精品解析：福建省泉州市德化县第二中学2023-2024学年高二下学期5月月考生物试题

德化二中2024年春高二年段第二阶段检测生物卷（发酵工程） 一、单项选择题：本题前15小题，每小题3分，后3小题各5分，共60分。 1. 含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用。该培养基能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌，只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。由其作用可知该培养基是一种 A. 固体培养基 B. 合成培养基 C. 天然培养基 D. 选择培养基 【答案】D 【解析】 【详解】该培养基由于含有氨苄青霉素，能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌。只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。因此氨苄青霉素起到了选择作用，D正确。 故选D。 2. 发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，下列哪项不是发酵过程中要完成的事 （ ） A. 随时取样检测培养液中的微生物数目、产物浓度 B. 不断添加菌种 C. 及时添加必需的培养液组分 D. 严格控制温度、pH、溶解氧、通气量与转速等发酵条件 【答案】B 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、菌种的扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。 【详解】A、发酵过程中要随时取样，检测培养液的细菌数目、产物浓度等，以了解发酵进程，A正确； B、发酵罐内微生物在适宜的条件下会迅速繁殖，因此，发酵过程中不需要不断的添加菌种，B错误； C、在发酵过程中需要向装置中及时添加必需的培养液组分，以保证发酵的最佳条件，C正确； D、要严格控制温度、pH溶解氧、通气量与转速等条件等环境因素，因为环境条件不仅会影响微生物的繁殖，还会影响发酵产物的形成，D正确。 故选B。 3. 某同学设计了如下图所示的发酵装置，下列有关叙述错误的是（　　） A. 该装置可阻止空气进入，用于果酒发酵 B. 该装置在发酵前要经消毒处理 C. 去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸需求 D. 弯管可以起到防止外界杂菌进入发酵瓶的作用 【答案】C 【解析】 【分析】1、果酒的制作：选用的菌种为兼性厌氧型的酵母菌。果酒制作的过程中，初期先通气让酵母菌进行有氧呼吸，有利于酵母菌的繁殖，中期进行酒精发酵时需要对装置进行密封处理。 2果醋的制作：使用的微生物是醋酸菌。醋酸菌是一种好氧菌。 【详解】A、果酒发酵需要无氧环境，该装置弯管中的水可阻止空气进入，创造无氧环境，因此能用于果酒发酵，A正确； B、为了防止杂菌污染，该装置在发酵前要经消毒处理，B正确； C、醋酸发酵使用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，该装置若用于醋酸发酵，去除弯管中的水，空气从弯管中进入，但不能满足底层发酵液中大量的醋酸菌进行细胞呼吸时对氧气的需求，C错误； D、弯管可以起到防止外界杂菌进入发酵瓶的作用，D正确。 故选C。 4. 某同学在酿制果醋时，先进行酒精发酵，然后转入醋酸发酵，结果发现果醋产量较低，其原因不可能是（　　） A. 由酒精发酵转入醋酸发酵时调低了温度 B. 在发酵过程中混入了其他微生物，造成了污染 C. 酒精发酵后通入氧气，导致醋酸发酵受到抑制 D. 酒精发酵产生的酒精浓度过高，抑制了醋酸发酵 【答案】C 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、果醋的制作需要的温度比果酒制作的温度高，如果调低了温度，果醋的产量可能会降低，A不符合题意 ； B、在发酵过程中混入了其他微生物，影响了果醋的发酵，果醋的产量可能会降低，B不符合题意； C、制作醋酸的醋酸菌是需氧型微生物，所以酒精发酵后通入氧气，不会使醋酸发酵受到抑制，C符合题意； D、酒精发酵产生的酒精浓度过高，抑制了醋酸菌的生长，从而抑制了醋酸发酵，果醋的产量可能会降低，D不符合题意。 故选C。 5. 几百年来，山东淄博王村“酿酒拌醋”的生产制作工艺日臻成熟和完善，故有“山东醋都”的美誉。如图是王村苹果醋生产加工流程图解，下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①需要对苹果进行选择、清洗 B. 过程②的温度要求低于过程③ C. 过程③需要在无氧条件下进行 D. 过程④需要进行调配、杀菌等操作 【答案】C 【解析】 【分析】果酒主要利用酵母菌，发酵温度为18-30℃，果醋主要利用醋酸菌，发酵温度为30-35℃。 【详解】A、过程①需要将好苹果挑选出来，将表面的灰尘清洗掉，A正确； B、过程②主要利用酵母菌，发酵温度为18-30℃，过程③主要利用醋酸菌，发酵温度为30-35℃，故过程②的温度要求低于过程③，B正确； C、过程③主要利用醋酸菌，醋酸菌为异养需氧型，故应在有氧条件下进行，C错误； D、醋酸发酵完成，制作成品，需进行调配（调配pH，使酸度适宜）、杀菌（除去微生物）等操作，D正确。 故选C。 6. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。如图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（　　） A. 去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染 B. 过程③在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋 C. 在过程④时，榨出的蓝莓汁需经过湿热灭菌后才能密闭发酵 D. 过程⑤中酒精可作为醋酸菌的碳源和能源 【答案】C 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 【详解】A、榨汁前需将新鲜的蓝莓进行冲洗，然后除去枝梗，以避免除去枝梗时引起蓝莓破损，防止增加被杂菌污染的机会，A正确； B、过程③是果醋发酵，所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋，B正确； C、过程④果酒制作的菌种的来源于蓝莓皮上野生的酵母菌，所以蓝莓汁不需经过湿热灭菌，C错误； D、在没有糖原的情况下，醋酸菌可以把酒精转化为醋酸，故过程⑤中酒精可作为醋酸菌的碳源和能源，D正确。 故选C。 7. 人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是（　　） 选项 A B C D 食品 果酒 果醋 腐乳 泡菜 主要微生物 酵母菌 醋酸菌 毛霉 醋酸菌 制作装置或操作步骤 A. A B. B C. C D. D 【答案】B 【解析】 【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。 2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。 4、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。 【详解】A、该装置中不需要温度计，换成充气管；排气管不能插入到液体中，否则发酵液会从导管溢出，A错误； B、醋酸菌是好氧菌，通入氧气有利于醋酸菌发酵，B正确； C、腐乳制作过程的主要微生物是毛霉，先让毛霉生长，后加盐腌制，否则盐会抑制毛霉生长，C错误； D、制作泡菜的原理是乳酸菌发酵，乳酸菌是厌氧型生物，所以在坛口加水，可以制造无氧环境，有利于乳酸菌增殖，D错误。 故选B。 8. 某科研人员利用郫县豆瓣酱为材料筛选高产蛋白酶的霉菌，下列利用平板划线法筛选该菌株的做法，正确的是（ ） A. 在每次划线前后都灼烧接种环的目的是防止杂菌污染 B. 接种霉菌后的培养基必须采用湿热灭菌法进行灭菌 C. 筛选用的固体选择培养基中必须加入一定量的蛋白质 D. 对筛选的菌株计数时选择菌落数为30～300的平板进行计数 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、初次划线灼烧的目的是防止杂菌污染，其后划线后灼烧的目的是杀死上次划线结束后残留在接种环上的菌种，使下一个区域的菌种只来自上一个区域的末尾，最后一次灼烧的目的是防止菌体污染环境，A错误； B、接种霉菌之前，培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，B错误； C、产蛋白酶的霉菌利用的底物是蛋白质，因此，培养基中需加入一定量的蛋白质，C正确； D、平板划线法不能对菌落进行计数，D错误。 故选C。 9. 下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是 A. 培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌 B. 接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧 C. 接种后的培养皿要倒置，以防培养污染 D. 菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基 【答案】A 【解析】 【分析】无菌技术指通过一定的物理、化学的手段，防止实验室培养物被外来微生物污染，保持微生物的纯培养的技术，其中包括在微生物的分离、转接、保存等过程中防止其他微生物污染的手段。常见的方法：消毒和灭菌。 【详解】接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用高压蒸汽灭菌法处理，A错误；为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要进行灼烧灭菌，B正确；接种后，培养皿需要倒置，以防皿盖上水珠落入培养基造成污染，C正确；分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于微生物的计数，所用培养基为固体培养基，D正确。故选A。 10. 下列有关微生物培养的叙述，错误的是（　　） A. 欲获得能分解石油的微生物的菌落，所用培养基中需要添加琼脂 B. 筛选产果胶酶的微生物的培养基要以果胶为唯一碳源 C. 要从细菌与真菌混杂的菌群中将细菌纯化，培养基除碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质外，最好添加抗生素制成选择培养基 D. 实验前对培养基的灭菌方法是湿热灭菌法，培养皿一般用干热灭菌法灭菌 【答案】C 【解析】 【分析】菌落：是指由单个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞集团。各种微生物在一定条件下形成的菌落特征，如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等，具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。 【详解】A、菌落是在固体培养基上获得的子细胞群体，因此要获得能分解石油的微生物的菌落，需要在培养基中需要添加琼脂，A正确； B、筛选产果胶酶的微生物的培养基要以果胶为唯一碳源，因为这样才能保证在该培养基上长出的是分解果胶的微生物，B正确； C、要从细菌与真菌混杂的菌群中将细菌纯化，培养基除碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质外，最好将培养基的pH调成中性或微碱性，以抑制真菌的生长，而添加抗生素会抑制细菌的生长，C错误； D、实验时，通常用湿热灭菌法对培养基进行灭菌，能耐高温的玻璃器皿如培养皿和金属用具，且需要干燥的物品，一般用干热灭菌法灭菌，D正确。 故选C。 11. 下列有关倒平板操作的叙述，错误的是（　　） A. 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B. 使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C. 将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上 D. 等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置 【答案】C 【解析】 【分析】倒平板操作的步骤： （1）将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞； （2）右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰； （3）用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖； （4）等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。 【详解】A、整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵，因此灭过菌的培养皿应放在火焰旁，A正确； B、打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰，防止杂菌污染，B正确； C、培养皿应打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能将培养皿盖完全打开，C错误； D、等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置，防止皿盖上的水珠滴入培养基造成污染，D正确。 故选C。 12. 尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述，正确的是（ ） A. 培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是鉴别培养基 B. 测定土壤中分解尿素的细菌数量和测定土壤中其他细菌的数量可采用相同的稀释度 C. 细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高 D. 利用稀释涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的细菌的分离计数和纯化鉴定 【答案】C 【解析】 【分析】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。 【详解】A、培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是选择培养基，A错误； B、因为土壤中各类微生物的数量不同，故为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离，B错误； C、细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，可加入酚红指示剂进行检测，C正确； D、鉴定分解尿素的细菌应该用加酚红的鉴别培养基，D错误。 故选C。 【点睛】对微生物培养的培养基、选择培养基的选择作用、培养液中的成分、常用的接种方法等相关知识的综合掌握是解答本题的关键。 13. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法不正确的是（ ） A. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 B. 通常对接种室用紫外线照射30 min后，再适量喷洒石炭酸等消毒液来增强消毒效果 C. 用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所得数据往往比实际数据偏小 D. 接种环在划线前后都需要灼烧，涂布器在接种前也需要灼烧，但两种处理方法不同 【答案】B 【解析】 【分析】平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。稀释涂布平板法则是菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 【详解】A、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，故两种纯化方法都是要防止杂菌污染，A正确； B、通常对接种室用紫外线照射30min，照射前可适量喷洒石炭酸等消毒液来增强消毒效果，B错误； C、因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所得数据往往比实际数据偏小，C正确； D、接种环可用灼烧灭菌，涂布器要沾少量酒精在火焰上引燃进行灭菌，D正确。 故选B。 14. 表为某培养基配方，下列叙述正确的是（ ） 牛肉膏 蛋白胨 乳糖 蔗糖 琼脂 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水 pH 5g lOg 5g 5g 2g 2g 0．4g 0．065g 1000 7．2 A. 提供碳源的只有蔗糖 B. 提供氮源的只有蛋白胨 C. 牛肉膏、蛋白胨均可提供氮源 D. 该培养基可特定培养自生固氮菌 【答案】C 【解析】 【分析】培养基的概念、营养构成 （1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 （2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【详解】A、提供碳源的有牛肉膏、蛋白胨、蔗糖和乳糖等，A错误； BC、该培养基成分中的牛肉膏、蛋白胨均可提供氮源，B错误、C正确； D、该培养基含有氮源，所以不可特定培养自生固氮菌，D错误。 故选C。 15. 大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如图。大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝（EMB培养基的指示剂）反应，菌落呈黑色。下列对实验操作的分析，错误的是（　　） A. 测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理 B. 过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染 C. 将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作 D. EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成黑色菌落 【答案】D 【解析】 【分析】大肠杆菌的代谢能与伊红美蓝（EMB培养基的指示剂）反应，菌落呈黑色，因此可以制备EMB培养基来鉴别大肠杆菌。 【详解】A、在实验室进行微生物培养的时候都需要进行严格的无菌操作，尽量减少杂菌的污染。干热灭菌法适用于对滤杯、滤膜和滤瓶进行灭菌，防止杂菌的污染，A正确； B、在酒精灯火焰附近操作可以减少空气中的杂菌污染，B正确； C、由于过滤完后细菌粘附在滤膜上，将滤膜紧贴在EMB培养基上可以将粘附的菌种接种在培养基上，C正确； D、EMB培养基属于鉴别培养基，没有选择作用，D错误。 故选D。 16. 泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害，某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”，查阅资料得到下图。请判断下列相关说法不正确的是（ ） A. 从细胞结构方面比较，制作泡菜和制作果醋所用的微生物相同 B. 从细胞代谢方面比较，制作泡菜和制作果酒所用的微生物相同 C. 据上图曲线分析，与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用 D. 据上图曲线分析，pH下降是因为乳酸菌产生的乳酸积累的结果 【答案】B 【解析】 【分析】1.参与果酒发酵的微生物是酵母菌，属于真核生物，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。 2.参与果醋制作的微生物是醋酸菌，属于原核生物，其新陈代谢类型为异养需氧型。 3.参与泡菜制作的微生物主要是乳酸菌，属于原核生物，其新陈代谢类型为异养厌氧型。 【详解】A、从细胞结构方面比较，制作泡菜所用的乳酸菌和制作果醋所用的醋酸菌都是原核生物，A正确； B、从细胞代谢方面比较，制作泡菜所用的乳酸菌是厌氧菌，而制作果酒所用的酵母菌是兼性厌氧菌，B错误； C、据图曲线分析，与第3天相比，第8天后的泡菜中亚硝酸盐含量明显降低，更适于食用，C正确； D、据图曲线分析，pH下降是因为乳酸菌产生的乳酸积累的结果，D正确。 故选B。 17. 微生物接种方法很多，平板划线法是最常用的一种。如图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。下列操作方法正确的是（　　） A. 划线操作时，如接种环不慎划破培养基，可以继续正常操作 B. 在③区域划线的时候，要从②区域划线的末端开始 C. 可以将④区域的划线与①区域的划线相连 D. 在该操作过程中只需要灼烧接种环4次 【答案】B 【解析】 【分析】平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 【详解】A、划线操作时，如接种环不慎划破培养基，则该培养基将不能继续使用，因为划破培养基会造成划线不均匀，难以分离单菌落，可能导致微生物的无氧呼吸或杂菌污染等，A错误； B、在进行第二次以及其后的划线操作时，要从上一次划线的末端开始划线，这样能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落，因此在③区域划线的时候，要从②区域划线的末端开始，B正确； C、划线时要避免最后一区（④区域）的划线与第一区域（①区域）划线相连，因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，C错误； D、在每次划线前后均需要对接种环灼烧灭菌，因此在该操作过程中需要灼烧接种环5次，D错误。 故选B。 18. 为衡量某凝胶免洗洗手液的清洗效果，研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程如图。下列叙述正确的是（ ） A. 统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法 B. 除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养 C. 培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌 D. 初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状 【答案】B 【解析】 【分析】微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、平板划线法不能用于活菌计数，统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A错误； B、除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确； C、当两个或多个细胞连在一起时，平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个或几个活菌，C错误； D、由于菌落肉眼可见，故初步判断培养基上菌种的类型，可用肉眼观察菌体的形态、大小、颜色等特征，D错误。 故选B。 二、非选择题：本题共3小题，共40分。 19. 在《魅力中国城》初赛竞演的“城市味道”环节中，黔东南以家乡的味道为主题，通过酸汤鱼、五彩姐妹饭等十几道特色农家菜，展示了黔东南州最具特色的城市美食，回答下列问题。 （1）“酸汤”是通过天然发酵而成的，参与该发酵过程的主要微生物是___。 （2）制作酸汤时常用到煮沸的水和米汤，将水煮沸的目的是___。 （3）出坛后的酸汤，若不及时食用，一段时间后会在其表面出现一层白膜，这是___（填微生物名称）繁殖引起的，与进行酸汤发酵的主要微生物相比，该微生物在结构上的最主要区别是___。 （4）在酸汤制作时，密封之前向发酵液中加入少许优质的酸汤母液，这样做有什么好处？___。 【答案】（1）乳酸菌 （2）除去水中的氧气并消毒 （3） ①. 酵母菌 ②. 具有核膜包被的细胞核 （4）提供优质菌种，缩短发酵时间 【解析】 【分析】1、泡菜、酸汤、酸奶的发酵原理是是乳酸菌无氧发酵产生乳酸。乳酸菌为原核生物，代谢类型为厌氧菌型。 2、果酒的制作原理：酵母菌在无氧条件下产生酒精和二氧化碳。酵母菌是真核生物，代谢类型为兼性厌氧型。 【小问1详解】 酸汤是通过乳酸菌的无氧呼吸(发酵)形成的。 【小问2详解】 制作酸汤时，将水煮沸的目的是除去水中的氧气并消毒；米汤相当于乳酸菌的培养液，可以为其提供水、无机盐、碳源、氮源等营养物质。 【小问3详解】 酸汤表面氧气含量高，因此其表面出现的一层白膜是酵母菌；与原核生物乳酸菌相比，酵母菌属于真核生物，具有核膜包被的成形的细胞核。 【小问4详解】 酸汤母液中含有，以提供优质菌种 ，减少发酵时间。 20. 根据下面的实验装置图（图1）和果酒的生产工艺流程图（图2），回答问题： （1）果酒的制作离不开酵母菌，在无氧条件下，酵母菌可以进行酒精发酵，请写出相应的反应式： ___________________。在葡萄酒的自然发酵过程中，起作用的主要是附着在葡萄皮上的___________________________。 （2）利用图1所示装置制作果酒时，为适当提高果酒的生产速率，进气口应_____________________；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是___________________________。 （3）若利用图2所示生产工艺流程制作樱桃酒，其中冲洗的目的是____________________________。樱桃榨汁前需要除去枝梗，此操作是在冲洗____________（填“前”或“后”）进行的。 （4）为验证樱桃酒制作是否成功，可将发酵液在酸性条件下用____________溶液来鉴定，若出现____________色，则说明有果酒产生。 【答案】 ①. ②. 野生型酵母菌 ③. 先打开后关闭 ④. 排出CO2，并防止杂菌污染 ⑤. 洗去樱桃表面的浮尘 ⑥. 后 ⑦. 重铬酸钾 ⑧. 灰绿 【解析】 【分析】1、分析图示，表示果酒和果醋的发酵装置图，其中有出料口的作用是出料、检测；充气口的作用是在果醋制作时通入氧气的；排气口的作用是排气（CO2），其长而弯曲的好处是防止杂菌和浮尘的污染。 2、果酒制作菌种是酵母菌，来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧、温度是18～25℃，pH值呈酸性。 【详解】（1）果酒的制作是依靠酵母菌无菌发酵产生酒精得到的，所以反应式即是无氧呼吸反应式，即： ，一些野生型酵母菌附着在葡萄皮上，果酒的发酵主要就是依靠这些酵母菌。 （2）制作果酒时可选用图1的装置，由于酵母菌为碱性厌氧菌，为适当提高果酒的生产速率，进气口应先打开后关闭，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是既可以放气，又可防止污染。 （3）根据题意，该流程图为樱桃酒生产工艺流程简图，其中冲洗的目的是洗去浮尘，樱桃榨汁前需要除去国柄，此操作是在冲洗之后进行的，以减少杂菌污染。 （4）酒精和酸性的重铬酸钾反应溶液由橙色变成灰绿色，因此樱桃果酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用重铬酸钾溶液来鉴定。 【点睛】本题结合实验装置图，考查果酒的制作，要求学生掌握果酒制作的原理和过程以及注意事项是解决问题的关键。能够正确识图判断图中装置在果酒发酵过程中的作用，理解酵母菌的代谢特点和酒精检测的方法。 21. 枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株，分别将浸过不同菌株的提取液（a～e）及无菌水（f）的无菌圆纸片置于平板培养基表面，在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1。请回答下列问题： （1）在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时，培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、___。培养枯草芽孢杆菌时，常用摇床进行振荡培养，目的是___。 （2）a～e中蛋白酶产量最高的菌株是___（用字母回答），判断依据是___。 （3）质监局为了检验标有含该蛋白酶的加酶洗衣粉质量，设计了如图2所示实验。如果实验结果是___，则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。若用该实验来判断此酶活性大小可通过观察___实现。 【答案】（1） ①. 蛋白质 ②. 增加培养液中的溶氧量并使菌株与培养液充分接触，有利于目的菌的生长繁殖 （2） ①. a ②. a周围的透明圈最大，说明其产生的蛋白酶数量多或活性高 （3） ①. A组胶片上的蛋白膜消失，B组胶片上的蛋白膜未消失 ②. 胶片上的蛋白膜消失所需时间的长短（相同时间内蛋白膜消失的面积） 【解析】 【分析】培养基的成分：水、碳源、氮源、无机盐和生长因子。加酶洗衣粉指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。 【小问1详解】 在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时，培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、蛋白质（蛋白酶可以催化蛋白质的水解）。培养枯草芽孢杆菌时，为了增加培养液中的溶氧量并使菌株与培养液充分接触，有利于目的菌的生长繁殖，常用摇床进行振荡培养。 【小问2详解】 a-e中，a周围的透明圈最大，说明其产生的蛋白酶数量多或活性高，故蛋白酶产量最高的菌株是a。 【小问3详解】 洗衣粉中若含有蛋白酶，A组因含有蛋白酶，则会引起蛋白膜分解掉，B组中高温会导致蛋白酶变性失活，不能分解蛋白膜，故若出现A组胶片上的蛋白膜消失，B组胶片上的蛋白膜未消失，则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。该实验可以通过观察胶片上的蛋白膜消失所需时间的长短来判断蛋白酶的活性大小。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 德化二中2024年春高二年段第二阶段检测生物卷（发酵工程） 一、单项选择题：本题前15小题，每小题3分，后3小题各5分，共60分。 1. 含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用。该培养基能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌，只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。由其作用可知该培养基是一种 A. 固体培养基 B. 合成培养基 C. 天然培养基 D. 选择培养基 2. 发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，下列哪项不是发酵过程中要完成的事 （ ） A. 随时取样检测培养液中的微生物数目、产物浓度 B. 不断添加菌种 C. 及时添加必需的培养液组分 D. 严格控制温度、pH、溶解氧、通气量与转速等发酵条件 3. 某同学设计了如下图所示的发酵装置，下列有关叙述错误的是（　　） A. 该装置可阻止空气进入，用于果酒发酵 B. 该装置在发酵前要经消毒处理 C. 去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸需求 D. 弯管可以起到防止外界杂菌进入发酵瓶的作用 4. 某同学在酿制果醋时，先进行酒精发酵，然后转入醋酸发酵，结果发现果醋产量较低，其原因不可能是（　　） A. 由酒精发酵转入醋酸发酵时调低了温度 B. 在发酵过程中混入了其他微生物，造成了污染 C. 酒精发酵后通入氧气，导致醋酸发酵受到抑制 D. 酒精发酵产生的酒精浓度过高，抑制了醋酸发酵 5. 几百年来，山东淄博王村“酿酒拌醋”的生产制作工艺日臻成熟和完善，故有“山东醋都”的美誉。如图是王村苹果醋生产加工流程图解，下列相关叙述错误的是（ ） A. 过程①需要对苹果进行选择、清洗 B. 过程②的温度要求低于过程③ C. 过程③需要在无氧条件下进行 D. 过程④需要进行调配、杀菌等操作 6. 蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。如图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（　　） A. 去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染 B. 过程③在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋 C. 在过程④时，榨出的蓝莓汁需经过湿热灭菌后才能密闭发酵 D. 过程⑤中酒精可作为醋酸菌的碳源和能源 7. 人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是（　　） 选项 A B C D 食品 果酒 果醋 腐乳 泡菜 主要微生物 酵母菌 醋酸菌 毛霉 醋酸菌 制作装置或操作步骤 A. A B. B C. C D. D 8. 某科研人员利用郫县豆瓣酱为材料筛选高产蛋白酶的霉菌，下列利用平板划线法筛选该菌株的做法，正确的是（ ） A. 在每次划线前后都灼烧接种环的目的是防止杂菌污染 B. 接种霉菌后的培养基必须采用湿热灭菌法进行灭菌 C. 筛选用的固体选择培养基中必须加入一定量的蛋白质 D. 对筛选的菌株计数时选择菌落数为30～300的平板进行计数 9. 下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是 A. 培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌 B. 接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧 C. 接种后的培养皿要倒置，以防培养污染 D. 菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基 10. 下列有关微生物培养的叙述，错误的是（　　） A. 欲获得能分解石油的微生物的菌落，所用培养基中需要添加琼脂 B. 筛选产果胶酶的微生物的培养基要以果胶为唯一碳源 C. 要从细菌与真菌混杂的菌群中将细菌纯化，培养基除碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质外，最好添加抗生素制成选择培养基 D. 实验前对培养基的灭菌方法是湿热灭菌法，培养皿一般用干热灭菌法灭菌 11. 下列有关倒平板操作的叙述，错误的是（　　） A. 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B. 使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C. 将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上 D. 等待培养基冷却凝固后需要倒过来放置 12. 尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述，正确的是（ ） A. 培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是鉴别培养基 B. 测定土壤中分解尿素的细菌数量和测定土壤中其他细菌的数量可采用相同的稀释度 C. 细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高 D. 利用稀释涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的细菌的分离计数和纯化鉴定 13. 在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法不正确的是（ ） A. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 B. 通常对接种室用紫外线照射30 min后，再适量喷洒石炭酸等消毒液来增强消毒效果 C. 用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所得数据往往比实际数据偏小 D. 接种环在划线前后都需要灼烧，涂布器在接种前也需要灼烧，但两种处理方法不同 14. 表为某培养基配方，下列叙述正确的是（ ） 牛肉膏 蛋白胨 乳糖 蔗糖 琼脂 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水 pH 5g lOg 5g 5g 2g 2g 0．4g 0．065g 1000 7．2 A. 提供碳源的只有蔗糖 B. 提供氮源的只有蛋白胨 C. 牛肉膏、蛋白胨均可提供氮源 D. 该培养基可特定培养自生固氮菌 15. 大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如图。大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝（EMB培养基的指示剂）反应，菌落呈黑色。下列对实验操作的分析，错误的是（　　） A. 测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理 B. 过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染 C. 将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作 D. EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成黑色菌落 16. 泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害，某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”，查阅资料得到下图。请判断下列相关说法不正确的是（ ） A. 从细胞结构方面比较，制作泡菜和制作果醋所用的微生物相同 B. 从细胞代谢方面比较，制作泡菜和制作果酒所用的微生物相同 C. 据上图曲线分析，与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用 D. 据上图曲线分析，pH下降是因为乳酸菌产生的乳酸积累的结果 17. 微生物接种方法很多，平板划线法是最常用的一种。如图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。下列操作方法正确的是（　　） A. 划线操作时，如接种环不慎划破培养基，可以继续正常操作 B. 在③区域划线的时候，要从②区域划线的末端开始 C. 可以将④区域的划线与①区域的划线相连 D. 在该操作过程中只需要灼烧接种环4次 18. 为衡量某凝胶免洗洗手液的清洗效果，研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程如图。下列叙述正确的是（ ） A. 统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法 B. 除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养 C. 培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌 D. 初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状 二、非选择题：本题共3小题，共40分。 19. 在《魅力中国城》初赛竞演的“城市味道”环节中，黔东南以家乡的味道为主题，通过酸汤鱼、五彩姐妹饭等十几道特色农家菜，展示了黔东南州最具特色的城市美食，回答下列问题。 （1）“酸汤”是通过天然发酵而成的，参与该发酵过程的主要微生物是___。 （2）制作酸汤时常用到煮沸的水和米汤，将水煮沸的目的是___。 （3）出坛后的酸汤，若不及时食用，一段时间后会在其表面出现一层白膜，这是___（填微生物名称）繁殖引起的，与进行酸汤发酵的主要微生物相比，该微生物在结构上的最主要区别是___。 （4）在酸汤制作时，密封之前向发酵液中加入少许优质的酸汤母液，这样做有什么好处？___。 20. 根据下面的实验装置图（图1）和果酒的生产工艺流程图（图2），回答问题： （1）果酒的制作离不开酵母菌，在无氧条件下，酵母菌可以进行酒精发酵，请写出相应的反应式： ___________________。在葡萄酒的自然发酵过程中，起作用的主要是附着在葡萄皮上的___________________________。 （2）利用图1所示装置制作果酒时，为适当提高果酒的生产速率，进气口应_____________________；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是___________________________。 （3）若利用图2所示生产工艺流程制作樱桃酒，其中冲洗的目的是____________________________。樱桃榨汁前需要除去枝梗，此操作是在冲洗____________（填“前”或“后”）进行的。 （4）为验证樱桃酒制作是否成功，可将发酵液在酸性条件下用____________溶液来鉴定，若出现____________色，则说明有果酒产生。 21. 枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株，分别将浸过不同菌株的提取液（a～e）及无菌水（f）的无菌圆纸片置于平板培养基表面，在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图1。请回答下列问题： （1）在筛选枯草芽孢杆菌蛋白酶高产菌株时，培养基营养成分应包括水、无机盐、生长因子、葡萄糖、___。培养枯草芽孢杆菌时，常用摇床进行振荡培养，目的是___。 （2）a～e中蛋白酶产量最高的菌株是___（用字母回答），判断依据是___。 （3）质监局为了检验标有含该蛋白酶的加酶洗衣粉质量，设计了如图2所示实验。如果实验结果是___，则说明该洗衣粉中含有蛋白酶。若用该实验来判断此酶活性大小可通过观察___实现。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $