项目8任务8.2食用菌菌种的来源与培育（课件）-《农业生物技术》（高教版第三版）同步精品课堂

项目8 食用菌栽培技术 任务8.2 食用菌菌种的来源与培育（2课时） 第三版（种植类专业） 《农业生物技术》 教学目标 一 知识目标：1.掌握食用菌菌种的来源与分类。 2.掌握食用菌菌种分离知识。 3.掌握培养基制备和无菌操作相关知识。 技能目标：能对食用菌菌种进行有效分离和培养。 情感目标：关注我国食用菌的生产和发展，激发爱 国之情。 教学重难点 二 重点：1.母种的分离与培育的步骤及操作； 2.原种和栽培种的培育的步骤及操作； 3.菌种的培养与保存。 难点：1.纯种分离及无菌培养； 2.如何对菌种的质量进行判断。 导入新课 三 食用菌就是一种健身强体、绿色环保的美味滋补食品,它不但具有很高的营养价值,而且还具有非常重要的保健价值,是一种高营养的药膳兼用食物。 请同学们，展示并介绍自己带来的食用菌。 那如何对食用菌菌种进行培育呢？ 新知讲授 四 一、母种的分离与培育 食用菌母种的获得与确定主要有五个步骤： 培养基的制备 种菇的选择 纯种的分离 母种培养与选择 母种的鉴定培养 新知讲授 四 1.培养基的制备 常用的食用菌母种培养基有三种： ★马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA培养基） ★马铃薯蔗糖琼脂培养基（PSA培养基） ★ 马铃薯综合培养基（ CPDA 培养基） 新知讲授 四 各培养基配方 ★PDA培养基：马铃薯200g(去皮),葡萄糖20g,琼脂18-20g,水1000ml,pH自然。适合一般的食用菌母种分离和培养。 ★ PAS培养基：马铃薯200g(去皮),蔗糖 20g 琼脂 18-20g,水1000ml,pH自然。适合一般的食用菌母种分离和培养。 ★ CPDA 培养基：马铃薯200g(去皮),磷酸二氢钾 3g， 硫酸镁 0.5g ，葡萄糖 20g ，维生素 10mg ，琼脂 18克 ，水1000 毫升,pH自然。 用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。　 新知讲授 四 （1）将马铃薯洗净，削去皮与芽眼，切成薄片，加水1 000 mL，在锅内煮沸后保持20 min，用4～8层纱布过滤。 培养基的制作步骤 新知讲授 四 （2）继续用小火加热，并准确称量其余药品，加到马铃薯汁中搅匀，琼脂粉最后加入（如果用琼脂条，需要边加热边搅拌，使其完全溶解，然后再加其余药品），加热使其完全溶化，补足水量至1 000 mL。 新知讲授 四 （3）分装试管。将培养基趁热倒入漏斗中或分装器中，分装试管。试管的装量大约为1∕5，各支试管装量一致。然后5～10只捆成一捆，准备灭菌。 新知讲授 四 （4）把捆好的试管塞上棉塞，放进灭菌锅进行灭菌。灭菌结束后，打开灭菌锅取出试管，在干净的房间里把试管摆成斜面，斜面一般是试管长度的1∕2左右，不得超过3∕5，然后放入培养箱35~37℃培养一天，检查无污染后保存待用。 11塞棉塞 11塞棉塞 新知讲授 四 13装锅 14灭菌 15摆斜面 15摆斜面 新知讲授 四 2.种菇的选择 （1）选取符合本品种典型特征的个体； （2）要在出菇早、出菇均匀、生长旺盛的菇木和菇床上挑选； （3）选朵型正常，菌盖肥厚，菌柄短壮，无病虫害； （4）野生菇木的选择应选出菇多而无杂菌生长的幼龄菇木。 选择什么样的种菇呢？ 新知讲授 四 3.纯种的分离 （以平菇为例） 常用的分离方法有： 组织分离法 孢子分离法 菇木分离法 新知讲授 四 （1）组织分离法 （1）选种菇：菇型正常、发育健壮、中等成熟的平菇子实体。 （2）种菇消毒：用75%酒精棉球擦拭表面，在接菌箱内掰开。 （3）取组织：用接种针在菌盖和菌柄交界部位中间挑取一小块组织放在试管的斜面培养基中部，在25℃的恒温箱中培养，即可萌发形成菌丝，再经提纯移接于新的斜面培养基上扩大培养即成母种。 新知讲授 四 （2）孢子分离法 此法为直接挑取担孢子培养或者通过孢子收集器收集孢子，然后在培养基上培养，获得母种。 新知讲授 四 （3）菇木分离法 （1）将已长菇的木段带回实验室，晾干，轻轻敲掉沾附的土和杂物； （2）剥掉树皮，削去表层木质部。 （3）选取菌丝洁白、浓密的部位切取菇木的中间部位，然后锯成3cm厚的薄片。带有菌丝的木块即为分离材料，带进无菌室进行分离。 （4）取选好的菇木小薄片，用75%酒精擦洗表面消毒，之后放入0.1％的升汞内消毒1～2min，再用无菌水洗去升汞残液。随后将其截成如火柴梗大小的小木条，移接在斜面培养基中央。经25～27℃恒温培养，待菌丝生长后，再行转管培养。 新知讲授 四 菇木分离示意图 新知讲授 四 将分离得到的菌种接入试管后，放入25℃的培养箱中培养。 采用组织分离法和菇木分离法，2～3d即看到菌丝生长，孢子分离法须一周左右才能用肉眼看到孢子萌发。此时即应检查菌丝生长情况，淘汰污染的及未萌发菌丝的试管，挑选菌丝发育健壮的试管分离扩大培养，即为平菇纯菌种（母种）。 4.母种培养与选择 新知讲授 四 培养好母种后，除用肉眼观察菌丝长势强弱外，还应做好瓶栽出菇试验。将母种接到装有灭菌棉籽皮或木屑培养基的菌种瓶内，置于25℃恒温箱中培养。菌丝长满瓶子后，置于15～18℃有光亮的地方培养。观察子实体生长情况，选择长势旺、出菇快而多的株系扩大制种。 5.母种的鉴定培养 新知讲授 四 二、原种和栽培种的培育 在获得母种后，下一步要进行原种和栽培种的生产，主要过程为培养基制作、培养基灭菌、母种接种、培养获得原种和栽培种几个方面： 新知讲授 四 1.培养基的配方及制作 原种和栽培种生产，常用的培养基有棉籽壳培养基、木屑麸皮培养基、麦粒菌种培养基和种木培养基。 棉籽壳培养基 麦粒培养基 木屑培养基 新知讲授 四 棉子壳培养基 ★配方： （1）棉子壳88%，麸皮或米糠10%，石膏1%，过磷酸钙1%。 （2）棉子壳93%，麸皮或米糠5%，石膏1%，过磷酸钙1%。 ★配制步骤： （1）选用无霉味、新鲜干燥的棉子壳，称取各种原料混合，每千克料加水120～130 kg，水中加多菌灵或高锰酸钾，按水重的千分之一计算。 （2）充分拌匀，使料中水分含量在65％～70％，可用手紧捏培养料，指缝间有水渗出为宜。 也可在水中加消毒剂石灰，按水质量的1％添加，石灰可使培养料pH偏高，有利于抑制杂菌生长，经平菇生长过程产酸以后，正好为平菇生长所需的pH。料中加入高锰酸钾、多菌灵、石灰，都可以使料中杂菌不易生长繁殖。 新知讲授 四 木屑麸皮培养基 ★配方： 木屑（阔叶树种）47%，棉子壳35%，麸皮（或米糠）15%，糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%。 ★配制步骤： 按配方称取原料，先将糖溶解于适量水中，其他原料进行混合，然后加入糖水拌匀，使料含水量达60%～65%(每千克料加水120 kg～130 kg)。简便检查含水量的方法，是用手取一把培养料紧握，以指缝间有水纹但不滴下为适度。 新知讲授 四 麦粒菌种培养基 ★配方 （1）小麦粒1 000 g，石膏粉20 g。 （2）小麦粒1 000 g，石膏粉12 g，碳酸钙3 g。 ★配制步骤： (1) 将麦粒倒入盛有2%～3%的石灰水（pH≥9）上清液中浸泡。浸泡至麦粒变软，从石灰水中捞出麦粒在草席等物上摊晾。 (2)重新浸入2%～3%的石灰水中，一般12 小时左右(20℃水温)。 (3)将麦粒捞出后装入蒸笼，用热蒸汽在100℃下蒸1 小时或放入锅中加水煮沸20～25 min，以煮至捏开麦粒时里面没有“白心”为度 。 (4)麦粒蒸后稍加摊晾，除去表面多余水分 。 (5) 将摊晾后的麦粒加入称好的石膏及碳酸钙,使之与麦粒充分混匀。 新知讲授 四 粪草培养基 ★配方： 粪草90 kg，麸皮或米糠8 kg，白糖1 kg，碳酸钙1 kg。 ★配制步骤： 将干牛粪与稻草(麦草)以6∶4之比，堆积发酵15～20 天，在这过程中要翻堆2～3次，然后挑出半腐熟的稻草，切成2～3 cm长，晒干即为粪草备用。制培养基时，按比例取粪草与其他辅料混匀，用糖水拌料，含水量约60%。 新知讲授 四 种木培养基 ★配方： 种木(木块、三角木、枝条)1 000 g，木屑100 g，米糠50 g，水150～200 mL。 ★配制步骤： 制作木块菌种时，先将种木锯成木条，再用刀切成楔形木块，或将种木横锯成1.2～1.5 cm厚的木片，风干后备用。 配制时先将准备好的种木浸入蔗糖或淘米水中24 小时，使其充分吸足水后捞出。同时将木屑、米糠等原料拌和，调节含水量达60%左右，然后取出三分之二与种木拌和均匀即可装瓶。而另三分之一可留下，覆在种木培养基的上方，以填补种木间的空隙。 新知讲授 四 培养基制好后，采用湿热灭菌的方法，杀死培养料内杂菌及孢子。 2.灭菌 新知讲授 四 灭菌后的瓶装培养基，在无菌室或接种箱内及时进行接种，每个母种斜面试管，可接种5～8瓶原种，将母种菌丝块放入原种培养基瓶后，塞上棉塞，置于25℃的温室内培养，约经20d左右，菌丝长满全瓶就可作栽培种接种之用，不宜久置。 母种的挑取 原种接种 3.接种 新知讲授 四 得到原种后，再把原种转接到栽培种培养基上进行扩大培养，获得栽培种。一瓶原种可接40瓶栽培种。具体制法是： 在接种箱中将原种瓶用5%的来苏儿擦洗瓶壁， 然后用消毒的镊子从原种瓶中夹取1小块菌种， 放在栽培瓶料中央，塞上棉塞， 置于培养室内（25℃）培养30d， 菌丝发满瓶，无杂菌污染，即可做栽培种使用。 栽培种接种 4.栽培种生产 新知讲授 四 三、菌种质量的判断 菌种质量的好坏直接关系到后续生产的成败，优良的菌种应具备： 种性优良，具有高产、优质、抗逆性强等优良性状；菌丝的生活力强、纯度高、适宜的菌龄、无病虫害等特征。 师生互动 五 1. 你认为菌种分离能否成功的关键在哪里? 2. 菌种能否一直传代使用? 交流讨论 培养基的制备 种菇的选择 纯种的分离 母种培养与选择 母种的鉴定培养 课堂小结 六 母 种 的 分 离 与 培 育 原种和栽培种的培育 培养基的制备 种菇的选择 纯种的分离 母种培养与选择 母种的鉴定培养 培养基的制备 种菇的选择 纯种的分离 母种培养与选择 母种的鉴定培养 培养基的制备 种菇的选择 纯种的分离 母种培养与选择 母种的鉴定培养 培养基的配方及制作 灭菌 接种 栽培种生产 布置作业 七 学向勤中得，萤窗万卷书。 三冬今足用，谁笑腹空虚。 完成：同步练习 项目8任务8.2 食用菌菌种的来源与培育 感谢观看 $$