2025届高考生物一轮复习：基因工程练习
高考生物专题抽测：基因工程
一、单项选择题：本部分包括12题，每题1分，共计12分。每题只有一个选项最符合题意。
1．如表列举了几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示相关酶的切割位点）。如图是酶切后产生的几种末端。下列说法正确的是
限制酶 | Alu Ⅰ | BamH Ⅰ | Sma Ⅰ | Sau3A Ⅰ |
识别序列切割位点 | AG↓CT TC↑GA | G↓GATCC CCTAG↑G | CCC↓GGG GGG↑CCC | ↓GATC CTAG↑ |
A．Sau3AⅠ和BamHⅠ切割产生的片段能够相连，但连接后的片段两者都不能再切割
B．BamHⅠ切割的是氢键，AluⅠ切割的是磷酸二酯键
C．②④⑤对应的识别序列均能被Sau3AⅠ识别并切割
D．T4DNA连接酶即能连接①③，也能连接②⑤，但后者连接效率低
2．CRISPR/Cas13d技术是一项以向导RNA（gRNA）引导Cas13d蛋白定向作用于靶向RNA的新兴技术。研究人员设计了若干个gRNA，分别靶向病毒RNA基因组的不同肽编码区，但不影响人体细胞的RNA，作用机理如下图。下列相关叙述错误的是
A．Cas13d能定向切开相邻两个核糖核苷酸之间的磷酸二酯键
B．gRNA通过与靶向RNA碱基互补配对将Cas13d引导至特定位点
C．与限制性核酸内切酶相比，Cas13d具有特异性识别能力
D．该技术有望成为一种能定向、灵活治疗RNA病毒感染的新方法
3．琼脂糖凝胶电泳常用于基因工程中不同 DNA 片段的检测，研究人员用 EcoRⅠ和 SmaⅠ两种限制酶处理某DNA分子，得到图2所示图谱，其中1号泳道是标准DNA 样品，2号、3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果；图 1 为 EcoRⅠ切割该 DNA 分子后的结果。下列说法错误的是
A．EcoRⅠ的识别序列为GAATTC，切割位点在G和A 之间
B．该DNA分子最可能是含1 000碱基对的环状DNA
C．据图2可知，该DNA分子中EcoRⅠ和SmaⅠ的酶切位点各有一个
D．EcoRⅠ和SmaⅠ共同处理后，形成2个游离的磷酸基团
4．基因工程中需使用多种工具酶，几种限制酶的切割位点如图所示。下列说法正确的是
A．限制酶Smal和EcoRV切割形成的末端，可通过E.coli DNA连接酶相互连接
B．DNA连接酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶均可催化磷酸二酯键的形成
C．限制酶EcoRI进行一次切割，会切断2个磷酸二酯键，形成1个游离的5’末端
D．若两种限制酶的识别序列相同，则形成的末端一定能通过DNA连接酶相互连接
5．限制性内切酶EcoRI识别并切割5＇-G↓AATTC-3＇3＇-CTTAA↑G-5＇双链DNA，用EcoRI完全酶切果蝇基因组DNA，理论上得到DNA片段的平均长度（碱基对）约为（ ）
A．60 B．2500 C．4000 D．24000
6．作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由正确的是（ ）
A．具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合
B．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达
C．对宿主细胞无伤害，以便于重组 DNA 的筛选
D．能在宿主细胞中稳定保存并复制，以便产生大量的目的基因
7．下列有关限制性内切核酸酶的叙述，正确的是
A．限制性内切核酸酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解磷酸二酯键有2个
B．限制性内切核酸酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大
C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性内切核酸酶切出的黏性末端可用DNA连接酶连接
D．只有用相同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒
8．下列关于利用洋葱进行“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是
A．DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精而某些蛋白质可以溶
B．将研磨液加入切碎的洋葱，充分研磨后离心，取上清液进行后续实验
C．玻璃棒上出现的白色丝状物是粗提取得到的DNA分子
D．将白色丝状物加入二苯胺试剂沸水浴，待试管冷却后观察颜色变化
9．已知限制酶BamHI和BglⅡ的识别位点分别是-G↓GATCC-、-A↓GATCT-。下列有关说法错误的是
A．限制酶的识别序列可能由4个、6个、8个或其他数目的核苷酸组成
B．上述两种限制酶切割出的末端只能用E.coliDNA连接酶进行“缝合”
C．若用两种限制酶同时切割目的基因和质粒，可提高重组质粒构建的成功率
D．上述两种限制酶切割出的末端之间相互连接后可能不会再被两种限制酶识别
10．从图甲酶切结果分析图乙目的基因（长度为2.0kb）插入方向正确的重组质粒序号和作出该判断所用的限制酶是
A．①，EcoRⅠ B．②，BamHⅠ C．①，EcoRⅠ和HindⅢ D．②，EcoRⅠ和HindⅢ
11．关于基因工程各种工具的叙述，错误的是
A．限制酶主要来自原核生物，限制酶一般不切割自身DNA
B．E .coliDNA连接酶只能“缝合”黏性末端
C．载体上必须有2个以上限制性内切核酸酶的切割位点
D．限制酶断开磷酸二酯键，T4DNA连接酶能恢复磷酸二酯键
12．将目的基因J与质粒构建重组表达载体，该质粒的部分结构如图所示。下列叙述错误的是
A．与图中启动子结合的酶是RNA聚合酶
B．除图中标出的结构外，质粒还需具备的结构有复制原点、标记基因、限制酶切位点等
C．用PCR检测J基因连接到质粒中且方向正确可选用的一对引物是F1和R2
D．若J基因转录的链位于b链，可知引物F1与基因J的b链相应部分序列相同
二、非选择题：本部分包括3题，共计38分。除特别说明外，每空1分。
13．（11分）血栓调节蛋白（TM）只能在血管内皮细胞中合成，具有调节凝血的功能。为了解决异种器官移植时引起凝血紊乱的问题，科研人员研究制备了猪血管内皮特异性表达人血栓调节蛋白（hTM）的转基因猪。下图表示部分研究过程，请回答：
注：ori是复制原点，T为终止子，puro为嘌呤霉素抗性基因，pTM为猪血栓调节蛋白，相关限制酶识别序列及切割位点如下表
限制酶 | Xho I | cla I | EcoR V |
识别序列及切割位点 | C | AT | GAT |
（1）步骤①使用的限制酶有 （2分）.
（2）步骤②中研究人员设计并合成了以下引物，合成这些引物的原料是 。
引物1：ATCGATATGCTTGGGGTCCTGGTCCTTGGC