专题16 发酵工程-【好题汇编】5年（2020-2024）高考1年模拟生物真题分类汇编（山东专用）

专题16 发酵工程 五年考情 考情分析 发酵工程 2020年山东卷第13题 2020年山东卷第20题 2021年山东卷第12题 2021年山东卷第14题 2021年山东卷第20题 2022年山东卷第14题 2022年山东卷第20题 2023年山东卷第12题 2023年山东卷第15题 2023年山东卷第20题 2024年山东卷第14题 2024年山东卷第15题 生物技术与工程,因为与生命科学相关的突出成就及热点问题联系密切，而成为生物高考命题的一大热点。通过近三年试题分析发现,应用微生物的分离纯化技术可以解决很多社会关关注度高的生产、生活、健康方面的热点问题，这使得生物技术与工程在赢得普通大众关注的同时,也赢得了高考命题专家的青睐,成为当下热门的“高频考点”。 1、（2024山东高考） 在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（　　） A. 相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢 B. 发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C. 发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长 D. 发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品 2、（2024山东高考） 酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z、trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（　　） A X→Y→Z B. Z→Y→X C. Y→X→Z D. Z→X→Y 3、（2023山东高考） 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ） A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死 B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C. ③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 4、（2023山东高考） 平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ） A. 不含氮源的平板不能用于微生物培养 B. 平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C. 接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D. 利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 5、（2023山东高考） 果酒的家庭制作与啤酒的工业化生产相比，共同点有（ ） A. 都利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理 B. 都需要一定的有氧环境供发酵菌种繁殖 C. 发酵前都需要对原料进行灭菌 D. 发酵结束后都必须进行消毒以延长保存期 6、（2022山东高考） 青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法错误的是（ ） A. 发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖 B 可用深层通气液体发酵技术提高产量 C. 选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中 D. 青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌 7、（2022山东高考） 啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法正确的是（ ） A. 用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶 B. 焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌 C. 糖浆经蒸煮、冷却后需接种酵母菌进行发酵 D. 通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期 8、（2020山东高考） 在实验室中可利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒，下列说法正确的是 A. 葡萄糖在酵母菌细胞的线粒体内被分解 B. 制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖 C. 制作过程中酵母菌始终处于碱性环境 D. 酵母菌的发酵产物不会抑制自身的代谢活动 9、（2020山东高考） 生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（　　） A. 倒成平板后直接培养可判断有无污染 B. 倒成平板后需要进行灭菌处理 C. 图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙 D. 生长图形法还可用于某些菌种的筛选 10、（2021山东高考） 葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是（ ） A. 无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖 B. 自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌 C. 葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的 D. 制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加 11、（2021山东高考） 解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是（ ） A. 甲菌属于解脂菌 B. 实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源 C. 可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比 D. 该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力 12、（2021山东高考） 含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是（ ） A. 乙菌的运动能力比甲菌强 B. 为不影响菌的运动需选用液体培养基 C. 该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量 D. 穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染 一、单选题 1．（2024·山东泰安·模拟预测）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。下列选项不正确的是（　　） A．菌T可能产生分解纤维素的酶，能够高效催化纤维素分解 B．淋洗液中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是合成一些氨基酸、核苷酸等含氮物质 C．可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，在使用该方法时需要注意必须将冷空气充分排除再开始加压 D．将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。发酵过程中，要始终保持密封状态 2．（2024·山东青岛·三模）利用杨木生产燃料乙醇的基本流程主要包括原料粉碎、提高纤维素浓度的预处理、释放单糖的酶解糖化、产生乙醇的微生物发酵、乙醇脱水的蒸馏工艺等步骤（预处理过程所需的果胶酶常来自于黑曲霉等微生物）。下图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是（    ） A．培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，果胶酶是黑曲霉分泌的一种单细胞蛋白 B．在伊红—亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程 C．接种的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量相等 D．接种量超过15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分 3．（2024·山东菏泽·二模）鲁菜是中国八大菜系之首，十分讲究配料和调料的搭配，烹饪中常使用酱油、腐乳、味精、白酒、醋和泡菜进行调味，下列说法错误的是（    ） A．白酒、味精和醋的发酵生产所需要的微生物均为真核生物 B．酱油的发酵生产经过蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 C．腐乳发酵过程中起主要作用的微生物是黑曲霉 D．泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气 4．（2024·山东泰安·模拟预测）在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（    ） A．泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气 B．葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋 C．制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料 D．果酒发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃ 5．（2024·山东·二模）原浆苹果醋的简要工艺流程为：苹果采摘→挑选清洗→破碎榨汁→酵母发酵→醋酸发酵→陈酿2年左右。下列叙述正确的是（    ） A．酵母发酵结束后，改变通气条件即可进行醋酸发酵 B．工艺流程中的“酵母发酵”发生在苹果细胞的细胞质基质中 C．酿醋过程中发酵液的pH逐渐降低，与酿酒制作过程中相反 D．醋酸发酵阶段中产生的气泡量少于酒精发酵阶段 6．（2024·山东济宁·三模）从传统发酵技术到发酵工程，经历了漫长的过程。下列说法错误的是（    ） A．传统酿酒过程中需要将温度控制在18~30℃之间 B．酱油等传统发酵以混合菌种的液体发酵及半固体发酵为主 C．发酵工程生产的微生物农药，是生物防治的重要手段 D．利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物的生长 7．（2024·山东泰安·三模）苹果酒口感甘醇，深受广大消费者喜爱。选用新鲜、成熟、无病虫害的苹果作为原料，进行清洗、去皮并榨汁。将苹果汁加入适量的酵母菌和白砂糖，充分混合后装入发酵桶中，用气密塞封好，放置在适宜的温度下进行发酵，发酵过程中可摇动一次，一段时间后，苹果酒便酿制成功。结合所给材料，下列叙述正确的是（　　） A．酵母菌利用的氮源、无机盐均来自苹果汁 B．过度清洗和去皮将使发酵无法进行 C．“在适宜的温度下进行发酵”的温度为30~35℃ D．发酵过程中摇动一次是为了增加苹果汁中的溶解氧 8．（2024·山东青岛·三模）稀释涂布平板法和稀释倒平板法是分离微生物的两种方法。稀释倒平板法是指将稀释的菌液和琼脂混合，然后将其倒入无菌培养皿中进行培养。下列说法正确的是（    ） A．培养过程中所用的培养基和培养皿均可采用湿热灭菌法 B．两种方法均可通过统计菌落数实现对活菌的准确计数 C．稀释倒平板法对好氧菌、热敏感菌的分离效果优于稀释涂布平板法 D．为了防止培养基温度过高杀死微生物，应将琼脂冷却至室温后再倒平板 9．（2024·山东菏泽·二模）稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一。土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质酶，能抑制稻瘟菌的生长，可用于稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶。下列说法错误的是（    ） A．筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基 B．纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种 C．在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶 D．可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 10．（2024·山东德州·二模）烟草的多糖含量偏高是造成烟叶原料品质不高的重要因素，微生物在烟叶醇化阶段可有效降低烟草的多糖含量。为提高烟叶质量，科研人员筛选出S1～S5微生物菌株，并测定其相关酶活力，结果如图所示。下列说法正确的是（　　）    A．筛选获得S1～S5微生物菌株时，应以淀粉为唯一碳源 B．用平板划线法分离单菌落前需对培养液进行稀释 C．用S1单菌落培养获得的纯培养物对烟叶进行醇化效果最好 D．烟叶醇化发酵应在低温下进行，以抑制杂菌繁殖 11．（2024·山东烟台·三模）细胞摇摆式间歇浸没生物反应器是通过摆动架的倾斜摆动，使培养液周期性间歇浸没组培苗，实现组培苗的快速生长。下列叙述正确的是（    ） A．获得组培苗的培养基含有水、无机盐、蔗糖、琼脂和激素等多种营养物质 B．间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸 C．获得组培苗的步骤：外植体→脱分化形成胚状体→再分化形成试管苗 D．经过间歇浸没培养获得的植株需要消毒后炼苗再移栽到经灭菌处理的土壤中 12．（2024·山东泰安·模拟预测）培养基是按照微生物、植物和动物组织对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列叙述正确的是（    ） A．脱分化培养基中含有蔗糖、无机盐和植物激素等营养物质 B．微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C．配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁 D．基本培养基中可能不含有氮源，但一定含有碳源 13．（2024·山东威海·二模）茅台酒的酿造包括高温制曲、高温堆积发酵等多种特色工艺，富含多种酿酒微生物的酒曲是形成茅台酒独特风味的关键。高温制曲时，发酵温度可达到63°C；高温堆积发酵时温度逐渐下降，可起到二次制曲的作用，通过进一步富集、筛选微生物来优化酿酒微生物的种类、数量及比例关系，以弥补高温制曲的不足，同时形成茅台酒中的主要香味物质。下列说法正确的是（    ） A．高温制曲过程中可以富集周边环境中的酵母菌 B．高温堆积发酵时温度下降有利于发酵菌种的繁殖和代谢活动 C．酿酒过程中密封的时间越长，酵母菌产生的酒精量越多 D．发酵结束后可通过消毒杀死茅台酒中的全部酿酒微生物以延长保存期 14．（2024·山东淄博·一模）甲醇蛋白是毕赤酵母的胞内蛋白，可用甲醇作碳源来培养毕赤酵母生产甲醇蛋白。毕赤酵母无毒性，甲醇对大多数微生物有毒性。下列叙述错误的是（　　） A．筛选能高效利用甲醇的毕赤酵母时，培养基应以甲醇为唯一碳源 B．虽然甲醇对多数微生物有毒性，发酵生产甲醇蛋白时也需检测是否有杂菌污染 C．发酵时，发酵温度、培养液的渗透压和pH影响甲醇蛋白产量 D．用作动物饲料时，需从毕赤酵母菌体中分离、纯化甲醇蛋白 15．（2023·山东潍坊·三模）为从泡菜汁中分离出乳酸菌高产菌株，甲、乙两同学分别采用平板划线法和稀释涂布平板法获取单菌落。已知在培养基中添加碳酸钙可使培养基变浑浊，而乳酸等酸性物质可溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。下列说法错误的是（    ） A．利用泡菜汁进行平板划线操作前无需进行稀释 B．涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL C．接种后需将平板放置在无氧条件下培养 D．周围透明圈最大的菌株，产酸能力不一定最强 二、多选题 16．（2024·山东青岛·一模）柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（    ） A．黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型相同 B．将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C．将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 D．若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 17．（2024·山东·二模）白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母对白地霉具有生物防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有不同浓度FeCl3的培养基如下表所示。实验结果为桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈，随FeCl3浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如下图所示。相关叙述正确的是（    ） 成分 MgSO4 NaH2PO4 蛋白胨 FeCl3溶液 水 琼脂 用量 5g 7g 15g 500mL 7g 20g A．实验中使用的培养基pH呈弱碱性，其中琼脂不是营养物质 B．白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法 C．白地霉不能利用与普切明酸结合后的铁是出现红色抑菌圈的原因 D．补足Fe3+可以使桔梅奇酵母对白地霉的抑制效果逐渐减弱 18．（2024·山东·三模）土壤中95%以上的磷为植物很难利用的无效磷。解磷菌能够将磷矿粉等无效磷转化为植物易利用的速效磷。为研究解磷菌的解磷机理，科研人员将磷矿粉制成培养液，培养从土壤中分离出的2种解磷菌（M-3-01、B3-5-6），测定培养液的上清液pH及其中的速效磷含量，结果如图，下列叙述正确的是（　　）      A．由图可知，168h以内M-3-01解磷能力较强 B．B3-5-6转化无效磷的能力与培养溶液pH显著相关 C．据图推测B3-5-6可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉 D．据图推测M-3-01不可以利用速效磷 19．（2024·山东济宁·三模）硝化细菌可有效净化水体中的按盐，降低对虾的死亡率。科研人员从当地对虾养殖池塘中筛选出了对按盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，操作流程如图1所示，结果如图2所示。下列说法错误的是（    ） A．图1中将候选菌接入含按盐培养液的目的是对硝化细菌进行扩大培养 B．图1中用平板划线法纯化菌种时，接种环需灼烧6次 C．由图2可知甲是在铵盐浓度最高的锥形瓶中培养 D．使用细菌计数板可以准确计数活的硝化细菌数目 20．（2024·山东·模拟预测）田间常施用草铵膦（含碳有机物）农药，该农药在环境中难以降解。科学家通过图1所示方法筛选出了可降解草铵膦的植物乳杆菌（ST-3），并研究了固定态（固定在多孔载体上）和培养液中游离态的ST-3的降解效果，结果如图2所示。下列叙述错误的是（    ）    A．图1中②过程应使用蒸馏水进行梯度稀释 B．图1中划线纯化过程中接种环需要灼烧5次 C．固定态ST-3可能更有利于与草铵膦接触 D．72h时，游离态ST-3对草铵膦的降解率可能大于固定态 21．（2024·山东烟台·一模）纤维素是地球上储量丰富的可再生资源，经纤维素酶催化水解后，可被微生物发酵利用。筛选高产纤维素酶菌株的流程如图所示。下列说法错误的是（    ） A．步骤I-Ⅲ均需在超净台上进行，I和Ⅲ均为稀释涂布平板法接种 B．培养基②的每一个菌落均是由一个细菌细胞繁殖而来的子细胞群 C．步骤Ⅱ是根据菌落特征初步鉴定并扩增高产纤维素酶菌株的过程 D．④从功能来看应为选择培养基，以便选出透明圈大的菌落作目的菌种 22．（2024·山东日照·模拟预测）某种除草剂（一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按下图过程选育能降解该除草剂的细菌。下列叙述正确的是（    ） A．图中培养基在各种成分都溶化后且分装前进行灭菌 B．图中接种方法为平板划线法，该方法可以于细菌计数 C．实验过程中需要将培养皿中培养基调至中性或弱碱性 D．培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同 23．（2024·山东济南·模拟预测）研究人员拟从新鲜蚯蚓粪中分离筛选出对番茄枯萎病有良好抑制效果的拮抗细菌。将蚯蚓粪加入无菌水中制成悬浮液，利用甲培养基进行筛选纯化后，将获得的不同菌株分别接种至乙培养基扩大培养，48h后进行“平板对峙实验”：在丙培养基的空白平板一侧放置一直径为5mm的番茄枯萎病菌的菌块，在平行另一侧放置相同大小的滤纸片，实验流程如下图。下列说法正确的是（    ） A．Ⅰ过程使用的接种方法是平板划线法，I~Ⅲ过程均需要无菌操作 B．对照组滤纸片用无菌水处理，实验组滤纸片用拮抗菌菌液处理 C．应培养至对照组病菌菌落长满丙培养基时开始测量并计算抑制率 D．选择丙培养基上直径大的病菌菌落对应的拮抗菌作为目的菌 24．（2024·山东泰安·模拟预测）肉苁蓉具有较高的药用价值，自然条件下的产量较低，其次生代谢产物苯乙醇苷(PeGs)是主要活性成分。研究人员以外植体诱导出愈伤组织，进一步进行细胞悬浮培养。在不同的初始接种浓度下培养一段时间后，对悬浮培养液的PeGs进行测定，结果如下图所示。下列有关叙述不正确的是（    ） A．植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物 B．若工厂化大量生产PeGs细胞悬浮培养时就应选择接种细胞的浓度为3.2g·L-1 C．若需进一步了解细胞生成PeGs的能力，则要检测培养后培养液中的细胞密度 D．植物组织培养时，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染 25．（2024·山东·模拟预测）某研究小组用紫外线照射酵母菌，将其接种到甲培养基上，一段时间后将甲培养基的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养基上，进一步培养得到如图所示结果。下列相关叙述正确的是（    ） A．甲培养基的菌落均匀分布，接种方法应为稀释涂布平板法 B．乙培养基和丙培养基的组成成分相同，均为选择培养基 C．甲中某些菌种可能发生突变，失去了合成某种物质的能力 D．影印接种可以保证甲的菌落数和丙的菌落数一定相等 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$ 专题16 发酵工程 五年考情 考情分析 发酵工程 2020年山东卷第13题 2020年山东卷第20题 2021年山东卷第12题 2021年山东卷第14题 2021年山东卷第20题 2022年山东卷第14题 2022年山东卷第20题 2023年山东卷第12题 2023年山东卷第15题 2023年山东卷第20题 2024年山东卷第14题 2024年山东卷第15题 生物技术与工程,因为与生命科学相关的突出成就及热点问题联系密切，而成为生物高考命题的一大热点。通过近三年试题分析发现,应用微生物的分离纯化技术可以解决很多社会关关注度高的生产、生活、健康方面的热点问题，这使得生物技术与工程在赢得普通大众关注的同时,也赢得了高考命题专家的青睐,成为当下热门的“高频考点”。 1、（2024山东高考） 在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（　　） A. 相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢 B. 发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C. 发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长 D. 发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程：（1）定义：利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品；主要为微生物细胞本身或者其代谢产物。（2）分离、提纯产物：产品若是微生物细胞，在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥；产品若是微生物代谢物，则根据产物的性质采取 适当的提取、分离和纯化措施。 【详解】A、黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧，相同菌体密度下，菌球体越大越不利于菌体与氧气接触，柠檬酸产生速率越慢，A正确； B、菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制，发酵中期添加一定量的硫酸铵，提高铵离子浓度，菌体内可提高柠檬酸产量，B正确； C、发酵过程中pH下降导致细菌生命活动所必须的酶失活，可抑制大部分细菌的生长，C正确； D、发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行分离、纯化、浓缩、干燥等一系列操作后才能获得柠檬酸产品，D错误。 故选D。 2、（2024山东高考） 酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z、trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（　　） A X→Y→Z B. Z→Y→X C. Y→X→Z D. Z→X→Y 【答案】D 【解析】 【分析】由图可知，trpZ突变体处菌落数＞trpX突变体处菌落数＞trpY突变体处菌落数。 【详解】A、若3种酶在该合成途径中的作用顺序为X→Y→Z，首先trpZ、trpY会给trpX提供酶X，然后trpZ会给trpY提供酶Y，最终会导致trpX突变体处菌落数＞trpY突变体处菌落数＞trpZ突变体处菌落数，与题意不符，A错误； B、若3种酶在该合成途径中的作用顺序为Z→Y→X，首先trpX、trpY会给trpZ提供酶Z，然后trpX会给trpY提供酶Y，最终会导致trpZ突变体处菌落数＞trpY突变体处菌落数＞trpX突变体处菌落数，与题意不符，B错误； C、若3种酶在该合成途径中的作用顺序为Y→X→Z，首先trpX、trpZ会给trpY提供酶Y，然后trpZ会给trpX提供酶X，最终会导致trpY突变体处菌落数＞trpX突变体处菌落数＞trpZ突变体处菌落数，与题意不符，C错误； D、若3种酶在该合成途径中的作用顺序为Z→X→Y，首先trpY、trpX会给trpZ提供酶Z，然后trpY会给trpX提供酶X，最终会导致trpZ突变体处菌落数＞trpX突变体处菌落数＞trpY突变体处菌落数，与题意相符，D正确。 故选D。 3、（2023山东高考） 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ） A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死 B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C. ③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 【答案】C 【解析】 【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 （1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。 （2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。 （3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。 （4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。 （5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。 【详解】A、盐水煮沸是为了杀灭杂菌，沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面的乳酸菌被杀死，A错误； B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误； C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，为了制造无氧环境，同时可排出初期酵母菌等发酵产生的气体，C正确； D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。 故选C。 4、（2023山东高考） 平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ） A. 不含氮源的平板不能用于微生物培养 B. 平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C. 接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D. 利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 【答案】D 【解析】 【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。 2、按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。 3、消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 【详解】A、不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误； B、平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于消毒，B错误； C、使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误； D、脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源而进行生长繁殖，但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物，D正确。 故选D。 5、（2023山东高考） 果酒的家庭制作与啤酒的工业化生产相比，共同点有（ ） A. 都利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理 B. 都需要一定的有氧环境供发酵菌种繁殖 C. 发酵前都需要对原料进行灭菌 D. 发酵结束后都必须进行消毒以延长保存期 【答案】AB 【解析】 【分析】果酒与啤酒的发酵原理均是酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精。 【详解】A、二者均利用了酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，A正确； B、发酵前期，均需要一定的有氧环境，使酵母菌大量繁殖，B正确； C、果酒的家庭制作不需对原料进行灭菌，C错误； D、果酒的家庭制作不需要进行消毒，D错误。 故选AB。 6、（2022山东高考） 青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法错误的是（ ） A. 发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖 B 可用深层通气液体发酵技术提高产量 C. 选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中 D. 青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌 【答案】D 【解析】 【分析】培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等四类营养物质。配制培养基时除了满足基本的营养条件外，还需满足微生物生长对特殊营养物质、pH、O2的要求。 【详解】A、青霉菌处于葡萄糖浓度不足的环境中会通过分泌青霉素杀死细菌；提供相同含量的碳源，葡萄糖溶液单位体积中溶质微粒较多，会导致细胞失水，发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖，乳糖是二糖，可被水解为半乳糖和葡萄糖，是青霉菌生长的最佳碳源，可以被青霉菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件，A正确； B、青霉菌的代谢类型为异养需氧型，可用深层通气液体发酵技术提高产量，B正确； C、选育出的高产青霉素菌株经扩大培养纯化后，才可接种到发酵罐中进行工业化生产，C正确； D、为了防止细菌、其他真菌等微生物的污染，获得纯净的青霉素，发酵罐仍需严格灭菌，D错误。 故选D。 7、（2022山东高考） 啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法正确的是（ ） A. 用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶 B. 焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌 C. 糖浆经蒸煮、冷却后需接种酵母菌进行发酵 D. 通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期 【答案】ACD 【解析】 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是异养兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。 【详解】A、赤霉素能促进种子的萌发，据此可推测若用赤霉素处理大麦，可诱导α-淀粉酶相关基因的表达，促进α-淀粉酶的合成，进而使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶，A正确； B、焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活，没有进行灭菌，B错误； C、糖浆经蒸煮（产生风味组分、终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌）、冷却后再接种酵母菌进行发酵，防止高温杀死菌种，C正确； D、转基因技术已被用来减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期，属于转基因技术在微生物领域的应用，D正确。 故选ACD。 8、（2020山东高考） 在实验室中可利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒，下列说法正确的是 A. 葡萄糖在酵母菌细胞的线粒体内被分解 B. 制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖 C. 制作过程中酵母菌始终处于碱性环境 D. 酵母菌的发酵产物不会抑制自身的代谢活动 【答案】B 【解析】 【分析】酵母菌是单细胞的真核生物，属于真菌，代谢类型是兼性厌氧型。在氧气充足时，酵母菌进行有氧呼吸，将葡萄糖分解为二氧化碳和水；在无氧条件下，进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。 【详解】A、利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒时，酵母菌进行无氧呼吸，葡萄糖在酵母菌细胞质基质内被分解，A错误； B、酵母菌繁殖需要空气，在完全隔绝空气的情况下，酵母菌繁殖几代就停止了，要维持酵母菌长时间发酵，必须供给一定的氧气，故制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖，B正确； C、酵母菌发酵的后期，由于产生的CO2和其他代谢产物的积累，发酵液呈酸性，C错误； D、酵母菌发酵产生的酒精会对酵母菌的生长产生抑制作用，D错误。故选B。 9、（2020山东高考） 生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（　　） A. 倒成平板后直接培养可判断有无污染 B. 倒成平板后需要进行灭菌处理 C. 图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙 D. 生长图形法还可用于某些菌种的筛选 【答案】AD 【解析】 【分析】培养基的概念及营养构成 （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 （2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。 【详解】A、平板上不含任何生长因子，若倒成平板后直接培养，出现菌落说明已被杂菌感染，因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长，A正确； B、制备平板时，先灭菌再倒平板，B错误； C、图中菌落生活在乙丙区域之间，说明同时需要乙和丙，C错误； D、不同菌种所需生长因子不同，可利用生长图形法筛选菌种，D正确 故选AD。 10、（2021山东高考） 葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是（ ） A. 无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖 B. 自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌 C. 葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的 D. 制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加 【答案】D 【解析】 【分析】果酒制备的菌种是酵母菌，条件：温度18-25℃，先通气后密闭。通气阶段，酵母菌有氧呼吸获得能量大量繁殖，密闭阶段发酵产生酒精。pH最好是弱酸性。 【详解】A、酵母菌进行有氧呼吸获得能量大量繁殖，无氧条件下，发酵产生酒精，故无氧条件下酵母菌能进行无氧呼吸存活但不能大量繁殖，A正确； B、自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是葡萄皮上的野生型酵母菌，B正确； C、葡萄皮中的色素进入发酵液使葡萄酒呈现颜色，C正确； D、制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量减少，D错误。 故选D。 11、（2021山东高考） 解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是（ ） A. 甲菌属于解脂菌 B. 实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源 C. 可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比 D. 该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力 【答案】B 【解析】 【分析】选择培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。 鉴别培养基：依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计。 【详解】A、根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”，说明甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A正确； B、乙菌落周围没有出现深蓝色，说明乙菌落不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌落也可以在培养基上生存，说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源，B错误； C、可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直观，C正确； D、可以利用该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力，观察指标可以以菌落周围深蓝色圈的大小，D正确。 故选B。 12、（2021山东高考） 含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是（ ） A. 乙菌的运动能力比甲菌强 B. 为不影响菌的运动需选用液体培养基 C. 该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量 D. 穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染 【答案】B 【解析】 【分析】图中是穿刺接种的方法，根据题干中的信息“硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀”，所以根据黑色沉淀的多少，比较两种菌产生硫化氢的能力。 【详解】A、从图中可以看出甲菌在试管中分布范围小于乙菌，说明了乙菌的运动能力比甲菌强，A正确； B、为不影响菌的运动需选用半固体培养基，B错误； C、根据题意，黑色区域的面积大小反映两种菌运动能力的大小，而不能表示二者产生硫化氢的能力大小，C正确； D、微生物接种技术的核心是防止杂菌的污染，D正确。 故选B。 一、单选题 1．（2024·山东泰安·模拟预测）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。下列选项不正确的是（　　） A．菌T可能产生分解纤维素的酶，能够高效催化纤维素分解 B．淋洗液中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是合成一些氨基酸、核苷酸等含氮物质 C．可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，在使用该方法时需要注意必须将冷空气充分排除再开始加压 D．将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。发酵过程中，要始终保持密封状态 【答案】D 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。 【详解】A、菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，因此在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，A正确； B、培养基的主要成分：水、碳源、氮源、无机盐，其中氮源主要为合成微生物的细胞结构提供原料（微生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂），B正确； C、高压蒸汽灭菌法的注意要把锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除后，将锅密闭，如果高压锅内的空气未排除或未完全排除，则蒸汽不能达到饱和，蒸汽的温度未达到要求的高度，结果导致灭菌的失败，C正确； D、果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，将酵母菌接种到灭菌后的培养基中进行酒精发酵，酒精发酵需要在无氧的条件下进行，此时拧紧瓶盖的主要目的是制造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，在发酵过程中密闭，所以需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳，D错误。 故选D。 2．（2024·山东青岛·三模）利用杨木生产燃料乙醇的基本流程主要包括原料粉碎、提高纤维素浓度的预处理、释放单糖的酶解糖化、产生乙醇的微生物发酵、乙醇脱水的蒸馏工艺等步骤（预处理过程所需的果胶酶常来自于黑曲霉等微生物）。下图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是（    ） A．培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，果胶酶是黑曲霉分泌的一种单细胞蛋白 B．在伊红—亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程 C．接种的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量相等 D．接种量超过15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分 【答案】D 【分析】1、培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A．培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，但单细胞蛋白指微生物菌体，果胶酶不属于单细胞蛋白，A错误； B．伊红—亚甲蓝培养基是鉴定大肠杆菌的培养基，本实验应该用刚果红培养基筛选高产纤维素酶菌株，B错误； C．酒精发酵的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量曲线有交点，但两者的纵坐标数值及单位均不同，故发酵后二者含量不同，C错误； D．由图可知，菌种接种量为15%时对应的酒精含量达到最大值，接种量超过15%，菌种数量大，自身的生长会大量消耗反应物，导致酒精产量降低，D正确。 故选D。 3．（2024·山东菏泽·二模）鲁菜是中国八大菜系之首，十分讲究配料和调料的搭配，烹饪中常使用酱油、腐乳、味精、白酒、醋和泡菜进行调味，下列说法错误的是（    ） A．白酒、味精和醋的发酵生产所需要的微生物均为真核生物 B．酱油的发酵生产经过蛋白质分解为小分子肽和氨基酸 C．腐乳发酵过程中起主要作用的微生物是黑曲霉 D．泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气 【答案】ACD 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。 【详解】A、白酒酿造使用的菌种是酵母菌，为真核生物；生产味精用的菌种是谷氨酸棒状杆菌，为原核生物；酿醋使用的菌种是醋酸菌，为原核生物，A错误； B、酿造酱油以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌（如黑曲霉），将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制成酱油产品，B正确； C、腐乳发酵过程中起主要作用的微生物是毛霉，C错误； D、乳酸菌属于厌氧菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，D错误。 故选ACD。 4．（2024·山东泰安·模拟预测）在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（    ） A．泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气 B．葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋 C．制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料 D．果酒发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃ 【答案】C 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。参与泡菜发酵过程的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。 【详解】A、泡菜发酵过程中起作用的微生物是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，泡菜发酵后期，发酵液中乳酸菌占优势，不需开盖放气，A错误； B、果酒制作过程中，起作用的是葡萄皮上的酵母菌，酿酒过程是无氧环境。醋酸菌是好氧菌，虽然葡萄果皮上也有醋酸菌，但在酿酒时的无氧环境下醋酸菌已经死亡。且醋酸菌比酵母菌所需的最适生长温度更高。因此，制作好葡萄酒后，除了要通入无菌空气外，还要适当升温，并加入适量醋酸菌，B错误； C、制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，是为了发酵初期让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，同时为了防止发酵过程中发酵液溢出。制作泡菜的盐水要淹没全部菜料，以提供无氧环境供乳酸菌进行无氧呼吸，C正确； D、果酒发酵时温度宜控制在18～30℃，果醋发酵时温度宜控制在30～35℃，D错误。 故选C。 5．（2024·山东·二模）原浆苹果醋的简要工艺流程为：苹果采摘→挑选清洗→破碎榨汁→酵母发酵→醋酸发酵→陈酿2年左右。下列叙述正确的是（    ） A．酵母发酵结束后，改变通气条件即可进行醋酸发酵 B．工艺流程中的“酵母发酵”发生在苹果细胞的细胞质基质中 C．酿醋过程中发酵液的pH逐渐降低，与酿酒制作过程中相反 D．醋酸发酵阶段中产生的气泡量少于酒精发酵阶段 【答案】D 【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色； 2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。 【详解】A、醋酸发酵需要通入氧气，且温度比果酒发酵温度高，所以酵母发酵结束后，改变通气条件和升高温度有利于醋酸发酵，A错误； B、果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，其场所是细胞质基质，因此工艺流程中的“酵母发酵”发生在酵母菌的细胞质基质中，B错误； C、果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中产生二氧化碳，发酵液pH也逐渐降低，C错误； “醋酸发酵”时，当糖源充足，糖将分解成醋酸且产生二氧化碳，即有气泡产生，但当缺少糖源时，酒精将转变成醋酸且不产生二氧化碳，即不产生气泡，因此醋酸发酵阶段中产生的气泡量少于酒精发酵阶段，D正确。 故选D。 6．（2024·山东济宁·三模）从传统发酵技术到发酵工程，经历了漫长的过程。下列说法错误的是（    ） A．传统酿酒过程中需要将温度控制在18~30℃之间 B．酱油等传统发酵以混合菌种的液体发酵及半固体发酵为主 C．发酵工程生产的微生物农药，是生物防治的重要手段 D．利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物的生长 【答案】B 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。 【详解】A、传统酿酒用到的菌种是酵母菌，酵母菌发酵的适宜温度是18~30℃，A正确； B、酱油等传统发酵以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，B错误； C、发酵工程生产的微生物农药，是利用微生物或其代谢产物来防治病虫害，是生物防治的重要手段，C正确； D、利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料能通过固氮提高土壤肥力从而促进植物的生长，D正确。 故选B。 7．（2024·山东泰安·三模）苹果酒口感甘醇，深受广大消费者喜爱。选用新鲜、成熟、无病虫害的苹果作为原料，进行清洗、去皮并榨汁。将苹果汁加入适量的酵母菌和白砂糖，充分混合后装入发酵桶中，用气密塞封好，放置在适宜的温度下进行发酵，发酵过程中可摇动一次，一段时间后，苹果酒便酿制成功。结合所给材料，下列叙述正确的是（　　） A．酵母菌利用的氮源、无机盐均来自苹果汁 B．过度清洗和去皮将使发酵无法进行 C．“在适宜的温度下进行发酵”的温度为30~35℃ D．发酵过程中摇动一次是为了增加苹果汁中的溶解氧 【答案】A 【分析】在苹果酒制作中菌种的主要来源是苹果皮上野生的酵母菌，发酵时一般不消毒，原因是在缺氧、呈酸性的环境中，绝大多数的微生物都无法适应这一环境而受到抑制。 【详解】A、白砂糖可为酵母菌提供碳源，但酵母菌利用的氮源、无机盐均来自苹果汁，A正确； B、过度清洗和去皮后苹果上可能不再有酵母菌，但由于苹果汁中加入了适量的酵母菌，故过度清洗和去皮后，发酵仍能进行，B错误； C、酿酒时，适宜的发酵温度是18~30℃，30~35℃是酿醋的适宜温度，C错误； D、酵母菌制酒时为无氧发酵，摇动一次是为了使菌体与苹果汁能充分接触，D错误。 故选A。 8．（2024·山东青岛·三模）稀释涂布平板法和稀释倒平板法是分离微生物的两种方法。稀释倒平板法是指将稀释的菌液和琼脂混合，然后将其倒入无菌培养皿中进行培养。下列说法正确的是（    ） A．培养过程中所用的培养基和培养皿均可采用湿热灭菌法 B．两种方法均可通过统计菌落数实现对活菌的准确计数 C．稀释倒平板法对好氧菌、热敏感菌的分离效果优于稀释涂布平板法 D．为了防止培养基温度过高杀死微生物，应将琼脂冷却至室温后再倒平板 【答案】A 【分析】微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板、接种、划线、在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、为了防止杂菌污染，培养过程中所用的培养基和培养皿均可采用湿热灭菌法，A正确； B、稀释涂布平板法和稀释倒平板法都不能通过统计菌落数实现对活菌的准确计数，B错误； C、稀释倒平板法是指将稀释的菌液和琼脂混合，然后将其倒入无菌培养皿中进行培养，琼脂可以隔绝空气、但不能及时散热，因此稀释涂布平板法对好氧菌、热敏感菌的分离效果优于稀释倒平板法，C错误； D、倒平板操作中需要将培养基冷却到50℃左右时进行，D错误。 故选A。 9．（2024·山东菏泽·二模）稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一。土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质酶，能抑制稻瘟菌的生长，可用于稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶。下列说法错误的是（    ） A．筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基 B．纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种 C．在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶 D．可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株 【答案】C 【分析】1、要从土壤中分离出能合成几丁质酶的微生物，应以几丁质为唯一碳源，以淘汰不能产生几丁质酶的真菌达到筛选效果。 2、水解圈是产生几丁质酶的微生物产生相关酶水解几丁质产生的，水解圈直径/菌落直径越大，说明该菌降解能力越强。 【详解】A、筛选土壤中目的微生物即降解几丁质的微生物时，应用以几丁质为唯一碳源的培养基进行筛选，A正确； B、纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种，两种方法均可得到单菌落，B正确； C、在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落不一定能分泌几丁质酶，可能部分是以几丁质的分解产物为碳源的微生物，C错误； D、水解圈是产生几丁质酶的微生物产生相关酶水解几丁质产生的，水解圈直径/菌落直径越大，说明该菌降解能力越强，故可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株，D正确。 故选C。 10．（2024·山东德州·二模）烟草的多糖含量偏高是造成烟叶原料品质不高的重要因素，微生物在烟叶醇化阶段可有效降低烟草的多糖含量。为提高烟叶质量，科研人员筛选出S1～S5微生物菌株，并测定其相关酶活力，结果如图所示。下列说法正确的是（　　）    A．筛选获得S1～S5微生物菌株时，应以淀粉为唯一碳源 B．用平板划线法分离单菌落前需对培养液进行稀释 C．用S1单菌落培养获得的纯培养物对烟叶进行醇化效果最好 D．烟叶醇化发酵应在低温下进行，以抑制杂菌繁殖 【答案】C 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、根据题图信息可知，科研人员筛选出的S1∼S5微生物菌株均能降低烟草中的多糖含量，但不能确定该微生物是否利用淀粉为碳源，A错误； B、用平板划线法分离单菌落直接使用未经稀释的微生物样本进行划线操作即可达到分离目的，B错误； C、据图分析可知，科研人员筛选出的S1∼S5微生物菌株均能降低烟草中的多糖含量，S1微生物对降低烟草的多糖酶活力比其他四种都强，故用S1单菌落培养获得的纯培养物对烟叶进行醇化效果最好，C正确。 D、酶催化化学反应需要适宜的温度，烟叶醇化发酵应在适宜的温度下进行，D错误。 故选C。 11．（2024·山东烟台·三模）细胞摇摆式间歇浸没生物反应器是通过摆动架的倾斜摆动，使培养液周期性间歇浸没组培苗，实现组培苗的快速生长。下列叙述正确的是（    ） A．获得组培苗的培养基含有水、无机盐、蔗糖、琼脂和激素等多种营养物质 B．间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸 C．获得组培苗的步骤：外植体→脱分化形成胚状体→再分化形成试管苗 D．经过间歇浸没培养获得的植株需要消毒后炼苗再移栽到经灭菌处理的土壤中 【答案】B 【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。 【详解】A、琼脂是凝固剂，不提供营养，A错误； B、间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸，有氧呼吸能为组培苗的生长发育提供能量，因此可以提高生长速度，B正确； C、外植体脱分化可以形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，C错误； D、植物组织培养是在无菌条件下进行的，经过间歇浸没培养获得的植株不需要消毒处理，D错误。 故选B。 12．（2024·山东泰安·模拟预测）培养基是按照微生物、植物和动物组织对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列叙述正确的是（    ） A．脱分化培养基中含有蔗糖、无机盐和植物激素等营养物质 B．微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C．配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁 D．基本培养基中可能不含有氮源，但一定含有碳源 【答案】C 【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。 【详解】A、植物激素起调节作用，不提供营养，不是营养物质，A错误； B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物培养时如果加入抗生素，可能会影响目的菌的生长，B错误； C、配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁操作，因为培养基配制好后还要经灭菌处理，C正确； D、有些基本培养基可能不含有氮源，如培养固氮菌的培养基；有些基本培养基也可能不含有碳源，如培养自养微生物的培养基，D错误。 故选C。 13．（2024·山东威海·二模）茅台酒的酿造包括高温制曲、高温堆积发酵等多种特色工艺，富含多种酿酒微生物的酒曲是形成茅台酒独特风味的关键。高温制曲时，发酵温度可达到63°C；高温堆积发酵时温度逐渐下降，可起到二次制曲的作用，通过进一步富集、筛选微生物来优化酿酒微生物的种类、数量及比例关系，以弥补高温制曲的不足，同时形成茅台酒中的主要香味物质。下列说法正确的是（    ） A．高温制曲过程中可以富集周边环境中的酵母菌 B．高温堆积发酵时温度下降有利于发酵菌种的繁殖和代谢活动 C．酿酒过程中密封的时间越长，酵母菌产生的酒精量越多 D．发酵结束后可通过消毒杀死茅台酒中的全部酿酒微生物以延长保存期 【答案】B 【分析】1、酿酒的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型，有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸为菌体繁殖提供能量，无氧条件下可进行无氧呼吸产生酒精。 2、消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部的一部分微生物，灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 【详解】A、高温制曲时，发酵温度可达到63°C，周围环境中的绝大多数酵母菌不能适应这个温度，A错误； B、高温堆积发酵时温度下降有利于发酵菌种的繁殖和代谢活动，B正确； C、酿酒过程中密封的时间太长，发酵罐中的氧气被耗尽，不利于酵母菌的繁殖，产生的酒精量减少，C错误； D、发酵结束后可通过灭菌杀死茅台酒中的全部酿酒微生物以延长保存期，D错误。 故选B。 14．（2024·山东淄博·一模）甲醇蛋白是毕赤酵母的胞内蛋白，可用甲醇作碳源来培养毕赤酵母生产甲醇蛋白。毕赤酵母无毒性，甲醇对大多数微生物有毒性。下列叙述错误的是（　　） A．筛选能高效利用甲醇的毕赤酵母时，培养基应以甲醇为唯一碳源 B．虽然甲醇对多数微生物有毒性，发酵生产甲醇蛋白时也需检测是否有杂菌污染 C．发酵时，发酵温度、培养液的渗透压和pH影响甲醇蛋白产量 D．用作动物饲料时，需从毕赤酵母菌体中分离、纯化甲醇蛋白 【答案】D 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。 【详解】A、甲醇蛋白是毕赤酵母的胞内蛋白，筛选能高效利用甲醇的毕赤酵母时， 应以甲醇为唯一碳源，A正确； B、微生物培养的核心是防止杂菌污染，因此虽然甲醇对多数微生物有毒性，发酵生产甲醇蛋白时也需检测是否有杂菌污染，B正确； C、发酵时，发酵温度、培养液的渗透压和pH 会影响毕赤酵母的生长繁殖，因此也会影响甲醇蛋白产量，C正确； D、饲料微生物是指做为畜、禽和鱼类的饲料以及适用于加工或改善饲料质量的微生物，因此用作动物饲料时， 需要直接培养毕赤酵母菌体，D错误。 故选D。 15．（2023·山东潍坊·三模）为从泡菜汁中分离出乳酸菌高产菌株，甲、乙两同学分别采用平板划线法和稀释涂布平板法获取单菌落。已知在培养基中添加碳酸钙可使培养基变浑浊，而乳酸等酸性物质可溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。下列说法错误的是（    ） A．利用泡菜汁进行平板划线操作前无需进行稀释 B．涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL C．接种后需将平板放置在无氧条件下培养 D．周围透明圈最大的菌株，产酸能力不一定最强 【答案】B 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、平板划线操作中在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，该方法接种时不需要稀释，A正确； B、涂布时所用菌液通常不超过0.1mL，平板上的菌落数应介于30～300个，则涂布用的菌浓度应控制在300-3000个/mL，B错误； C、乳酸菌是厌氧菌，接种后需将平板放置在无氧条件下培养，C正确； D、周围透明圈最大的菌株，产酸能力不一定最强，应选择透明圈与菌落直径比例最大的类型，D正确。 故选B。 二、多选题 16．（2024·山东青岛·一模）柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（    ） A．黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型相同 B．将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C．将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 D．若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 【答案】BD 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、由培养时需要通气振荡可知，黑曲霉的异化作用类型为需氧型，因此其代谢类型为异养需氧型，制作果醋利用的是醋酸菌，制作腐乳利用的是毛霉，它们的代谢类型均为异养需氧型，A正确； B、将菌种接种至A培养基时，平板划线法的接种工具接种环在使用前需在火焰上灼烧灭菌，B错误； C、将菌种转接至B培养基是将菌种转接至新的培养基，目的是为了进行扩大培养，从而增加菌种的数量，C正确； D、以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌(如黑曲霉)，将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制可以制成酱油产品，D错误。 故选BD。 17．（2024·山东·二模）白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母对白地霉具有生物防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有不同浓度FeCl3的培养基如下表所示。实验结果为桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈，随FeCl3浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如下图所示。相关叙述正确的是（    ） 成分 MgSO4 NaH2PO4 蛋白胨 FeCl3溶液 水 琼脂 用量 5g 7g 15g 500mL 7g 20g A．实验中使用的培养基pH呈弱碱性，其中琼脂不是营养物质 B．白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法 C．白地霉不能利用与普切明酸结合后的铁是出现红色抑菌圈的原因 D．补足Fe3+可以使桔梅奇酵母对白地霉的抑制效果逐渐减弱 【答案】CD 【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求； 2、微生物常见的接种的方法： （1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落; （2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、白地霉属于霉菌，实验中使用的培养基pH呈弱酸性，其中琼脂是凝固剂的一种，不是营养物质，在培养液中加入琼脂可以使液体培养基成为琼脂固体培养基，A错误； B、白地霉的接种采用了涂布平板法，桔梅奇酵母应使用了平板划线法，B错误； C、由题意可知，随培养基中FeCl3浓度的增加，普切明酸与Fe3+的结合增强，抑菌圈的红色加深，说明白地霉不能利用与普切明酸结合后的铁是出现红色抑菌圈的原因，C正确； D、普切明酸与Fe3+形成红色复合物，随培养基中FeCl3浓度的增加，抑菌圈变窄，是由于白地霉从培养基中获得了较多的铁离子，FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果，D正确。 故选CD。 18．（2024·山东·三模）土壤中95%以上的磷为植物很难利用的无效磷。解磷菌能够将磷矿粉等无效磷转化为植物易利用的速效磷。为研究解磷菌的解磷机理，科研人员将磷矿粉制成培养液，培养从土壤中分离出的2种解磷菌（M-3-01、B3-5-6），测定培养液的上清液pH及其中的速效磷含量，结果如图，下列叙述正确的是（　　）      A．由图可知，168h以内M-3-01解磷能力较强 B．B3-5-6转化无效磷的能力与培养溶液pH显著相关 C．据图推测B3-5-6可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉 D．据图推测M-3-01不可以利用速效磷 【答案】ABC 【分析】1、培养基的主要成分是水、碳源、氮源、无机盐。 2、据图可知，自变量为培养时间及不同的解磷菌，因变量为速效磷和pH。 【详解】A、据图可知，168h以内M-3-01解磷菌的速效磷含量高于B3-5-6解磷菌，说明168h以内M-3-01解磷能力较强，A正确； B、在培养72h以后B3-5-6解磷菌中的pH下降，速效磷含量也迅速上升，则说明B3-5-6转化无效磷的能力与培养溶液pH显著相关，B正确； C、当pH下降时B3-5-6培养液上清液中速效磷含量也迅速上升，当pH上升到7.0以上时，速效磷的含量不再上升，推测B3-5-6可能借助分泌酸性物质溶解磷矿粉，C正确； D、据图可知，培养168h以后，M-3-01组的培养液中速效磷含量下降，说明M-3-01可以利用速效磷，D错误。 故选ABC。 19．（2024·山东济宁·三模）硝化细菌可有效净化水体中的按盐，降低对虾的死亡率。科研人员从当地对虾养殖池塘中筛选出了对按盐降解率高且稳定的硝化细菌菌株，操作流程如图1所示，结果如图2所示。下列说法错误的是（    ） A．图1中将候选菌接入含按盐培养液的目的是对硝化细菌进行扩大培养 B．图1中用平板划线法纯化菌种时，接种环需灼烧6次 C．由图2可知甲是在铵盐浓度最高的锥形瓶中培养 D．使用细菌计数板可以准确计数活的硝化细菌数目 【答案】ACD 【分析】1、微生物常见的接种的方法： (1)平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生 长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 (2)稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、振荡培养：提供充足氧气、并使细菌与营养物质充分接触，扩大培养。 【详解】A、图1中将候选菌接入含按盐培养液的目的是筛选能够分解铵盐的硝化细菌，A错误； B、纯化菌种时，图1的接种方法是平板划线法，在第一次接种和每次接种后都需要灼烧接种环，图1中一共划线5次，故接种环需要灼烧6次，B正确； C、据图2分析可知，铵盐浓度最高的是甲菌株，这说明甲菌株降解铵盐的能力最弱，C错误； D、使用细菌计数板在显微镜下可以计算出一定容积的样品中微生物的数量，但不能区分死菌与活菌，因此不能准确计数活的硝化细菌数目，D错误。 故选ACD。 20．（2024·山东·模拟预测）田间常施用草铵膦（含碳有机物）农药，该农药在环境中难以降解。科学家通过图1所示方法筛选出了可降解草铵膦的植物乳杆菌（ST-3），并研究了固定态（固定在多孔载体上）和培养液中游离态的ST-3的降解效果，结果如图2所示。下列叙述错误的是（    ）    A．图1中②过程应使用蒸馏水进行梯度稀释 B．图1中划线纯化过程中接种环需要灼烧5次 C．固定态ST-3可能更有利于与草铵膦接触 D．72h时，游离态ST-3对草铵膦的降解率可能大于固定态 【答案】AB 【分析】分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。 【详解】A、图1中②过程应使用无菌水进行梯度稀释，A错误； B、采用平板划线法接种时，每次划线前后都需要灼烧接种环，图中共划线5次，故需要灼烧接种环6次，B错误； C、据图2可知，相同时间内，固定态ST-3对土壤中草铵膦的降解率高于游离态，推测固定态ST-3可能更有利于与草铵膦接触，C正确； D、随着时间的延长，土壤中草铵膦剩余量不同，根据图中的降解率变化情况分析，48h时施加固定态ST-3的土壤中，草铵膦浓度较低，72h时固定态ST-3对草铵膦的降解率可能小于游离态ST-3，D正确。 故选AB。 21．（2024·山东烟台·一模）纤维素是地球上储量丰富的可再生资源，经纤维素酶催化水解后，可被微生物发酵利用。筛选高产纤维素酶菌株的流程如图所示。下列说法错误的是（    ） A．步骤I-Ⅲ均需在超净台上进行，I和Ⅲ均为稀释涂布平板法接种 B．培养基②的每一个菌落均是由一个细菌细胞繁殖而来的子细胞群 C．步骤Ⅱ是根据菌落特征初步鉴定并扩增高产纤维素酶菌株的过程 D．④从功能来看应为选择培养基，以便选出透明圈大的菌落作目的菌种 【答案】BD 【分析】1、 选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 2、筛选产纤维素酶的菌株应以纤维素为唯一碳源，可以保证平板上长出的菌株均能分解利用纤维素。 3、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、分析题图可知，I和Ⅲ均属于接种，Ⅱ是挑取单菌落转接，为了防止杂菌污染，获得目标菌株，均需要在超净台上进行；稀释涂布平板法是将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落；题图可知，I和Ⅲ均为稀释涂布平板法接种，A正确； B、培养基②的菌落可能存在由两个或多个细菌细胞繁殖而来的子细胞群，B错误； C、步骤Ⅱ挑取直接最大的菌落转接到液体培养基，该过程是根据菌落特征初步鉴定并扩增高产纤维素酶菌株的过程，C正确； D、题干为了筛选高产纤维素酶菌株，培养基需要以纤维素为唯一碳源，培养基④富含纤维素且含有能与纤维素形成红色复合物的刚果红，从功能上来看其应为选择+鉴别培养基（以鉴别为主），选出透明圈与菌落比值较大的菌落作目的菌种，D错误。 故选BD。 22．（2024·山东日照·模拟预测）某种除草剂（一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按下图过程选育能降解该除草剂的细菌。下列叙述正确的是（    ） A．图中培养基在各种成分都溶化后且分装前进行灭菌 B．图中接种方法为平板划线法，该方法可以于细菌计数 C．实验过程中需要将培养皿中培养基调至中性或弱碱性 D．培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同 【答案】CD 【分析】微生物常用的接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法。 【详解】A、培养基在各种成分都溶化后，在分装到锥形瓶后进行灭菌，A错误； B、平板划线法不能记数，B错误； C、一般培养细菌时需要培养基调至中性或弱碱性，C正确； D、培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同，有透明圈的，是能够利用除草剂中的氮源，没有透明圈的，不能利用除草剂中的氮源，D正确。 故选CD。 23．（2024·山东济南·模拟预测）研究人员拟从新鲜蚯蚓粪中分离筛选出对番茄枯萎病有良好抑制效果的拮抗细菌。将蚯蚓粪加入无菌水中制成悬浮液，利用甲培养基进行筛选纯化后，将获得的不同菌株分别接种至乙培养基扩大培养，48h后进行“平板对峙实验”：在丙培养基的空白平板一侧放置一直径为5mm的番茄枯萎病菌的菌块，在平行另一侧放置相同大小的滤纸片，实验流程如下图。下列说法正确的是（    ） A．Ⅰ过程使用的接种方法是平板划线法，I~Ⅲ过程均需要无菌操作 B．对照组滤纸片用无菌水处理，实验组滤纸片用拮抗菌菌液处理 C．应培养至对照组病菌菌落长满丙培养基时开始测量并计算抑制率 D．选择丙培养基上直径大的病菌菌落对应的拮抗菌作为目的菌 【答案】ABC 【分析】分析图形：Ⅰ为接种，根据甲培养基是菌落的形态可知，接种的方法为平板划线法；Ⅱ为将甲培养基中获取的不同菌株分别接种至乙培养基；Ⅲ为接种后进行平板对峙实验。 【详解】A、据图可知，甲培养基中是各种线的分布，故步骤Ⅰ使用的接种方法是平板划线法；微生物分离和培养的关键就是防止杂菌污染，故Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都需要进行无菌操作，A正确； B、本实验的目的是探究拮抗细菌是否对番茄枯萎病有良好抑制，故实验组滤纸片用拮抗菌菌液处理，对照组滤纸片用无菌水处理，B正确； C、由于对照组没有用拮抗菌菌液处理，故培养至对照组枯萎病菌菌落长满时，通过对滴加拮抗菌液处理组的统计后，开始测量并计算抑制率，C正确； D、为达到阶段一的目的，应选择“平板对峙实验”培养后番茄枯萎病菌菌落直径小的细菌，因为番茄枯萎病菌菌落直径越小，说明抑制效果越好，D错误。 故选ABC。 24．（2024·山东泰安·模拟预测）肉苁蓉具有较高的药用价值，自然条件下的产量较低，其次生代谢产物苯乙醇苷(PeGs)是主要活性成分。研究人员以外植体诱导出愈伤组织，进一步进行细胞悬浮培养。在不同的初始接种浓度下培养一段时间后，对悬浮培养液的PeGs进行测定，结果如下图所示。下列有关叙述不正确的是（    ） A．植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物 B．若工厂化大量生产PeGs细胞悬浮培养时就应选择接种细胞的浓度为3.2g·L-1 C．若需进一步了解细胞生成PeGs的能力，则要检测培养后培养液中的细胞密度 D．植物组织培养时，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染 【答案】ABD 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、植物细胞培养的目的主要是获得植物细胞的次生代谢产物，次生代谢不是生物生长所必需的，A错误； B、若工厂化大量生产PeGs，细胞悬浮培养时选择接种细胞的浓度应在2.4至4.0g·L-1之间设置梯度浓度找到最适浓度，B错误； C、若需进一步了解细胞生成PeGs的能力，细胞密度若过大影响其产量，因此要检测培养后培养液中的细胞密度，C正确； D、植物组织培养时，应对外植体进行消毒处理，对培养基进行灭菌处理，以防止培养基及愈伤组织污染，D错误。 故选ABD。 25．（2024·山东·模拟预测）某研究小组用紫外线照射酵母菌，将其接种到甲培养基上，一段时间后将甲培养基的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养基上，进一步培养得到如图所示结果。下列相关叙述正确的是（    ） A．甲培养基的菌落均匀分布，接种方法应为稀释涂布平板法 B．乙培养基和丙培养基的组成成分相同，均为选择培养基 C．甲中某些菌种可能发生突变，失去了合成某种物质的能力 D．影印接种可以保证甲的菌落数和丙的菌落数一定相等 【答案】AC 【分析】1、平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 2、稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。 【详解】A、甲培养皿的菌落均匀分布，接种方法应为稀释涂布平板法，A正确； B、甲、丙培养基菌落数目多，包括野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿菌株未生长的是某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是加入了同种营养成分的培养基，B错误； C、甲培养基菌落数目多，包括野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，影印接种到乙培养基上，部分菌落未生长，说明甲中某些菌种可能发生突变，失去了合成某种物质的能力，C正确； D、影印培养试验主要是一个为了在一系列培养皿的相同位置上能培养出相同的菌落的试验，不一定保证甲的菌落数和丙的菌落数一定相等，D错误。 故选AC。 原创精品资源学科网独家享有版权，侵权必究！2 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $$