精品解析：山东省菏泽市定陶区第一中学2023-2024学年高二下学期期末模拟考试生物试题（二）

高二生物期末考试模拟试题（二） 时间：90min 分值：100分 一、本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求 1. 酒精是生物学实验中常用的试剂。下表表述错误的选项共有（　　） 选项 实验 酒精的作用 ① DNA 的粗提取与鉴定 溶解DNA， 初步分离DNA与蛋白质 ② 菊花的组织培养 工作台、外植体、培养基等的消毒 ③ 绿叶中色素的提取 溶解绿叶中的色素 ④ 检测生物组织中的脂肪 洗去浮色 ⑤ 研究土壤中小动物类群的丰富度 防止小动物尸体腐烂 A. 1 项 B. 2 项 C. 3项 D. 4 项 2. 2024年3月31日丽水马拉松开跑。运动员在跑步过程中会消耗大量能量、丢失很多水和无机盐，比赛补给站为运动员提供了水、运动饮料和香蕉等物资。下列叙述错误的是（　　） A. 香蕉中富含的葡萄糖和果糖，能被人体快速吸收利用 B. 运动饮料中含有多种离子，可帮助维持运动员血浆渗透压的平衡 C. 运动员体内的水可缓和体温变化，与水分子之间的氢键有关 D. 若运动员血液中钙离子含量过高，则会引发肌肉抽搐 3. 科学发现离不开科学家们的前赴后继，以下关于科学家的工作和结论表述错误的是（ ） A. 恩格尔曼设计了巧妙的水绵实验，显微镜下需氧细菌的分布直观地体现了放氧部位 B. 希尔发现离体叶绿体的悬浮液中加入氧化剂，光、暗条件下都能释放出氧气 C. 丹尼利和戴维森发现细胞表面张力低于油—水界面的表面张力，结合其他发现推测细胞膜中可能附有蛋白质 D. 罗伯特森利用电镜观察到细胞膜的三层结构，推测细胞膜由蛋白质—脂质—蛋白质构成 4. 一种金属离子能够通过细胞膜进入细胞内部。将活细胞放入不同浓度的、含该金属离子的溶液中，1h后测量细胞内该金属离子的浓度，得到如图所示曲线。下列叙述错误的是（　　） A. 该金属离子进入细胞的方式是主动运输 B. 该金属离子的转运速率与溶液中离子浓度有关 C. A点之后转运速率不再增加，可能是受通道蛋白数量的限制 D. 该金属离子的转运过程中需要消耗能量 5. 原核生物链霉菌产生的缬氨霉素是由12个氨基酸组成的脂溶性环形肽。若将缬氨霉素嵌入脂质体后，能提高K+顺浓度梯度运输的速率。缬氨霉素还会抑制线粒体中ATP的合成。下列说法错误的是（ ） A. 链霉菌、支原体、颤蓝细菌的细胞中均不存在染色体 B. 合成缬氨霉素时， 需脱去12分子水，形成12个肽键 C. 缬氨霉素嵌入脂质体时， 处于磷脂分子的头部位置 D. 肌肉细胞使用缬氨霉素后，会抑制K+的主动运输 6. 下图曲线b 表示在最适温度、最适pH 时，反应物浓度与酶促反应速率的关系。下列叙述正确的是（ ） A. 若实验刚开始时酶量增加，反应速率可用曲线a 表示 B. B点时升高温度，反应速率可用曲线c 表示 C. 曲线出现平台的原因是反应物已经反应完全 D. 限制AB段反应速率的主要因素是反应物浓度 7. 下图为线粒体局部放大示意图，内膜上多个各不相同的电子传递复合物在依次传递电子的同时将质子排出线粒体基质，ATP合酶能催化ATP的合成。下列叙述正确的是（　　） A. 图示过程体现的是有氧呼吸第二、三阶段，分别发生于线粒体基质和内膜上 B. 线粒体内外膜间隙的pH高于线粒体基质 C. 还原型辅酶I在细胞质基质和线粒体基质中均能产生 D. 图示过程发生了一系列的能量转换，NADH中的化学能多数转换为ATP中的化学能 8. 如图为植物光合作用强度随光照强度变化的坐标图，下列叙述中不正确的是（ ） A. a点叶肉细胞产生ATP的细胞器只有线粒体 B. b点植物的光合作用强度与细胞呼吸强度相等 C. 当植物缺镁时，b点将右移 D. 已知某植物光合作用和细胞呼吸的最适温度分别为25℃和30℃，如果该图表示该植物处于25℃环境中，则将温度提高到30℃时，a点上移，b点左移 9. 浙江嵊州盛产的桃形李可用于生产果酒、果醋、果脯等系列产品，部分产品流程如下图。下列叙述正确的是（ ） A. 新鲜桃形李汁接种酵母菌后需高压蒸汽灭菌以排除杂菌污染 B. 桃形李汁中通入无菌空气对酵母菌的增殖和酒精的产量均不利 C. 可抽样检测发酵罐内的酒精和醋酸含量初步判断发酵状态 D. 可以用平板划线法调查发酵液中酵母菌和醋酸菌的数量 10. 紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种次生代谢物。利用植物组织培养和细胞培养的技术生产紫杉醇是一条重要途径，基本流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 通常选取幼茎是因为其携带的病毒少 B. 在愈伤组织阶段主要依赖培养基中的有机物供能 C. 该过程不需要再分化形成完整植株就可以提取紫杉醇 D. 继代次数增加会使愈伤组织的再生率和产量增加 11. 蝙蝠是一种具有长寿、抗病毒和回声定位等生物学特性的哺乳动物，有重要研究价值。研究者将蝙蝠的诱导多能干细胞（iPS细胞）标上绿色荧光，将其注入到小鼠的囊胚中，发现内细胞团某些细胞带有绿色荧光，将上述胚胎移入雌鼠子宫，发现三胚层的细胞中均有部分带绿色荧光。下列说法错误的是（ ） A. 可从蝙蝠囊胚的内细胞团中获得其iPS细胞 B. 可通过体外受精和胚胎培养技术获得小鼠囊胚 C. 接受胚胎的小鼠需进行同期发情处理 D. 结果表明蝙蝠iPS细胞在体内仍具有分化能力 12. H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育。可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列叙述正确的是（ ） A. 培养液中添加H-Y单克隆抗体能促进牛早期胚胎发育成雄性 B. 该单抗的制备涉及动物细胞培养、细胞核移植技术、细胞融合等技术 C. 囊胚期性别鉴定后获得的雄性胚胎可进行胚胎移植 D. 用H-Y抗原免疫母牛也可以获得相应抗体 13. 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ） A. 生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等 B. 治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆个体，且需要严格的监管 C. “设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者需要在植入前对胚胎进行遗传学诊断 D. 转基因植物进入自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性 14. 牛胚胎移植试验的主要流程如下，下列相关叙述正确的是（　　） ①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④___→⑤胚胎移植→⑥子代小牛 A. ①过程需要注射性激素，目的是获得更多的卵母细胞 B. ③过程是以哺乳动物早期胚胎未与子宫建立了组织上的联系为前提 C. ④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚 D. ⑤过程成功率的高低主要取决于受体的排斥程度 15. 以下说法正确的是（ ） ①基因工程的原理是基因重组②动物细胞培养的原理是细胞增殖 ③制备单克隆抗体时得到杂交瘤细胞还要克隆化培养和抗体检测才能确定是否能产生特异性抗体 ④克隆动物的成功证明动物细胞有全能性 ⑤稀释涂布平板法除了用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目 ⑥接种针和接种环常用高压蒸汽灭菌 ⑦单克隆抗体的特点是能准确识别抗原的差异并与之结合，可大量制备 ⑧多数动物细胞培养液的pH为7.35~7.45 A. ①②③⑤⑦ B. ②③④⑤⑧ C. ①②④⑤⑥ D. ②⑤⑥⑦⑧ 二、不定项：每题3分共15分。选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 如图为C、H、O、N、P等元素构成大分子物质甲、乙、丙及结构丁的示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 若图中物质甲能与碘液发生蓝色反应，则单体3为葡萄糖 B. 若图中结构丁是一种细胞器，则单体1为氨基酸，单体2为核糖核苷酸 C. 若图中结构丁能被碱性物质染成深色，则结构丁为染色质或染色体 D. 物质乙、丙和单体1、单体2都有物种特异性 17. 下列有关酶的叙述，正确的是（ ） A. DNA连接酶以DNA的一条链为模板，将单个脱氧核苷酸连接起来 B. 反转录酶是以RNA为模板指导脱氧核糖核苷酸连接合成DNA的酶 C. DNA聚合酶可将两个DNA分子片段间的缝隙连接起来 D. 限制性内切核酸酶识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割DNA分子 18. 抗CD20抗体可用于治疗淋巴瘤等疾病。研究人员将表达抗CD20单克隆抗体的DHFR—CHO杂交瘤细胞接种于反应器中培养，抽样检测产物浓度和细胞生长情况（通过台盼蓝染色结合显微镜直接计数统计细胞密度和活性，结果如图）。下列叙述错误的是（　　） A. 杂交瘤细胞培养过程中需置于37℃、含的气体条件下进行培养 B. 显微镜下只统计单位体积中被染色的细胞数量，即可得到活细胞密度 C. 培养到第6天左右，可获得最高浓度的抗CD20抗体 D. 经克隆化培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体 19. 科学家将某病毒抗原蛋白的部分编码序列（RBD）拼接成融合基因2RBD和3RBD，探究RBD的二聚体蛋白和三聚体蛋白能否模拟RBD的天然构象并获得高效免疫原性。为鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒用NcoI和SacI双酶切处理后电泳，结果如图，其中泳道1为双酶切pNZ8149-2RBD，两个条带大小分别为2507bp和2020bp。将构建好的重组质粒分别导入工程菌中进行表达产物的检测。下列说法不正确的是（ ） A. PCR扩增融合基因时，在引物的3′端添加相应限制酶的识别序列 B. 据图可知，融合基因3RBD的长度为2686bp C. 泳道2呈现一个条带的原因是酶切pNZ8149﹣3RBD产生的两个片段大小相近 D. 从工程菌细胞表面提取蛋白质进行检测，从而进一步比较两者的免疫原性 20. 下图表示不同生物细胞代谢的过程。下列有关叙述正确的是（ ） A. 给甲提供H218O，一段时间后可在细胞内检测到（CH218O） B. 甲、乙、丙三者均为生产者，甲可能是蓝细菌，乙可能是根瘤菌，丙发生的反应中不产氧，可能为厌氧型的生物 C. 图丁过程①可表示渗透吸水，对④⑤⑥⑦⑧过程研究，发现产生的能量全部储存于ATP中 D. 就植株叶肉细胞来说，若图丁中②O₂的释放量大于⑧O₂的吸收量，则该植物体内有机物的量不一定增加 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 线粒体是真核细胞的重要细胞器。当线粒体受损时，细胞通过清理受损的线粒体来维持细胞内的稳态。我国科研人员对此开展研究。 （1）从结构和功能的角度分析线粒体结构的特殊性及其意义：_____________。 （2）科研人员推测受损线粒体可通过进入迁移体（细胞在迁移中形成的一种囊泡结构）而被释放到细胞外，即“线粒体胞吐”。为此，科研人员利用绿色荧光标记迁移体，红色荧光标记线粒体，用药物C处理细胞使线粒体受损，若观察到_____________则可初步验证上述推测。 （3）为研究受损线粒体进入迁移体的机制，科研人员进一步实验。 ①真核细胞内的_____________锚定并支撑着细胞器，与细胞器在细胞内的运输有关。 ②为研究D蛋白和K蛋白在线粒体胞吐中的作用，对红色荧光标记了线粒体的细胞进行相应操作，检测迁移体中的红色荧光，操作及结果如图1和2。图1结果表明：K蛋白______________。图2结果表明：_____________。 （4）研究表明，正常线粒体内膜两侧离子分布不均，形成线粒体膜电位，而受损线粒体的膜电位丧失或降低。科研人员构建了D蛋白基因敲除的细胞系，测定并计算经药物C处理的正常细胞和D蛋白基因敲除细胞系的线粒体膜电位平均值，结果如下表，据表分析：D蛋白基因敲除细胞系线粒体膜电位的平均值升高的原因是______。 细胞类型 正常细胞 D蛋白基因敲除细胞系 细胞中全部线粒体膜电位的平均值（荧光强度相对值） 4.1 5.8 22. 土壤盐分过高对植物的伤害作用称为盐胁迫。科研人员研究盐胁迫下竹柳苗光合作用的变化，结果如下图，请回答下列问题： CK：对照组；S1：轻度盐胁迫；S2：中度盐胁迫；S3：重度盐胁迫 （1）与第3天相比，第6天盐胁迫组竹柳苗的净光合速率下降，其中____________组（填“S2”或“S3”）是因为非气孔因素造成的，判断的理由是________________________。 （2）重度盐胁迫条件下，12天内竹柳苗干重的变化为_________（填“增加”、“不变”或“减少”），原因是______________________。 （3）研究发现，盐胁迫下竹柳根细胞内的脯氨酸含量明显升高。据此推测竹柳减缓盐胁迫对水分吸收影响的机制是____________________。 （4）进一步研究发现，盐胁迫下竹柳根细胞内的脯氨酸含量增加的机制是通过激活脯氨酸合成关键基因P5CS和P5CR的表达，以及提高P5CR酶的活性。请设计实验加以验证该机制，简要写出实验思路____________。 23. 某兴趣小组同学从土壤中分离分解尿素的细菌并对其进行计数。其实验设计流程如图所示，每个浓度设置4个平板，其中平板1、2、3是选择培养基，平板4是牛肉膏蛋白胨 （1）获得纯净的微生物培养物的关键是_________。涂布器使用前用到的无菌技术包括________。 （2）图中选择培养基中对氮源的要求是________。牛肉膏蛋白胨培养基中牛肉膏提供的主要营养是________。 （3）图中四组平板采用的接种方法是________。微生物的数量测定还可以用显微镜直接计数，该方法需要利用特定的_________，在显微镜下观察、计数，但统计结果比实际值________(填“大或小”),原因是________。 （4）若乙组4个平板,统计菌落数分别为260、268、252、358,则 1g 土样中分解尿素细菌菌落数是________个。比较四组实验中1、2、3平板和4号平板中的菌落数，可知此选择培养基能够_________。 24. 裸鼹鼠几乎不得癌症，其寿命可超过30年，同样大小的家鼠最长寿命为4年。为探究其原因，科研人员做了以下研究。 （1）将裸鼹鼠皮肤成纤维细胞置于__________培养箱进行体外培养，经检测发现其分泌大量粘稠的高分子量透明质酸（HA），可抑制细胞过度增殖。 （2）研究者检测不同来源成纤维细胞中HA合成酶（HAS）的含量，结果如图1。另外，发现裸鼹鼠组织的HA降解酶（HAase）的活性远低于人和小鼠。结合图文信息，分析裸鼹鼠皮肤成纤维细胞分泌大量高分子量HA的原因是______________________________________________。 结果显示，裸鼹鼠胚胎期HA合成酶低表达，推测其意义是______________________________________________。 （3）为进一步研究高分子量HA能否提高小鼠的寿命，研究人员进行了下列实验（图2）。 ①通过转基因技术获得转基因小鼠A：为了将目的基因插入小鼠6号染色体的特定位点，需在其两端设计与6号染色体同源序列，实现同源序列之间的重组。由此获得的转基因小鼠A暂时无法表达HA合成酶2，原因是______________________________________________________。 ②B鼠为导入表达CE的纯合子，CE也插入6号染色体的相同位点。外源雌激素可诱导cre重组酶活化，活化的cre重组酶能识别并切除loxP位点间的序列。A、B鼠交配获得C、D鼠，请画出C鼠的基因组成情况_________________________。 ③利用C、D鼠进行实验，测得实验组小鼠HA含量升高，癌症概率降低、炎症反应减少，寿命也得到了延长。请写出对照组的选材______________（“C”或“D”）及实验处理。 （4）请简述本研究的应用前景______________。 25. 研究发现，大部分白血病患者细胞中存在异常的融合基因 UBA2-WTIP，可作为检测白血病的特异性分子标志物。科研人员通过 RT-PCR 方法克隆得到融合基因UBA2-WTIP，为了研究该基因的作用和致病机制，需要构建重组载体并把目的基因和FLAG标签基因序列连接起来，分别获得带有 FLAG 肽链的 UBA2-WTIP 融合蛋白和WTIP 蛋白。FLAG肽链由8个氨基酸残基组成，可作为基因工程中蛋白质是否表达的标记。 （1）科研人员以提取的某白血病人外周血细胞总 RNA为模板，经过_________过程合成cDNA,设计________种引物,经RT-PCR扩增出融合基因 UBA2-WTIP,对测序结果进行数据分析,推测融合基因UBA2-WTIP 是在 UBA2基因的第16 外显子与 WTIP 基因的第2 外显子处拼接而成，如图1所示。为了验证该融合基因的产生是基因组DNA融合而不是不同的RNA 剪接后逆转录所产生的，可提取该病人的________(填“DNA”或“RNA”)为模板，使用图中F₁ 和 R₁ 引物进行PCR扩增，若出现_________bp扩增片段，说明该融合基因的融合方式是基因组水平融合。 （2）为了构建重组载体，科研人员设计了以下2种引物，如图2所示：上游引物F2为:5’TATGGTACCATG①GCACTGTCGCGGGGG3’,GGTACC 为 KpnI酶切位点；下游引物R2为:5’TAT②TCA③GAGCTCAGTGACGTG3’；FLAG标签基因编码链序列可以插入目的基因编码区的首端或者末端。已知引物中 ATG对应起始密码。若UBA2-WTIP融合基因编码的蛋白质前端有一段信号肽，则 FLAG 标签基因序列一般不能插入①位置，原因是_________；已知引物中 TCA 对应终止密码，则FLAG 标签基因序列和EcoRⅠ酶切位点应分别插入在下游引物_________、________处。 （3）制备的重组载体体外转染人类白血病细胞株 KG-1a细胞，提取各组细胞总蛋白，用FLAG 单克隆抗体检测蛋白表达情况，并分别测定转染空质粒的对照细胞、转录 UBA2-WTIP 融合基因及转录 WTIP 基因的KG-1a细胞增殖情况，结果分别如图3所示。 检测相关蛋白质是否表达的方法是________；上述生长曲线结果说明________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物期末考试模拟试题（二） 时间：90min 分值：100分 一、本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求 1. 酒精是生物学实验中常用的试剂。下表表述错误的选项共有（　　） 选项 实验 酒精的作用 ① DNA 的粗提取与鉴定 溶解DNA， 初步分离DNA与蛋白质 ② 菊花的组织培养 工作台、外植体、培养基等的消毒 ③ 绿叶中色素的提取 溶解绿叶中的色素 ④ 检测生物组织中的脂肪 洗去浮色 ⑤ 研究土壤中小动物类群的丰富度 防止小动物尸体腐烂 A. 1 项 B. 2 项 C. 3项 D. 4 项 【答案】B 【解析】 【分析】酒精是生物实验常用试剂之一： 1、如检测脂肪实验中需用体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色； 2、观察植物细胞有丝分裂实验和低温诱导染色体数目加倍实验中都需要用到酒精，用体积分数为95%的酒精和盐酸一起制成解离液对材料进行解离，低温诱导染色体数目加倍实验中还需要用酒精洗去卡诺氏液； 3、绿叶中色素的提取和分离实验中可用无水乙醇来提取色素； 4、果酒和果醋制作实验、组织培养实验中可用体积分数为70%的酒精进行消毒等。 【详解】①DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，向滤液中加入冷却的体积分数为95%的酒精，静置2~3min，溶液中会出现白色丝状物，就是粗提取的DNA，①错误； ②70%的酒精可导致蛋白质变性，可用于实验室和日常消毒，菊花的组织培养过程中，需要对工作台、外植体、手等消毒，培养基需要灭菌，②错误； ③由于绿叶中的色素不溶于水而溶于有机溶剂，所以酒精（无水乙醇）在色素的提取和分离实验时可作为有机溶剂起到提取色素的作用，③正确； ④脂肪鉴定实验中，染色后滴加2滴体积分数为50%的酒精，洗去浮色，④正确； ⑤土壤小动物丰富度研究中，收集的小动物可以放入体积分数为70%的酒精溶液中，防止小动物尸体腐烂，⑤正确。 综上分析，共两项错误，B符合题意，ACD不符合题意。 故选B。 2. 2024年3月31日丽水马拉松开跑。运动员在跑步过程中会消耗大量能量、丢失很多水和无机盐，比赛补给站为运动员提供了水、运动饮料和香蕉等物资。下列叙述错误的是（　　） A. 香蕉中富含的葡萄糖和果糖，能被人体快速吸收利用 B. 运动饮料中含有多种离子，可帮助维持运动员血浆渗透压的平衡 C. 运动员体内的水可缓和体温变化，与水分子之间的氢键有关 D. 若运动员血液中钙离子含量过高，则会引发肌肉抽搐 【答案】D 【解析】 【分析】体内水少或吃的食物过咸时→细胞外液渗透压升高→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素多→肾小管、集合管重吸收增加→尿量减少。 【详解】A、香蕉中富含的葡萄糖和果糖，是单糖，能被人体快速吸收利用，A正确； B、运动饮料可以补充水分和无机盐，以补充运动过程中丢失的水分和无机盐，使人体渗透压保持稳定，B正确； C、运动员体内的水可缓和体温变化，与水分子之间的氢键有关，C正确； D、若运动员血液中钙离子含量过低，则会引发肌肉抽搐，D错误。 故选D。 3. 科学发现离不开科学家们的前赴后继，以下关于科学家的工作和结论表述错误的是（ ） A. 恩格尔曼设计了巧妙的水绵实验，显微镜下需氧细菌的分布直观地体现了放氧部位 B. 希尔发现离体叶绿体的悬浮液中加入氧化剂，光、暗条件下都能释放出氧气 C. 丹尼利和戴维森发现细胞表面张力低于油—水界面的表面张力，结合其他发现推测细胞膜中可能附有蛋白质 D. 罗伯特森利用电镜观察到细胞膜的三层结构，推测细胞膜由蛋白质—脂质—蛋白质构成 【答案】B 【解析】 【分析】人们对细胞膜的化学成分和结构的认识经历了很长的过程：1859年欧文顿对膜通透性进行研究推测膜是由脂质组成的；科学家对哺乳动物红细胞膜成分分析得出组成细胞膜的脂质有磷脂和胆固醇；1925年荷兰科学家戈特和格伦德尔推测细胞膜中磷脂分子必然排列为连续的两层；1935年英国丹尼利和戴维森研究细胞膜的张力推测细胞膜除含脂质分子外，可能还附有蛋白质。 【详解】A、恩格尔曼将载有水绵和需氧细菌的临时装片置于没有空气的小室中，在黑暗中用极细的光束照射水绵，发现细菌只向叶绿体被光束照射的部位集中，直观地体现了放氧部位，A正确； B、希尔发现离体叶绿体的悬浮液中加入氧化剂，在光照下可以释放出氧气，B错误； C、英国学者丹尼利和戴维森研究了细胞膜的张力。他们发现细胞的表面张力明显低于油一水界面的表面张力。由于人们已经发现了油脂滴表面如果吸附有蛋白质成分则表面张力会降低，因此丹尼利和戴维森推测细胞膜中可能还附有蛋白质，C正确； D、罗伯特森在电镜下观察到细胞膜清晰的暗一亮一暗三层结构，他结合其他科学家的工作，大胆提出了细胞膜由蛋白质—脂质—蛋白质构成，D正确。 故选B。 4. 一种金属离子能够通过细胞膜进入细胞内部。将活细胞放入不同浓度的、含该金属离子的溶液中，1h后测量细胞内该金属离子的浓度，得到如图所示曲线。下列叙述错误的是（　　） A. 该金属离子进入细胞的方式是主动运输 B. 该金属离子的转运速率与溶液中离子浓度有关 C. A点之后转运速率不再增加，可能是受通道蛋白数量的限制 D. 该金属离子的转运过程中需要消耗能量 【答案】C 【解析】 【分析】题图分析：将活细胞放入不同浓度的含该金属离子的溶液中，1h后测量细胞内该金属离子的浓度得到的曲线，由于细胞能够将金属离子逆浓度运输到细胞中，因此属于主动运输。 【详解】A、看图可知，由于细胞能够将金属离子逆浓度运输到细胞中，该金属离子进入细胞的方式是主动运输，是细胞最重要的物质吸收方式，A正确； B、分析曲线图可知，在一定范围内，随外界溶液中金属离子浓度的增大，细胞内金属离子浓度也增大，可见该金属离子转运速率受溶液中离子浓度的影响，B正确； C、由于该金属离子进入细胞的方式是主动运输，需要载体蛋白的协助，故A点之后金属离子转运速率不再增加，可能是受载体蛋白数量的限制，C错误； D、该金属离子进入细胞的方式是主动运输，需要消耗能量，D正确。 故选C。 5. 原核生物链霉菌产生的缬氨霉素是由12个氨基酸组成的脂溶性环形肽。若将缬氨霉素嵌入脂质体后，能提高K+顺浓度梯度运输的速率。缬氨霉素还会抑制线粒体中ATP的合成。下列说法错误的是（ ） A. 链霉菌、支原体、颤蓝细菌的细胞中均不存在染色体 B. 合成缬氨霉素时， 需脱去12分子水，形成12个肽键 C. 缬氨霉素嵌入脂质体时， 处于磷脂分子的头部位置 D. 肌肉细胞使用缬氨霉素后，会抑制K+的主动运输 【答案】C 【解析】 【分析】主动运输：能逆相对含量梯度运输；需要载体；需要消耗能量。 【详解】A、链霉菌、支原体、颤蓝细菌均为原核生物，原核生物细胞内不含染色体，A正确； B、环状肽脱去的水分子数=氨基酸数=肽键数，缬氨霉素是由12个氨基酸组成的脂溶性环形肽，因此需脱去12分子水，形成12个肽键，B正确； C、缬氨霉素是脂溶性环形肽，而磷脂分子的头部是亲水端，尾部是疏水端，故缬氨霉素嵌入脂质体时， 处于磷脂分子的尾部位置，C错误； D、K+的主动运输需要ATP水解供能，缬氨霉素会抑制线粒体中ATP的合成，因此肌肉细胞使用缬氨霉素后，会抑制K+的主动运输，D正确。 故选C。 6. 下图曲线b 表示在最适温度、最适pH 时，反应物浓度与酶促反应速率的关系。下列叙述正确的是（ ） A. 若实验刚开始时酶量增加，反应速率可用曲线a 表示 B. B点时升高温度，反应速率可用曲线c 表示 C. 