精品解析：安徽省六安市叶集区叶集皖西当代中学2023-2024学年高二下学期5月期中生物试题

绝密★启用前 叶集皖西当代中学高二年级5月月考 生物 本试卷分选择题和非选择题两部分，共8页。全卷满分100分，考试时间75分钟。 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共30小题，每小题2分，共60分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的。 1. 某兴趣小组为从土壤中筛选出某类细菌制备相应培养基，培养基成分如表所示。下列有关分析错误的是（ ） 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 质量/g 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0 A. 从物理性质角度分析，该培养基属于固体培养基 B. 从功能角度分析，该培养基属于选择培养基 C. 该培养基可以筛选出能分解尿素的微生物 D. 该培养基灭菌后还需要将pH调至中性或弱碱性 2. 沙果中有机酸、维生素含量较高，有很高的营养价值。人们对其进行深加工，开发生产出了沙果果酒、果醋等发酵产品。下列有关制作过程或原理的分析，错误的是（ ） 选项 制作产品 有关制作过程或原理的分析 A 沙果果酒 发酵过程中及时拧开发酵瓶盖为发酵提供充足的空气 B 沙果果酒 发酵瓶大约留1/3的空隙，避免产生气体导致发酵液溢出 C 沙果果醋 在O2和糖源充足的条件下，醋酸菌将糖分解成醋酸 D 沙果果醋 发酵温度为30～35℃时较适宜，该温度有利于醋酸菌生长繁殖 A. A B. B C. C D. D 3. 发酵产品的使用深入生活的方方面面。发酵工程可对细胞和细胞代谢产物进行工业化生产，传统发酵技术大大丰富了食物的品种，充分体现了劳动人民的智慧。下列关于发酵工程和传统发酵技术的说法，正确的是（ ） A. 用发酵工程生产青霉素时，若发酵罐和培养基灭菌不彻底污染了杂菌，会因为某些杂菌分泌酶将青霉素分解掉而降低产量 B. 家庭制泡菜和变酸的葡萄酒表面长的菌膜分别是由酵母菌和醋酸菌形成，它们都是需氧型的原核生物 C. 发酵工程往往采用液体培养基进行发酵，发酵结束后会通过提取、分离和纯化的措施来获得单细胞蛋白产品 D. 与发酵工程相比，传统发酵技术中菌种来源于多种天然微生物，发酵过程经过严格灭菌，所以产品质量较高且品质稳定 4. 下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法，错误的是（ ） A. 土壤中各类微生物的数量不同，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离 B. 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同 C. 可根据菌落的特征，区分不同的微生物 D. 牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落 5. 兰花高贵典雅，但是其种子在自然条件下萌发率很低；传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题。为了让名贵的兰花大量、快速地繁殖，就需要借助植物组织培养技术。下列有关说法错误的是（ ） A. 兰花植物组织培养过程中，生长素/细胞分裂素的值大于1，可促进诱导生芽 B. 兰花的传统分株繁殖属于无性繁殖 C. 相比于叶肉细胞、利用兰花芽尖的分生区细胞进行植物组织培养更容易成功 D. 利用兰花的花粉粒进行单倍体育种也需要用到植物组织培养技术 6. 动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。下列相关叙述错误的是（　　） A. 细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 B. 动物细胞融合技术可以用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等 C. 动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术的原理是完全相同的 D. 杂交瘤技术是动物细胞融合技术的重要应用，具有重要意义 7. 悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培养管通常放置在95%的O2和5%CO2的环境中 B. 灌流式培养的细胞会贴壁生长，但不会出现接触抑制现象 C. 灌流速率越高，营养物质利用越充分 D. 灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行 8. 紫草宁是从紫草愈伤组织细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁是世界上首例药用植物细胞工程产品。下列关于植物细胞工程的说法，不正确的是（　　） A. 植物细胞培养生产紫草宁的原理是细胞增殖，所获得紫草宁为次生代谢产物，一般不是植物生长和生存所必需的 B. 植物组织培养时，应对外植体进行消毒处理以防止培养基及愈伤组织污染 C. 在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，可直接获得染色体加倍的细胞 D. 叶肉细胞往往带病毒且细胞的全能性较低，故培育脱毒植物适宜选茎尖而不选叶片 9. 20世纪60年代，科学家尝试将番茄和马铃薯杂交，希望培育出一种地上结番茄，地下结马铃薯的超级作物，传统的杂交方法很难实现，科学家利用体细胞杂交技术得到了“番茄—马铃薯”杂种植株，但是没有出现地上结番茄，地下结马铃薯的现象。下列关于该技术的叙述，错误的是（ ） A. 培育“番茄—马铃薯”杂种植株的原理是植物细胞具有全能性和细胞膜的流动性 B. “番茄—马铃薯”杂种植株，没有出现地上结番茄，地下结马铃薯的原因是存在生殖隔离 C. 利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁得到原生质体，以免影响细胞间杂交 D. 原生质体融合是体细胞杂交的关键环节，可借助物理法、化学法进行融合 10. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（　　） A. 单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养 B. 制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 C. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选 D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 11. 水牛养殖是中国重要的农业产业之一。与传统繁殖方法相比，家畜胚胎工程技术可以挖掘动物的繁殖潜力，提升家畜种质资源质量。以下选项错误的是（ ） A. 取滋养层细胞进行DNA分析、选育优良品种，可以提升水牛种质资源 B. 注射促性腺激素促超数排卵和体外受精可以增加水牛胚胎数量 C. 胚胎移植使优良母畜免去了冗长的妊娠期，同时需要用免疫抑制剂处理代孕母畜 D. 同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，是动物无性繁殖或克隆的方法之一 12. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（　　） A. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B. 过程①通常使用合成培养基加入血清等天然成分 C. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D. 过程③常使用PEG或灭活的病毒诱导法 13. 种间体细胞核移植（iSCNT）将供体动物体细胞与来自不同种、科、目或纲的家畜（驯养动物）的去核卵母细胞融合并激活，以获得较多的重构胚，进而获得动物个体，是体细胞核移植（SCNT）中极具潜力的研究方向之一。由于多种野生动物数量稀少且呈持续下降趋势，因此采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，甚至无法完成，而从活体或死后不久的野生动物体内采集体细胞利用iSCNT技术获得动物个体，可在一定程度上维持濒危动物数量。下列叙述正确的是（ ） A. iSCNT技术必须通过显微操作技术将供体细胞的细胞核取出，然后注入去核的卵母细胞 B. 若从野生动物体内采集到的体细胞数目较少，可先用添加动物血清的固体培养基进行培养 C. iSCNT技术的原理是动物细胞核具有全能性，操作过程中可用Ca2+激活重构胚 D. 同一野生动物经iSCNT技术获得的多个重构胚中，遗传物质可能不完全相同 14. 下面表示“DNA粗提取与鉴定”实验的基本流程，相关叙述错误的是（ ） ①取材→②破碎细胞→③获得滤液→④去除杂质→⑤进一步提纯→⑥DNA鉴定 A. 本实验使用了体积分数为95%的酒精 B. 步骤①中可以使用猪肝细胞作为实验材料 C. 步骤③中可以使用纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液 D. 步骤⑥向试管中加入二苯胺试剂后静置5min后即可呈现蓝色 15. 基因工程操作离不开三种工具，下列有关说法不正确的是（ ） A. 用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒，可获得相同的黏性末端 B. 常用载体质粒的基本单位是脱氧核糖核苷酸，另外两种工具的基本单位是氨基酸 C. DNA聚合酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针” D. 限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力 16. 基因工程中PCR扩增产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列关于PCR 及电泳鉴定的叙述，错误的是（ ） A. PCR通过调节温度来控制DNA 双链的解聚及模板与引物的结合 B. DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度有关，与DNA分子的大小和构象无关 C. 因 DNA分子在凝胶载样缓冲液中带正电荷或负电荷，可用于电泳 D. 采用PCR技术对一个DNA进行扩增，若每个DNA分子的每条链都做模板，则第n次循环共需要引物2n个 17. 甲、乙、丙三种限制酶均识别6个核苷酸序列，下列有关如图所示的黏性末端的说法，错误的是（　　） A. 甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的 B. 甲、乙具有相同的黏性末端，可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能 C. DNA连接酶的作用位点是b处 D. 切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段 18. 目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法正确的是（　　） A. 获得外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA聚合酶 B. 导入外源基因的精子能与从卵巢中获取的卵细胞直接完成②过程 C. ②采用体外受精技术，受精的标志是观察到3个极体 D. ④过程是胚胎移植，需移植到同种生理状态相同的代孕雌鼠子宫中 19. 基因工程自20世纪70年代起得到迅猛的发展，在农牧业、医药卫生和食品工业等方面得到广泛的应用。下列叙述错误的是（ ） A. 将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物 B. 目前利用基因工程技术可以生产细胞因子、抗体和疫苗等 C. 利用基因工程技术通过乳腺分泌乳汁生产药物叫作乳腺生物反应器 D. 将赖氨酸合成酶基因导入玉米中培育转基因玉米可提高玉米中赖氨酸含量 20. 研究发现，胰岛素进入血液循环后容易被降解，糖尿病患者需要反复注射胰岛素才能达到治疗效果。科研人员借助蛋白质工程改变了胰岛素中的某些氨基酸，提高了胰岛素在患者体内的稳定性，延长了其作用时间。下列有关叙述错误的是（ ） A. 蛋白质工程的实质是在DNA分子水平上进行设计和改造蛋白质 B. 氨基酸序列的差异是影响胰岛素在患者体内是否稳定的原因之一 C. 蛋白质工程难度很大与蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构有关 D. 改造胰岛素应首先从设计胰岛素基因中的脱氧核苷酸序列出发 21. “黑寡妇”蜘蛛吐出的丝强过钢丝，用其吐出的丝织成的布比制造防弹背心所用纤维的强度高很多。科学家把“黑寡妇”蜘蛛体内蜘蛛丝蛋白基因，导入到山羊细胞内，培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器，获得了坚韧程度极强的蜘蛛丝蛋白，取名为“生物钢”，操作过程如下。下列说法错误的是（　　） A. 要在蜘蛛丝蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子 B. 显微注射将含有蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入山羊的受精卵中，进而发育成“蜘蛛羊” C. “蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”会造成环境污染 D. 乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点 22. 基因工程在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等领域得到广泛的应用。下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（ ） A. 将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中，即可获得乳腺生物反应器 B. 将赖氨酸合成酶基因导入玉米细胞，获得富含赖氨酸的转基因玉米 C. 将乙烯合成相关基因导入番茄，获得的延熟番茄储存时间大大延长 D. 我国科学家培育的Bt毒蛋白抗虫棉对棉铃虫具有较强的抗性 23. 赖氨酸是人类的必需氨基酸，玉米中的赖氨酸含量很低，且在加工过程中易被破坏而缺乏。为提高玉米中赖氨酸的含量，若将天冬氨酸激酶中第352位的苏氨酸变为异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变为异亮氨酸，可以使玉米种子中游离赖氨酸含量提高2倍。下列说法错误的是（　　） A. 蛋白质工程实质是通过改变基因的碱基排列顺序而改变蛋白质的结构 B. 蛋白质工程是分子水平的操作，其过程无需构建基因表达载体 C. 蛋白质工程理论上既能改造现有蛋白质，也能制造新的蛋白质 D. 对基因的改造会经常用到基因的定点突变技术来进行碱基的替换、增添等 24. “三亲试管婴儿”为第四代试管婴儿，又叫卵浆置换技术。高龄产妇的胞浆已经老化，不利于胚胎的发育，选择高龄产妇自身活性较强的卵子的细胞核，借助年轻女性卵子的胞浆，将细胞核注入胞浆中，组合成新的卵子，就可以大幅度地提升受精卵质量，形成胚胎后移植到母体子宫。下列说法错误的是（　　） A. 该技术能大幅度改善卵子质量、解决卵子老化和精子质量不佳等问题 B. 该技术能极大地提高高龄患者的试管婴儿成功率 C. 年轻女性的卵子需要去掉细胞核，也就是去掉纺锤体—染色体复合物 D. “三亲试管婴儿”会导致伦理道德方面的质疑和争议 25. 生物技术与工程学相结合，可研究、设计和加工生产各种生物工程产品。下列有关叙述正确的是（ ） ①由于外植体在植物组织培养过程中不感染病毒，用任何外植体都可制备脱毒苗 ②由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用 ③胚胎移植作为胚胎工程的前端技术环节，推动了胚胎工程其他技术的研究和应用 ④PCR反应过程可以在PCR扩增仪中自动完成，而后常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物 ⑤利用基因工程技术的乳腺生物反应器，可以让哺乳动物批量生产相应的药物 ⑥蛋白质工程仅以蛋白质结构为基础逆中心法则进行，就可以改造或制造新的蛋白质 A. ①③ B. ②④⑤ C. ②③④⑥ D. ①③④⑤⑥ 26. 经人工诱变后，部分细菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了营养缺陷型菌株，这在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法 B. 根据用途分类，图中基本培养基属于选择培养基 C. 进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上 D. 为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取菌落B进行接种培养，并进一步鉴定 27. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列叙述错误的是（ ） A. 该方法依据的原理是醋酸菌在氧气、糖源充足时将酒精转化为醋酸 B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高醋酸菌失水过多 C. “衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的 D. “挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中溶解氧 28. 犬卵母细胞体外成熟和早期胚胎培养一直是犬科动物繁殖领域的世界级技术难题。青岛农业大学生命科学学院赵明辉副教授通过研究发现，无机盐离子的特殊配比可促进犬早期胚胎的基因组激活，而添加新鲜的维生素、组织液提取物等物质则可帮助犬早期胚胎维持正常的形态和细胞分化。下列有关胚胎工程的叙述，错误的是（　　） A. 为获得多个犬卵母细胞，可对雕犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵 B. 早期胚胎的体外培养液中还应该加入有机盐和血清等成分并需控制好温度 C. 早期胚胎包括桑椹胚、囊胚和原肠胚等，原肠胚期开始出现细胞分化形成原肠腔 D. 赵教授的发现揭示了营养物质的配比有时比浓度更重要，促生长因子作用很大 29. 关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（ ） A. 过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 B. 离心研磨液是为了加速DNA沉淀 C. 在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色 D. 粗提取的DNA中可能含有蛋白质 30. 筛选含有目的基因的受体细胞是基因工程中的重要环节。图中pUC18是一种常用质粒，其中ori为复制原点，Apr为青霉素抗性基因，lacZ’基因能合成某种酶，该酶能将无色染料X-gal变成蓝色。已知目的基因插入的位置如图所示，为快速筛选出只含重组质粒的大肠杆菌，平板培养基内除了大肠杆菌生长所必需的营养物质和琼脂外，还必须加入（ ） A. 青霉素 B. 无色染料X-gal C. 青霉素和无色染料X-gal D. 青霉素或无色染料X-gal 二、非选择题：共40分。 31. 近年来，水环境中发现的不同程度的抗生素残留，不仅威胁水生生物的生存，还会损害微生物的生态平衡。氧氟沙星（OFL）（C18H2OFN3O4）是一种人工合成的广谱抗菌的氟喹诺酮类药物，某实验小组成功地从废水环境样品中分离得到能降解OFL的菌株A。筛选分离的操作过程如图所示。回答下列问题： （1）筛选能够降解OFL的菌株时，富集培养基中需要加入__________作为唯一碳源或氨源。用于培养菌株A的固体培养基含有水、蛋白胨、酵母提取物和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为菌株A提供碳源、氮源和____________。 （2）过程Ⅲ所利用的接种方法是_________，与平板划线法不同的是，此方法还可以用于_________。过程Ⅱ中的总稀释次数为8次，在过程Ⅲ中，可以每隔24h统计一次菌落的数目，选取_________时的记录作为结果，三个培养基中长出的菌落数量分别是145、163、154，故推测A中细菌的数量为_________个/mL。 （3）该实验小组欲进一步探究初始OFL浓度对菌株A降解OFL能力的影响，请帮助其设计实验并写出实验思路：_____ 32. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自________。 （2）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是__________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行__________培养的方式进行扩大培养。 （3）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 ①单克隆抗体除可以运载药物外，还有__________等作用。（答出2点即可） ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_________________。 （4）与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体副作用更小，原因是____________________。 33. 下图表示获得抗除草剂转基因玉米的技术路线，其中含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。回答下列问题： （1）基因工程的核心是______，该步骤中通常选用两种不同的限制酶，其优点是__________。 （2）通过PCR技术扩增G基因，需要以__________为原料，扩增6次需要两种引物各________个。为了将获得的C基因准确连接至质粒上，需要在两种引物的__________（填“5’”或“3’”）端分别添加相应限制酶的识别序列；同时G基因必须正确插入到__________和__________之间，其中后者是位于基因前端的片段，其作用是_____________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 绝密★启用前 叶集皖西当代中学高二年级5月月考 生物 本试卷分选择题和非选择题两部分，共8页。全卷满分100分，考试时间75分钟。 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 一、选择题：本题共30小题，每小题2分，共60分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的。 1. 某兴趣小组为从土壤中筛选出某类细菌制备相应培养基，培养基成分如表所示。下列有关分析错误的是（ ） 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 质量/g 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0 A. 从物理性质角度分析，该培养基属于固体培养基 B. 从功能角度分析，该培养基属于选择培养基 C. 该培养基可以筛选出能分解尿素的微生物 D. 该培养基灭菌后还需要将pH调至中性或弱碱性 【答案】D 【解析】 【分析】1、培养基的成分包括水、无机盐、碳源、氮源等。 2、分析表格：表格中含有琼脂，从物理性质来说，属于固体培养基；从培养基的功能上看，该培养基以尿素为唯一氮源，属于选择培养基，用于筛选尿素分解菌。 【详解】A、该培养基中含有凝固剂琼脂，所以从物理性质角度分析，该培养基属于固体培养基，A正确； BC、该培养基以尿素作为唯一氮源，所以该培养基可以用于筛选尿素分解菌，属于选择培养基，BC正确； D、调节pH应在灭菌之前，D错误。 故选D。 2. 沙果中的有机酸、维生素含量较高，有很高的营养价值。人们对其进行深加工，开发生产出了沙果果酒、果醋等发酵产品。下列有关制作过程或原理的分析，错误的是（ ） 选项 制作产品 有关制作过程或原理的分析 A 沙果果酒 发酵过程中及时拧开发酵瓶盖为发酵提供充足的空气 B 沙果果酒 发酵瓶大约留1/3的空隙，避免产生气体导致发酵液溢出 C 沙果果醋 在O2和糖源充足的条件下，醋酸菌将糖分解成醋酸 D 沙果果醋 发酵温度为30～35℃时较适宜，该温度有利于醋酸菌生长繁殖 A. A B. B C. C D. D 【答案】A 【解析】 【分析】果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗(2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干，②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒(3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约1/3的空间，并封闭充气口②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃~25℃，时间控制在10~12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行，及时的监测，③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃~35℃，时间控制在前7~8d左右，并注意适时通过充气口充气。 【详解】A、制作果酒时，发酵过程中及时拧松发酵瓶盖为了排出气体，防止发酵液溢出，A错误； B、制作果酒时，发酵瓶大约留1/3的空隙，使酵母菌繁殖，避免产生气体导致发酵液溢出，B正确； C、制作果醋时，在O2和糖源充足的条件下，醋酸菌将糖分解成醋酸，C正确； D、制作果醋时，发酵温度是30～35℃时较适宜，该温度有利于醋酸菌生长繁殖，D正确。 故选A。 3. 发酵产品的使用深入生活的方方面面。发酵工程可对细胞和细胞代谢产物进行工业化生产，传统发酵技术大大丰富了食物的品种，充分体现了劳动人民的智慧。下列关于发酵工程和传统发酵技术的说法，正确的是（ ） A. 用发酵工程生产青霉素时，若发酵罐和培养基灭菌不彻底污染了杂菌，会因为某些杂菌分泌酶将青霉素分解掉而降低产量 B. 家庭制泡菜和变酸的葡萄酒表面长的菌膜分别是由酵母菌和醋酸菌形成，它们都是需氧型的原核生物 C. 发酵工程往往采用液体培养基进行发酵，发酵结束后会通过提取、分离和纯化的措施来获得单细胞蛋白产品 D. 与发酵工程相比，传统发酵技术中菌种来源于多种天然微生物，发酵过程经过严格灭菌，所以产品质量较高且品质稳定 【答案】A 【解析】 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产人类所需的产品，一般包括菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。发酵工程在食品工业、医药工业及其他工农业生产上有重要的应用价值。 【详解】A、用发酵工程生产青霉素时，若发酵罐和培养基灭菌不彻底污染了杂菌，会因为某些杂菌分泌酶将青霉素分解掉而降低产量，需要严格灭菌，A正确； B、家庭制泡菜和变酸的葡萄酒表面长的菌膜分别是由酵母菌和醋酸菌形成，但是酵母菌是兼性厌氧的真核生物，B错误； C、发酵工程往往采用液体培养基进行发酵，发酵结束后会通过提取、分离和纯化的措施来获得细胞代谢物，单细胞蛋白指微生物菌体，可通过过滤、沉淀方法获得，C错误； D、传统发酵技术的微生物是天然微生物，并未经过严格灭菌，D错误。 故选A。 4. 下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法，错误的是（ ） A. 土壤中各类微生物的数量不同，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离 B. 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同 C. 可根据菌落的特征，区分不同的微生物 D. 牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落 【答案】D 【解析】 【分析】从土壤中筛选目的微生物的流程一般为：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。通常选取菌落数在30-300的平板进行统计。 【详解】A、土壤中各种微生物数量不同，细菌大约为70%～90%，其次是放线菌，真菌最少，故不同类型微生物，要按不同稀释倍数进行，A正确； B、测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，需要选用的稀释范围不同，B正确； C、一般来说，可根据菌落的形状、大小、颜色等特征区分不同的微生物，C正确； D、验证选择培养基是否具有选择作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，若后者上的菌落数明显大于前者，说明前者具有筛选作用，D错误。 故选D。 5. 兰花高贵典雅，但是其种子在自然条件下萌发率很低；传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题。为了让名贵的兰花大量、快速地繁殖，就需要借助植物组织培养技术。下列有关说法错误的是（ ） A. 兰花植物组织培养过程中，生长素/细胞分裂素的值大于1，可促进诱导生芽 B. 兰花的传统分株繁殖属于无性繁殖 C. 相比于叶肉细胞、利用兰花芽尖的分生区细胞进行植物组织培养更容易成功 D. 利用兰花的花粉粒进行单倍体育种也需要用到植物组织培养技术 【答案】A 【解析】 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、生长素/细胞分裂素的值小于l时可促进诱导生芽，A错误； B、兰花的传统分株繁殖不涉及精卵结合过程，属于无性繁殖，B正确； C、由于茎尖分裂能力强，全能性高，故利用茎尖分生区比利用叶肉细胞进行植物组织培养更容易成功，C正确； D、植物组织培养可将外植体培育为完整植株，利用兰花的花粉粒进行单倍体育种也需要用到植物组织培养技术，D正确。 故选A。 6. 动物细胞融合技术就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。下列相关叙述错误的是（　　） A. 细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 B. 动物细胞融合技术可以用于研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等 C. 动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术的原理是完全相同的 D. 杂交瘤技术是动物细胞融合技术的重要应用，具有重要意义 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等。 【详解】A、细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，A正确； B、动物细胞融合已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段，B正确； C、动物细胞融合技术的原理是细胞膜的流动性，植物体细胞杂交技术包括细胞融合和植物组织培养两个环节，所以其原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，二者的原理不完全相同，C错误； D、杂交瘤技术是动物细胞融合技术的重要应用，具有重要意义，D正确。 故选C。 7. 悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述正确的是（　　） A. 培养管通常放置在95%的O2和5%CO2的环境中 B. 灌流式培养的细胞会贴壁生长，但不会出现接触抑制现象 C. 灌流速率越高，营养物质利用越充分 D. 灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质等。 【详解】A、进行动物细胞培养时通常置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，A错误； B、悬浮培养的动物细胞不出现贴壁生长现象，B错误； C、过高的灌流速率，都会导致培养的细胞没有及时利用营养物质，而使营养物质不能得到充分利用，C错误； D、悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻，而灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行，D正确； 故选D。 8. 紫草宁是从紫草愈伤组织细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。利用植物细胞培养生产的紫草宁是世界上首例药用植物细胞工程产品。下列关于植物细胞工程的说法，不正确的是（　　） A. 植物细胞培养生产紫草宁的原理是细胞增殖，所获得紫草宁为次生代谢产物，一般不是植物生长和生存所必需的 B. 植物组织培养时，应对外植体进行消毒处理以防止培养基及愈伤组织污染 C. 在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，可直接获得染色体加倍的细胞 D. 叶肉细胞往往带病毒且细胞的全能性较低，故培育脱毒植物适宜选茎尖而不选叶片 【答案】C 【解析】 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、植物细胞培养的主要目的是通过大规模的细胞培养使其增殖，以获得人类所需的细胞次生代谢产物，细胞次生代谢产物不是植物细胞生长所必需的，A正确； B、植物组织培养时，应对外植体进行消毒处理，培养基需要进行灭菌处理，这样可以防止杂菌污染，B正确； C、在培养愈伤组织时加入细胞融合的诱导剂，不能直接获得染色体加倍的细胞，因为植物细胞具有细胞壁，阻止了原生质体的融合，C错误； D、叶肉细胞往往带病毒且细胞的全能性较低，而茎尖不仅不带毒，而且全能性较高，故培育脱毒植物适宜选茎尖而不选叶片，D正确。 故选C。 9. 20世纪60年代，科学家尝试将番茄和马铃薯杂交，希望培育出一种地上结番茄，地下结马铃薯的超级作物，传统的杂交方法很难实现，科学家利用体细胞杂交技术得到了“番茄—马铃薯”杂种植株，但是没有出现地上结番茄，地下结马铃薯的现象。下列关于该技术的叙述，错误的是（ ） A. 培育“番茄—马铃薯”杂种植株的原理是植物细胞具有全能性和细胞膜的流动性 B. “番茄—马铃薯”杂种植株，没有出现地上结番茄，地下结马铃薯的原因是存在生殖隔离 C. 利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁得到原生质体，以免影响细胞间杂交 D. 原生质体融合是体细胞杂交的关键环节，可借助物理法、化学法进行融合 【答案】B 【解析】 【分析】植物体细胞杂交：来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。 【详解】A、植物体细胞杂交技术是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术，所以培育“番茄—马铃薯”杂种植株的原理是植物细胞具有全能性和细胞膜的流动性，A正确； B、“番茄—马铃薯”杂种植株没有出现地上结番茄，地下结马铃薯的原因是生物体内基因的表达相互干扰，B错误； C、植物细胞只有在去除细胞壁成为原生质体后才能融合，需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，以免影响细胞间杂交，去除细胞壁后可得到原生质体，C正确； D、原生质体融合是体细胞杂交的关键环节，可借助物理法（电融合法、离心法）、化学法（PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法）进行融合，D正确。 故选B。 10. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（　　） A. 单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养 B. 制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 C. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到胚胎进行质量筛选 D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 【答案】A 【解析】 【分析】1、单克隆抗体制备的两次筛选：①利用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞) ：②进行抗体检测，筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 2、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，此时胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段。 【详解】A、单倍体育种时，F1的花药不需要筛选直接进行组织培养，之后用秋水仙素处理单倍体幼苗使染色体加倍后，再进行筛选，A错误； B、制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞，去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞，B正确； C、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，挑取质量好，活性强的胚胎进行培养或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，C正确； D、制备单克隆抗体时，在筛选出杂交瘤细胞后，需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。上述筛选过程中涉及的抗体检测属于分子水平的筛选，所以，制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D正确。 故选A。 11. 水牛养殖是中国重要的农业产业之一。与传统繁殖方法相比，家畜胚胎工程技术可以挖掘动物的繁殖潜力，提升家畜种质资源质量。以下选项错误的是（ ） A. 取滋养层细胞进行DNA分析、选育优良品种，可以提升水牛种质资源 B. 注射促性腺激素促超数排卵和体外受精可以增加水牛胚胎数量 C. 胚胎移植使优良母畜免去了冗长的妊娠期，同时需要用免疫抑制剂处理代孕母畜 D. 同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，是动物无性繁殖或克隆的方法之一 【答案】C 【解析】 【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。 【详解】A、从囊胚中取滋养层细胞做DNA分析、选育优良品种，可以提升水牛种质资源，A正确； B、用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理，以获得大量卵母细胞，再通过体外受精可以增加水牛胚胎数量，B正确； C、受体母畜的生殖道对于植入的具有抗原性质的胚胎，一般来说，在同一物种之内并不产生排斥现象，因此不需要使用免疫抑制剂处理代孕母畜，C错误； D、同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，是动物无性繁殖或克隆的方法之一，D正确。 故选C。 12. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（　　） A. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定 B. 过程①通常使用合成培养基加入血清等天然成分 C. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理 D. 过程③常使用PEG或灭活的病毒诱导法 【答案】B 【解析】 【分析】分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取甲牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期的乙牛的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。 【详解】A、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A错误； B、过程①通常使用合成培养基加入血清等天然成分培养动物细胞，为细胞培养提供未知的营养成分，B正确； C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误； D、过程③常使用电刺激激活重组细胞，D错误。 故选B。 13. 种间体细胞核移植（iSCNT）将供体动物体细胞与来自不同种、科、目或纲的家畜（驯养动物）的去核卵母细胞融合并激活，以获得较多的重构胚，进而获得动物个体，是体细胞核移植（SCNT）中极具潜力的研究方向之一。由于多种野生动物数量稀少且呈持续下降趋势，因此采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，甚至无法完成，而从活体或死后不久的野生动物体内采集体细胞利用iSCNT技术获得动物个体，可在一定程度上维持濒危动物数量。下列叙述正确的是（ ） A. iSCNT技术必须通过显微操作技术将供体细胞的细胞核取出，然后注入去核的卵母细胞 B. 若从野生动物体内采集到的体细胞数目较少，可先用添加动物血清的固体培养基进行培养 C. iSCNT技术的原理是动物细胞核具有全能性，操作过程中可用Ca2+激活重构胚 D. 同一野生动物经iSCNT技术获得的多个重构胚中，遗传物质可能不完全相同 【答案】D 【解析】 【分析】①动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新的胚胎，继而发育成动物个体的技术，其原理是动物细胞核具有全能性。②重构胚是指人工重新构建的胚胎，具有发育成为完整个体的能力。可以用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。 【详解】A、在进行核移植时，可以通过显微操作技术，将供体细胞注入去核的卵母细胞，A错误； B、若从野生动物体内采集到的体细胞数目较少，可先用添加动物血清的液体培养基进行培养，以增加体细胞的数目，B错误； C、种间体细胞核移植（iSCNT）技术的原理是动物细胞核具有全能性，操作过程中可用Ca2+载体激活重构胚，C错误； D、在种间体细胞核移植（iSCNT）过程中，去核的卵母细胞来自不同种、科、目或纲的家畜（驯养动物），获得的重构胚胎的细胞质遗传物质可能不同，因此同一野生动物经iSCNT技术获得的多个重构胚中，遗传物质可能不完全相同，D正确。 故选D。 14. 下面表示“DNA粗提取与鉴定”实验的基本流程，相关叙述错误的是（ ） ①取材→②破碎细胞→③获得滤液→④去除杂质→⑤进一步提纯→⑥DNA鉴定 A. 本实验使用了体积分数为95%的酒精 B. 步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料 C. 步骤③中可以使用纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液 D. 步骤⑥向试管中加入二苯胺试剂后静置5min后即可呈现蓝色 【答案】D 【解析】 【分析】DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异，可以利用这些差异，选用适当的物理或化学方法对它们进行提取。DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精；DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 【详解】A、DNA不溶于酒精，尤其是体积分数为95%的冷冻酒精，而细胞中的某些物质可以溶解于酒精，本实验使用了体积分数为95%的酒精，目的是析出提取含杂质较少的DNA，A正确； B、肝细胞含有细胞核和众多的细胞器，步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料，B正确； C、步骤③中可以使用纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液，上清液中含有DNA，C正确； D、步骤⑥中DNA鉴定时向试管中加入二苯胺试剂后，应将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后可观察到蓝色，D错误。 故选D。 15. 基因工程操作离不开三种工具，下列有关说法不正确的是（ ） A. 用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒，可获得相同的黏性末端 B. 常用载体质粒的基本单位是脱氧核糖核苷酸，另外两种工具的基本单位是氨基酸 C. DNA聚合酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针” D. 限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程的工具： （1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂； （2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键； （3）载体：常用的载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。 【详解】A、构建基因表达载体时，常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒，以产生相同的黏性末端，以便于二者连接，A正确； B、在三种工具中最常用载体--质粒的化学本质是DNA，其基本单位是脱氧核糖核苷酸；另外两种工具酶的化学本质是蛋白质，其基本单位是氨基酸，B正确； C、DNA连接酶能够催化形成磷酸二酯键，是基因工程中的“分子缝合针”，C错误； D、限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力，即具有专一性，D正确。 故选C。 16. 基因工程中PCR扩增产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列关于PCR 及电泳鉴定叙述，错误的是（ ） A. PCR通过调节温度来控制DNA 双链的解聚及模板与引物的结合 B. DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度有关，与DNA分子的大小和构象无关 C. 因 DNA分子在凝胶载样缓冲液中带正电荷或负电荷，可用于电泳 D. 采用PCR技术对一个DNA进行扩增，若每个DNA分子的每条链都做模板，则第n次循环共需要引物2n个 【答案】B 【解析】 【分析】利用PCR可以在体外进行DNA片段的扩增。PCR利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。PCR仪实质上就是一台能够自动调控温度的仪器。一次PCR一般要经历30次循环。 【详解】A、PCR通过调节温度来控制DNA 双链的解聚及模板与引物的结合，如PCR通过90℃以上的高温解旋，72℃左右的温度下模板与引物结合，A正确； B、在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来，B错误； C、NA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷，在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，C正确； D、PCR 技术大量扩增目的基因时，第n-1次生成2n-1个DNA分子，第n次复制形成2n个DNA，所以需要的引物数目为（2n-2n-1）×2=2n，D正确。 故选B。 17. 甲、乙、丙三种限制酶均识别6个核苷酸序列，下列有关如图所示的黏性末端的说法，错误的是（　　） A. 甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的 B. 甲、乙具有相同的黏性末端，可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能 C. DNA连接酶的作用位点是b处 D. 切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段 【答案】C 【解析】 【分析】据图可知，切割形成甲、乙、丙黏性末端的限制酶识别序列与切割位点分别是—GAATTC—(在G与A之间切割)、—CAATTG—(在C与A之间切割)、—CTTAAG—(在C与T之间切割)。 【详解】A、据图可知，切割形成甲、乙、丙黏性末端的限制酶识别序列与切割位点分别是—GAATTC—(在G与A之间切割)、—CAATTG—(在C与A之间切割)、—CTTAAG—(在C与T之间切割)，即甲、乙、丙是由不同的限制酶切割产生的，A正确； B、甲、乙的黏性末端互补，所以甲、乙可以形成重组DNA分子；甲、丙的黏性末端不互补，所以甲、丙无法形成重组DNA分子，B正确； C、DNA连接酶可以恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而b处是氢键，C错误； D、甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段为 ，其中没有切割产生甲的限制酶的识别序列及酶切位点，所以切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段，D正确。 故选C。 18. 目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法正确的是（　　） A. 获得外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA聚合酶 B. 导入外源基因的精子能与从卵巢中获取的卵细胞直接完成②过程 C. ②采用体外受精技术，受精的标志是观察到3个极体 D. ④过程是胚胎移植，需移植到同种生理状态相同的代孕雌鼠子宫中 【答案】D 【解析】 【分析】分析图示可知，图示为转基因鼠的制备过程，①过程是将标记的外源基因导入成熟的精子中，②过程是体外受精，③过程为早期胚胎培养，④过程为胚胎移植。 【详解】A、获得外源基因一般需要用到限制酶，构建基因表达载体用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶，A错误； B、导入外源基因的精子需获能培养后才能与从卵巢中获取的卵细胞完成②过程，B错误； C、多数哺乳动物的第一极体不会进行减数第一次分裂，因为不会形成两个第二极体，在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体作为受精标志，C错误； D、④过程是胚胎移植，早期胚胎需移植到与供体有相同的生理基础的代孕雌鼠子宫内，以进行后续的胚胎发育过程，D正确。 故选D。 19. 基因工程自20世纪70年代起得到迅猛的发展，在农牧业、医药卫生和食品工业等方面得到广泛的应用。下列叙述错误的是（ ） A. 将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物 B. 目前利用基因工程技术可以生产细胞因子、抗体和疫苗等 C. 利用基因工程技术通过乳腺分泌乳汁生产药物叫作乳腺生物反应器 D. 将赖氨酸合成酶基因导入玉米中培育转基因玉米可提高玉米中赖氨酸含量 【答案】D 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【详解】A、将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，利用植物组织培养技术，可培育转基因抗病植物，A正确； B、利用基因工程技术可以将相关基因导入微生物，通过培养微生物来生产细胞因子、抗体和疫苗等，B正确； C、动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台，使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称，C正确； D、我国科学家将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米，获得富含赖氨酸的转基因玉米，D错误。 故选D。 20. 研究发现，胰岛素进入血液循环后容易被降解，糖尿病患者需要反复注射胰岛素才能达到治疗效果。科研人员借助蛋白质工程改变了胰岛素中的某些氨基酸，提高了胰岛素在患者体内的稳定性，延长了其作用时间。下列有关叙述错误的是（ ） A. 蛋白质工程的实质是在DNA分子水平上进行设计和改造蛋白质 B. 氨基酸序列的差异是影响胰岛素在患者体内是否稳定的原因之一 C. 蛋白质工程难度很大与蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构有关 D. 改造胰岛素应首先从设计胰岛素基因中的脱氧核苷酸序列出发 【答案】D 【解析】 【分析】蛋白质工程的基本流程：根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列（基因）→DNA合成，最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。 【详解】A、蛋白质工程基本流程为：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列（基因）→DNA合成，最终要利用基因工程上来解决蛋白质的合成，因此蛋白质工程的实质是在 DNA 分子水平上进行设计和改造蛋白质，A正确； B、氨基酸序列差异，导致胰岛素的空间结构有所改变，影响了它的功能，因此氨基酸序列的差异是影响胰岛素在患者体内是否稳定的原因之一，B正确； C、多数蛋白质除具有一级结构（即氨基酸顺序）外，还具有复杂的高级结构，即空间结构，而很多蛋白质的空间结构是人们目前还不清楚的，因此实施蛋白质工程的难度很大，C正确； D、胰岛素属于蛋白质，改造胰岛素应首先从设计预期的蛋白质结构出发，D错误。 故选D。 21. “黑寡妇”蜘蛛吐出的丝强过钢丝，用其吐出的丝织成的布比制造防弹背心所用纤维的强度高很多。科学家把“黑寡妇”蜘蛛体内蜘蛛丝蛋白基因，导入到山羊细胞内，培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器，获得了坚韧程度极强的蜘蛛丝蛋白，取名为“生物钢”，操作过程如下。下列说法错误的是（　　） A. 要在蜘蛛丝蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子 B. 显微注射将含有蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入山羊的受精卵中，进而发育成“蜘蛛羊” C. “蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”会造成环境污染 D. 乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点 【答案】C 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、启动子具有特异性，在构建基因表达载体时，要在蜘蛛丝蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子，A正确； B、受精卵的全能性较高，通过显微注射的方法将含有蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入山羊的受精卵中，进而发育成“蜘蛛羊”，B正确； C、“蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”，可以被生物降解，不会造成环境污染，C错误； D、乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点，D正确。 故选C。 22. 基因工程在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等领域得到广泛的应用。下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（ ） A. 将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中，即可获得乳腺生物反应器 B. 将赖氨酸合成酶基因导入玉米细胞，获得富含赖氨酸的转基因玉米 C. 将乙烯合成相关基因导入番茄，获得的延熟番茄储存时间大大延长 D. 我国科学家培育的Bt毒蛋白抗虫棉对棉铃虫具有较强的抗性 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物基因工程技术主要用于提高农作物的抗逆能力（如抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等）以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面。 2、动物基因工程方面，将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物（哺乳动物才会泌乳）的受精卵中，然后将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物，该转基因动物进入泌乳期后，通过分泌的乳汁获得所需药品，称之为乳腺生物反应器。 3、医药卫生方面，基因治疗是治疗遗传病最有效的手段。 【详解】A、转基因动物中常用的受体细胞为受精卵，通过显微注射技术将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊受精卵中，获得生产人凝血因子的乳腺生物反应器，A错误； B、我国科学家将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米，获得富含赖氨酸的转基因玉米，B错误； C、若将乙烯合成相关基因导入番茄，获得的转基因番茄能合成更多的乙烯，使得果实成熟加快，不利于储存，C错误； D、一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金芽孢杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而此毒蛋白对人畜无害，据此科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功地实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的抗虫棉，D正确。 故选D。 23. 赖氨酸是人类的必需氨基酸，玉米中的赖氨酸含量很低，且在加工过程中易被破坏而缺乏。为提高玉米中赖氨酸的含量，若将天冬氨酸激酶中第352位的苏氨酸变为异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变为异亮氨酸，可以使玉米种子中游离赖氨酸含量提高2倍。下列说法错误的是（　　） A. 蛋白质工程实质是通过改变基因的碱基排列顺序而改变蛋白质的结构 B. 蛋白质工程是分子水平的操作，其过程无需构建基因表达载体 C. 蛋白质工程理论上既能改造现有蛋白质，也能制造新的蛋白质 D. 对基因的改造会经常用到基因的定点突变技术来进行碱基的替换、增添等 【答案】B 【解析】 【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要；蛋白质工程的实质：定向改造或生产人类所需蛋白质，生产自然界没有的蛋白质； 2、蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构。蛋白质工程的基本途径是：根据预期的蛋白质功能设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，推测出相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因，再经表达过程产生预期蛋白质。 【详解】A、蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，是通过改变基因的碱基排列顺序而改变蛋白质的结构，A正确； B、基因表达载体的构建是基因工程的核心，基因工程是蛋白质工程的基础，故蛋白质工程都需要构建基因表达载体，B错误； C、蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，C正确； D、对蛋白质的改造是指通过基因工程中的定点诱变技术来进行碱基的替换、增添等，有目的改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸残基，以改善蛋白质的性质和功能，D正确。 故选B。 24. “三亲试管婴儿”为第四代试管婴儿，又叫卵浆置换技术。高龄产妇的胞浆已经老化，不利于胚胎的发育，选择高龄产妇自身活性较强的卵子的细胞核，借助年轻女性卵子的胞浆，将细胞核注入胞浆中，组合成新的卵子，就可以大幅度地提升受精卵质量，形成胚胎后移植到母体子宫。下列说法错误的是（　　） A. 该技术能大幅度改善卵子质量、解决卵子老化和精子质量不佳等问题 B. 该技术能极大地提高高龄患者的试管婴儿成功率 C. 年轻女性的卵子需要去掉细胞核，也就是去掉纺锤体—染色体复合物 D. “三亲试管婴儿”会导致伦理道德方面的质疑和争议 【答案】A 【解析】 【分析】试管婴儿技术主要用到了胚胎工程和细胞工程中的体外受精、胚胎移植、动物细胞培养、早期胚胎培养等技术。 【详解】A、结合题干可知，该技术能大幅度改善卵子质量、解决卵子老化的问题，但是没有解决精子不佳的问题，A错误； B、大龄女性容易产生质量不佳的卵子，而重组的卵细胞成活力较强，该技术能极大地提高高龄患者的试管婴儿成功率，B正确； C、年轻女性的卵子需要去掉细胞核，也就是去掉纺锤体—染色体复合物，因为处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞内没有细胞核，C正确； D、该技术孕育的后代，卵子的遗传物质来源于两个女性，会导致伦理道德方面的质疑和争议，D正确。 故选A。 25. 生物技术与工程学相结合，可研究、设计和加工生产各种生物工程产品。下列有关叙述正确的是（ ） ①由于外植体在植物组织培养过程中不感染病毒，用任何外植体都可制备脱毒苗 ②由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用 ③胚胎移植作为胚胎工程的前端技术环节，推动了胚胎工程其他技术的研究和应用 ④PCR反应过程可以在PCR扩增仪中自动完成，而后常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物 ⑤利用基因工程技术的乳腺生物反应器，可以让哺乳动物批量生产相应的药物 ⑥蛋白质工程仅以蛋白质结构为基础逆中心法则进行，就可以改造或制造新的蛋白质 A. ①③ B. ②④⑤ C. ②③④⑥ D. ①③④⑤⑥ 【答案】B 【解析】 【分析】PCR技术是对体内DNA复制过程的模仿，也需要模板、原料、酶和引物等。待扩 增的DNA分子是模板，原料是4种脱氧核苷三磷酸，即dNTP，N代表A、T、G、C四 种碱基。PCR过程 （图4-11） 包括多次循环，每个循环分为3个步骤。①变性：模板DNA 双链在高温下 （90～95 ℃） 氢键断裂，解旋成2条 DNA 单链，这个过程称为变性。 ②退火：温度降低（50～60 ℃）后，2个引物分别与各自互补的DNA单链结合，称为 退火。③延伸：分别以两条DNA单链为模板，4种脱氧核苷三磷酸为原料，耐高温的 Taq DNA 聚合酶在适宜的温度（约72 ℃）下，以引物与模板形成的小段DNA双链区为 起点，催化合成一条新的DNA互补链。 【详解】①虽然外植体在植物组织培养过程中不感染病毒，但外植体可能本身携带病毒，因此不是用任何外植体都可制备脱毒苗，一般用茎尖制备脱毒苗，①错误； ②iPS细胞为多功能干细胞，能分裂分化产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用，②正确； ③胚胎移植作为胚胎工程的最后技术环节，推动了胚胎工程其他技术的研究和应用，③错误； ④PCR反应过程可以在PCR扩增仪中自动完成，PCR的产物的分子量大小等不同，因此常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR的产物，④正确； ⑤利用基因工程技术的乳腺生物反应器，可以利用哺乳动物源源不断地批量生产相应的药物，⑤正确； ⑥蛋白质工程师指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，⑥错误。 故选B。 26. 经人工诱变后，部分细菌由于某种酶被破坏，其细胞中某些化学反应不能正常进行，就形成了营养缺陷型菌株，这在工业生产上有较广阔的应用前景。以下是实验人员利用影印法初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程，下列相关叙述错误的是（ ） A. 培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法 B. 根据用途分类，图中基本培养基属于选择培养基 C. 进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上 D. 为了完成对初检营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取菌落B进行接种培养，并进一步鉴定 【答案】D 【解析】 【分析】分析题图，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，则在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株。 【详解】A、培养基灭菌常用的方法是湿热灭菌法，主要使用高压蒸汽灭菌锅灭菌，A正确； B、根据用途分类，图中基本培养基(缺乏某种氨基酸)属于选择培养基，B正确； C、进行过程②培养时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，防止基本培养基中混入特定氨基酸，C正确； D、为了完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员应挑取菌落A进行接种培养(在相同的接种位置，在基本培养基中不能生长，而在完全培养基中能生长的就是目的菌)，并进行进一步鉴定，D错误。 故选D。 27. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列叙述错误的是（ ） A. 该方法依据的原理是醋酸菌在氧气、糖源充足时将酒精转化为醋酸 B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高醋酸菌失水过多 C. “衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的 D. “挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 【答案】A 【解析】 【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是—种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解为醋酸; 当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-35℃。 【详解】 A、该方法的原理是醋酸菌在氧气充足、缺少糖源时可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，A错误； B、加水的目的是对"酒"进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌（失水过多），B正确； C、醋酸菌对氧气的含量特别敏感，"衣" 位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C正确； D、醋酸菌是一种好氧菌，"挠搅"有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，D正确。 故选A。 【点睛】 28. 犬卵母细胞体外成熟和早期胚胎培养一直是犬科动物繁殖领域的世界级技术难题。青岛农业大学生命科学学院赵明辉副教授通过研究发现，无机盐离子的特殊配比可促进犬早期胚胎的基因组激活，而添加新鲜的维生素、组织液提取物等物质则可帮助犬早期胚胎维持正常的形态和细胞分化。下列有关胚胎工程的叙述，错误的是（　　） A. 为获得多个犬卵母细胞，可对雕犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵 B. 早期胚胎的体外培养液中还应该加入有机盐和血清等成分并需控制好温度 C. 早期胚胎包括桑椹胚、囊胚和原肠胚等，原肠胚期开始出现细胞分化形成原肠腔 D. 赵教授的发现揭示了营养物质的配比有时比浓度更重要，促生长因子作用很大 【答案】C 【解析】 【分析】早期胚胎培养用到发育培养基,包含无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清动物细胞培养用到液体培养基,包含糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清血浆。促性腺激素能促进超数排卵。 【详解】A、一定量的促性腺激素能促进超数排卵，得到多个犬卵母细胞，A正确； B、早期胚胎的体外培养液中还应该加入有机盐和血清等成分，另外需要控制温度、气体条件，保持无毒无菌环境，B正确； C、早期胚胎包括桑椹胚、囊胚和原肠胚等，但细胞分化开始于囊胚，C错误； D、无机盐离子的特殊配比可促进犬早期胚胎的基因组激活，说明营养物质的配比有时比浓度更重要，促生长因子作用很大，D正确。 故选C。 29. 关于“DNA的粗提取与鉴定”实验，下列说法错误的是（ ） A. 过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 B. 离心研磨液是为了加速DNA的沉淀 C. 在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色 D. 粗提取的DNA中可能含有蛋白质 【答案】B 【解析】 【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。 【详解】A、低温时DNA酶的活性较低，过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解，A正确； B、离心研磨液是为了使细胞碎片沉淀，B错误； C、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色，C正确； D、细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，可能有蛋白质不溶于酒精，在95%的冷酒精中与DNA一块儿析出，故粗提取的DNA中可能含有蛋白质，D正确。 故选B。 30. 筛选含有目的基因的受体细胞是基因工程中的重要环节。图中pUC18是一种常用质粒，其中ori为复制原点，Apr为青霉素抗性基因，lacZ’基因能合成某种酶，该酶能将无色染料X-gal变成蓝色。已知目的基因插入的位置如图所示，为快速筛选出只含重组质粒的大肠杆菌，平板培养基内除了大肠杆菌生长所必需的营养物质和琼脂外，还必须加入（ ） A. 青霉素 B. 无色染料X-gal C. 青霉素和无色染料X-gal D. 青霉素或无色染料X-gal 【答案】C 【解析】 【分析】如图是目的基因与pUC18质粒重组的示意图。图中Apr是青霉素抗性基因，lacZˊ基因控制合成某种酶能将无色染料X-gal变成蓝色，最终能在含无色染料X-gal的培养基上将含该基因的菌落染成蓝色。 【详解】由于目的基因由载体导入受体细胞，所以首先要加入与标记基因（青霉素抗性基因）相关的青霉素选择出含质粒的细胞，此时培养基上存活的细胞有两类，分别是含空质粒和含重组质粒的，由于目的基因的插入位点在lacZ’内部，故重组质粒的lacZ’被破坏，而不能将X-gal变成蓝色，所以X-gal是lacZ’基因是否被破坏的颜色指示剂，故要添加进去，所以培养基中需要加入青霉素和无色染料X-gal。 故选C。 二、非选择题：共40分。 31. 近年来，水环境中发现的不同程度的抗生素残留，不仅威胁水生生物的生存，还会损害微生物的生态平衡。氧氟沙星（OFL）（C18H2OFN3O4）是一种人工合成的广谱抗菌的氟喹诺酮类药物，某实验小组成功地从废水环境样品中分离得到能降解OFL的菌株A。筛选分离的操作过程如图所示。回答下列问题： （1）筛选能够降解OFL菌株时，富集培养基中需要加入__________作为唯一碳源或氨源。用于培养菌株A的固体培养基含有水、蛋白胨、酵母提取物和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为菌株A提供碳源、氮源和____________。 （2）过程Ⅲ所利用的接种方法是_________，与平板划线法不同的是，此方法还可以用于_________。过程Ⅱ中的总稀释次数为8次，在过程Ⅲ中，可以每隔24h统计一次菌落的数目，选取_________时的记录作为结果，三个培养基中长出的菌落数量分别是145、163、154，故推测A中细菌的数量为_________个/mL。 （3）该实验小组欲进一步探究初始OFL浓度对菌株A降解OFL能力的影响，请帮助其设计实验并写出实验思路：_____ 【答案】（1） ①. OFL ②. 维生素 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 统计样本内活菌数量 ③. 菌落数目稳定时 ④. 1.54×1011 （3）设置含一系列的OFL浓度的培养基，分别接种等量的菌株A，检测OFL的降解程度 【解析】 【分析】1、稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。 2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。 【小问1详解】 筛选能够降解OFL的菌株时，富集培养基中需要加入OFL来作为唯一碳源或氮源；蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂，主要为菌株A提供碳源、氮源和维生素。 【小问2详解】 过程Ⅲ利用的接种方法是稀释涂布平板法，与平板划线法相比，此方法还可以用于统计样品中活菌的数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果；在过程Ⅲ中，可以每隔24h统计一次菌落的数目，选取菌落数目稳定时时的记录作为结果，以保证所有菌落都能统计到。A中细菌的数量为（145+163+154）÷3（求均值）×108（稀释8次）÷0.1（取0.1mL涂布，最后求1mL菌液的菌落数）=1.54×1011个·mL⁻¹。 【小问3详解】 欲进一步探究初始OFL浓度对菌株A降解OFL能力的影响，自变量是初始OFL浓度，因变量是菌株A的降解效果，因此可设置含一系列的OFL浓度的培养基，分别接种等量的菌株A，检测OFL的降解程度。 32. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物（ADC），过程如图1所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自________。 （2）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交瘤细胞的特点是__________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行__________培养的方式进行扩大培养。 （3）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。 ①单克隆抗体除可以运载药物外，还有__________等作用。（答出2点即可） ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_________________。 （4）与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小，原因是____________________。 【答案】（1）人的乳腺癌细胞 （2） ①. 抗体检测 ②. 既能大量增殖，又能产生特定抗体 ③. 体外动物细胞 （3） ①. 作为诊断试剂、治疗疾病 ②. 癌细胞凋亡 （4）将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤 【解析】 【分析】由图1可知，①表示动物细胞的融合，②表示筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测筛选既能产生特定抗体，又能大量增殖的杂交瘤细胞。由图2可知，ADC不识别正常细胞，识别并结合乳腺癌细胞。 【小问1详解】 根据体液免疫的原理，要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择乳腺癌细胞作为抗原对小鼠，使小鼠经体液免疫产生已免疫的能产生乳腺癌相关抗原的抗体的B淋巴细胞，因此抗原应取至人的乳腺癌细胞。 【小问2详解】 ②表示筛选杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，故需要进行③克隆化培养和抗体检测，选择反应呈阳性的杂交瘤细胞；杂交瘤细胞含有已免疫的B淋巴细胞和瘤细胞的遗传物质，则具有两种细胞的优良性状，即具有无限增殖，且能产生特定抗体的特点；筛选出符合要求的杂交瘤细胞后，即可利用动物细胞培养技术进行体外培养，也可以注射到小鼠腹腔内培养。 【小问3详解】 ①ADC中的单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，让药物作用于乳腺癌细胞，而不作用于正常的细胞，可以降低乳腺癌治疗药物的副作用；单克隆抗体自身也能用于治疗疾病；单克隆抗体还可以作为诊断试剂，如检测相关基因有没有表达成蛋白质，或检测抗原的有无。 ②由图可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。 【小问4详解】 利用ADC中抗体与抗原特异性结合的特点，能将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副作用小），故与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小。 33. 下图表示获得抗除草剂转基因玉米的技术路线，其中含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。回答下列问题： （1）基因工程的核心是______，该步骤中通常选用两种不同的限制酶，其优点是__________。 （2）通过PCR技术扩增G基因，需要以__________为原料，扩增6次需要两种引物各________个。为了将获得的C基因准确连接至质粒上，需要在两种引物的__________（填“5’”或“3’”）端分别添加相应限制酶的识别序列；同时G基因必须正确插入到__________和__________之间，其中后者是位于基因前端的片段，其作用是_____________。 【答案】（1） ①. 基因表达载体的构建 ②. 防止酶切产物自身环化且可定向导入目的基因 （2） ①. 4种脱氧核糖核苷酸 ②. 63 ③. 5' ④. 终止子 ⑤. 启动子 ⑥. 它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出 【解析】 【分析】基因工程的步骤为：获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 基因工程的核心是基因表达载体的构建，该步骤中通常选用两种不同的限制酶，其优点是防止酶切产物自身环化且可定向插入目的基因。如果用一种限制酶来切割目的基因两端和质粒时，目的基因两端会出现相同的末端，可能使目的基因反向插入质粒中。这样在构建基因表达载体时,会出现3种情况：目的基因-目的基因、目的基因-运载体、运载体-运载体,这样会出现自身环化现象。 【小问2详解】 PCR技术其实就是模拟DNA复制过程，需要以4种脱氧核糖核苷酸为原料，目的基因的两条母链为模板。扩增1次需要2个引物，每种1个，扩增2次需要6个引物，每种3个，扩增3次需要14个引物，每种7个，依次扩增n次需要2n+1-2个引物，扩增6次需要27-2=126个引物，每种63个。引物是从子链的5'端往3'方向延伸，为了能让扩增出的目的基因与表达载体正确连接，则需要在引物的5'端分别添加相应限制酶的识别序列。在构建基因表达载体时，G基因必须正确插入到终止子和启动子之间，其中后者启动子是位于基因前端的片段，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人 类需要的蛋白质。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$