江苏省扬州市2023-2024学年高二下学期期末考试生物试题

2023-2024学年第二学期期末检测 高二生物 2024.06 本试卷分为第I卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。第I卷1-4页，第Ⅱ卷5-8页。 共100分。考试时间75分钟。 注意事项： 1.答第|卷前，考生务必将自己的学校、姓名、考号填涂在机读答题卡上。 2.将答策填涂、填写在机读答题卡上。 第I卷（选择题共40分） 一、单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分。每题只有一个选项最符合题意。 1.下列有关生物体中化合物的叙述，正确的是 A.构成血红蛋白的某些氨基酸中含有S、Fe等元素 B.血钙浓度过低会引发重症肌无力 C.ATP和RNA都含有腺苷，组成元素相同 D.淀粉和脂质组成元素相同，但淀粉比脂质氧的含量高 2.下列有关实验操作的叙述正确的是 A.检测脂肪实验中，采用体积分数为75%的酒精洗去浮色 B.用一定浓度的MgSO4溶液可能使水培泛黄的植物叶片变绿 C.显微镜下观察到某细胞质逆时针方向流动，实际上是顺时针方向流动 D.鉴定蛋白质和还原糖实验中，采用的NaOH溶液的浓度不同，CuSO4的浓度相同 3.细胞的结构与功能是相适应的。下列叙述错误的是 A.线粒体内膜向内腔折叠形成嵴，增大膜面积，有利于葡萄糖分解酶的附着 B.巨噬细胞中含有较多的溶酶体，有利于消化分解侵入的病毒和细菌 C.叶绿体在细胞内的流动受光照强度的影响，在弱光下会汇集到细胞顶面 D.染色质在细胞分裂期高度螺旋化为染色体，有利于染色体的平均分配 4.ATP的合成需要ATP合酶的参与，在跨膜质子(Ht)电化学势能的推动下合成ATP,下列 说法正确的是 AATP合酶跨膜部位具有亲水性，有利于与膜结合部位的稳定 B.ATP合酶的参与下H的跨膜运输方式属于主动运输 C.活细胞中ATP酶和ATP合酶几乎时刻行使其功能 D.ATP中两个相邻的磷酸基团都带正电荷，使得磷酐键不稳定 5.植物组织培养所用的培养基中常添加蔗糖，植物细胞利用蔗糖的方式如下图所示。下列叙 述正确的是 蔗糖H 喜糖H H-ATP酶 共转运体 蔗糖H H 一细胞生 ADP+Pi ATP 蔗糖酶 一细胞膜 靠1面计0面 A.蔗糖进入植物细胞的方式属于协助扩散 B.转运蔗糖时蔗糖H共转运体的空间结构不会发生变化 C.培养基的pH值高于细胞内时，有利于植物细胞吸收蔗糖 D.蔗糖酶将细胞外的糖水解为单糖可提高蔗糖的利用率 6.海洋软体动物一一绿叶海天牛，幼体时通体褐色，以藻类为食，并将藻类的叶绿体完整地 保留到自己的肠细胞中且有活力，最终海天牛成体身体变绿。将其移到实验室中，仅提供 光照和CO2的情况下能存活10个多月。下列有关叙述错误的是 A.海洋藻类为绿叶海天牛提供了用于光合和呼吸作用的物质与能量 B.海洋藻类的叶绿体共生在绿叶海天牛肠道里能进行光合作用 C.这种属性使绿叶海天牛有更多的精力去完成繁殖和躲避天敌的任务 D.一只绿叶海天牛一生中能产生ATP的生理过程会发生显著变化 7.科研小组拟培育能产生甲、乙两种药用植物有效成分的植物新品种，设计了如下实验流程。 据图分析错误的是 5 围 ⑥吵 → 2 b 国 署 A.过程①通常用纤维素酶和果胶酶处理 B.过程②常使用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂 C.过程④⑤分别涉及细胞的脱分化和再分化 D.过程⑥需要将试管苗移栽到含多种激素的基质上进行炼苗 8.下图为我国科学家利用体细胞克隆技术，获得了两只猕猴“中中”和“华华”的简要流程。 相关叙述正确的是 A猴体 细 早期 “中中” 胞 移 细胞 核 合 胚 胚胎 “华华” B猴去核 卵母细胞 A.图示过程中利用的技术有核移植和干细胞移植技术等 B.这两只克隆猕猴是由同一受精卵发育而成的双胞胎 C.C猴会对移入子宫的外来胚胎产生一定程度的免疫排斥反应 D.利用A猴的胚胎干细胞核移植获得克隆猕猴的难度要小些 9.下列有关基因工程所需酶及载体的的描述错误的是 A.限制酶切割1个位点，破坏两个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团 B.T4DNA连接酶可连接黏性末端和平末端，不具有专一性 C.DNA聚合酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键 D.使用质粒作为载体可以避免目的基因在受体细胞内被分解 第2页共8页 10.下列生物技术操作不能达成预期目标的是 A.将胰岛素基因表达质粒转入酵母菌，筛选获得产胰岛素工程菌 B.将肠乳糖酶基因导入奶牛乳腺细胞，培育产低乳糖牛乳的奶牛 C.将体外改造后能识别特定癌细胞的T细胞回输患者，进行癌症治疗 D.将花青素代谢相关基因导入植物体细胞，获得具有特定花色的植株 11.检测和筛选是生物技术中的重要环节。下列叙述正确的是 A.制备单克隆抗体过程中第一次和第二次筛选的原理相同 B.基因工程中利用含抗生素的培养基筛选出的受体细胞不一定含有重组质粒 C.检测目的基因能否稳定遗传的关键是看目的基因是否成功构建为基因表达载体 D.只要检测到目的基因成功表达出蛋白质，就证明基因工程取得成功 12.巢式PCR是一种特殊的聚合酶链式反应，使用两组不同的引物实现目标DNA片段的扩增。 第一组外引物扩增出的DNA片段（中间产物）长度超出目标区域，第二组内引物称为巢 式引物，其结合部位在中间产物内部的目标区域，从而扩增出目标产物，具体过程如下图 所示。下列说法错误的是 模板 第一次PCR扩增 中间产物 第二次PCR扩增 目标产物 A.巢式PCR的两轮扩增中所需的两对引物不同，但原料和酶相同 B.DNA的合成总是从子链的5'端向3'延伸与TagDNA聚合酶的作用有关 C.用内引物进行PCR时，扩增n次后理论上需要2n2个引物 D.巢式PCR技术相较于传统PCR技术增强了扩增产物的特异性 13.DNA粗提取与鉴定的实验流程是“取材→研磨→过滤→分离→鉴定”。下列叙述正确的是 A.大肠杆菌、洋葱和猪血细胞均可作为提取DNA的材料 B.将研磨液从冰箱中取出后，取沉淀物继续进行实验 C.滤液中加入冷酒精，用玻璃棒快速搅拌会使DNA的提取量增加 D.进行DNA鉴定时，对照组不需要加入DNA 14,生物技术在迅猛发展，它与人类健康、生产生活的关系越来越密切。下列说法错误的是 A,利用马铃薯茎尖组织培养获得的脱毒苗能提高产量 B.单克隆抗体在疾病诊断和病原体鉴定中发挥重要作用 C.通过乳房生物反应器可在分泌的乳汁中获得所需的药物 D,蛋白质工程可对蛋白质结构直接改造以满足生产生活需求 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止，个选项符合题意。每 题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 15.微管是参与组成细胞骨架的蛋白质纤维，可以发生解聚和重新组装，下列叙述正确的是 A.微管和细胞膜的基本支架均可被蛋白酶水解 B.微管既参与维持细胞稳定的形态，也和细胞变形运动有关 C.微管可参与构成细胞器移动的轨道 D.微管结构与细胞的能量转化、信息传递等功能密切相关 16.取生现状态相同的等量紫色洋慈鳞片叶外表皮，分别放入等量且适量的等浓度的甲、乙溶 液中，一段时间后观察到乙溶液中细胞状态如图A所示，测得甲、乙两溶液中细胞总失水 量变化如图B所示。下列有关分析错误的是 个细胞总失水量 口甲组 ■乙组 0246810处理时间/min 图A 图B A.图A中由1、2和6构成的原生质层相当于半透膜 B.可以判定图A中的细胞正处于渗透失水的过程中 C.6min时乙组细胞开始吸收溶质使细胞质浓度升高 D.两组细胞在4min时的吸水能力都比在2min时强 17.丙酮酸在不同酶催化下生成的产物如下图1，植物体内普遍存在乙醇脱氢酶(ADH)和乳 酸脱氢酶(LDH)。科研人员研究了淹水胁迫对某植物根系呼吸酶活性的影响，结果如下 图2。下列说法正确的是 丙酮酸 3r ▣对服 ■水淹 LDH酶 (:ww.j3. LDH 10.3 ADH (-uw. 0.2 乙醛 ADH ADH 0.1 NAD- —NADH →NAD 老Hy LDH 乳酸 乙醇 0 图1 图2 A.酒精发酵和乳酸发酵可实现NAD的再生 B。淹水胁迫时，该植物根细胞可产生乳酸和酒精 C.淹水胁迫时，该植物根细胞乳酸发酵途径更占优势 D.酒精发酵和乳酸发酵时合成ATP的能量来自NADH 18.葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，科学家将其第138位甘氨酸替换为脯氨酸后，其最适温 度提高了10℃左右。下列相关叙述正确的是 A.蛋白质工程首先要获取基因和蛋白质的结构数据 B,可用定点诱变技术直接将蛋白质中的甘氨酸替换为脯氨酸 C.利用蛋白质工程技术可以定向改变蛋白质的结构 D.改造后的葡萄糖异构酶的最适保存温度也提高了10℃左右 第4页共8页 Ⅱ卷（非选择题共60分） 三、非选择题：本部分包括5题，共计60分。 19.(12分)胆固醇在血液中通过与磷脂和蛋白质结合形成低密度脂蛋白(LDL)颗粒形式运 输到其他组织细胞（靶细胞）中，以满足这些细胞对胆固醇的需要，同时降低血浆中胆固 醇含量。下图是LDL通过受体介导进入细胞的途径。 LDL 载脂蛋白B 一载脂蛋白B LDL受体 胞外 型固醇 胞内 1 胞内体 网格蛋白 包被的囊泡 LDL受体蛋白 利用 3 游离 RNA 胆国醇还原酶 水解酶 下乙酰CoA ←过多的胆固醇→ DNA 胆固醇酯储存 图1 (1)胆固醇除参与血液中脂质的运输，还参与构成▲（细胞结构）。LDL之所以能够将包裹 的胆固醇准确转运至靶细胞中，与其结构中的▲与靶细胞膜上的LDL受体结合直接相关。 (2)与LDL受体合成、加工、修饰有关的细胞器有▲。LDL与其受体结合体现了细胞膜的△ 功能。 (3)与细胞质膜相比，LDL膜结构的不同点主要是▲。 (4)LDL通过途径①▲方式进入靶细胞，形成网格蛋白包被的囊泡，经过脱包被作用后与胞 内体（膜包裹的囊泡结构）融合。由于胞内体的内部酸性较强，LDL与受体分离，形成 含有LDL的胞内体和含有受体的小囊泡。含有LDL的胞内体可通过途径③被转运到▲中， 被其中的水解酶降解，胆固醇被释放进入细胞质基质：含有受体的小囊泡的去路是▲。 (5)由图1可知，当细胞中的胆固醇含量过高时，会通过▲（促进/抑制）LDL受体基因表达、 抑制乙酰C0A合成胆固醇以及促进胆固醇酯的储存，从而使游离胆固醇的含量维持在正 常水平。 (6)随着生活水平的提高，因糖、脂过量摄入导致的肥胖、非酒精性脂肪肝炎(NASH)等代 谢性疾病高发。非酒精性脂肪肝炎患者血液中甘油三酯和胆固醇偏高。为探究药剂 Exendin-4在脂质代谢中的作用，科研人员设计以下实验： 血液中的含量(mmoV/L) ①将非酒精性脂肪肝炎模型小鼠均分为甲、乙、丙三组。 4.0 ②甲组给予正常饮食作为对照；乙、丙两组均给予高脂 35 3.0 口甲 饮食，乙组腹腔注射适量生理盐水，丙组腹腔注射▲。 2.5 图乙 2.0 ☑丙 ③注射一周后检测三组小鼠血液中的甘油三酯和胆固 1.5 醇含量，结果如图2。根据实验结果可判断，Exendin-4 1.0- 0.5 对非酒精性脂肪肝炎小鼠血脂的作用效果是▲。为了更 0.0 口☑ 好的研究Exerdin-4使用效果，还需要进一步确定该药 甘油三酯 胆因醇 物的使用量，应增设的实验操作是▲，分别注入小鼠腹 田2 腔，一段时间后检测小鼠血液中的甘油三酯和胆固醇含量。 第5页共8页 20.(11分)普鲁士蓝纳米酶（以下简称纳米酶）具有催化HO2分解的能力，科学家利用该酶 进行了一系列实验以研究其特性。 1.0 0.8 0.d 02 ■■ 0.0 606.57.0758.0 0 5 1015 20 1015 20 PH GLY/(jmoV/L) [CuV(umoVL) 因1 图2 图3 (1)实验发现，少量的纳米酶能够催化HO2在短时间内大量分解，这说明其具有▲的特点， 原因是酶具有▲的作用机制。 (2)为探究纳米爵在不同pH值下的活性，科学家用溶解氧测定仪测定溶液中的溶氧量得到如 图1所示结果（△DO表示加入H2O25min后的溶氧量变化），可知纳米酶作用的适宜pH△ (填“偏酸性”或“偏中性”或“偏碱性”)。 (3)为监测常用的一种除草剂草甘膜(GLY)对纳米酶的影响，科学家以添加草甘磷的△DO (△DO(GLY))与不添加草甘膦的△DO(△DO(0))的比值(y)为纵坐标，GLY 浓度(x)为横坐标，绘制标准曲线如图2，说明草甘膦对纳米酶活性具有▲作用。该监 测体系也可用于草甘膦浓度的定量检测，使用该监测体系测得某士壤样品△DO比值为02， 则该土壤样品的草甘膦浓度约为▲μmoL。 (4)科学家进一步检测在HO2溶液加入了不同浓度Cu+混合5分钟后溶液的△D0值，实验 结果见图3，可得出的结论是：▲。通过查阅资料后发现C+对纳米酶的作用有影响，为 研究C+对纳米酶活性的影响，进行如下实验，请完善实验思路并顶期实验结果。 ①A组：测定▲与30%H02反应5min后的△D0值： ②B组：测定不同浓度纳米酶与30%H202反应5min后的△D0值： ③C组：测定▲与30%HzO2反应5min后的△D0值。 实验结果表明，C+对纳米酶在催化H2O2分解的影响并非简单的物理叠加，而是具有协 同作用，请在答题纸相应的坐标图中画出C组的结果曲线，并完善实验结果图（不要求 具体数值)。 21.(13分)下图甲表示某同学利用轮叶黑藻（一种沉水植物）探究“光照强度对光合速率的影 响”的实验装置：；图乙是轮叶黑藻细胞光合作用相关过程示意图（研究表明，水中CO2浓 度降低能诱导轮叶黑藻光合途径由C3途径向效率更高的C4途径转变，而且两条途径可在 同一细胞中进行)。 橡胶塞 有色小液滴 苹果酸ADP 广口瓶 C02缓冲液 ADP 丙般G PEP(C 灯 黑藻。 PEXC草酸乙酸C) .CO HCO AQPE岁 图甲 图乙 (1)对图甲装置进行遮光处理可测定轮叶黑藻有氧呼吸速率，此时有色液滴移动方向是▲（填： 笛6雷什。而 “向左”或“向右”)，原因是▲。若给与适宜的光照强度时，图甲中有色液滴的移动方 向是▲（填：“向左”或“向右”）。 (2)图乙CO2转变为HCO过程中，生成的H以▲的方式运出细胞；催化过程①和过程④中 CO2固定的两种酶(PEPC、Rubisco).中，与CO2亲和力较高的是▲，判断的依据是▲。 过程②消耗的NADPH产生于▲（填场所）；丙酮酸产生的过程除了图示③以外，还有发 生在▲（填过程）。 (3)研究人员通过测定并比较不同CO2浓度下PEPC酶的活性。证明低浓度CO2能诱导轮叶 黑藻光合途径的转变。请填写下表有关实验过程的内容并预期实验结果。 实验材料 处理方法 结果检测 预期结果 甲组一对照组 适量的轮叶黑藻 ②▲ 甲乙两组PEPC ③▲ 乙组一实验组1①)▲(2分)低浓度CO2处理 酶的活性 试举出本实验中的两个无关变量④▲。 22.(12分)肌钙蛋白I(cTI)是人体心肌细胞中的肌钙蛋白的一种亚基，其在血液中含量上 升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTl的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请 据图分析回答下列问题： cIn注射 ◆小鼠◆B淋巴细胞 验金甲①乙②丙分泌 抗cTnl单 克隆抗体 骨髓瘤细胞 (1)细胞培养中，可采用▲的方法防止有害代谢物的积累。每隔2周用cTl作为抗原注射小 鼠1次，共注射3次，其目的是▲，3次注射后的第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬 液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是▲。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是▲，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上进行抗 体阳性检测，之后经稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得▲。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 催 花，腔 检测 产物 固相 00抗原 酶标 特定 抗体 抗体仓 面0底物 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的 ▲结合。该检测方法中，酶标抗体的作用一方面是▲，另一方面▲从而通过测定产物量来 判断待测抗原量。 (4)杂交瘤细胞进行体外培养时，科学家根据细胞所需营养物质按种类和用量严格配制培养基， 这种培养基称为▲（填“合成培养基”或“天然培养基”），但在实践中上述培养基只能 维持细胞生存，不能促进细胞增殖，因此还需加入▲等成分。 (5)杂交瘤细胞与普通的动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有▲的特点，因此后 者进一步传代培养时，需要定期用▲处理。 23.(12分)甜味蛋白具有高甜度、低热量、安全性高等优点，并且具有一定的营养价值。科 研人员将甜味蛋白基因(G基因)转入普通的甜玉米细胞中，培育出了超量表达G蛋白的 转基因甜玉米新品种，提高了玉米的商品价值。在超量表达G基因载体的构建中，所用 DNA片段和Ti质粒及酶切位点如图1、2所示。 第7页共8页 EcoR I.BamH I HindⅢ BamH I 潮露素 抗性基因 Sac I M EcoR I Hind Ill N T-DNA Not I Ti质粒 终止子 一G基因料强启动子 卡那霉素」 抗性基因 图1 图2 (1)图1中，强启动子是一段特殊序列的DNA片段。位于基因的▲（填“上游”或“下游” 或“上下游均可”)，强启动子能被▲识别并驱动基因持续转录。该转录过程中模板链的 5端位于▲(“M或N)端。 (2)利用TDNA的▲特性，最终使强启动子和G基因整合到玉米细胞染色体DNA上。为使 DNA片段能定向插入TDNA中，可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列， M、N端添加的序列所对应的限制酶分别是▲。构建G基因的超表达载体，还需用到DNA 连接酶，其中DNA连接酶作用的底物为图3中的▲（填“A”或“B”或“A和B”)。 POH OHP 5”mimm3 3IIIILIs OHP B.3ii出出， POH 图3 (3)外植体经脱分化形成的愈伤组织放入农杆菌液浸泡后，进行植物组织培养时培养基中需加 入▲进行筛选。对获得的Y1、Y2、Y3、Y4四个玉米株系用G蛋白基因的探针作DNA分子 杂交检测，结果均为阳性，但进一步对G蛋白表达量测定时，发现Y4株系的表达量与野 生型相近，原因可能是▲。 (4)图4为淀粉合成酶基因片段，其转录后形成的前体NA,需通过加工后方能用于翻译。 科研人员希望通过降低淀粉合成酶基因的表达，进一步提高甜玉米中可溶性糖的含量，将 吗啉反义寡核苷酸导入玉米受精卵中，发现淀粉合成酶基因表达受阻。其受阻机制可能存 在两种假说。 假说1：吗啉反义寡核苷酸导致前体RNA上内含子1的对应序列不能被剪切： 假说2：吗啉反义寡核苷酸导致前体RNA上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。 引物1 引物2 引物3 3’—5 3’5 3’—5 5 3 外显子1 内含子1 外显子2 内含子2 外显子3 5-3 5—3 53 引物4 引物5 引物6 图4 为验证上述假说，在受精卵发育后3天的胚细胞中，分别从实验组和对照组提取▲，逆转 录形成cDNA。 ①若假说1成立，使用图示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为▲。 A实验组有目的条带 B.对照组有目的条带 C.实验组无目的条带 D.对照组无目的条带 ②若要证明假说2，需选择图示引物▲(2分)进行PCR扩增后，进一步鉴定。 ③若某次实验电泳结果发现：实验组和对照组都没有任何条带，从PC操作过程角度解释 可能的原因是▲（至少写出两点）· 馆8而#8面 2023-2024学年度第二学期高二期末检测 高二生物参考答案 单项选择题：本部分包括14题，每题2分，共计28分，每题只有一个选项最符合题意。 题号 1 2 3 4 6 1 8 10 答案 A D D D B ⊙ 题号 11 12 13 14 答案 B C D 0 二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分，每题有不止一个选项符合题意，每题全选 对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分， 15.BCD 16.ABC 17.AB 18.AC 三、非选择题：本部分包括5题，共计60分。 19.(12分) (1)动物细胞膜 我胎蛋白B (②)核糖体、内质网、高尔基体、线粒体 信息交流 ()LDL膜由单层磷脂分子组成 (4)胞吞 溶酶体 回到细胞膜（被重复利用） (⑤)抑制 (⑥②等量的Exendin-4 ③既能降低小鼠的甘油三酯，又能降低小鼠的胆固醇，且对小鼠甘油三酯的降低效果更显著 设置一系列浓度梯度的Exendin4 20.(11分) (1)高效性 更显著地降低生化反应的活化能 ·A组 (2)偏碱性 —B组 (3)抑制 10 C组 (4)一定浓度范国内Cú促进H0:分解 适宜（一定）浓度的 Cu2 钠米酶浓度 不同浓度纳米酶分别与A组浓度的C的混合液 探究0对纳米酶的影响实验结果曲线图 实验结果曲线图(C组曲线起点正确得1分、趋势正确得1分、纵轴与横轴标识1分，共3分) 21.(13分) (1)向左 黑暗条件下轮叶黑藻只进行呼吸作用，广口瓶内氧气减少 向右 (2)主动运输 PEPC i PEPC薛能固定更低浓度的CO: 类囊体薄膜 细胞呼吸第一阶段（糖酵解） (3)①生理状态一致且等量的轮叶黑藻(2分) ②大气中的（或适宜浓度）C0:处理 ③乙组PEPC碑活性高于甲组 ④相同且适宜光照强度和温度， 相同的光照时间处理等 22.(12分) (1)定期更换培养液 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞 聚乙二醇PEG) (2)乙和丙 能产生（特异性强、灵敏度高的）抗cTl抗体的杂交箱细胞（答到杂交箱细胞1分，答 出抗©Tl抗体的条交箱细胞2分) (3)不同抗原决定族（部位） 抗体与待测抗原结合 酵催化特定底物反应产生相应产物 (④)合成培养基 动物血清 (⑤)贴壁生长和接触抑制 被蛋白酶或胶原蛋白酶 23.(12分) (1)上游 RNA聚合 M (2)可转移 Nol和Sal(顺序不能候倒) B (3)潮霉素 Y:株系玉米中目的基因未表达 (A)总RNA ①A、D ②3和4(2分) 3退火温度太高、引物自连或互连（合理即可）