同的小鼠体内，引起机体发生________免疫，其中的________分泌相应抗体。 （2）制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，经过两次筛选得到两种杂交瘤细胞，其中第二次筛选一般先用________方法获得单个杂交瘤细胞，并通过________获得大量的这种杂交瘤细胞。如果两种杂交瘤细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。 （3）抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同）。因此，双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原ɑ、β结合称为双特异性抗体，如下图2，请将合适的字母填入下面的表格中。 1 2 3 4 5 6 A2 ① ② ③ ɑ ④ ①________；②________；③________；④________。 （4）结合所学，图1为甘蓝与萝卜体细胞杂交的原生质体融合过程示意图。图2为图1的①过程中不同酶解时间下，萝卜细胞原生质体数量统计。请回答下列相关问题。 图1中①过程应用纤维素酶和果胶酶来处理萝卜细胞和甘蓝细胞。 据图2判断，①过程对萝卜细胞处理的最佳时间为_______h，从细胞结构的角度分析，对甘蓝细胞处理的最佳时间和对萝卜细胞处理的最佳时间相近，推测理由是__________。 将图1杂种细胞培育成一个完整植株采用的技术手段是_______________。该技术手段包括两大过程是________________________________（按顺序填写）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 江苏省仪征中学高二生物五一假期收心卷（2） 一、单选题 1. 南极雌帝企鹅产蛋后，由雄帝企鹅负责孵蛋，孵蛋期间不进食。下列叙述错误的是（ ） A. 帝企鹅蛋的卵清蛋白中N元素的质量分数高于C元素 B. 帝企鹅的核酸、多糖和蛋白质合成过程中都有水的产生 C. 帝企鹅蛋孵化过程中有mRNA和蛋白质种类的变化 D. 雄帝企鹅孵蛋期间主要靠消耗体内脂肪以供能 【答案】A 【解析】 【分析】糖类是主要的能源物质，脂肪是良好的储能物质，ATP是直接能源物质。 【详解】A、帝企鹅蛋的卵清蛋白中N元素的质量分数低于C元素，A错误； B、核酸、糖原、蛋白质的合成都经历了“脱水缩合”过程，故都有水的产生，B正确； C、帝企鹅蛋孵化过程涉及基因的选择性表达，故帝企鹅蛋孵化过程有mRNA和蛋白质种类的变化，C正确； D、脂肪是良好的储能物质，雄帝企鹅孵蛋期间不进食，主要靠消耗体内脂肪以供能，D正确。 故选A。 2. 几丁质是昆虫外骨骼和真菌细胞壁的重要成分。中国科学家首次解析了几丁质合成酶的结构，进一步阐明了几丁质合成的过程，该研究结果在农业生产上具有重要意义。下列叙述错误的是（ ） A. 细胞核是真菌合成几丁质的控制中心 B. 几丁质是由多个单体构成的多糖物质 C. 细胞通过跨膜运输将几丁质运到胞外 D. 几丁质合成酶抑制剂可用于防治病虫害 【答案】C 【解析】 【分析】几丁质是一种多糖，又称壳多糖，广泛存在于甲壳类动物和昆虫的外骨骼、真菌的细胞壁中。分析题图可知，几丁质合成的过程主要有三个阶段，第一个阶段，几丁质合成酶将细胞中的单糖转移到细胞膜上用于合成几丁质糖链。第二阶段，新生成的几丁质糖链通过细胞膜上的转运通道释放到细胞外。第三阶段，释放的几丁质链自发组装形成几丁质。 【详解】A、细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心，真菌合成几丁质属于细胞代谢，A正确； B、N-乙酰葡萄糖氨是几丁质的单体，几丁质是由多个这样的单体脱水缩合而成的多糖，B正确； C、据图分析可知，因为几丁质的合成是在细胞膜上进行的，所以几丁质运到胞外的过程没有跨膜运输，C错误； D、几丁质合成酶抑制剂可以抑制该酶的活性，打断生物合成几丁质的过程，从而让缺乏几丁质的害虫、真菌死亡，故可用于防止病虫害，D正确。 故选C。 3. 植物细胞及其部分结构如图所示。下列相关叙述错误的是（　　） A. 主要由DNA和蛋白质组成的①只存在于细胞核中 B. 核膜及各种细胞器膜的基本结构都与②相似 C. ③的主要成分是多糖，也含有多种蛋白质 D. 植物细胞必须具备①、②和③才能存活 【答案】D 【解析】 【分析】分析图片，可知①是染色质，②是细胞膜，③是细胞壁。 【详解】A、分析图片，可知①是染色质，是由DNA 和蛋白质组成的，只存在于植物细胞的细胞核中，A正确； B、分析图片，②是细胞膜，主要由磷脂双分子层构成，核膜和细胞器膜的基本结构和细胞膜相似，但各种膜上的蛋白质等成分有差异，功能也各不相同，B正确； C、分析图片，③是细胞壁，主要成分是纤维素和果胶，其中纤维素是多糖，此外细胞壁含多种蛋白质，C正确； D、部分植物细胞并没有细胞核，即并不具有①染色质，也可以成活，例如植物的筛管细胞，D错误。 故选D。 4. 溶酶体膜上的H+载体蛋白和Cl-/H+转运蛋白都能运输H+，溶酶体内H+浓度由H+载体蛋白维持，Cl-/H+转运蛋白在H+浓度梯度驱动下，运出H+的同时把Cl-逆浓度梯度运入溶酶体。Cl-/H+转运蛋白缺失突变体的细胞中，因Cl-转运受阻导致溶酶体内的吞噬物积累，严重时可导致溶酶体破裂。下列说法错误的是（ ） A. H+进入溶酶体的方式属于主动运输 B. H+载体蛋白失活可引起溶酶体内的吞噬物积累 C. 该突变体的细胞中损伤和衰老的细胞器无法得到及时清除 D. 溶酶体破裂后，释放到细胞质基质中的水解酶活性增强 【答案】D 【解析】 【分析】1. 被动运输：简单来说就是小分子物质从高浓度运输到低浓度，是最简单的跨膜运输方式，不需能量。被动运输又分为两种方式：自由扩散：不需要载体蛋白协助，如：氧气，二氧化碳，脂肪，协助扩散：需要载体蛋白协助，如:氨基酸，核苷酸，特例...2.主动运输：小分子物质从低浓度运输到高浓度，如：矿物质离子，葡萄糖进出除红细胞外的其他细胞需要能量和载体蛋白。3.胞吞胞吐：大分子物质的跨膜运输，需能量。 【详解】A、Cl-/H+转运蛋白在H+浓度梯度驱动下，运出H+的同时把Cl-逆浓度梯度运入溶酶体，说明H+浓度为溶酶体内较高，因此H+进入溶酶体为逆浓度运输，方式属于主动运输，A正确； B、溶酶体内H+浓度由H+载体蛋白维持，若载体蛋白失活，溶酶体内pH改变导致溶酶体酶活性降低，进而导致溶酶体内的吞噬物积累，B正确； C、Cl-/H+转运蛋白缺失突变体的细胞中，因Cl-转运受阻导致溶酶体内的吞噬物积累，该突变体的细胞中损伤和衰老的细胞器无法得到及时清除，C正确； D、细胞质基质中的pH与溶酶体内不同，溶酶体破裂后，释放到细胞质基质中的水解酶可能失活，D错误。 故选D。 5. 人体免疫系统在抵御病原体的侵害中发挥了重要的作用。下列相关叙述正确的是（　　） A. 人体内各种免疫细胞都分布在免疫器官和淋巴液中 B. 相同病原体侵入不同人体后激活的B细胞分泌的抗体都相同 C. 树突状细胞、辅助性T细胞和B细胞识别相同抗原的受体相同 D. 抗原呈递细胞既参与细胞毒性T细胞的活化也参与B细胞的活化 【答案】D 【解析】 【分析】人体免疫系统的三大防线： （1）第一道：皮肤、粘膜的屏障作用及皮肤、黏膜的分泌物（泪液、唾液）的杀灭作用； （2）第二道：吞噬细胞的吞噬作用及体液中杀菌物质的杀灭作用； （3）第三道：免疫器官、免疫细胞、免疫物质共同组成的免疫系统。 2、免疫系统的组成： （1）免疫器官：骨髓、胸腺、脾、淋巴结、扁桃体等； （2）免疫细胞：①淋巴细胞：位于淋巴液、血液和淋巴结中。T细胞（迁移到胸腺中成熟）、B细胞（在骨髓中成熟）。②吞噬细胞等； （3）免疫分子：各种抗体和淋巴因子等。特异性免疫中发挥免疫作用的主要是淋巴细胞，由骨髓中造血干细胞分化、发育而来。 【详解】A、人体内各种免疫细胞树突状细胞、巨噬细胞和淋巴细胞分布在免疫器官和血液、淋巴液中，A错误； B、由于在特异性免疫过程中，相同病原体侵入不同人体激活B细胞的抗原决定簇可能不同，B细胞分泌的抗体可能不相同，B错误； C、树突状细胞、辅助性T细胞和B细胞摄取和加工处理抗原的过程不同，识别相同抗原的受体也就不相同，C错误； D、抗原呈递细胞既参与细胞毒性T细胞的活化也参与B细胞的活化，D正确。 故选D。 6. 我国学者首次揭示了夜间光照影响血糖代谢的机制。健康受试者于夜间分别在某波长光照和黑暗条件下口服等量葡萄糖，然后在不同时间检测血糖水平（图1）。夜间光照影响血糖代谢的过程如图2所示。下列叙述错误的是（ ） A. 在夜间光照条件下，受试者血糖代谢的调节方式是神经调节 B. 与夜间黑暗条件相比，光照条件下受试者利用葡萄糖的速率下降 C. 若受试者棕色脂肪组织的代谢被抑制，则图1两条曲线趋于重叠 D. 长期熬夜的不良生活方式可增加患糖代谢相关疾病的风险 【答案】A 【解析】 【分析】1、分析图1曲线可知，光照和黑暗条件下口服等量葡萄糖，30分钟后两者出现差别，光照下血糖浓度高于黑暗条件下血糖浓度。 2、根据图2可知：光调节葡萄糖代谢的机制：光可通过神经调节的方式影向糖代谢，其信号传导途径是：光→视网膜感光细胞→传入神经→下丘脑和延髓箭头交感神经→棕色脂肪细胞，葡萄糖利用减少，导致血糖上升。 【详解】A、血糖代谢的调节除了如图2所示的神经调节之外，还存在胰岛素、胰高血糖素等激素调节，A错误； B、由图1可知，光照和黑暗条件下口服等量葡萄糖，光照下血糖浓度高于黑暗条件下血糖浓度，说明与夜间黑暗条件，光照条件下受试者利用葡萄糖的速率下降，B正确； C、光照通过反射弧使交感神经作用于棕色脂肪细胞利用葡萄糖减少，若棕色脂肪组织的代谢被抑制，则黑暗条件下葡萄糖的利用也会减少，即图1两条曲线趋于重叠，C正确； D、光可通过神经调节的方式影向糖代谢，其信号传导途径是：光→视网膜感光细胞→传入神经→下丘脑和延髓箭头交感神经→棕色脂肪细胞，葡萄糖利用减少，导致血糖上升，故长期熬夜的不良生活方式可增加患糖代谢相关疾病的风险，D正确。 故选A。 7. 为研究马铃薯贮藏时间与内源激素含量之间的关系，研究人员测定了马铃薯块茎贮藏期间在不同温度条件下的发芽率（图1），以及20℃条件下3种内源激素的含量（图2）。下列叙述正确的是（ ） A. 贮藏第60天时，4℃下马铃薯块茎脱落酸含量可能高于20℃ B. 马铃薯块茎贮藏期间，赤霉素/脱落酸比值高抑制发芽 C. 降低温度或喷洒赤霉素均可延长马铃薯块茎的贮藏时间 D. 20℃下贮藏120天后，赤霉素促进马铃薯芽生长的作用大于生长素 【答案】A 【解析】 【分析】分析图1可知，随贮藏时间延长，马铃薯块茎的发芽率逐渐升高，温度越低，发芽时间越晚，完全发芽所需时间越长。分析图2可知，在20℃条件下，随贮藏时间延长，生长素相对含量升高，赤霉素相对含量先升高再略微降低，脱落酸相对含量不断降低。 【详解】A、从图1中可知，贮藏第60天时，4℃下马铃薯块茎发芽率明显低于20℃时，而脱落酸具有抑制马铃薯发芽的作用，因此4℃下马铃薯块茎的脱落酸含量可能高于20℃，A正确； B、赤霉素能抵消脱落酸对马铃薯发芽的抑制作用，解除休眠，促进发芽。马铃薯块茎贮藏期间，赤霉素/脱落酸比值高则会促进发芽，B错误； C、据分析可知，降低温度可使马铃薯延迟发芽，从而延长马铃薯块茎的贮藏时间，喷洒赤霉素则会使马铃薯提前发芽，缩短马铃薯块茎的贮藏时间，C错误； D、从图2中只能看出20℃下贮藏120天后，赤霉素的相对含量比生长素低，无法比较两种激素促进马铃薯芽生长的作用大小，D错误。 故选A。 8. 如图为某城市湖泊生态系统中主要食物链的部分能量流动的过程图（图中Р是浮游植物，Ⅱ～V是消费者，数字单位是t/km2·a）。下列叙述错误的是（ ） A. 当P中某种群的出生率下降、死亡率升高时，其种群密度可能在增大 B. Ⅳ同化的能量极少，原因是其通过呼吸作用消耗的能量太多 C. V中不同物种在湖泊中不同的水层分布与食物的分布有关 D. 图中后一个营养级的存在有利于增加前一个营养级的物种多样性 【答案】B 【解析】 【分析】流入某一营养级的能量（同化量）＝呼吸作用散失的能量＋用于生长发育、繁殖的能量（以有机物形式储存起来）＝呼吸作用散失的能量＋（被同化）流向下一营养级的能量＋流向分解者的能量＋（未利用的能量）。生态系统中生产者和消费者之间由于食物关系会形成一定的营养结构。食物链和（食物链交织而成的）食物网是由生产者和消费者之间存在食物关系形成的。相邻养级之间的能量传递效率=下一级同化的能量/上一级同化的能量×100%。 【详解】A、P存在捕食者，因而其中某个种群数量的变化将会呈“S”形增长，而“S”形增长的种群，其出生率一直在下降，死亡率一直在升高，但是在达到K值之前，其种群密度总是在增大，A正确； B、依据“同化量=摄入量-粪便量”的关系可知，在摄入量不变的情况下，粪便量越大，Ⅳ同化的能量就会越少，而“同化量=呼吸量+储存量”，所以同化量极少与呼吸消耗量无关，B错误； C、Ⅴ中不同物种在湖泊中分布在不同的水层与食物的分布和栖息条件有关，C正确； D、后一个营养级是前一个营养级的捕食者，捕食者往往捕食个体数量较多的物种，这样就会避免出现一种或少数几种生物在生态系统中占绝对优势的局面，为其他物种的形成腾出空间，捕食者的存在有利于增加物种多样性，D正确。 故选B。 9. 人工防护林具有防风、固沙及保护农田等作用，对维护区域生态系统稳定具有重要意义。下列叙述正确的是（ ） A. 防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调 B. 防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的循环原理 C. 防护林建成后，若失去人类的维护将会发生初生演替 D. 防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的直接价值 【答案】A 【解析】 【分析】生物多样性的价值包括直接价值（食用、药用、工业用、旅游观赏、科研、文学艺术等）、间接价值（对生态系统起到的调节功能）和潜在价值（目前不清楚）。 【详解】A、防护林通过自组织、自我调节可实现自身结构与功能的协调，A正确； B、防护林建设应选择本地种，遵循了生态工程的协调原理，B错误； C、防护林建成后，若失去人类的维护将会发生次生演替，C错误； D、防护林的防风、固沙及保护农田的作用体现了生物多样性的间接价值，D错误。 故选A。 10. 下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是（　　） A. 通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比 B. 通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大 C. 通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法除菌 D. 血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定 【答案】A 【解析】 【分析】培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。灭菌常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。 【详解】A、细菌是原核生物，酵母菌是真核生物，不同微生物对营养物质的需求是不一样，通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比，A正确； B、通常细菌的生长速度比酵母菌快，但形成的菌落，不一定细菌的大于酵母菌的，与细菌的种类有关，部分细菌的菌落小于酵母菌，B错误； C、通常细菌和酵母菌的培养基都可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误； D、血细胞计数板适用于真菌的计数，细菌计数板用于细菌的数量测定等，D错误。 故选A。 11. 垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（ ） A. 压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品 B. 添加的木屑有利于堆肥体通气，还可作为某些微生物的碳源 C. X中需要添加合适的菌种，才能产生沼气 D. 为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动 【答案】D 【解析】 【分析】生态系统的功能包括能量流动、物质循环和信息传递，三者缺一不可；物质循环是生态系统的基础，能量流动是生态系统的动力，信息传递则决定着能量流动和物质循环的方向和状态；信息传递是双向的，能量流动是单向的，物质循环具有全球性。 【详解】A、压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品，有利于实现物质的循环再生和能量的多级利用，A正确； B、添加的木屑有利于堆肥体通气，木屑也可作为某些微生物的碳源，B正确； C、X中需要添加合适的菌种，通过分解有机物才能产生沼气，C正确； D、为保证堆肥体中微生物的活性，可以对堆肥体进行翻动，D错误。 故选D。 12. 某小组通过PCR（假设引物长度为8个碱基短于实际长度）获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是（ ） A. 其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇ B. 步骤①所用的酶是SpeI和CfoI C. 用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段 D. 酶切片段和载体连接时，可使用E．coli连接酶或T4连接酶 【答案】B 【解析】 【详解】A、由于引物只能引导子链从5＇到3＇，根据碱基互补配对原则，其中一个引物序列为5＇TGCGCAGT-3＇，A正确； B、根据三种酶的酶切位点，左侧的黏性末端是使用NheI切割形成的，右边的黏性末端是用CfoI切割形成的，B错误； C、用步骤①的酶对载体进行酶切，使用了NheI和CfoI进行切割，根据他们的识别位点以及原本DNA的序列，切割之后至少获得了2个片段，C正确； D、图中形成的是黏性末端，而E.coliDNA连接酶能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端，D正确。 故选B。 13. CD163蛋白是PRRSV病毒感染家畜的受体。为实时监控CD163蛋白的表达和转运过程，将红色荧光蛋白RFP基因与CD163基因拼接在一起（如下图），使其表达成一条多肽。该拼接过程的关键步骤是除去（ ） A. CD163基因中编码起始密码子的序列 B. CD163基因中编码终止密码子的序列 C. RFP基因中编码起始密码子的序列 D. RFP基因中编码终止密码子的序列 【答案】B 【解析】 【分析】基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因启动子终止子和标记基因等。 【详解】为实时监控CD163蛋白的表达和转运过程，则拼接在一起的红色荧光蛋白RFP基因与CD163基因都得转录和翻译，使其表达成一条多肽，因此拼接在一起的CD163基因转录形成的mRNA中不能出现终止密码子，否则红色荧光蛋白RFP基因转录形成的mRNA不能进行翻译，无法合成红色荧光蛋白，因此该拼接过程的关键步骤是除去CD163基因中编码终止密码子的序列，B符合题意，ACD不符合题意。 故选B。 14. 某小组以拟南芥原生质体为材料，研究了生长素（IAA）、组蛋白乙酰化及R基因对原生质体形成愈伤组织的影响。野生型（WT）和R基因突变型（rr）的原生质体分别经下表不同条件培养相同时间后，检测培养材料中R基因表达量，并统计愈伤组织形成率，结果如图所示。据此推断，下列叙述正确的是（ ） 编号 原生质体 培养条件 ① WT 培养基 ② WT 培养基+合适浓度的IAA ③ rr 培养基 ④ rr 培养基+合适浓度的IAA ⑤ WT 培养基+组蛋白乙酰化抑制剂 A. 组蛋白乙酰化有利于WT原生质体形成愈伤组织 B. R基因通过促进IAA的合成提高愈伤组织形成率 C. 组蛋白乙酰化通过改变DNA碱基序列影响R基因表达量 D. 若用IAA合成抑制剂处理WT原生质体，愈伤组织形成率将升高 【答案】A 【解析】 【分析】离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株。 【详解】A、①和③进行对比可以看出R基因表达量高，愈伤组织形成率高，①和⑤对比，使用组蛋白乙酰化抑制剂之后，R基因的表达量下降，愈伤组织的形成率也会降低，因此推测组蛋白乙酰化有利于WT原生质体形成愈伤组织，A正确； B、图中数据无法得出R基因是通过促进IAA的合成提高愈伤组织形成率，B错误； C、图中的数据没有关于DNA碱基序列的测定，因此无法推测组蛋白乙酰化通过改变DNA碱基序列影响R基因表达量，C错误； D、①和②对比可以看出IAA能够促进愈伤组织的形成，因此若用IAA合成抑制剂处理WT原生质体，愈伤组织形成率将降低，D错误。 故选A。 15. 利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”。我国科研人员将一个极体注入修饰后的次级卵母细胞后（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如下图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 体外培养卵母细胞时，为防止污染需将培养皿密闭培养在二氧化碳培养箱中 B. 胚胎移植前，需对供体和受体进行免疫检查，避免发生免疫排斥反应 C. 甲基化会关闭基因的活性，对某些基因进行去甲基化后该基因可正常表达 D. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同 【答案】C 【解析】 【分析】分析图示，从卵泡中取出卵母细胞，再将经过甲基化处理的卵母细胞进行早期胚胎培养、胚胎移植等获得孤雌小鼠。 【详解】A、动物细胞培养过程中，为防止杂菌污染，需要加入抗生素，A错误； B、胚胎移植不会发生免疫排斥，B错误； C、DNA分子甲基化会影响基因的表达，从而关闭基因的活性，而对某些基因进行去甲基化后该基因可正常表达，C正确； D、孤雌小鼠是由次级卵母细胞发育而来，如果提供卵细胞的母本基因型是AaBb，经过减数分裂形成的次级卵母细胞基因型可以是AABB，所以二者基因型可能不同，D错误。 故选C。 二、多选题 16. 在盐化土壤中，大量Na＋迅速流入细胞，形成胁迫，影响植物正常生长。耐盐植物可通过Ca2＋介导的离子跨膜运输，减少Na＋在细胞内的积累，从而提高抗盐胁迫的能力，其主要机制如下图。下列说法正确的是（ ） A. 在盐胁迫下，Na＋进出细胞的运输方式是主动运输 B. 使用ATP抑制剂处理细胞，Na＋的排出量会明显减少 C. 在高盐胁迫下，胞外Ca2＋抑制转运蛋白A，胞内Ca2＋促进转运蛋白C D. 转运蛋白C能同时转运H＋和Na＋，故其不具有特异性 【答案】BC 【解析】 【分析】据图分析：钠离子经转运蛋白A进入细胞，钙离子会抑制该过程，细胞内钙离子增多，促进钠离子运出细胞。 【详解】A、在盐化土壤中，大量Na＋迅速流入细胞，形成胁迫，Na＋进入细胞是顺浓度梯度，据图可知，Na＋进入细胞需要转运蛋白A的协助，所以Na＋进入细胞属于协助扩散，A错误； B、据图可知，H＋运出细胞需要ATP提供能量，属于主动运输，H＋顺浓度梯度进入细胞产生的势能驱动Na＋经转运蛋白C进入细胞的过程，使用ATP抑制剂处理细胞，H＋运出细胞的量减少，细胞内外H＋浓度差减少，为Na＋运出细胞提供的势能减少，Na＋的排出量会明显减少，B正确； C、据图可知，在高盐胁迫下，胞外Ca2＋抑制转运蛋白A转运Na＋进入细胞，胞内Ca2＋增多促进转运蛋白C转运Na＋出细胞，C正确； D、转运蛋白C能同时转运H＋和Na＋，而不能转运其他离子，故其仍具有特异性，D错误。 故选BC。 17. 1937年霍奇金以蛙坐骨神经为材料，研究冷却阻滞对动作电位在神经纤维上传导的影响，记录距冷却阻滞点不同距离处膜内电位变化，结果如下图。相关叙述正确的是（ ） A. 实验中坐骨神经应始终置于无菌水中 B. 实验刺激和测量的部位应选择神经元轴突 C. 冷却阻滞影响细胞膜上钠离子通道的开放 D. 本研究还可证明神经纤维上兴奋传导是双向的 【答案】BC 【解析】 【分析】1、反射弧是反射的结构基础，反射弧包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经、效应器五个部分，神经节所在的神经元是传入神经元，效应器是指传出神经末梢以及其所支配的肌肉或者腺体。 2、静息电位是外正内负，主要由钾离子外流产生和维持，动作电位是外负内正，主要由钠离子产生和维持。兴奋在突触处的传递过程：突触前膜内的突触小泡释放神经递质，作用于突触后膜上的受体，突触后膜电位发生变化，使突触后神经元兴奋或抑制，突触后神经元的兴奋或抑制取决于神经递质的种类。 【详解】A、实验中坐骨神经应始终置于任氏液中，A错误； B、轴突较长易操作，并且神经冲动的传导主要通过轴突，所以实验刺激和测量的部位应选择神经元轴突，B正确； C、据图分析，冷却阻滞点不同距离处膜内电位降低，所以冷却阻滞影响细胞膜上钠离子通道的开放，C正确； D、本研究只研究了一个方向的兴奋的传导，不能证明神经纤维上兴奋传导是双向的，D错误。 故选BC。 18. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 为获得更多的囊胚，可采用激素注射以促进雄鼠产生更多的精子 B. 用胰蛋白酶将细胞间的蛋白纤维消化后可获得分散的胚胎干细胞 C. 细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同 D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养 【答案】AC 【解析】 【分析】据图分析：a表示内细胞团细胞，b表示滋养层细胞。 【详解】A、获得更多的囊胚，可采用激素注射以促进雌鼠产生更多的生殖细胞，A错误； B、用胰蛋白酶将细胞间的蛋白纤维消化，使细胞分散开，可获得分散的胚胎干细胞，B正确； C、a表示内细胞团细胞，b表示滋养层细胞，是由同一个受精卵分裂分化形成的，所含核基因相同，C错误； D、胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，D正确。 故选AC。 19. 通常植物主茎的顶端生长很快，侧芽生长很慢或潜伏不生长称为顶端优势，如图为顶端优势的原理图。下列有关分析错误的是（　　） A. 生长素在植物主茎中的运输方式是极性运输，在尖端不可以横向运输 B. 图示表明植物的生命活动往往受多种激素和其他因子的共同调节 C. 该植物去顶后IPT基因才能表达，在IPT作用下CK形成并激活侧芽的发育 D. 图示表明生长素既能催化也能抑制细胞分裂素的合成 【答案】AD 【解析】 【分析】顶端优势：植物的顶芽优先生长而侧芽受抑制的现象。产生的原因：由顶芽形成的生长素向侧芽运输，使侧芽附近生长素浓度加大，由于侧芽对生长素敏感而被抑制，顶芽优先生长。 【详解】A、生长素在植物主茎中的运输方式是极性运输，在尖端可以横向运输，A错误； B、图示表明植物的生命活动往往受多种激素和其他因子的共同调节，B正确； C、图示表明去顶后IPT基因才能表达，在IPT作用下，CK形成并激活侧芽的发育，C正确； D、生长素无催化作用，它的作用是调节植物的生命活动，D错误。 故选AD。 三、非选择题 20. 某小组为研究真菌基因m的功能，构建了融合表达蛋白M和tag标签的质粒，请结合实验流程回答下列问题： （1）目的基因的扩增 ①提取真菌细胞______，经逆转录获得cDNA，进一步获得基因m片段。 ②为了获得融合tag标签的蛋白M，设计引物P2时，不能包含基因m终止密码子的编码序列，否则将导致______。 ③热启动PCR可提高扩增效率，方法之一是：先将除TaqDNA聚合酶（Taq酶）以外的各成分混合后，加热到80℃以上再混入酶，然后直接从94℃开始PCR扩增，下列叙述正确的有______ A．Taq酶最适催化温度范围为50～60℃ B．与常规PCR相比，热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物 C．两条子链的合成一定都是从5′端向3′端延伸 D．PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了Taq酶的特异性 （2）重组质粒的构建 ①将Sma I切开的载体A与添加同源序列的m混合，用特定DNA酶处理形成黏性末端，然后降温以促进______，形成A-m结合体。将A-m结合体导入大肠杆菌，利用大肠杆菌中的DNA聚合酶及______酶等，完成质粒的环化。 ②若正确构建的重组质粒A—m仍能被Sma I切开，则Sma I的酶切位点可能在______。 （3）融合蛋白的表达 ①用含有尿嘧啶的培养基培养URA3基因缺失型酵母，将其作为受体菌，导入质粒A-m，然后涂布于无尿嘧啶的培养基上，筛选获得目的菌株，其机理是______。 ②若通过抗原一抗体杂交实验检测到酵母蛋白中含tag标签，说明______，后续实验可借助tag标签进行蛋白M的分离纯化。 【答案】（1） ①. mRNA ②. 蛋白M上不含tag标签 ③. BC （2） ①. 黏性末端碱基配对 ②. DNA连接 ③. 基因m的连接处或基因m的内部 （3） ①. 受体菌在无尿嘧啶的培养基上无法生长，导入重组质粒的受体菌含有URA3基因可以长成菌落 ②. 融合基因表达（或融合基因正确解码） 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 ①以逆转录获得cDNA的方式，要先从真菌细胞中提取基因m转录出来的mRNA。 ②从构建好的重组质粒上看，tag序列位于目的基因下游，若m基因的转录产物mRNA上有终止密码子，核糖体移动到终止密码子多肽链就断开，则不会对tag序列的转录产物继续进行翻译，蛋白M上就不含tag标签。 ③A、从题干信息可知，“80℃以上再混入酶，然后直接从94℃开始PCR扩增”，故Taq酶最适催化温度范围为94℃左右，A错误； B、PCR 反应的最初加热过程中，样品温度上升到70℃之前，在较低的温度下引物可能与部分单链模板形成非特异性结合，并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸，结果会导致引物错配形成的产物的扩增，影响反应的特异性；热启动可减少引物错配形成的产物的扩增，提高反应的特异性，B正确； C、DNA分子复制具有方向性，都是从5′端向3′端延伸，C正确； D、Taq酶没有特异性，与普通的DNA聚合酶相比，Taq酶更耐高温，D错误。 故选BC。 【小问2详解】 ①从图上看，载体A只有一个Sma I的酶切位点，故被Sma I切开后，载体由环状变为链状DNA，将Sma I切开的载体A与添加同源序列的m混合，用特定DNA酶处理形成黏性末端，然后降温以促进载体A与添加同源序列的m的黏性末端碱基互补配对。将A-m结合体导入大肠杆菌，利用大肠杆菌中的DNA聚合酶及DNA连接酶等，完成质粒的环化。 ②重组质粒中，载体A被Sma I切开的位置已经与基因m相连，原来的酶切位点已不存在，若正确构建的重组质粒A—m仍能被Sma I切开，则Sma I的酶切位点可能在基因m的连接处或基因m内部。 【小问3详解】 ①筛选目的菌株的机理是：导入了质粒A-m的目的菌株由于含有URA3基因，能在无尿嘧啶的培养基上存活，而URA3基因缺失型酵母则不能存活。 ②若通过抗原一抗体杂交实验检测到酵母蛋白中含lag标签，位于lag标签上游的基因m应该正常表达，说明融合基因表达（或融合基因正确解码）。 【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行知识迁移，准确答题。 21. 为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒，如图1所示。请回答下列问题： （1）分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时，配制的两个反应体系中不同的有______，扩增程序中最主要的不同是______。 （2）有关基因序列如图2，引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用______。 A. ATGGTG------CAACCA B. TGGTTG------CACCAT C. GACGAG------CTGCAG D. CTGCAG------CTCGTC （3）将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有_______。 （4）转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，下列叙述错误的有_______。 A. 稀释涂布平板需控制每个平板30~300个菌落 B. 抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高 C. 抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落 D. 抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化 （5）为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3．根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有______。 （6）对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒，通常需进一步通过基因测序确认，原因是______。 【答案】（1） ①. 模板（片段F1、片段F2）、引物 ②. 退火温度 （2）CD （3）限制性内切核酸酶（限制酶）和DNA连接酶 （4）ABC （5）P3、P4 （6）琼脂糖凝胶电泳技术仅能用于分析待检测DNA分子的大小，无法确定待检测DNA分子的碱基序列 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。 （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法； （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 PCR反应进行的条件：引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时， 配制的两个反应体系中不同的有模板（片段F1、片段F2）、引物。PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合。不同的PCR反应体系中，模板和引物是不同的：扩增 程序中依据不同引物设置不同的退火温度是最重要的环节，恰当地选择退火温度，尽量避免引物与 模板的非特异性结合，以保证目的产物的有效扩增。而对于延伸时间而言，以常用的Taq DNA聚 133 合酶为例，催化DNA延伸的速度为1000~2000 bp/min，通常在实验室中可根据目的片段大小在 30s~2min的时长内大致设置廷伸时间，一般不雪要精确控制。 【小问2详解】 由图1可知，引物F2-F用于扩增F2片段，引物F1-R用于扩增F1片段，C选项中5'-GACGAG-3'能与AnBI中左侧部分碱基进行碱基互补配对，因此引物F2-F选用C。D选项中5'-CTGCAG-3'能与EGFP中的右侧部分序列进行碱基互补配对，因此引物F1-R选用D。 【小问3详解】 传统重组质粒构建需要使用限制性内切核酸酶（限制酶）切割质粒使其具有与目的基因相同的黏性末端，之后再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接成重组质粒。将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，由于PCR产物片段和线性质粒载体具有同源序列，可通过重组酶形成环化质粒。不需要使用限制性内切核酸酶（限制酶）和DNA连接酶。 【小问4详解】 A、转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，用稀释涂布平板法筛选时，菌落数可能低于30，A错误； B、培养基冷却后才能接种，抗性平板上未长出菌落，一般不是培养基温度太高所致，B错误； C、转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，一般含有重组质粒的大肠杆菌才能发展为菌落，故不会出现大量杂菌形成的菌落，C错误； D、抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化，D正确。 故选ABC。 【小问5详解】 EGFP为720bp，AnBI为390bp，二者的总大小为720bp+390bp=1110bp，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，其大小接近于P1、P2，根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有P3、P4。 【小问6详解】 琼脂糖凝胶电泳技术仅能用于分析待检测DNA分子的大小，无法确定待检测DNA分子的碱基序列，因此对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒，通常需进一步通过基因测序确认。 22. 长时程增强（LTP）是突触前纤维受到高频刺激后，突触传递强度增强且能持续数小时至几天的电现象，与人的长时记忆有关。下图是海马区某侧支LTP产生机制示意图，回答下列问题： （1）依据以上机制示意图，LTP的发生属于______ （填“正”或“负”）反馈调节。 （2）若阻断NMDA受体作用，再高频刺激突触前膜，未诱发LTP，但出现了突触后膜电现象。据图推断，该电现象与_______内流有关。 （3）为了探讨L蛋白的自身磷酸化位点（图中α位和β位）对L蛋白自我激活的影响，研究人员构建了四种突变小鼠甲、乙、丙和丁，并开展了相关实验，结果如表所示： 正常 小鼠 甲 乙 丙 丁 α位突变为缬氨酸，该位点不发生自身磷酸化 α位突变为天冬氨酸，阻断Ca2+/钙调蛋白复合体与L蛋白结合 β位突变为丙氨酸，该位点不发生自身磷酸化 L蛋白编码基因确缺失 L蛋白活性 + ++++ ++++ + - 高频刺激 有LTP 有LTP ? 无LTP 无LTP 注：“+”多少表示活性强弱，“-”表示无活性。 据此分析： ①小鼠乙在高频刺激后______（填“有”或“无”）LTP现象，原因是___________ ; ②α位的自身磷酸化可能对L蛋白活性具有________作用。 ③在甲、乙和丁实验组中，无L蛋白β位自身磷酸化的组是__________。 【答案】（1）正 （2）Na+ （3） ①. 有 ②. 小鼠乙L蛋白突变后阻断了Ca2+/钙调蛋白复合体与L蛋白结合，但不影响NO合成酶催化生成NO，同时L蛋白活性较高，可增强AMPA敏感性，同时招募新的AMPA嵌入膜中，利于钠离子内流 ③. 抑制 ④. 丁 【解析】 【分析】兴奋传导和传递的过程： 1、静息时，神经细胞膜对钾离子的通透性大，钾离子大量外流，形成内负外正的静息电位；受到刺激后，神经细胞膜的通透性发生改变，对钠离子的通透性增大，钠离子内流，形成内正外负的动作电位。兴奋部位和非兴奋部位形成电位差，产生局部电流，兴奋就以电信号的形式传递下去。 2、兴奋在神经元之间需要通过突触结构进行传递，突触包括突触前膜、突触间隙、突触后膜，具体的传递过程为：兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放递质（化学信号），递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将兴奋传递到下一个神经元。 【小问1详解】 由题图可以看出，突触前膜释放谷氨酸后，经过一系列的信号变化，会促进NO合成酶生成NO，进一步促进突触前膜释放更多谷氨酸，该过程属于正反馈调节。 【小问2详解】 阻断NMDA受体的作用，不能促进Ca2+内流，从而不能形成Ca2+/钙调蛋白复合体，不能促进NO合成酶合成NO，从而不能产生LTP，但是谷氨酸还可以与AMPA受体结合，促进Na+内流，从而引发电位变化。 【小问3详解】 ①由题表数据可以看出，小鼠乙L蛋白突变后，阻断了Ca2+/钙调蛋白复合体与L蛋白结合，但不影响NO合成酶催化NO的生成，且L蛋白活性较高，可增强AMPA敏感性，同时招募新的AMPA嵌入膜中，利于钠离子内流，小鼠乙在高频刺激后有LTP现象。 ②小鼠甲L蛋白的α位突变为缬氨酸以后，该位点不能发生自身磷酸化，与正常小鼠相比（α位可以发生自身磷酸化），L蛋白活性增强，说明α位发生自身磷酸化可能会对L蛋白的活性起到抑制作用。 ③丁组小鼠L蛋白编码基因缺失，则不能形成L蛋白，无法发生L蛋白β位自身磷酸化。甲中α位点突变，其无法磷酸化，但不影响β位点磷酸化，故有LTP；乙α位点突变，阻断Ca2+/钙调蛋白复合体与L蛋白结合，但L蛋白活性较高，说明不影响β位点磷酸化。在甲、乙和丁实验组中，无L蛋白β位自身磷酸化的组是丁。 23. 手指割破时机体常出现疼痛、心跳加快等症状。下图为吞噬细胞参与痛觉调控的机制示意图请回答下列问题。 （1）下图中，手指割破产生的兴奋传导至T处，突触前膜释放的递质与突触后膜___________结合，使后神经元兴奋，T处（图中显示是突触）信号形式转变过程为___________。 （2）伤害性刺激使心率加快的原因有:交感神经的兴奋，使肾上腺髓质分泌肾上腺素；下丘脑分泌的___________，促进垂体分泌促肾上腺皮质激素，该激素使肾上腺皮质分泌糖皮质激素；肾上腺素与糖皮质激素经体液运输作用于靶器官。 （3）皮肤破损，病原体入侵，吞噬细胞对其识别并进行胞吞，胞内___________（填细胞器）降解病原体，这种防御作用为______________________。 （4）如图所示，病原体刺激下，吞噬细胞分泌神经生长因子（NGF），NGF作用于感受器上的受体，引起感受器的电位变化，进一步产生兴奋传导到___________形成痛觉。该过程中，Ca2+的作用有___________。 （5）药物MNACI3是一种抗NGF受体的单克隆抗体，用于治疗炎性疼痛和神经病理性疼痛。该药的作用机制是_________________________________。 【答案】（1） ①. 受体##特异性受体 ②. 电信号→化学信号→电信号 （2）促肾上腺皮质激素释放激素 （3） ①. 溶酶体 ②. 非特异性免疫 （4） ①. 大脑皮层 ②. 促进吞噬细胞释放NGF；钙离子内流，利于形成动作电位，产生兴奋 （5）抑制NGF与NGF受体结合，进而抑制感受器的兴奋，使大脑皮层不能产生痛觉 【解析】 【分析】1、人体神经调节的方式是反射，反射的结构基础是反射弧，反射弧由感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器五部分构成，兴奋在反射弧上单向传递，兴奋在突触处产生电信号到化学信号再到电信号的转变。 2、人体的三道防线：第一道防线是由皮肤和黏膜构成的，不仅能够阻挡病原体侵入人体，而且它们的分泌物（如乳酸、脂肪酸、胃酸和酶等）还有杀菌的作用。第二道防线是体液中的杀菌物质——溶菌酶和吞噬细胞。第三道防线主要由免疫器官（扁桃体、淋巴结、胸腺、骨髓、和脾脏等）和免疫细胞（淋巴细胞、吞噬细胞等）借助血液循环和淋巴循环而组成的。 【小问1详解】 兴奋在神经元之间的传递时，突触前膜释放的神经递质与突触后膜上的特异性受体结合，引起突触后膜的兴奋。兴奋在突触处的信号转变方式为电信号→化学信号→电信号。 【小问2详解】 糖皮质激素的分泌存在分级调节，下丘脑分泌的促肾上腺皮质激素释放激素作用于垂体，使垂体分泌促肾上腺皮质激素，该激素使肾上腺皮质分泌糖皮质激素。 【小问3详解】 病原体侵染机体后，吞噬细胞将其吞噬，并利用细胞内的溶酶体将其水解，在这过程中吞噬细胞参与的是免疫系统的第二道防线，因此这种防御作用为非特异性免疫。 【小问4详解】 产生感觉的部位在大脑皮层。由图可知，根据图中箭头，NGF与受体结合后，激活激酶，激酶导致钙离子通道开放，钙离子内流，利于形成动作电位，产生兴奋。同时可促进吞噬细胞释放NGF。 【小问5详解】 药物MNACI3是一种抗NGF受体的单克隆抗体，使得NGF不能与NGF受体结合，从而不能引起感受器兴奋，也不能将兴奋传导大大脑皮层，因此感觉不到疼痛。 24. 科学家研发了多种RNA药物用于疾病治疗和预防，图中①～④示意4种RNA药物的作用机制。请回答下列问题。 （1）细胞核内RNA转录合成以___________为模板，需要___________的催化。前体mRNA需加工为成熟的mRNA，才能转运到细胞质中发挥作用，说明___________对大分子物质的转运具有选择性。 （2）机制①:有些杜兴氏肌营养不良症患者DMD蛋白基因的51外显子片段中发生___________，提前产生终止密码子，从而不能合成DMD蛋白。为治疗该疾病，将反义RNA药物导入细胞核，使其与51外显子转录产物结合形成___________，DMD前体mRNA剪接时，异常区段被剔除，从而合成有功能的小DMD蛋白，减轻症状。 （3）机制②:有些高胆固醇血症患者的PCSK9蛋白可促进低密度脂蛋白的内吞受体降解，血液中胆固醇含量偏高。转入与PCSK9mRNA特异性结合的siRNA，导致PCSK9mRNA被剪断，从而抑制细胞内的___________合成，治疗高胆固醇血症。 （4）机制③:mRNA药物进入患者细胞内可表达正常的功能蛋白，替代变异蛋白发挥治疗作用。通常将mRNA药物包装成脂质体纳米颗粒，目的是___________。 （5）机制④:编码新冠病毒S蛋白的mRNA疫苗，进入人体细胞，在内质网上的核糖体中合成S蛋白，经过___________修饰加工后输送出细胞，可作为___________诱导人体产生特异性免疫反应。 （6）接种了两次新型冠状病毒灭活疫苗后，若第三次加强接种改为重组新型冠状病毒疫苗，根据人体特异性免疫反应机制分析，进一步提高免疫力的原因有: ______________________。 【答案】（1） ①. DNA的一条链 ②. RNA聚合酶 ③. 核孔 （2） ①. 基因突变 ②. 双链RNA （3）PCSK9蛋白 （4）防止mRNA降解，协助mRNA跨膜进入细胞 （5） ①. 高尔基体 ②. 抗原 （6）重组新型冠状病毒疫苗上新的抗原决定簇，可激发机体产生体液免疫和细胞免疫，从而产生新的抗体和记忆细 胞；相同的抗原决定簇可激发机体的二次免疫过程，能产生更多的抗体和记忆细胞 【解析】 【分析】基因表达包括转录和翻译两个过程，其中转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程主要在细胞核中进行，需要解旋酶和RNA聚合酶参与；翻译是以mRNA为模板合成蛋白质的过程，该过程发生在核糖体上，需要以氨基酸为原料，还需要酶、能量和tRNA。 【小问1详解】 转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，该过程需要RNA聚合酶的催化；mRNA需要加工为成熟mRNA后才能被转移到细胞质中发挥作用，该过程是通过核孔进行的，说明核孔对大分子物质的转运具有选择性。 【小问2详解】 若DMD蛋白基因的51外显子片段中发生基因突变，即发生碱基对的增添、替换或缺失，可能导致mRNA上的碱基发生改变，终止密码提前出现，从而不能合成DMD蛋白而引发杜兴氏肌营养不良；治疗该疾病，将反义RNA药物导入细胞核，使其与51外显子转录产物结合形成双链RNA，DMD前体mRNA剪接时，异常区段被剔除，从而合成有功能的小DMD蛋白，减轻症状。 【小问3详解】 高胆固醇是由于胆固醇含量过高引起的，转入与PCSK9mRNA特异性结合的siRNA，导致PCSK9mRNA不能发挥作用，即不能作为模板翻译出PCSK9蛋白，密度脂蛋白的内吞受体降解减慢，从而使胆固醇含量正常。 【小问4详解】 通常将mRNA药物包装成脂质体纳米颗粒，脂质体与细胞膜的基本结构类似，防止mRNA降解，协助mRNA跨膜进入细胞。 【小问5详解】 新冠病毒的S蛋白属于膜上的蛋白，膜上的蛋白质在核糖体合成后，还需要经过高尔基体的修饰加工后输送出细胞；疫苗相当于抗原，可诱导人体产生特异性免疫反应。 【小问6详解】 接种了两次新型冠状病毒灭活疫苗后，若第三次加强接种改为重组新型冠状病毒疫苗，可进一步提高免疫力的原因是：重组新型冠状病毒疫苗上新的抗原决定簇，可激发机体产生体液免疫和细胞免疫，从而产生新的抗体和记忆细 胞；相同的抗原决定簇可激发机体的二次免疫过程，能产生更多的抗体和记忆细胞。 25. 科研人员在杂交瘤细胞的基础上，获得了双杂交瘤细胞，每种杂交瘤细胞产生的抗体结构、与抗原结合的情况如下图1所示。请回答下列问题。 （1）科研人员将抗原ɑ、β分别注射到不同的小鼠体内，引起机体发生________免疫，其中的________分泌相应抗体。 （2）制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，经过两次筛选得到两种杂交瘤细胞，其中第二次筛选一般先用________方法获得单个杂交瘤细胞，并通过________获得大量的这种杂交瘤细胞。如果两种杂交瘤细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。 （3）抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同）。因此，双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原ɑ、β结合称为双特异性抗体，如下图2，请将合适的字母填入下面的表格中。 1 2 3 4 5 6 A2 ① ② ③ ɑ ④ ①________；②________；③________；④________。 （4）结合所学，图1为甘蓝与萝卜体细胞杂交的原生质体融合过程示意图。图2为图1的①过程中不同酶解时间下，萝卜细胞原生质体数量统计。请回答下列相关问题。 图1中①过程应用纤维素酶和果胶酶来处理萝卜细胞和甘蓝细胞。 据图2判断，①过程对萝卜细胞处理的最佳时间为_______h，从细胞结构的角度分析，对甘蓝细胞处理的最佳时间和对萝卜细胞处理的最佳时间相近，推测理由是__________。 将图1杂种细胞培育成一个完整植株采用的技术手段是_______________。该技术手段包括两大过程是________________________________（按顺序填写）。 【答案】（1） ①. 体液 ②. 浆细胞 （2） ①. 96孔板 ②. 体外培养 （3） ①. B2 ②. a ③. b ④. β （4） ①. 4 ②. 甘蓝细胞的细胞壁成分和萝卜细胞相同，且所用酶相同 ③. 植物组织培养 ④. 脱分化、再分化 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。 【小问1详解】 图1中是抗原α、β分别注射到小鼠体内，小鼠分别产生的α、β的两种单克隆抗体，科研人员将抗原α、β分别注射到小鼠体内，引起机体的体液免疫，B细胞受到刺激后开始一系列的增殖、分化，大部分分化成浆细胞产生抗体，小部分形成记忆细胞。 【小问2详解】 其中第二次筛选一般用96孔板（多孔板）培养，以筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。并通过体外培养获得大量的这种杂交瘤细胞。如果两种杂交瘤细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b，这种细胞称作双杂交瘤细胞。 【小问3详解】 由于图2抗体是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体，由表格信息可知1链为A2，则2链为B2，根据图1信息判断，3、4分别是a、b；因为5为α，则6是β。 【小问4详解】 从图2可看出，当酶解时间为4h时原生质体数量最多。因为①过程是用酶去除植物细胞的细胞壁，甘蓝细胞细胞壁的主要成分和萝卜细胞的相同，且所用酶相同，所以，酶解时间对甘蓝细胞处理的效果应与对萝卜细胞处理的相近。将图1杂种细胞培养成一个完整幼苗需用植物组织培养方法，其过程为将杂种细胞通过脱分化形成愈伤组织，再将愈伤组织诱导再分化形成幼苗。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $