精品解析：天津市北京师范大学静海附属学校2022-2023学年高二下学期第二次阶段性评估（期中）生物试题

北师大静海附校2022-2023学年第2学期高二年级 第二次阶段性评估生物试题 考试时间：60分钟满分：100分 第I卷（共40分） 一、选择题（本题共20小题，每小题2分。在每小题给出的四个选项中只有一项是符合题目要求的，请将答案涂写在答题卡相应的位置中。） 1. 下列有关利用传统发酵技术制作果酒、果醋及泡菜的叙述，正确的是（　　）。 A. 制作泡菜时加入一定量的陈泡菜汁能加快发酵进程 B. 发酵原料和发酵装置都需进行灭菌，以防止杂菌污染 C. 制作果醋利用了醋酸菌在无氧条件下产生醋酸 D. 三者发酵液都主要是因为产生了大量二氧化碳而呈酸性 2. 欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（ ） A. 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 B. 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板 C. 可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D. 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌 3. 下列有关平板划线法操作的叙述，错误的是（ ） A. 将接种环放在酒精灯火焰上灼烧 B. 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 C. 蘸取菌液和划线均要在酒精灯火焰旁进行 D. 接种环划线时要将最后一次的划线与第一次的划线相连 4. 下列各项培育植物新品种的过程中，不经过愈伤组织阶段的是（ ） A. 通过植物体细胞杂交培育白菜—甘蓝杂种植株 B. 通过多倍体育种培育无子西瓜 C. 通过单倍体育种培育优质小麦 D. 通过基因工程培育转基因抗虫水稻 5. 下列有关哺乳动物受精的表述，正确的是（　　）。 A. 透明带反应和卵细胞膜反应可以防止多精入卵的发生 B. 自然状态下，受精在子宫中完成 C. 精子需要获能才能与卵子结合，而卵子一经排出就具有受精能力 D 精子入卵后，卵子恢复并很快完成了减数第一次分裂 6. 生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是（　　） A. 人工诱导基因突变 B. 选择优良品种进行杂交 C. 取茎尖分生组织进行组织培养 D. 进行远缘植物体细胞杂交 7. 筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。有关本实验的叙述，错误的是（ ） 菌种 菌落直径：C（mm） 透明圈直径：H（mm） H/C 细菌I 5．1 11．2 2．2 细菌Ⅱ 8．1 13．0 1．6 A. 培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B. 筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C 以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外 D. H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异 8. 丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如下图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（　　）。 A. 培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性 B. 利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小 C. 以丙草胺为唯一氮源培养基进行培养可提高降解菌的浓度 D. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1．7×109个 9. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　）。 A. DNA和蛋白质都溶于酒精 B. 提取植物材料的DNA需先研磨破碎细胞 C. DNA只能溶于2mol/L的NaCI溶液 D. 溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺后颜色呈紫色 10. 假设世界上最后一头野驴刚死亡，以下使它“复生”方案中可行的是（ ） A. 将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育出新个体 B. 将野驴的体细胞核移植到家驴的去核卵细胞中，培育出新个体 C. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育出新个体 D. 将野驴的体细胞取出，利用组织培养培育出新个体 11. 下图示植物细胞融合及组织培养过程。下列说法中不正确的是（　　）。 A. 植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍 B. 杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株，说明杂种细胞具有全能性 C. 若A细胞的基因型为Rr，B细胞为Yy，则最终形成的杂种植株的基因型为RrYy D. 尽管愈伤组织可以进行光合作用，但其培养基中仍需要糖类、氨基酸等有机营养 12. 下图为产业化繁育良种牛的部分过程。下列相关叙述错误的是（　　） A. E和F的繁育过程中，A、B、C、D牛都必须是遗传性能优良的个体 B. 过程②无核卵母细胞可以为重组细胞全能性的表达提供物质基础 C. 过程③可用物理或化学方法进行处理，目的是激活重组细胞完成细胞分裂和发育过程 D. E的遗传物质来自供体A和C，F的核遗传物质全部来自供体B 13. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精获取的精子能立即与卵细胞受精 B. ②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行减数分裂，有细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎恢复和发育 D. 为选育出能泌乳的雌奶牛，移植前需从滋养层部位取样，做染色体分析鉴定性别 14. 下列技术或方法与原理相符的是（ ） A. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖 B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性 C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组 15. 质粒是基因工程最常用的载体，下列关于质粒的说法正确的是（　　） A. 质粒在宿主细胞内都要整合到染色体DNA上 B. 质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器 C. 基因工程使用的质粒一定含有标记基因和复制原点 D. 质粒上碱基之间数量存在A+G＝U+C 16. GoldenGate是当代极为重要的一种分子克隆技术，该技术的实施依赖于Ⅱs型限制酶，图所示为某种Ⅱs型限制酶的识别序列和切割位点（N表示任意碱基），以下说法正确的是（ ） A. IIs型限制酶不具有高效性 B. Ⅱs型限制酶作用位点是氢键 C. Ⅱs型限制酶应保存于高温条件 D. 同种IIs型限制酶切割两个DNA分子所得片段未必能以DNA连接酶连接 17. 下图为DNA 分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（ ） A. DNA 连接酶、限制酶、解旋酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 18. 下面是质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，ampr为氨苄青霉素抗性基因，tetr为四环素抗性基因，箭头表示限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在氨苄青霉素培养基上生长而不能在四环素培养基上生长的含重组质粒的细胞，应选择合适的酶切位点是（ ） A. B. C. D. 19. 2017年，某国批准首例使用细胞核移植技术培育三亲婴儿的申请。如图为三亲婴儿的培育过程。据图分析，下列叙述正确的是（ ） A. 三亲婴儿出生属于无性生殖 B. 该技术可避免母亲的红绿色盲基因传递给后代 C. 卵母细胞经过培养获能后才能受精 D. 三亲婴儿的培育用到了动物细胞培养、核移植等操作 20. 使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 单克隆抗体制备过程中需要使用Taq酶 B. ADC进入肿瘤细胞的运输方式为协助扩散 C. 溶酶体破裂导致其中的水解酶释放，加速了肿瘤细胞死亡 D. 细胞毒素具有与肿瘤细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合的能力 第Ⅱ卷（共60分） 二、非选择题（本题共5小题，共60分。请将答案写在答题卡相应的位置上。） 21. 如图是果酒果醋的制作流程。请据图回答以下问题： （1）在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有的乳酸菌发酵产生乳酸；也可能是__________________，导致醋酸菌生长繁殖，产生醋酸。 （2）某同学尝试用罐头瓶制作果酒，在培养过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，这样做的主要目的，一是__________，二是避免氧气进入和杂菌污染。 （3）在酸性条件下，可用橙色的________溶液来检测果酒发酵是否成功。若要进一步检测所得果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用________法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。 （4）在果酒制作中，加入的新鲜葡萄汁没有经过灭菌处理，但是在制出的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是酵母菌与杂菌之间存在________关系；二是由于酵母菌发酵产生的________不利于杂菌的生长。 22. 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题： （1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_____的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_____。甲、乙培养基均属于_____培养基。 （2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_____倍。 （3）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤：用_____对淤泥进行梯度稀释，然后涂布到_____（填“甲”或“乙”）培养基上，培养后计数。 23. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示： （1）过程①常用的酶是_____，杂种细胞形成的标志是_____。 （2）植物原生质体融合过程常利用化学试剂_____诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到不同的原生质体，当观察到融合的细胞表面_____时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 （3）过程③和过程④依次为_____，过程④中的培养基常添加的植物激素是生长素和_____。 （4）若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞含_____条染色体。 24. 如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： （1）图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有_____种类型。已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有_____的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用_____诱导融合。 （2）在体外进行动物细胞培养时需要在合成加培养基的基础上添加_____等天然成分。 （3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是_____。 （4）由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的_____和_____两大技术。 25. 下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI 直线所示为三种限制酶的酶切位点。 （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_____限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。过程①可采用的操作方法是_____。过程②可采用的生物技术是_____。 （2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_____。 A. 启动子 B. tetR C. 复制原点 D. ampR （3）在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的_____或囊胚。在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将_____均等分割。 （4）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_____技术检测。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 北师大静海附校2022-2023学年第2学期高二年级 第二次阶段性评估生物试题 考试时间：60分钟满分：100分 第I卷（共40分） 一、选择题（本题共20小题，每小题2分。在每小题给出的四个选项中只有一项是符合题目要求的，请将答案涂写在答题卡相应的位置中。） 1. 下列有关利用传统发酵技术制作果酒、果醋及泡菜的叙述，正确的是（　　）。 A. 制作泡菜时加入一定量的陈泡菜汁能加快发酵进程 B. 发酵原料和发酵装置都需进行灭菌，以防止杂菌污染 C. 制作果醋利用了醋酸菌在无氧条件下产生醋酸 D. 三者的发酵液都主要是因为产生了大量二氧化碳而呈酸性 【答案】A 【解析】 【分析】1、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸； 2、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌．在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、制作泡菜时加入一定量的陈泡菜汁能加快发酵进程，原因是陈泡菜汁中含有乳酸菌菌种，A正确； B、传统制作果酒时，发酵原料不能进行灭菌，因为菌种是来自果皮上的野生酵母菌，B错误； C、参与果醋制作的醋酸菌是需氧菌；故制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸，C错误； D、制作泡菜的发酵液是由于产生大量乳酸而呈酸性，且乳酸菌发酵时不会产生二氧化碳，D错误。 故选A。 2. 欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（ ） A. 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 B. 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板 C. 可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D. 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌 【答案】D 【解析】 【详解】A、为防止土壤浸出液浓度过高，不能获得单菌落，要将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确； B、同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，防止偶然因素对实验结果的影响，B正确； C、可以将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，以判断培养基灭菌是否彻底，C正确； D、可筛选出分解尿素的细菌的培养基是以尿素为唯一氮源的选择培养基，D错误。 故选D 3. 下列有关平板划线法操作的叙述，错误的是（ ） A. 将接种环放在酒精灯火焰上灼烧 B. 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 C. 蘸取菌液和划线均要在酒精灯火焰旁进行 D. 接种环划线时要将最后一次的划线与第一次的划线相连 【答案】D 【解析】 【分析】平板划线分离操作中的有关问题：在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线。每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 【详解】A、接种环应该采用灼烧灭菌法进行灭菌，即将接种环放在火焰上灼烧，A正确； B、将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液，防止高温杀死菌种，B正确； C、为防止杂菌污染，蘸取菌液和划线都要在酒精灯火焰旁进行，C正确； D、划线时，在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线，不能将最后一区的划线与第一区的划线相连，D错误。 故选D。 4. 下列各项培育植物新品种的过程中，不经过愈伤组织阶段的是（ ） A. 通过植物体细胞杂交培育白菜—甘蓝杂种植株 B. 通过多倍体育种培育无子西瓜 C. 通过单倍体育种培育优质小麦 D. 通过基因工程培育转基因抗虫水稻 【答案】B 【解析】 【分析】 【详解】愈伤组织是植物组织培养的中间结构。植物体细胞杂交需利用植物组织培养技术；多倍体育种不需利用植物组织培养；单倍体育种中花药离体培养利用了植物组织培养技术，基因工程培育抗虫棉需利用植物组织培养技术，所以B项不经愈伤组织阶段。故选B。 5. 下列有关哺乳动物受精的表述，正确的是（　　）。 A. 透明带反应和卵细胞膜反应可以防止多精入卵的发生 B. 自然状态下，受精在子宫中完成 C. 精子需要获能才能与卵子结合，而卵子一经排出就具有受精能力 D. 精子入卵后，卵子恢复并很快完成了减数第一次分裂 【答案】A 【解析】 【分析】受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。 【详解】A、透明带反应是防止多精子进入卵受精的第一道屏障，卵细胞膜反应是防止多精子入卵受精的第二道屏障，A正确； B、在自然情况下，受精是在雌性的输卵管内完成的，B错误； C、精子需要获能才能与卵子结合，而卵子只有发育到MⅡ中期才具备与精子受精的能力，C错误； D、受精过程中，卵子完成减数第二次分裂，D错误。 故选A。 6. 生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是（　　） A. 人工诱导基因突变 B. 选择优良品种进行杂交 C. 取茎尖分生组织进行组织培养 D. 进行远缘植物体细胞杂交 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养的应用：1、植物离体快速繁殖。2、无病毒苗木培育 ，无性繁殖植物，病毒在体内积累，对生产造成极大损失。 利用组织培养方法可脱除病毒，获得脱病毒小苗。3、通过花药和花粉培养获得单倍体植株、缩短育种年限 。4、培养细胞突变体的应用 。5、利用组织培养的材料作为植物生物反应器。 【详解】A、植物长期无性繁殖，病毒在体内积累，基因突变不会消除病毒，A错误； B、选择优良品种进行杂交会使子代获得优良性状，不会消除病毒，B错误； C、植物长期无性繁殖，病毒在体内积累，植物的茎尖无毒或病毒极少，可以组织培养获得无病毒植株，C正确； D、进行远缘植物体细胞杂交，细胞内的病毒不会消失，D错误。 故选C。 【点睛】 7. 筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。有关本实验的叙述，错误的是（ ） 菌种 菌落直径：C（mm） 透明圈直径：H（mm） H/C 细菌I 5．1 11．2 2．2 细菌Ⅱ 8．1 13．0 1．6 A. 培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B. 筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C. 以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外 D. H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异 【答案】C 【解析】 【分析】1、培养基的营养构成①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求； 2、该选择培养基上的唯一碳源是淀粉，只有能利用淀粉的微生物才能存活，微生物分解淀粉后，会产生透明圈； 3、据图分析：图示接种方法为稀释涂布平板法，菌种Ⅰ分解淀粉的能力更强。 【详解】A、筛选淀粉分解菌的培养基中，除淀粉提供碳源外，还需要氮源、水、无机盐等营养物质，A正确； B、筛选淀粉分解菌时，需要对菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养，B正确； C、据图分析可知，两个菌落均产生了透明圈，说明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉，C错误； D、淀粉分解菌的H/C越大，说明其产生的淀粉酶分解的淀粉相对越多，说明该淀粉分解菌分解淀粉的能力越强，D正确。 故选C。 8. 丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如下图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（　　）。 A. 培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性 B. 利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小 C. 以丙草胺为唯一氮源培养基进行培养可提高降解菌的浓度 D. 5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1．7×109个 【答案】A 【解析】 【分析】统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法： ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）：①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。 【详解】A、培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A错误； B、图中利用的是稀释涂布平板法进行计数，利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小，这是因为前者只能计算活菌，而显微镜直接计数法不区分活、死菌，B正确； C、由题干信息可知，该实验的目的是从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，故培养基应以丙草胺为唯一氮源，该培养基中只有降解丙草胺的细菌菌株才能生长，其他微生物的生长会受到抑制，故用该培养基进行培养可提高降解菌的浓度，C正确； D、5号试管的稀释倍数是105，则每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×10×105=1.7×109个，D正确。 故选A。 9. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　）。 A. DNA和蛋白质都溶于酒精 B. 提取植物材料的DNA需先研磨破碎细胞 C. DNA只能溶于2mol/L的NaCI溶液 D. 溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺后颜色呈紫色 【答案】B 【解析】 【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。2、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 【详解】A、DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精，A错误； B、提取植物材料的DNA应先破坏细胞结构，让DNA释放出来，B正确； C、DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度较大，也能溶液其他浓度的NaCI溶液，C错误； D、鉴定DNA时，应将丝状物加入2mol/L的NaCl溶液中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解，之后加入到二苯胺试剂中进行沸水浴加热5分钟，冷却后溶液呈蓝色，D错误。 故选B。 10. 假设世界上最后一头野驴刚死亡，以下使它“复生”方案中可行的是（ ） A. 将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育出新个体 B. 将野驴的体细胞核移植到家驴的去核卵细胞中，培育出新个体 C. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育出新个体 D. 将野驴的体细胞取出，利用组织培养培育出新个体 【答案】B 【解析】 【分析】用体细胞进行动物克隆，目前只能通过体细胞核移植技术实现，该技术需要将待克隆动物体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中，形成重构胚，再经过动物细胞培养和胚胎移植，最终培育出新个体。 【详解】A、将野驴的基因导入家驴的受精卵中，只能培育出转基因驴，不能让野驴“复生”，A错误； B、将野驴的体细胞核移植到家驴的去核卵细胞中，可以克隆形成野驴，B正确； C、由于动物细胞的全能性受到限制，目前动物细胞融合技术还不能产生生物体，C错误； D、由于动物细胞的全能性受到限制，目前动物细胞还不能培养成动物个体，D错误。 故选B。 11. 下图示植物细胞融合及组织培养过程。下列说法中不正确的是（　　）。 A. 植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍 B. 杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株，说明杂种细胞具有全能性 C. 若A细胞的基因型为Rr，B细胞为Yy，则最终形成的杂种植株的基因型为RrYy D. 尽管愈伤组织可以进行光合作用，但其培养基中仍需要糖类、氨基酸等有机营养 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图：图示为植物细胞融合及组织培养过程示意图．①表示去除细胞壁，获取原生质体的过程；②表示人工诱导原生质体融合的过程；③表示再生形成新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。 【详解】A、植物体细胞杂交的最大优点是克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确； B、杂种细胞培育成杂种植株需经过④和⑤过程，采用了植物组织培养技术，该技术原理是植物细胞具有全能性，因此杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株说明杂种细胞具有全能性，B正确； C、杂种植株含有两个亲本的遗传物质，若A的基因型为Rr，B的基因型为Yy，则最终形成的杂种植株的基因型为RrYy，C正确； D、愈伤组织细胞内没有叶绿体，不能进行光合作用，D错误。 故选D。 12. 下图为产业化繁育良种牛的部分过程。下列相关叙述错误的是（　　） A. E和F的繁育过程中，A、B、C、D牛都必须是遗传性能优良的个体 B. 过程②无核卵母细胞可以为重组细胞全能性的表达提供物质基础 C. 过程③可用物理或化学方法进行处理，目的是激活重组细胞完成细胞分裂和发育过程 D. E的遗传物质来自供体A和C，F的核遗传物质全部来自供体B 【答案】A 【解析】 【分析】 分析题图：①表示体外受精或配种，②表示去核，③表示用物理或化学方法激活重组细胞。 【详解】A、E和F的繁育过程中，A、B、C都是供体牛，因此都必须是遗传性能优良的个体，而D牛是受体牛，可以不是遗传性能优良的个体，A错误； B、过程②表示去核，无核卵母细胞的细胞质中含有促进核基因表达的物质，并含有丰富的营养物质，可以为重组细胞全能性的表达提供物质基础，B正确； C、过程③可用物理或化学方法进行处理，目的是激活重组细胞，使其完成细胞分裂和发育进程，形成重组胚胎，C正确； D、分析图示可知，E由受精卵发育而来，其核遗传物质来自供体A和C，F的核遗传物质全部来自供体B，D正确。 故选A。 13. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精获取的精子能立即与卵细胞受精 B. ②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行减数分裂，有细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎恢复和发育 D. 为选育出能泌乳的雌奶牛，移植前需从滋养层部位取样，做染色体分析鉴定性别 【答案】D 【解析】 【分析】题图分析：图中①表示体外受精，②表示早期胚胎培养，③表示胚胎分割，④表示胚胎移植。 【详解】A、①代表体外受精，体外受精和体内受精前精子都需要获能，A错误； B、②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂和分化，B错误； C、③代表胚胎分割，需均等分割囊胚的内细胞团，以免影响胚胎发育，C错误； D、DNA分析鉴定性别须从胚胎的滋养层部位取样，这样既保证了遗传信息一致，又不影响内细胞团进一步发育，D正确。 故选D。 【点睛】 14. 下列技术或方法与原理相符的是（ ） A. 人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖 B. 植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性 C. 早期胚胎培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性 D. 转基因抗虫棉和克隆羊多利的培育——基因重组 【答案】A 【解析】 【分析】细胞的全能性指高度分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性；单克隆抗体的制备过程没有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖；早期胚胎培养进行的是有丝分裂，没有体现细胞膜的流动性；人鼠细胞融合涉及细胞膜的融合过程，故体现细胞膜的流动性这一结构特点；转基因抗虫棉的培育利用的是基因工程技术，其原理是基因重组；克隆羊多利的培育运用的是核移植技术，其原理是动物细胞核的全能性。 【详解】人参细胞培养和动物细胞的培养中细胞要进行有丝分裂，故体现了细胞增殖这一原理，A项正确；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性，单克隆抗体的制备过程没有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖，B项错误；早期胚胎培养进行的是有丝分裂，体现了细胞的增殖能力，没有体现膜的流动性，人鼠细胞融合体现了细胞膜的流动性，C项错误；转基因抗虫棉的培育是基因工程，原理是基因重组，克隆羊多利的培育是核移植，胚胎移植，无基因重组，D项错误。 15. 质粒是基因工程最常用的载体，下列关于质粒的说法正确的是（　　） A. 质粒在宿主细胞内都要整合到染色体DNA上 B. 质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型细胞器 C. 基因工程使用的质粒一定含有标记基因和复制原点 D. 质粒上碱基之间数量存在A+G＝U+C 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．其中质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 【详解】A、质粒在宿主细胞内不一定都要整合到染色体DNA上，如宿主细胞是原核细胞时不含染色体，A错误； B、质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型环状DNA分子，而不是细胞器，B错误； C、基因工程使用的质粒一定含有标记基因（便于筛选出重组质粒），和复制原点（作为复制的起点），C正确； D、质粒是环状DNA分子，不含碱基U，为双链结构，所以其碱基之间数量存在A+G＝T+C，D错误。 故选C。 16. GoldenGate是当代极为重要的一种分子克隆技术，该技术的实施依赖于Ⅱs型限制酶，图所示为某种Ⅱs型限制酶的识别序列和切割位点（N表示任意碱基），以下说法正确的是（ ） A. IIs型限制酶不具有高效性 B. Ⅱs型限制酶作用位点是氢键 C. Ⅱs型限制酶应保存于高温条件 D. 同种IIs型限制酶切割两个DNA分子所得片段未必能以DNA连接酶连接 【答案】D 【解析】 【分析】限制性核酸内切酶是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶，简称限制酶。 【详解】A、Ⅱs限制酶作为酶类，其催化作用具有高效性，A错误； B、Ⅱs型限制酶的作用位点是磷酸二酯键，B错误； C、高温会破坏酶的空间结构，使酶失活酶，不适合保存Ⅱs型限制酶，一般用低温保存酶，C错误； D、Ⅱs限制酶切割位点N表示任意碱基，因此同种Ⅱs型限制酶切割两个不同DNA分子所得的片段未必能通过DNA连接酶连接，D正确。 故选D。 17. 下图为DNA 分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（ ） A. DNA 连接酶、限制酶、解旋酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 【答案】D 【解析】 【分析】解旋酶：能使DNA分子两条链之间的氢键断裂，使DNA双链打开。 限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 DNA连接酶：连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键。 【详解】①处为氢键，是解旋酶的作用部位；②处为磷酸二酯键，是限制酶的作用部位；③处为两个DNA片段的缺口，是DNA连接酶的作用部位，催化磷酸二酯键的形成，即D正确。 故选D。 18. 下面是质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，ampr为氨苄青霉素抗性基因，tetr为四环素抗性基因，箭头表示限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在氨苄青霉素培养基上生长而不能在四环素培养基上生长的含重组质粒的细胞，应选择合适的酶切位点是（ ） A. B. C. D. 【答案】D 【解析】 【分析】基因表达载体一般包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因。图中Ampr为氨苄青霉素抗性基因，Tetr为四环素抗性基因，一般这些抗性基因作为基因工程的标记基因，而ori为复制必需的序列，因此该基因不能被破坏。 【详解】A 、图中酶切位点在ori序列上，该序列被破坏，重组质粒将无法进行复制，因此含重组DNA细胞既不能在四环素培养基上生长，也不能在氨苄青霉素培养基上生长，A错误； B、图中酶切位点没有破坏三个基因，因此含重组DNA的细胞既能在四环素培养基上生长，也能在氨苄青霉素培养基上生长，B错误； C、图中酶切位点在氨苄青霉素抗性基因（ampr）上，氨苄青霉素抗性基因被破坏，则含重组DNA的细胞能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长，C错误。 D、图中酶切位点在四环素抗性基因（tetr）上，由于仅四环素抗性基因被破坏，则含重组DNA的细胞能在氨苄青霉素培养基上生长而不能在四环素培养基上生长，D正确。 故选D。 19. 2017年，某国批准首例使用细胞核移植技术培育三亲婴儿的申请。如图为三亲婴儿的培育过程。据图分析，下列叙述正确的是（ ） A. 三亲婴儿的出生属于无性生殖 B. 该技术可避免母亲的红绿色盲基因传递给后代 C. 卵母细胞经过培养获能后才能受精 D. 三亲婴儿培育用到了动物细胞培养、核移植等操作 【答案】D 【解析】 【分析】题图分析：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。 【详解】A、三亲婴儿的产生过程经过了精卵细胞的融合，因而三亲婴儿出生属于有性生殖，A错误； B、红绿色盲基因存在于细胞核，母亲的细胞核基因会传递给子代，故该技术不可避免母亲的红绿色盲基因传递给后代，B错误； C、卵母细胞经过培养至减数第二次分裂中期才能受精，C错误； D、看图可知：三亲婴儿的培育用到了早期胚胎培养、胚胎移植和核移植等操作，D正确。 故选D。 20. 使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是（　　） A. 单克隆抗体制备过程中需要使用Taq酶 B. ADC进入肿瘤细胞的运输方式为协助扩散 C. 溶酶体破裂导致其中的水解酶释放，加速了肿瘤细胞死亡 D. 细胞毒素具有与肿瘤细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合的能力 【答案】C 【解析】 【分析】据图分析，抗体上带有细胞毒素，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把细胞毒素一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡。 【详解】A、PCR过程中要使用到Taq酶，单克隆抗体制备过程包括细胞融合和细胞培养，该过程中不需要使用Taq酶，A错误； B、ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，ADC进入肿瘤细胞是胞吐的方式，B错误； C、溶酶体破裂使其中的蛋白酶等多种水解酶释放出来，破坏细胞结构，加速肿瘤细胞凋亡，C正确； D、细胞毒素杀伤肿瘤细胞没有特异性，能与肿瘤细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合的是抗体，D错误。 故选C。 第Ⅱ卷（共60分） 二、非选择题（本题共5小题，共60分。请将答案写在答题卡相应的位置上。） 21. 如图是果酒果醋的制作流程。请据图回答以下问题： （1）在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有的乳酸菌发酵产生乳酸；也可能是__________________，导致醋酸菌生长繁殖，产生醋酸。 （2）某同学尝试用罐头瓶制作果酒，在培养过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，这样做的主要目的，一是__________，二是避免氧气进入和杂菌污染。 （3）在酸性条件下，可用橙色的________溶液来检测果酒发酵是否成功。若要进一步检测所得果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用________法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。 （4）在果酒制作中，加入的新鲜葡萄汁没有经过灭菌处理，但是在制出的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是酵母菌与杂菌之间存在________关系；二是由于酵母菌发酵产生的________不利于杂菌的生长。 【答案】（1）装置密闭不严 （2）放掉发酵产生的CO2 （3） ①. 酸性的重铬酸钾 ②. 稀释涂布平板法 （4） ①. 竞争 ②. 酒精 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，新陈代谢类型是兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再把乙醛变为醋酸。 【小问1详解】 在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有乳酸菌发酵产生乳酸；也可能是发酵容器密闭不严，导致醋酸菌生长繁殖，产生醋酸。 【小问2详解】 酵母菌发酵时产生二氧化碳，如果不及时放气发酵瓶可能会爆炸，因此在制酒阶段，每隔12h左右就要将瓶盖拧松一次；不打开瓶盖的目的为了防止氧气和杂菌进入发酵瓶。 【小问3详解】 酒精可用酸性条件下的重铬酸钾溶液来检测；若要进一步检测果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用稀释涂布平板法；这种方法计算得到的数值往往偏低，原因是两个或多个酵母菌会形成一个菌落。 【小问4详解】 加入的新鲜葡萄汁没有进行过灭菌处理，但是在制出的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是大量的酵母菌在与杂菌之间的竞争中取得优势，二是果酒中的酒精、缺氧和酸性环境更不利于杂菌生长，从而淘汰掉杂菌。 22. 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题： （1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_____的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_____。甲、乙培养基均属于_____培养基。 （2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_____倍。 （3）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤：用_____对淤泥进行梯度稀释，然后涂布到_____（填“甲”或“乙”）培养基上，培养后计数。 【答案】（1） ①. 高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法） ②. 琼脂 ③. 选择 （2）104 （3） ①. 无菌水 ②. 乙 【解析】 【分析】分析题图：①为淤泥取样进行稀释，②为接种到液体培养基上，③稀释涂布平板法接种到以S为唯一碳源和氮源的选择培养基上，其中Y为琼脂，④为挑取单菌落接种，⑤在以S为唯一碳源和氮源的选择培养基上进一步筛选出高效降解S的菌株。 【小问1详解】 微生物培养的关键是无菌技术，常用高压蒸汽灭菌法（或湿热灭菌）对盛有水或培养基的摇瓶进行灭菌。乙培养基为接种的培养基，属于固体培养基，结合题干“乙的组分为无机盐、水、S和Y”，其中S（一种含有C、H、N的有机物）为碳源和氮源，则Y物质是琼脂（凝固剂）。甲、乙培养基均以S（一种含有C、H、N的有机物）为唯一碳源和氮源，属于选择培养基。 【小问2详解】 利用稀释涂布平板法对细菌进行计数，要保证每个平板上长出的菌落数不超过200，假设稀释倍数为a，在每个平板上涂布100μL（即0.1mL）稀释后的菌液，则有200×a÷0.1=2×107，则稀释倍数a=104。 【小问3详解】 能够对微生物进行分离和计数的方法是稀释涂布平板法，故若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，可以取淤泥加入无菌水制成菌悬液，涂布（或稀释涂布）到乙培养基上，培养后进行计数。 23. 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示： （1）过程①常用的酶是_____，杂种细胞形成的标志是_____。 （2）植物原生质体融合过程常利用化学试剂_____诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到不同的原生质体，当观察到融合的细胞表面_____时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 （3）过程③和过程④依次为_____，过程④中的培养基常添加的植物激素是生长素和_____。 （4）若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞含_____条染色体。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶     ②. 杂种细胞再生出新的细胞壁 （2） ①. 聚乙二醇##PEG ②. 有两种颜色的荧光标记 （3） ①. 脱分化和再分化  ②. 细胞分裂素 （4）m+n 【解析】 【分析】分析题图：图示为番茄一马铃薯杂种植株的培育过程，①表示去壁过程，常用酶解法；②表示融合的原生质体再生出细胞壁的过程；③表示脱分化过程；④表示再分化过程。 小问1详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此根据酶的专一性原理，去除植物细胞壁常用纤维素酶和果胶酶；细胞融合完成的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁。 【小问2详解】 植物原生质体融合过程常利用化学试剂聚乙二醇诱导；在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到：细胞膜上含有两种颜色的荧光标记时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 【小问3详解】 过程③脱分化，过程④再分化，过程④再分化中的培养基常添加的植物激素是生长素和细胞分裂素。 【小问4详解】 杂种细胞的染色体数为两种细胞染色体数之和即（m+n）。 24. 如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： （1）图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有_____种类型。已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程体现了细胞膜具有_____的结构特点。在体外融合时需要诱导，与诱导植物原生质体融合不同的是图中还可用_____诱导融合。 （2）在体外进行动物细胞培养时需要在合成加培养基的基础上添加_____等天然成分。 （3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是_____。 （4）由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的_____和_____两大技术。 【答案】（1） ①. 三（或3） ②. 一定的流动性 ③. 灭活病毒 （2）血清 （3）筛选出杂交瘤细胞 （4） ①. 动物细胞融合 ②. 动物细胞培养 【解析】 【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 2、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。 3、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。 【小问1详解】 B细胞和骨髓瘤细胞融合体现了细胞膜的结构特性-流动性；如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有3种类型（B细胞和B细胞融合、B细胞和杂交瘤细胞融合、杂交瘤细胞和杂交瘤细胞融合）。动物细胞融合时还可以用灭活的病毒诱导融合。 【小问2详解】 动物细胞培养时，在合成培养基中还需要添加血清，以供应动物细胞生长的某些物质。 【小问3详解】 图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出杂交瘤细胞。 【小问4详解】 由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的动物细胞融合和动物细胞培养两大技术；其中动物细胞融合的意义是突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 25. 下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI 直线所示为三种限制酶的酶切位点。 （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用_____限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。过程①可采用的操作方法是_____。过程②可采用的生物技术是_____。 （2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_____。 A. 启动子 B. tetR C. 复制原点 D. ampR （3）在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的_____或囊胚。在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将_____均等分割。 （4）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_____技术检测。 【答案】（1） ①. Hind Ⅲ和BamH I ②. 显微注射法 ③. 胚胎移植技术 （2）A （3） ①. 桑葚胚 ②. 内细胞团 （4）抗原-抗体杂交 【解析】 【分析】分析题图，图示是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，包括基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、早期胚胎培养、胚胎移植等步骤，其中过程①是将重组质粒导入受体细胞；过程②需采用胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母牛体内。 【小问1详解】 外源DNA分子上含有限制酶BamH I、Hind Ⅲ、SmaⅠ的切割位点，其中限制酶SmaⅠ的切割位点位于目的基因上，所以获取目的基因和构建基因表达载体时，应用限制酶Hind Ⅲ和BamH I；其中过程①是将重组质粒导入受体细胞，导入动物细胞的方法是显微注射法，过程②需采用胚胎移植技术。 【小问2详解】 能让目的基因开始表达的是启动子，启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度，故选A。 【小问3详解】 对早期胚胎进行切割，经过程胚胎移植过程可获得多个新个体都发育成了个体，这体现了细胞全能性。在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚。在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割； 【小问4详解】 一般检测目的基因是否表达成功用抗原-抗体杂交技术来检测。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$