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微专题56 动物细胞融合和单克隆抗体制备
1.A 制备单克隆抗体过程中,要对实验小鼠注射特定的抗原,抗原进入机体后刺激机体产生特异性免疫反应从而产生相应的B淋巴细胞,B不符合题意;向细胞培养液中加入促融剂的种类和处理时间会影响细胞的融合,C不符合题意;选择特定试剂筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞需要考虑,否则会影响单克隆抗体的产量或得到单克隆抗体的特异性差,D不符合题意。
2.B 对小鼠注射GP3蛋白,小鼠发生体液免疫并产生相应的抗GP3蛋白抗体,A错误;①过程是将细胞甲和sp20细胞融合,诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等,B正确;融合后的细胞至少需要经过两次筛选,第二次筛选需进行克隆化培养和抗体检测,C错误;细胞丁扩大培养后得到的抗体是一群识别相同抗原的单克隆抗体,D错误。
3.A 体外培养的单个B淋巴细胞无法无限增殖,故不能获得大量抗HCG的单克隆抗体,A错误;过程③是经过多孔玻璃板筛选后的杂交瘤细胞,均能产生特定抗体,B正确;据图可知,图中细胞集落a能够产生阳性反应,故可用于大规模培养,生产抗HCG单克隆抗体,C正确;由于杂交瘤细胞既保留了鼠瘤细胞无限增殖的特点,又有B淋巴细胞产生特异性抗体的作用,所以图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象,D正确。
4.D 单克隆抗体的制备过程主要运用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合,原理依次是细胞的增殖、细胞膜的流动性,D错误。
5.解析:(1)单克隆抗体运用动物细胞融合(B细胞和骨髓瘤细胞的融合)、动物细胞培养技术(培养骨髓瘤细胞等);过程①目的是刺激小鼠产生分泌抗S蛋白抗体的B淋巴细胞;过程②目的是促进细胞和骨髓瘤细胞融合,促融方法有PEG融合法、电融合法或灭活病毒诱导法等。(2)过程③是指把c细胞群稀释,然后都放在选择培养基的多孔培养皿中培养,在该培养基中未融合的细胞和同种融合的细胞都死亡,只有杂交瘤细胞能存活且增殖;过程④是筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,所用方法是抗原—抗体杂交。(3)在筛选杂交瘤细胞时,试管中共有5种细胞,分别是未融合的B淋巴细胞、互融的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、互融的骨髓瘤细胞、互融的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,只有互融的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能增殖。
答案:(1)动物细胞融合、动物细胞培养 刺激小鼠产生分泌抗S蛋白抗体的B淋巴细胞 灭活病毒诱导法(或PEG融合法或电融合法) (2)选择 杂交瘤细胞 抗原—抗体杂交 (3)C
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微专题56 动物细胞融合和单克隆抗体制备
1.在利用细胞融合技术生产单克隆抗体的过程中,不需要考虑( )
A.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞之间的免疫排斥
B.注射特定抗原蛋白,对实验小鼠进行免疫
C.向细胞培养液中加入促融剂的种类和处理时间
D.选择特定试剂筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞
2.猪繁殖与呼吸综合征是一种由PRRSV病毒引发的传染病,为诊断和治疗猪繁殖与呼吸综合征,科学家制备出抗PRRSVGP3蛋白的单克隆抗体,制备过程如图所示,下列叙述正确的是( )
注:sp20细胞是小鼠骨髓瘤细胞。
A.若小鼠血清中出现抗GP3蛋白抗体,则说明小鼠产生了相应的细胞免疫
B.①过程中可通过PEG融合法、电融合法诱导细胞甲和sp20细胞融合
C.第2次筛选无需克隆化培养细胞丙,可直接通过抗体检测筛选出细胞丁
D.细胞丁扩大培养后得到的抗体是一群识别不同抗原的抗体混合物
3.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。抗HCG单克隆抗体制备流程示意图如图所示。下列有关分析错误的是( )
A.体外培养单个B淋巴细胞也可以获得大量抗HCG的单克隆抗体
B.过程③培养后的细胞均能产生特定抗体
C.图中细胞集落a可用于大规模培养,生产抗HCG单克隆抗体
D.图中能产生单克隆抗体的细胞在培养过程中不会出现接触抑制的现象
4.(不定项)人乳头瘤病毒(HPV)是一种DNA病毒,可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述错误的是( )
A.在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体
B.单克隆抗体的特点是能准确识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,可以大量制备
C.可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞
D.单克隆抗体制备过程涉及的生物学原理有细胞增殖和细胞膜的选择透过性
5.如图为筛选、制备单克隆抗体的示意图,①~⑤代表相关过程,a~g代表相关细胞。根据图解回答问题:
(1)由图可看出,单克隆抗体制备过程运用的动物细胞工程技术有____________________(写出2个),过程①是给小鼠注射S抗原蛋白,其目的是__________________,过程②的促融方法有__________________(写出一种促融的方法)。
(2)图中过程③④为两次筛选过程,过程③是指把c细胞群稀释,然后都放在特定的________培养基的多孔培养皿中培养,只有________________能够存活且增殖,因此细胞集落为单个存活细胞的克隆;过程④是用________________的方法,经多次筛选得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞群。
(3)已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基蝶呤阻断。鼠淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖。若将这两种细胞在含氨基蝶呤的试管中混合后促融,则试管中细胞的种类数和能增殖的细胞种类数分别是(不考虑三个及以上细胞融合)________。
A.3和1 B.5和3
C.5和1 D.3和3
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