曲线出现平台的原因是反应物已经反应完全 D. 限制AB段反应速率的主要因素是反应物浓度 【答案】D 【解析】 【分析】题干中提出“曲线b表示在最适温度、最适pH条件下”进行的，因此此时的酶活性最强，改变温度或PH都会降低酶的活性，使曲线下降．图中可以看出，在曲线AB段反应速率与反应物浓度呈正相关，因此反应物浓度是限制曲线AB段反应速率的主要因素，但是在B点时反应速率不再增加，此时的限制因素为酶的数量。 【详解】A、若实验刚开始时酶量增加，酶促反应速率会增大，而曲线a 表示酶促反应速率减小，A错误； B、题干信息“曲线b 表示在最适温度、最适pH 时，反应物浓度与酶促反应速率的关系”，B点时升高温度，反应速率会下降，B错误； C、曲线反应的是反应物浓度与酶促反应速率的关系，曲线出现平台的原因是酶的数量的限制，C错误； D、AB段酶促反应速率随着反应物浓度的增加而增加，限制AB段反应速率的主要因素是反应物浓度，D正确。 故选D。 7. 下图为线粒体局部放大示意图，内膜上多个各不相同的电子传递复合物在依次传递电子的同时将质子排出线粒体基质，ATP合酶能催化ATP的合成。下列叙述正确的是（　　） A. 图示过程体现的是有氧呼吸第二、三阶段，分别发生于线粒体基质和内膜上 B. 线粒体内外膜间隙的pH高于线粒体基质 C. 还原型辅酶I在细胞质基质和线粒体基质中均能产生 D. 图示过程发生了一系列的能量转换，NADH中的化学能多数转换为ATP中的化学能 【答案】C 【解析】 【分析】有氧呼吸：第一阶段在细胞质基质，第二阶段在线粒体基质，第三阶段在线粒体内膜。第二阶段消耗水，第三阶段生成水，第三阶段消耗氧气。 【详解】A、图示过程体现的是有氧呼吸第三阶段，发生在线粒体内膜上，A错误； B、由图可知，NADH将有机物降解得到的高能电子传递给质子泵，后者利用这一能量将H+泵到线粒体内外膜间隙，线粒体内外膜间隙的pH 低于线粒体基质，B错误； C、有氧呼吸第一阶段、第二阶段都有还原型辅酶Ⅰ生成，分别发生在细胞质基质和线粒体基质中，C正确； D、NADH将有机物降解得到的高能电子传递给质子泵，后者利用这一能量将H+泵到线粒体基质外，实现了由有机物中的化学能到电能的转化，H+通过特殊的结构回流至线粒体基质，同时驱动ATP合成，实现了电能到ATP中的化学能的转化，但NADH 中的化学能少数转换为 ATP中的化学能，多数以热能的形式散失了，D错误。 故选C。 8. 如图为植物光合作用强度随光照强度变化的坐标图，下列叙述中不正确的是（ ） A. a点叶肉细胞产生ATP的细胞器只有线粒体 B. b点植物的光合作用强度与细胞呼吸强度相等 C. 当植物缺镁时，b点将右移 D. 已知某植物光合作用和细胞呼吸的最适温度分别为25℃和30℃，如果该图表示该植物处于25℃环境中，则将温度提高到30℃时，a点上移，b点左移 【答案】D 【解析】 【详解】a点时光照强度为0，植物叶肉细胞只进行细胞呼吸，故产生ATP的细胞器只有线粒体，A项正确；b点时O2释放量为0，说明此时植物的光合作用强度和呼吸作用强度相等，B项正确；当植物缺镁时，叶绿素的合成受到影响，光合作用减弱，b点要增加光照强度，才能保证此时的光合作用强度等于细胞呼吸强度，故b点将向右移，C项正确；已知植物在25℃时光合作用强度最强，如果将温度提高到30℃，呼吸强度增加，光合作用强度下降，则a点将上移，b点将右移，D项错误。 9. 浙江嵊州盛产的桃形李可用于生产果酒、果醋、果脯等系列产品，部分产品流程如下图。下列叙述正确的是（ ） A. 新鲜桃形李汁接种酵母菌后需高压蒸汽灭菌以排除杂菌污染 B. 桃形李汁中通入无菌空气对酵母菌的增殖和酒精的产量均不利 C. 可抽样检测发酵罐内的酒精和醋酸含量初步判断发酵状态 D. 可以用平板划线法调查发酵液中酵母菌和醋酸菌的数量 【答案】C 【解析】 【分析】1、酵母菌是一类单细胞真菌，能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果、蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28°C。 2、醋酸菌是好氧细菌，当O2、糖源都充足时能将糖分解成醋酸；当缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌可用于制作各种风味的醋。多数醋酸菌的最适生长温度为30~35°C。 【详解】A、新鲜桃形李汁接种酵母菌后用高压蒸汽灭菌会一同杀死酵母菌导致发酵无法进行，A错误； B、桃形李汁中通入无菌空气有利于酵母菌的增殖，但果酒的发酵是在无氧条件下进行，故不利于酒精的产生，B错误； C、发酵不同阶段，发酵罐内的物质含量不同，故可抽样检测发酵罐内的酒精和醋酸含量初步判断发酵状态，C正确； D、调查发酵液中酵母菌和醋酸菌的数量使用稀释涂布平板法，D错误。 故选C。 10. 紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种次生代谢物。利用植物组织培养和细胞培养的技术生产紫杉醇是一条重要途径，基本流程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 通常选取幼茎是因为其携带的病毒少 B. 在愈伤组织阶段主要依赖培养基中的有机物供能 C. 该过程不需要再分化形成完整植株就可以提取紫杉醇 D. 继代次数增加会使愈伤组织的再生率和产量增加 【答案】D 【解析】 【分析】1、次生代谢物在植物的光合作用、呼吸作用、物质的运输以及植物的生长发育等生理过程中没有明显的或直接的作用，是一大类非生长发育所必需的小分子有机化合物，但它们对植物的整个代谢具有明显的调控作用。 2、次生代谢物产生和分布通常有种属、器官或组织和生长发育期的特异性。某种次生代谢物的产生和分布通常局限在某一个或几个植物种类中，甚至在不同的器官或组织以及不同的生育期，次生代谢物的产生和分布也有明显的局限性。 【详解】A、根尖、茎尖等生长旺盛的部位携带的病毒少，甚至无病毒，是适宜的实验材料，A正确； B、在愈伤组织阶段，细胞无法利用光能进行光合作用，其生命活动所需能量来源于培养基中的有机物，B正确； C、次生代谢物产生和分布通常有种属、器官或组织和生长发育期的特异性，因此不需要再分化形成完整植株就可以提取紫杉醇，C正确； D、继代次数增加可能是细胞正常的二倍体核型发生变化，导致愈伤组织的再生率和产量降低，D错误。 故选D。 11. 蝙蝠是一种具有长寿、抗病毒和回声定位等生物学特性的哺乳动物，有重要研究价值。研究者将蝙蝠的诱导多能干细胞（iPS细胞）标上绿色荧光，将其注入到小鼠的囊胚中，发现内细胞团某些细胞带有绿色荧光，将上述胚胎移入雌鼠子宫，发现三胚层的细胞中均有部分带绿色荧光。下列说法错误的是（ ） A. 可从蝙蝠囊胚的内细胞团中获得其iPS细胞 B. 可通过体外受精和胚胎培养技术获得小鼠囊胚 C. 接受胚胎的小鼠需进行同期发情处理 D. 结果表明蝙蝠iPS细胞在体内仍具有分化能力 【答案】A 【解析】 【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。2、胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。3、胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合征。还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。 【详解】A、囊胚的内细胞团具有发育的全能性，不需要诱导形成多能干细胞，可以从蝙蝠囊胚的滋养层中获得其iPS细胞，A错误； B、可通过体外受精获得受精卵，在通过体外早期培养技术获得囊胚，B正确； C、胚胎移植时需要对受体即接收胚胎的个体进行同期发情处理，使移植的胚胎处于相同的生理环境，C正确； D、发荧光的诱导多能干细胞注入到小鼠的囊胚中，发现内细胞团某些细胞带有绿色荧光，再将上述胚胎移入雌鼠子宫，发现三胚层的细胞中均有部分带绿色荧光，由此可说明蝙蝠iPS细胞在体内仍具有分化能力，D正确。 故选A。 12. H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育。可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列叙述正确的是（ ） A. 培养液中添加H-Y单克隆抗体能促进牛早期胚胎发育成雄性 B. 该单抗的制备涉及动物细胞培养、细胞核移植技术、细胞融合等技术 C. 囊胚期性别鉴定后获得的雄性胚胎可进行胚胎移植 D. 用H-Y抗原免疫母牛也可以获得相应抗体 【答案】D 【解析】 【分析】题意分析，H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育，正常雌性体内不存在H-Y抗原，故利用抗体和抗原特异性结合的原理，用H-Y单克隆抗体筛选胚胎。 【详解】A、培养液中添加H-Y单克隆抗体，可以和H-Y抗原特异性结合，可用于筛选雄性胚胎，但不能促进牛早期胚胎发育成雄性，A错误； B、单克隆抗体的制备过程中涉及动物细胞培养和动物细胞融合技术，没有涉及细胞核移植技术，B错误； C、囊胚期性别鉴定后获得的雌性胚胎可进行胚胎移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药，C错误； D、抗原是能够引起机体产生特异性免疫反应的物质，用H-Y抗原免疫母牛，使其体内发生体液免疫反应，产生相应的浆细胞，进而获得相应抗体，D正确。 故选D。 13. 生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ） A. 生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等 B. 治疗性克隆是为了获得治疗所用的克隆个体，且需要严格的监管 C. “设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者需要在植入前对胚胎进行遗传学诊断 D. 转基因植物进入自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性 【答案】B 【解析】 【分析】转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。 生物武器的传播是把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。 【详解】A、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，它可以直接或者通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，A正确； B、治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的，需要在严格的监管下进行，B错误； C、“设计试管婴儿”与“试管婴儿”的主要区别在于前者在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断，C正确； D、转基因植物进入自然生态系统后可能因其具有较强的“选择优势”而占有较多的环境资源，使得其他物种的生存受到影响，从而严重影响生物多样性，D正确。 故选B。 14. 牛胚胎移植试验的主要流程如下，下列相关叙述正确的是（　　） ①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④___→⑤胚胎移植→⑥子代小牛 A. ①过程需要注射性激素，目的是获得更多的卵母细胞 B. ③过程是以哺乳动物早期胚胎未与子宫建立了组织上的联系为前提 C. ④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚 D. ⑤过程成功率的高低主要取决于受体的排斥程度 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：（1）对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体；用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；（2）配种或人工授精；（3）对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；（4）对胚胎进行移植；（5）移植后的检查。 【详解】A、①过程需要注射促性腺激素，目的是获得更多的卵母细胞，A错误； B、③过程是以哺乳动物早期胚胎处于游离状态，未与子宫建立了组织上的联系为前提，B正确； C、④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚，C错误； D、⑤过程成功率的高低主要决定于供、受体生理状况的一致性，受体对移入的胚胎基本上不会产生免疫排斥反应，D错误。 故选B。 15. 以下说法正确的是（ ） ①基因工程的原理是基因重组②动物细胞培养的原理是细胞增殖 ③制备单克隆抗体时得到杂交瘤细胞还要克隆化培养和抗体检测才能确定是否能产生特异性抗体 ④克隆动物的成功证明动物细胞有全能性 ⑤稀释涂布平板法除了用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目 ⑥接种针和接种环常用高压蒸汽灭菌 ⑦单克隆抗体的特点是能准确识别抗原的差异并与之结合，可大量制备 ⑧多数动物细胞培养液的pH为7.35~7.45 A. ①②③⑤⑦ B. ②③④⑤⑧ C. ①②④⑤⑥ D. ②⑤⑥⑦⑧ 【答案】A 【解析】 【分析】1、单克隆抗体是指由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体； 2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体； 3、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备； 4、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点．②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【详解】①基因工程又称重组DNA技术，其原理是基因重组，①正确； ②动物细胞培养只能得到数目更多的细胞，不能得到完整动物体，因此动物细胞培养的原理是细胞增殖，②正确； ③由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞，因此还需要克隆化培养和抗体检测才能确定是否能产生特异性抗体，③正确； ④动物细胞核含有该种动物的全套遗传物质，具有发育成完整个体的潜能，因此克隆动物的成功证明了动物细胞核有全能性，④错误； ⑤稀释涂布平板法能分离纯化菌种，获得单菌落，当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计菌落数可推测样品中的活菌数，因此稀释涂布平板法还可以用于计数，⑤正确； ⑥接种针和接种环等接种工具常用灼烧灭菌的方法，⑥错误； ⑦单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备，因此单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等优点，⑦正确； ⑧动物细胞培养需要适宜的pH，多数动物细胞生存的适宜pH为7.2-7.4，⑧错误； 因此，A正确，BCD错误。 故选A。 二、不定项：每题3分共15分。选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 如图为C、H、O、N、P等元素构成大分子物质甲、乙、丙及结构丁的示意图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 若图中物质甲能与碘液发生蓝色反应，则单体3为葡萄糖 B. 若图中结构丁是一种细胞器，则单体1为氨基酸，单体2为核糖核苷酸 C. 若图中结构丁能被碱性物质染成深色，则结构丁为染色质或染色体 D. 物质乙、丙和单体1、单体2都有物种特异性 【答案】ABC 【解析】 【分析】1、组成多糖的基本单位是单糖，组成蛋白质的基本单位是氨基酸，组成核酸的基本单位是核苷酸，这些基本单位称为单体。 2、某些化学试剂能够使生物组织中的相关化合物产生特定的颜色反应，根据是否出现相应的颜色可以鉴定化合物是否存在。 3、题图分析：据图分析，甲乙丙都是生物大分子，则C、H、O、N构成的单体1表示氨基酸，物质乙表示蛋白质；C、H、O、N、P构成的单体2表示核苷酸，物质丙表示核酸；C、H、O构成的单体3表示单糖，而物质甲表示多糖。 【详解】A、若图中物质甲能与碘液发生蓝色反应，则物质甲为淀粉，其单体3为葡萄糖，由C、H、O组成，A正确； B、若图中丁是一种细胞器，由核酸和蛋白质构成，应该是核糖体，由蛋白质和RNA组成，则单体1为氨基酸，单体2为核糖核苷酸，B正确； C、若图中结构丁能被碱性物质染成深色，则丁为染色质或染色体，物质丙为DNA，物质乙是蛋白质，C正确； D、物质甲乙丙是生物大分子，则C、H、O、N构成的单体1表示氨基酸，物质乙表示蛋白质；C、H、O、N、P构成的单体2表示核苷酸，物质丙表示核酸。蛋白质和核酸都有物种特异性，但它们的单体没有物种特异性，D错误。 故选ABC。 17. 下列有关酶的叙述，正确的是（ ） A. DNA连接酶以DNA的一条链为模板，将单个脱氧核苷酸连接起来 B. 反转录酶是以RNA为模板指导脱氧核糖核苷酸连接合成DNA的酶 C. DNA聚合酶可将两个DNA分子片段间的缝隙连接起来 D. 限制性内切核酸酶识别特定的核苷酸序列并在特定位点切割DNA分子 【答案】BD 【解析】 【分析】1、“分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；“分子缝合针”--DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 【详解】A、DNA连接酶将两个DNA片段连接起来，形成磷酸二酯键，DNA聚合酶是将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键，A错误； B、反转录酶是反转录过程需要的酶，反转录的结果是合成DNA，所以是以RNA为模板指导脱氧核糖核苷酸连接并合成DNA的酶，B正确； C、DNA连接酶可将两个DNA分子片段间的缝隙连接起来，形成磷酸二酯键，C错误； D、限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，即在特定位点切割DNA分子，D正确。 故选BD。 18. 抗CD20抗体可用于治疗淋巴瘤等疾病。研究人员将表达抗CD20单克隆抗体的DHFR—CHO杂交瘤细胞接种于反应器中培养，抽样检测产物浓度和细胞生长情况（通过台盼蓝染色结合显微镜直接计数统计细胞密度和活性，结果如图）。下列叙述错误的是（　　） A. 杂交瘤细胞培养过程中需置于37℃、含的气体条件下进行培养 B. 显微镜下只统计单位体积中被染色的细胞数量，即可得到活细胞密度 C. 培养到第6天左右，可获得最高浓度的抗CD20抗体 D. 经克隆化培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体 【答案】AB 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、进行杂交瘤细胞培养时，需置于37℃、含有95%空气和5%CO2混合气体的培养箱中培养，A错误； B、死细胞会被台盼蓝染成蓝色，活细胞不会，因此，显微镜下应该统计单位体积中没有被染色的细胞数量，B错误； C、培养到第6天左右，产物浓度达到最大，可获得最高浓度的抗CD20抗体，C正确； D、单克隆抗体制备过程中至少经过两次筛选，一次是用特定的选择培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞，杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，即用96孔板克隆化培养和多次筛选杂交瘤细胞后，就可获得既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，在体外大规模培养可获得单克隆抗体，D正确。 故选AB。 19. 科学家将某病毒抗原蛋白的部分编码序列（RBD）拼接成融合基因2RBD和3RBD，探究RBD的二聚体蛋白和三聚体蛋白能否模拟RBD的天然构象并获得高效免疫原性。为鉴定重组质粒是否构建成功，将重组质粒用NcoI和SacI双酶切处理后电泳，结果如图，其中泳道1为双酶切pNZ8149-2RBD，两个条带大小分别为2507bp和2020bp。将构建好的重组质粒分别导入工程菌中进行表达产物的检测。下列说法不正确的是（ ） A. PCR扩增融合基因时，在引物的3′端添加相应限制酶的识别序列 B. 据图可知，融合基因3RBD的长度为2686bp C. 泳道2呈现一个条带的原因是酶切pNZ8149﹣3RBD产生的两个片段大小相近 D. 从工程菌细胞表面提取蛋白质进行检测，从而进一步比较两者的免疫原性 【答案】A 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样；（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、引物使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，PCR扩增融合基因时，在引物的5'端添加相应限制酶的识别序列，A错误； B、由图可知pNZ8149-2RBD和pNZ8149-3RBD的碱基对分别为4527bp和5193bp，所以RBD长度为5193-4527=666bp，泳道1为双酶切pNZ8149-2RBD，两个条带大小分别为2507bp和2020bp，结合图中泳道2只有一个条带的信息可推测，融合基因3RBD的长度为666+2020=2686bp，B正确； C、由图可知，泳道2呈现一个条带，其原因是双酶切pNZ8149-3RBD后产生的两个片段大小相近，C正确； D、根据题目信息可知，该实验的目的是“探究RBD的二聚体蛋白和三聚体蛋白能否模拟RBD的天然构象并获得高效免疫原性”，U-M为信号肽-细胞壁锚定蛋白序列，据图可知，RBD与U-M相连，因此可以从工程菌细胞表面提取蛋白质进行检测，从而进一步比较两者的免疫原性，D正确。 故选A。 20. 下图表示不同生物细胞代谢的过程。下列有关叙述正确的是（ ） A. 给甲提供H218O，一段时间后可在细胞内检测到（CH218O） B. 甲、乙、丙三者均为生产者，甲可能是蓝细菌，乙可能是根瘤菌，丙发生的反应中不产氧，可能为厌氧型的生物 C. 图丁过程①可表示渗透吸水，对④⑤⑥⑦⑧过程研究，发现产生的能量全部储存于ATP中 D. 就植株叶肉细胞来说，若图丁中②O₂的释放量大于⑧O₂的吸收量，则该植物体内有机物的量不一定增加 【答案】AD 【解析】 【分析】化能合成作用： 1、概念：是一些生物（如硝化细菌）利用化学能（体外环境物质氧化释放的能量）把CO2和H2O合成储存能量的有机物的过程。 2、实例：硝化细菌主要有两类：一类是亚硝化细菌，可将氨氧化成亚硝酸；另一类是硝化细菌，可以把亚硝酸氧化成硝酸，两者都能利用释放的能量都能把无机物合成有机物。 【详解】A、给甲提供H218O，水可以参与有氧呼吸第二阶段，生产C18O2，二氧化碳参与光合作用的暗反应生成带有放射性标记的（CH₂18O），A正确； B、根瘤菌直接依靠植物制造的有机物维持生存，属于消费者，而不是生产者，故乙不可能是根瘤菌，乙可能是硝化细菌，硝化细菌能将土壤的氨氧化成为硝酸，利用释放的能量将CO₂和H2O合成糖类，即化能合成作用，甲、乙、丙都能将无机物转化为有机物，都为自养型生物，说明这三种生物一定都是生产者，但丙的反应中不产氧气，可能为厌氧型的生物，B错误； C、过程①可表示渗透吸水，对④⑤⑥⑦⑧过程研究可知细胞呼吸中所释放的大部分能量以热能散失，C错误； D、若叶肉细胞②光反应过程O₂的释放量大于⑧有氧呼吸过程O₂的吸收量，则叶肉细胞的净光合作用量>0，但植物体还有很多不能进行光合作用的细胞，只能进行呼吸作用，所以该植物体内有机物的量不一定增加，D正确。 故选AD。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 线粒体是真核细胞的重要细胞器。当线粒体受损时，细胞通过清理受损的线粒体来维持细胞内的稳态。我国科研人员对此开展研究。 （1）从结构和功能的角度分析线粒体结构的特殊性及其意义：_____________。 （2）科研人员推测受损线粒体可通过进入迁移体（细胞在迁移中形成的一种囊泡结构）而被释放到细胞外，即“线粒体胞吐”。为此，科研人员利用绿色荧光标记迁移体，红色荧光标记线粒体，用药物C处理细胞使线粒体受损，若观察到_____________则可初步验证上述推测。 （3）为研究受损线粒体进入迁移体的机制，科研人员进一步实验。 ①真核细胞内的_____________锚定并支撑着细胞器，与细胞器在细胞内的运输有关。 ②为研究D蛋白和K蛋白在线粒体胞吐中的作用，对红色荧光标记了线粒体的细胞进行相应操作，检测迁移体中的红色荧光，操作及结果如图1和2。图1结果表明：K蛋白______________。图2结果表明：_____________。 （4）研究表明，正常线粒体内膜两侧离子分布不均，形成线粒体膜电位，而受损线粒体的膜电位丧失或降低。科研人员构建了D蛋白基因敲除的细胞系，测定并计算经药物C处理的正常细胞和D蛋白基因敲除细胞系的线粒体膜电位平均值，结果如下表，据表分析：D蛋白基因敲除细胞系线粒体膜电位的平均值升高的原因是______。 细胞类型 正常细胞 D蛋白基因敲除细胞系 细胞中全部线粒体膜电位的平均值（荧光强度相对值） 4.1 5.8 【答案】（1）线粒体内膜折叠成嵴增大膜面积，有利于有氧呼吸第三阶段进行 （2）红绿荧光（在迁移体中）重叠 （3） ①. 细胞骨架 ②. 线粒体受损时促进线粒体胞吐 ③. 抑制线粒体胞吐 （4）D蛋白基因敲除细胞系的线粒体胞吐强于正常细胞，清除膜电位丧失或降低的受损线粒体，使线粒体膜电位平均值升高 【解析】 【分析】据题图可知，未敲除K基因并用药物处理时，荧光相对值大，而敲除该基因并用药物C处理时，相对值小，说K蛋白的作用是在线粒体受损时促进线粒体胞吐；敲除D基因即D蛋白缺失时会导致与药物 C处理相同情况，故有K蛋白时，D蛋白才能发挥抑制线粒体胞吐的作用。 【小问1详解】 线粒体的内膜折叠成嵴，而其上进行有氧呼吸的第三阶段，因此其结构与功能的关系是：线粒体内膜折叠成嵴增大膜面积，有利于有氧呼吸第三阶段进行。 【小问2详解】 绿色荧光标记迁移体，红色荧光标记线粒体，若要证明受损线粒体可通过进入迁移体被释放到细胞外，则观察到的现象应该是红绿荧光重叠。 【小问3详解】 ①真核细胞中锚定并支撑着细胞器的是细胞骨架。 ②分析题图知，未敲除K基因并用药物处理时，荧光相对值大，而敲除该基因并处理时，相对值小，说明K蛋白的作用是在线粒体受损时促进线粒体胞吐。D基因未敲除时荧光相对值小，D基因敲除且K基因存在时荧光值才相对大，结合K蛋白促进线粒体胞吐的功能，推测D蛋白的作用是：抑制线粒体胞吐。 【小问4详解】 D蛋白基因敲除细胞系细胞中全部线粒体膜电位的平均值升高，说明D蛋白基因敲除细胞系的线粒体胞吐强于正常细胞，清除膜电位丧失或降低的受损线拉体，使线粒体膜电位平均值升高。 22. 土壤盐分过高对植物的伤害作用称为盐胁迫。科研人员研究盐胁迫下竹柳苗光合作用的变化，结果如下图，请回答下列问题： CK：对照组；S1：轻度盐胁迫；S2：中度盐胁迫；S3：重度盐胁迫 （1）与第3天相比，第6天盐胁迫组竹柳苗的净光合速率下降，其中____________组（填“S2”或“S3”）是因为非气孔因素造成的，判断的理由是________________________。 （2）重度盐胁迫条件下，12天内竹柳苗干重的变化为_________（填“增加”、“不变”或“减少”），原因是______________________。 （3）研究发现，盐胁迫下竹柳根细胞内的脯氨酸含量明显升高。据此推测竹柳减缓盐胁迫对水分吸收影响的机制是____________________。 （4）进一步研究发现，盐胁迫下竹柳根细胞内的脯氨酸含量增加的机制是通过激活脯氨酸合成关键基因P5CS和P5CR的表达，以及提高P5CR酶的活性。请设计实验加以验证该机制，简要写出实验思路____________。 【答案】（1） ①. S3 ②. S3组在第6天时气孔导度反而上升 （2） ①. 增加 ②. 在重度盐胁迫情况下，虽然净光合速率下降，但依然大于0 （3）在干旱胁迫下，该植物根细胞内脯氨酸含量明显升高，进而提高了细胞液浓度，提高植物根系的吸水力 （4）将竹柳根细胞随机分成两组，一组给与高盐环境，另一组给与正常环境，一段时间后检测两组细胞中关键基因P5CS和P5CR的表达量以及脯氨酸含量并进行比较，进而得出相应的结论 【解析】 【分析】1、温度对光合作用的影响：在最适温度下酶的活性最强，光合作用强度最大，当温度低于最适温度，光合作用强度随温度的增加而加强，当温度高于最适温度，光合作用强度随温度的增加而减弱。 2、二氧化碳浓度对光合作用的影响：在一定范围内，光合作用强度随二氧化碳浓度的增加而增强。当二氧化碳浓度增加到一定的值，光合作用强度不再增强。 3、光照强度对光合作用的影响：在一定范围内，光合作用强度随光照强度的增加而增强。当光照强度增加到一定的值，光合作用强度不再增强。 【小问1详解】 与第3天相比，第6天盐胁迫组竹柳苗的净光合速率下降，其中“S3”是因为非气孔因素造成的，这是因为S3组在第6天时气孔导度反而上升，但此时的净光合速率是下降的。 【小问2详解】 重度盐胁迫条件下，12天内竹柳苗干重的变化表现为“增加”，这是因为在重度盐胁迫情况下，虽然净光合速率下降，但依然大于0，说明干重在增加，只是增加速率逐渐下降而已。 【小问3详解】 研究发现，盐胁迫下竹柳根细胞内的脯氨酸含量明显升高。据此推测由于植物自我保护性调节，在干旱胁迫下，该植物根细胞内脯氨酸含量明显升高，进而提高了细胞液浓度，提高植物根系的吸水力，进而起到了减缓盐胁迫对水分吸收的影响。 【小问4详解】 进一步研究发现，盐胁迫下竹柳根细胞内的脯氨酸含量增加的机制是通过激活脯氨酸合成关键基因P5CS和P5CR的表达，以及提高P5CR酶的活性。本实验的目的是验证竹柳根细胞内的脯氨酸含量增加的机制是通过激活脯氨酸合成关键基因P5CS和P5CR的表达，以及提高P5CR酶的活性实现的，因此实验的自变量为是否进行盐胁迫，因变量是关键基因P5CS和P5CR的表达量以及脯氨酸含量。因此本实验的设计思路为，将竹柳根细胞随机分成两组，一组给与高盐环境，另一组给与正常环境，一段时间后检测两组细胞中关键基因P5CS和P5CR的表达量以及脯氨酸含量并进行比较，进而得出相应的结论。 23. 某兴趣小组同学从土壤中分离分解尿素的细菌并对其进行计数。其实验设计流程如图所示，每个浓度设置4个平板，其中平板1、2、3是选择培养基，平板4是牛肉膏蛋白胨 （1）获得纯净的微生物培养物的关键是_________。涂布器使用前用到的无菌技术包括________。 （2）图中选择培养基中对氮源的要求是________。牛肉膏蛋白胨培养基中牛肉膏提供的主要营养是________。 （3）图中四组平板采用的接种方法是________。微生物的数量测定还可以用显微镜直接计数，该方法需要利用特定的_________，在显微镜下观察、计数，但统计结果比实际值________(填“大或小”),原因是________。 （4）若乙组4个平板,统计菌落数分别为260、268、252、358,则 1g 土样中分解尿素细菌菌落数是________个。比较四组实验中1、2、3平板和4号平板中的菌落数，可知此选择培养基能够_________。 【答案】（1） ①. 防止杂菌污染 ②. 消毒和灭菌 （2） ①. 以尿素为唯一氮源 ②. 碳源、磷酸盐和维生素等 （3） ①. 稀释涂布平板法法 ②. 细菌计数板或血细胞计数板 ③. 大 ④. 统计结果一般是活菌数和死菌数的总和 （4） ①. 2.6×109 ②. 从土壤中分离分解尿素的细菌 【解析】 【分析】获得纯培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术包括消毒和灭菌。接种的方法有稀释涂布平板法法和平板划线法，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分布涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。稀释涂布平板法可以进行微生物的培养和计数。 【小问1详解】 获得纯培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术包括消毒和灭菌。 【小问2详解】 图中选择培养基要能从土壤中分离分解尿素的细菌，所以应该以尿素为唯一氮源，牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏提供的主要营养是碳源、磷酸盐和维生素等。 【小问3详解】 图中的菌落分布比较均匀，采用的接种方法是稀释涂布平板法。用显微镜直接计数需要利用特定的细菌计数板或血细胞计数板来进行计数，该方法的统计结果偏大，因为显微镜下无法区分死菌和活菌，统计结果一般是活菌数和死菌数的总和。 【小问4详解】 计算公式C/V×M，C是平均菌落数（260+268+252）÷3=260（不包括358，该数据是牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数），V是涂布体积0.1，M是稀释倍数106，所以 1g 土样中分解尿素细菌菌落数是2.6×109，比较四组实验中1、2、3平板和4号平板中的菌落数，可知此选择培养基的菌落数小于牛肉膏蛋白胨培养基中的菌落数，说明能够从土壤中分离分解尿素的细菌。 24. 裸鼹鼠几乎不得癌症，其寿命可超过30年，同样大小的家鼠最长寿命为4年。为探究其原因，科研人员做了以下研究。 （1）将裸鼹鼠皮肤成纤维细胞置于__________培养箱进行体外培养，经检测发现其分泌大量粘稠的高分子量透明质酸（HA），可抑制细胞过度增殖。 （2）研究者检测不同来源成纤维细胞中HA合成酶（HAS）的含量，结果如图1。另外，发现裸鼹鼠组织的HA降解酶（HAase）的活性远低于人和小鼠。结合图文信息，分析裸鼹鼠皮肤成纤维细胞分泌大量高分子量HA的原因是______________________________________________。 结果显示，裸鼹鼠胚胎期HA合成酶低表达，推测其意义是______________________________________________。 （3）为进一步研究高分子量HA能否提高小鼠的寿命，研究人员进行了下列实验（图2）。 ①通过转基因技术获得转基因小鼠A：为了将目的基因插入小鼠6号染色体的特定位点，需在其两端设计与6号染色体同源序列，实现同源序列之间的重组。由此获得的转基因小鼠A暂时无法表达HA合成酶2，原因是______________________________________________________。 ②B鼠为导入表达CE的纯合子，CE也插入6号染色体的相同位点。外源雌激素可诱导cre重组酶活化，活化的cre重组酶能识别并切除loxP位点间的序列。A、B鼠交配获得C、D鼠，请画出C鼠的基因组成情况_________________________。 ③利用C、D鼠进行实验，测得实验组小鼠HA含量升高，癌症概率降低、炎症反应减少，寿命也得到了延长。请写出对照组的选材______________（“C”或“D”）及实验处理。 （4）请简述本研究的应用前景______________。 【答案】（1）CO2 （2） ①. 裸鼹鼠体内HA合成酶2表达量（含量）高，促进HA合成；而HA降解酶活性低，减少分解 ②. 避免对胚胎期细胞分裂的抑制作用，保障正常生长发育 （3） ①. 启动子未直接与HA合成酶2的基因相连 ②. ③. 选材：D鼠，处理：注射外源雌激素 （4）高分子透明质酸未来可以应用于改善人类健康状况，治疗癌症和提升人类寿命等 【解析】 【分析】1、动物细胞培养所需气体主要有氧气和二氧化碳，氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH值。进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将他们置于含有95%空气和5%二氧化碳混合气体的二氧化碳培养箱中进行培养； 2、基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等； （3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法； （4）目的基因的检测与鉴定： 分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术； 个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 动物细胞培养所需气体主要有氧气和二氧化碳，氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH值。进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将他们置于含有95%空气和5%二氧化碳混合气体的二氧化碳培养箱中进行培养，将裸鼹鼠皮肤成纤维细胞置于CO2培养箱进行体外培养； 【小问2详解】 根据图文信息可知，裸鼹鼠体内HA合成酶2表达量（含量）高，能够促进HA合成；而且HA降解酶活性低，减少分解，因此裸鼹鼠皮肤成纤维细胞分泌大量高分子量HA。根据题干信息可知，高分子量透明质酸（HA）可抑制细胞过度增殖。由此推测，裸鼹鼠胚胎期HA合成酶低表达，是为了避免对胚胎期细胞分裂的抑制作用，保障正常生长发育； 【小问3详解】 ①通过将目的基因插入小鼠6号染色体的特定位点，需在其两端设计与6号染色体同源序列，实现同源序列之间的重组，由此获得的转基因小鼠A，由于启动子未直接与HA合成酶2的基因相连，因此转基因小鼠A暂时无法表达HA合成酶2； ②根据图示可知小鼠A、B的基因组成，将A、B鼠交配获得C、D鼠，C鼠基因组成如图所示： ，根据题意信息可知，外源雌激素可诱导cre重组酶活化，活化的cre重组酶能识别并切除loxP位点间的序列。利用C、D鼠进行实验，测得实验组小鼠HA含量升高，癌症概率降低、炎症反应减少，寿命也得到了延长； ③因为D鼠没有loxP位点，因此C鼠为实验组，D鼠则是作为对照组，通过注射外源雌激素能够诱导cre重组酶活化，活化的cre重组酶能识别并切除loxP位点间的序列； 【小问4详解】 根据题意可知，高分子量透明质酸可抑制细胞过度增殖，由此推测高分子透明质酸未来可以应用于改善人类健康状况，治疗癌症和提升人类寿命等。 25. 研究发现，大部分白血病患者细胞中存在异常的融合基因 UBA2-WTIP，可作为检测白血病的特异性分子标志物。科研人员通过 RT-PCR 方法克隆得到融合基因UBA2-WTIP，为了研究该基因的作用和致病机制，需要构建重组载体并把目的基因和FLAG标签基因序列连接起来，分别获得带有 FLAG 肽链的 UBA2-WTIP 融合蛋白和WTIP 蛋白。FLAG肽链由8个氨基酸残基组成，可作为基因工程中蛋白质是否表达的标记。 （1）科研人员以提取的某白血病人外周血细胞总 RNA为模板，经过_________过程合成cDNA,设计________种引物,经RT-PCR扩增出融合基因 UBA2-WTIP,对测序结果进行数据分析,推测融合基因UBA2-WTIP 是在 UBA2基因的第16 外显子与 WTIP 基因的第2 外显子处拼接而成，如图1所示。为了验证该融合基因的产生是基因组DNA融合而不是不同的RNA 剪接后逆转录所产生的，可提取该病人的________(填“DNA”或“RNA”)为模板，使用图中F₁ 和 R₁ 引物进行PCR扩增，若出现_________bp扩增片段，说明该融合基因的融合方式是基因组水平融合。 （2）为了构建重组载体，科研人员设计了以下2种引物，如图2所示：上游引物F2为:5’TATGGTACCATG①GCACTGTCGCGGGGG3’,GGTACC 为 KpnI酶切位点；下游引物R2为:5’TAT②TCA③GAGCTCAGTGACGTG3’；FLAG标签基因编码链序列可以插入目的基因编码区的首端或者末端。已知引物中 ATG对应起始密码。若UBA2-WTIP融合基因编码的蛋白质前端有一段信号肽，则 FLAG 标签基因序列一般不能插入①位置，原因是_________；已知引物中 TCA 对应终止密码，则FLAG 标签基因序列和EcoRⅠ酶切位点应分别插入在下游引物_________、________处。 （3）制备的重组载体体外转染人类白血病细胞株 KG-1a细胞，提取各组细胞总蛋白，用FLAG 单克隆抗体检测蛋白表达情况，并分别测定转染空质粒的对照细胞、转录 UBA2-WTIP 融合基因及转录 WTIP 基因的KG-1a细胞增殖情况，结果分别如图3所示。 检测相关蛋白质是否表达的方法是________；上述生长曲线结果说明________。 【答案】（1） ①. 逆（反）转录 ②. 2 ③. DNA ④. 239 （2） ①. 蛋白质前端的信号肽一般会在蛋白质成熟时被切割掉，所以不能得到带有FLAG肽链的蛋白质 ②. R2③ ③. R2② （3） ①. 抗原—抗体杂交 ②. UBA2—WTIP融合基因能在体外促进白血病细胞增殖，WTIP基因能抑制白血病细胞的增殖 【解析】 【分析】基因工程的基本操作程序有四步：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建；（3）将目的基因导入受体细胞，（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 科研人员以提取的某白血病人外周血细胞总RNA为模板，经过逆（反）转录过程合成cDNA。DNA分子是双链，PCR时以每一条为模板，合成子代DNA，因此需要2种引物。据图1可知，如果融合基因UBA2—WTIP是在UBA2基因的第16外显子与WTIP基因的第2外显子处拼接而成，那么该基因长度为239bp，能以F1和R1引物进行PCR扩增，因此如果提取该病人的DNA，使用图中F1和R1引物进行PCR扩增，若出现239bp扩增片段，该融合基因的融合方式是基因组水平融合。 【小问2详解】 PCR时，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的，①位置前面为ATG，是翻译的起始位置，若FLAG标签基因序列插入①位置，UBA2—WTIP融合基因编码的蛋白质前端有一段信号肽，蛋白质前端的信号肽一般会在蛋白质成熟时被切割掉，不能得到带有FLAG肽链的蛋白质，因此一般不能插入①位置。已知引物中 TCA 对应终止密码，EcoR Ⅰ酶切位点应位于终止密码对应序列之后，FLAG标签基因序列应位于终止密码对应序列之前，因此可在下游引物R2②③处分别插入EcoR Ⅰ酶切位点和FLAG标签基因序列。 【小问3详解】 检测相关蛋白质是否表达的方法是抗原—抗体杂交。据图3结果可知，与转染空质粒的对照细胞相比，转录WTIP基因的KG-la细胞增殖较少，转录UBA2—WTIP融合基因的KG-la细胞增殖较多，据此可知，UBA2—WTIP融合基因能在体外促进白血病细胞增殖，WTIP基因能抑制白血病细胞的增殖。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $