精品解析：宁夏回族自治区石嘴山市第一中学2023-2024学年高二下学期5月月考生物试题

石嘴山市第一中学2024学年高二下学期5月月考 生物学试题 一、单选题（共60分） 1. 下列有关PCR技术的叙述，错误的是（ ） A. 每一次循环后目的基因的数可以增加一倍 B. 模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用 C. PCR反应过程中加入的酶的显著特性是耐高温 D. PCR反应过程中需要3个不同的温度范围 2. 下列有关受精作用及胚胎发育的说法，正确的是（　　） A. 卵子是否受精的标志可以是卵细胞膜和透明带之间出现两个极体 B. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 C. 桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” D. 防止多精入卵的两道屏障是核膜反应和透明带反应 3. 下列关于单克隆抗体制备的叙述，错误的是（ ） A. 单克隆抗体制备运用了动物细胞融合和动物细胞培养技术 B. 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 C. 经小鼠腹腔内培养后，可从小鼠血液中分离得到大量单克隆抗体 D. 灭活病毒可使细胞相互凝聚并让细胞膜上的分子重新排布 4. β-hcg（人绒毛膜促性腺激素）是由滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。利用细胞工程方法以β-hcg为抗原制备单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ） A. 制备抗β-hcg单克隆抗体可以应用于医学诊断 B. 聚乙二醇可以诱导B淋巴细胞和B淋巴细胞融合 C. 小鼠注射β-hcg后，产生的血清抗体为单克隆抗体 D. 制备抗β-hcg单克隆抗体，可以将杂交瘤细胞注射到动物体内 5. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，其制备流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 采用激素注射促进雌鼠排出更多的卵母细胞 B. a处细胞和b处细胞内含有的核基因不同，所以全能性高低不同 C. 用胰蛋白酶处理a处细胞可获得分散的胚胎干细胞 D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养 6. 使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。临床上运用抗体-药物偶联物（ADC）将药物与抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。下列叙述错误的是（ ） A. ADC中的抗体主要是发挥治疗效应 B. ADC中的抗体能特异性识别肿瘤抗原 C. ADC中的抗体可以通过杂交瘤技术大量制备 D. 可以将ADC中的药物换成放射性同位素，标记单克隆抗体进行靶向放疗 7. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的二倍体野生花卉且其细胞中的黄酮类化合物可入药。为满足狼爪瓦松市场化需求，某科研小组利用植物细胞工程等技术手段，进行狼爪瓦松的扩大培养，具体过程如图所示（其中数字序号代表相应的处理过程）。下列有关分析正确的是（　　） A. 过程①前需要用70%酒精对植株甲进行消毒，以保证外植体不被污染 B. 过程③需要先在生长素/细胞分裂素的比值高的培养基中培养 C. 过程⑥利用愈伤组织分裂能力强的特点进行细胞培养可大量获得黄酮类化合物 D. 除了植株丙，植物乙、丁细胞核遗传物质与甲相同，属于同一物种 8. 下图为DNA 分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（ ） A. DNA 连接酶、限制酶、解旋酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 9. 牛胚胎移植试验的主要流程如下，下列相关叙述正确的是（　　） ①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④_______→⑤胚胎移植→⑥子代小牛 A. ①过程需要对供体注射性激素，目的是获得更多的卵母细胞 B. ③过程的理论基础是哺乳动物早期胚胎未与子宫建立组织上的联系 C. ④过程是“对胚胎进行检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚 D. ⑤过程成功率的高低主要取决于受体对移植胚胎的排斥程度 10. 下列关于哺乳动物受精的叙述，错误的是（ ） A. 自然情况下，受精和精子获能的过程都可在输卵管中 B. 卵细胞膜反应发生在精子入卵之后 C. 精子与卵子相遇时，会释放多种溶解卵细胞膜外结构酶 D. 受精成功的标志是卵细胞排出第二极体，形成雌原核 11. 如图是动物细胞培养过程中可能出现的接触抑制现象，下列有关叙述错误的是（ ） A 正常动物细胞培养过程中，贴壁细胞会出现接触抑制现象，悬浮型细胞不会出现接触抑制现象 B. 癌细胞无接触抑制因而培养时可形成多层细胞 C. 出现接触抑制时细胞也会继续分裂活动 D. 出现接触抑制后需要用胰蛋白酶处理后才可进行传代培养 12. 干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，临床上广泛用于治疗病毒感染性疾病。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，EcoRI、BamHI为限制酶。下列有关叙述错误的是（ ） A. 过程①依据的原理是DNA半保留复制，需要用到成对的引物 B. 过程②构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间 C. 过程③中Ti质粒的T-DNA能携带目的基因整合到根瘤农杆菌的染色体DNA中 D. 过程④需要控制培养基中植物激素的种类和比例，以防愈伤组织细胞发生再分化 13. 我国科学家利用体细胞诱导产生多能干细胞（iPS细胞），并将其注射到无法发育到成体阶段的四倍体囊胚中，最终获得克隆鼠，经鉴定证实克隆鼠确实从iPS细胞发育而来，并可繁殖后代。实验流程见下图，下列分析正确的是（　　） A. 克隆鼠的遗传物质来自于白鼠和灰鼠 B. 诱导多能干细胞技术可应用于组织器官移植 C. 本实验使用到体外受精和胚胎分割移植等技术 D. 应在培养液中添加适量的抗生素防止病毒感染 14. 《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需要。下列叙述错误的是（ ） A. 利用微型繁殖技术可获得大量樱桃脱毒苗，也能保持优良品种的遗传特性，培育无毒樱桃时常选取樱桃植株的茎尖或根尖分生区作为外植体 B. 过程①与过程②的培养基中生长素和细胞分裂素的比例一般不相同，且①必须避光处理 C. 富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素 D. 应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素 15. 研究人员用EcoRI和SmaI两种限制酶处理某DNA分子，图1为EcoRI切割该DNA分子后的结果；图2是酶切后的凝胶电泳图谱，其中1号泳道是DNA Marker，2号、3号、4号分别是EcoRI单独处理、SmaI单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（ ） A. 据图1可知EcoRI的识别序列为-GAATTC-，切割位点在G和A之间 B. 据图2可知琼脂糖凝胶的加样孔在A端，且连着电泳槽的负极 C. 据图2可知该DNA分子最可能是含1000个碱基对的链状DNA D. 据图2可知该DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个 16. 同尾酶是指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。下图为EcoRI、Bam-HI、Bgl I和MboI四种限制酶的识别序列及酶切位点。下列说法正确的是（ ） A. BamHI、BgⅡ、MboI属于同尾酶，他们的识别序列相同 B. 使用同尾酶构建基因表达载体时，切割位点的选择范围扩大 C. 选用两种不同的限制酶切割目的基因，都可以防止目的基因自身环化 D. 用DNA连接酶将BamHI和MboI形成的黏性末端连接后，可被二者重新切开 17. 模型构建是生命科学教学、研究和学习的一种重要方法。下图是生物概念模型，相关分析或理解错误的是（　　） A. 若图示为动物体细胞融合技术，则D可能是杂交瘤细胞 B. 若图示为基因工程，则C为重组质粒，D为受体细胞 C. 若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞 D. 若图示为试管婴儿技术，D为婴儿，C→D的过程在试管中进行 18. 下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述错误的是（　　） A. 图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B. 利用PEG融合法、灭活病毒诱导法和电融合法等方法可诱导细胞融合获得乙 C. 用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D. 丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 19. 科研人员用基因工程的方法从酵母菌细胞内获得了干扰素，临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病。下图为基因工程生产干扰素的部分操作，①②③④表示相关操作过程。下列说法错误的是（ ） A. ①-④过程中需要用到限制酶的操作是①②，需要用到DNA连接酶的是②③ B. ②过程操作的原理是DNA双链复制 C. 经③操作后得到的质粒中应含有启动子、终止子、干扰素基因、标记基因等 D. 干扰素基因在酵母菌细胞内转录时需要用到RNA聚合酶，但不需要解旋酶 20. 下列有关哺乳动物受精过程和胚胎早期发育叙述，选项中全部正确的是（ ） ①动物排出的卵子成熟程度不同，但都需要到MII期时才具备与精子受精的能力 ②自然情况下，在雌性动物的子宫内精子进入卵细胞完成受精过程 ③获能精子与卵细胞相遇时，会引起透明带反应和卵细胞膜反应 ④受精卵在输卵管内进行卵裂时，细胞数量增加，胚胎总体积并不增加 ⑤受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期 ⑥桑葚胚的内细胞团细胞逐渐分化，将来可发育成胎儿的各种组织 ⑦胚胎发育形成三个胚层是原肠胚时期，是遗传物质改变引起的 A. ①③④ B. ②④⑦ C. ①⑤⑥ D. ③④⑥ 21. 如图所示为培育转基因抗植物病毒番茄的过程示意图。下列叙述正确的是（ ） A. 目的基因和Ti质粒构建重组表达载体时需要用DNA聚合酶和DNA连接酶 B. 转基因抗植物病毒番茄是否培育成功可通过抗病毒接种实验进行鉴定 C. 过程A需要的启动子，位于基因的下游，有了它才能驱动基因转录出mRNA D. 过程B需要用Ca2+处理，以提高番茄细胞壁的通透性 22. 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1~4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是（ ） A. 若用PCR技术获取蛛丝蛋白基因，则设计的引物应分别结合在2、3部位 B. 若受体细胞为大肠杆菌，则蛛丝蛋白的加工需要细胞中内质网的参与 C. 若一个蛛丝蛋白基因扩增了4次，则共消耗引物32个 D. 在PCR仪中根据选定的引物至少需经过5次循环才可获得32个符合要求的目的基因 23. 采用植物组织培养技术得到的山药脱毒苗，可恢复其原有的优质高产特性，流程如下图，下列叙述错误的是（ ） A. 该技术体现了植物细胞具有全能性 B. 选择茎尖作为外植体可减少病毒感染 C 外植体需要进行灭菌处理，否则会导致培养过程中外植体边缘污染 D. 将外植体接种至固体培养基时，需注意方向不要倒插 24. 紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。科研人员为获得更多紫杉醇，尝试利用植物组织培养技术获取紫杉醇，操作流程图如下。下列相关叙述错误的是（ ） A. 用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织去除细胞壁，有利于原生质体的融合 B. 诱导愈伤组织形成需考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等 C. 细胞悬浮培养与继代培养有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长 D. 同一株植物不同部位的细胞经诱导培养后获得的植株基因型不一定相同 25. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（　　） A. 单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养 B. 制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 C. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选 D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 26. 下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图，下列叙述正确的是（　　） A. 步骤①应对切取的组织进行灭菌 B. 步骤②应向锥形瓶中加入无菌水制成细胞悬液 C. 培养液营养充足时，原代培养细胞不会出现接触抑制 D. ③→④分装时需调整到合适的细胞密度 27. 我国科学家培育克隆小猴的简要流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 克隆小猴的培育应用了动物体细胞核移植技术 B. 采集到的母猴卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期 C. 重构胚需用梯度离心或化学物质处理等方法激活 D. 克隆小猴的线粒体DNA不可能来自代孕母猴 28. 体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生、拯救濒危动物等方面有着广泛的应用前景。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是（ ） A. 哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的 B. 克隆动物与供核动物的遗传性状完全相同，原因是遗传物质主要分布在细胞核中 C. 利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物，可作为生物反应器生产医用蛋白 D. 将患者细胞核移植到胚胎干细胞，诱导重组干细胞发育形成的器官可避免免疫排斥反应 29. 下列关于生物工程的叙述，正确的是（ ） A. 转基因克隆动物和转基因试管动物的培育均需进行早期胚胎培养和胚胎移植 B. 将动物组织分散成单个细胞和筛选杂交瘤细胞均需酶处理 C. 用灭活病毒可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 30. 基因工程操作离不开三种工具，下列有关说法不正确的是（ ） A. 用相同的限制性内切核酸酶处理目的基因和质粒，可获得相同的末端 B. 载体质粒的基本单位是脱氧核糖核苷酸，另外两种工具的基本单位是氨基酸 C. DNA连接酶与DNA聚合酶催化合成的化学键相同，催化反应的底物也相同 D. 限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力 31. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素 B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害 C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关 D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制 32. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c 表示现代工程技术，①、②、③表示其结果，下列说法正确的是 A. 若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性 B. c可以表示单克隆抗体制备，③为获得的单克隆抗体 C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 D. 若 b 是试管动物技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 33. 下图表示某胚胎工程的流程图。据图分析，下列叙述不正确的是(　　) ①→早期胚胎培养→早期胚胎→②→新个体 A. 若该工程表示的是转基因技术，则①是含有基因表达载体的受精卵 B. 若该工程表示的是核移植技术，则①的形成需要卵母细胞的参与 C. 若该工程表示的是胚胎分割技术，则①可以是桑椹胚 D. ②需对受体注射促性腺激素，以达到超数排卵和同期发情的目的 34. 某同学利用洋葱为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定实验。下列有关叙述错误的是（　　） A. 该同学也可选择鸡血、猪肝等动物细胞为实验材料提取DNA，但方法可能有所不同 B. 将洋葱切碎加研磨液研磨、过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中 C. 向含有DNA的粗提取液中加入体积分数为95%的冷酒精后，出现的白色丝状物为DNA D. 鉴定DNA时，需先将DNA溶解在2mol/L NaCl溶液，再加入二苯胺试剂并进行沸水浴加热 35. 让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断，下列说法正确的是（　　） A. 图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等 B. 小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同，小羊a与羊N的性状表现相同 C. 若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故而它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状 D. 依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛” 二、非选择题（共40分） 36. 如图所示表示科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a~h为操作过程，请据图回答有关问题： （1）“试管牛”技术的操作流程是_______（用箭头将相关字母连接起来表示）。 （2）一般是对发育到_______（阶段）的早期胚胎进行过程c_______的处理，后经过d→e过程获得A牛和B牛的性别______（填“相同”“不同”或“不一定相同”）。 （3）d和f过程采用的技术是_______，进行该操作之前要对图中的“母牛”进行_______处理。该操作后的早期胚胎能在受体内存活的原因_____________________。 37. 某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题： （1）若抗盐基因序列已知，根据序列信息设计引物进行PCR扩增。PCR反应过程所需要的引物一般有________种，DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸，合成新的DNA链。 （2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。构建的基因表达载体除了含有目的基因、标记基因外，还要含有________。 （3）将目的基因导入植物细胞，采用最多的方法是________，其中用到的质粒上含有一段特殊的DNA片段，可带目的基因进入植物细胞，该片段称为________。 （4）在构建重组质粒时，选用上图中的SalI、HindⅢ两种酶酶切效果更好，而不是只用SalI酶，原因是________。质粒和抗盐基因同时用两种限制酶处理后利用________连接，可得到重组DNA分子。 （5）含有目的基因的农杆菌可根据标记基因进行筛选。若农杆菌在含有四环素和氨苄青霉素的培养基上都可以生长繁殖，农杆菌中________（填“是”或“否”）已含有目的基因，为什么？________。 38. 2019年1月24日，5只生物钟紊乱体细胞克隆猴登上中国期刊《国家科学评论》封面，标志着中国体细胞克隆技术走向成熟。利用这项技术可批量生产实验用疾病模型猴。如图是体细胞克隆猴的培育过程。请回答下列问题： （1）研究者选择出生夭折的猕猴作为供核个体，先取相应组织，剪碎，用______酶处理后，置于含有______的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 （2）克隆猴的获得属于______繁殖，该过程需要先获得卵母细胞，为获得更多的卵母细胞，需要对母猴进行______处理，然后对卵母细胞去核。实际上去掉的是______________________________ （3）核移植过程中用去核卵母细胞作为受体细胞的原因是①卵母细胞比较大，容易操作；②_____。 （4）非人灵长类的体细胞核移植非常困难，研究发现体细胞克隆猴胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。据此提出攻克技术难点的思路是________。 39. 玉米中含有β-胡萝卜素，为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题。 （1）甲方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是___。 （2）通过⑤获得“黄金大米”幼苗过程中，植物需要依赖培养基中的蔗糖，其中蔗糖的作用是___（请至少答出两点）。 （3）乙方案中，在体细胞杂交前需要用___酶除去细胞壁获得原生质体，获得原生质体后，将其置于___溶液中防止其吸水涨破。常用化学试剂____________诱导原生质体的融合。 （4）甲乙两方案在育种工作中都具有广泛的应用价值，两者共有的优点是___。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 石嘴山市第一中学2024学年高二下学期5月月考 生物学试题 一、单选题（共60分） 1. 下列有关PCR技术的叙述，错误的是（ ） A. 每一次循环后目的基因的数可以增加一倍 B. 模板DNA和引物能在每一次扩增中重复使用 C. PCR反应过程中加入的酶的显著特性是耐高温 D. PCR反应过程中需要3个不同的温度范围 【答案】B 【解析】 【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 【详解】A、PCR技术中每一次循环后目的基因的数量可以增加一倍，即呈指数形式的扩增，A正确； B、模板DNA能在每一次扩增中重复使用，而引物不能重复使用，B错误； C、PCR反应过程中包含高温变性，反应过程中加入的酶为耐高温的DNA聚合酶，C正确； D、PCR反应过程中需要3个不同的温度范围，即：变性温度在90℃以上，复性温度在50℃左右，延伸温度在72℃左右，D正确。 故选B。 2. 下列有关受精作用及胚胎发育的说法，正确的是（　　） A. 卵子是否受精的标志可以是卵细胞膜和透明带之间出现两个极体 B. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 C. 桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” D. 防止多精入卵的两道屏障是核膜反应和透明带反应 【答案】A 【解析】 【分析】受精过程是指雌雄配子经过相互识别融合成为受精卵的过程，早期胚胎发育经历的阶段有：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚。 【详解】A、卵子是否受精的标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体，受精完成的标志是雌雄原核融合，A正确； B、卵裂期胚胎中细胞数目在不断增加，而有机物的总量因为细胞呼吸消耗而减少，B错误； C、囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”，C错误； D、防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应，D错误。 故选A。 3. 下列关于单克隆抗体制备的叙述，错误的是（ ） A. 单克隆抗体制备运用了动物细胞融合和动物细胞培养技术 B. 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 C. 经小鼠腹腔内培养后，可从小鼠血液中分离得到大量单克隆抗体 D. 灭活病毒可使细胞相互凝聚并让细胞膜上的分子重新排布 【答案】C 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合，经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞并经专一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞；杂交瘤细胞集合了两个细胞的遗传物质，既能无限繁殖，又能产生特异性抗体，又能无限繁殖。单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。 【详解】A、单克隆抗体制备时需要将骨髓瘤细胞和浆细胞融合在一起，然后培养细胞，进行筛选，运用了动物细胞融合和动物细胞培养技术，A正确； B、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，都是利用了细胞膜的流动性，B正确； C、注入腹腔可以方便地获得大量抗体，首先注射方便，其次腹水收获容易，单克隆抗体产量高，C错误； D、病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，是细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，D正确。 故选C。 4. β-hcg（人绒毛膜促性腺激素）是由滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。利用细胞工程方法以β-hcg为抗原制备单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ） A. 制备抗β-hcg单克隆抗体可以应用于医学诊断 B. 聚乙二醇可以诱导B淋巴细胞和B淋巴细胞融合 C. 小鼠注射β-hcg后，产生的血清抗体为单克隆抗体 D. 制备抗β-hcg单克隆抗体，可以将杂交瘤细胞注射到动物体内 【答案】C 【解析】 【分析】制备单克隆抗体的诱导过程有：正常小鼠免疫处理、动物细胞的融合（物、化、生法）、杂交瘤细胞的筛选与培养、抗体检验阳性细胞培养、单克隆抗体的提纯。 【详解】A、制备抗β-hcg单克隆抗体可以应用于医学诊断，广泛运用于早孕的诊断，快速方便，A正确； B、诱导动物细胞融合的方法有：物理法、化学法（常用聚乙二醇）和灭活的病毒诱导，B正确； C、单克隆抗体是指由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，C错误； D、制备抗β-hcg单克隆抗体，可以将杂交瘤细胞注射到动物体内，属于体内培养，成本低，D正确。 故选C。 5. 小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，其制备流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 采用激素注射促进雌鼠排出更多的卵母细胞 B. a处细胞和b处细胞内含有的核基因不同，所以全能性高低不同 C. 用胰蛋白酶处理a处细胞可获得分散的胚胎干细胞 D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养 【答案】B 【解析】 【分析】1.胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。 2.ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。 【详解】A、为了获得更多的囊胚，可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，A正确； B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的，故核基因相同，B错误； C、运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞，首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，获得分散的胚胎干细胞，C正确； D、动物细胞培养时需要在5% CO2的培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，D正确。 故选B。 6. 使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。临床上运用抗体-药物偶联物（ADC）将药物与抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。下列叙述错误的是（ ） A. ADC中的抗体主要是发挥治疗效应 B. ADC中的抗体能特异性识别肿瘤抗原 C. ADC中的抗体可以通过杂交瘤技术大量制备 D. 可以将ADC中的药物换成放射性同位素，标记单克隆抗体进行靶向放疗 【答案】A 【解析】 【分析】高效的细胞毒素类药物可高效的细胞毒素类药物，但同时也会对正常细胞产生伤害，而将细胞毒素与抗体结合，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把细胞毒素一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。 【详解】A、ADC中抗体的作用是特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并与之结合，A错误； B、抗体能特异性识别抗原并与其结合，题中ADC中的抗体能特异性识别肿瘤抗原，B正确； C、杂交瘤细胞可以大量制备单克隆抗体，C正确； D、用放射性同位素标记的单克隆抗体可对肿瘤进行靶向治疗，D正确。 故选A。 7. 狼爪瓦松是一种具有观赏价值的二倍体野生花卉且其细胞中的黄酮类化合物可入药。为满足狼爪瓦松市场化需求，某科研小组利用植物细胞工程等技术手段，进行狼爪瓦松的扩大培养，具体过程如图所示（其中数字序号代表相应的处理过程）。下列有关分析正确的是（　　） A. 过程①前需要用70%酒精对植株甲进行消毒，以保证外植体不被污染 B. 过程③需要先在生长素/细胞分裂素比值高的培养基中培养 C. 过程⑥利用愈伤组织分裂能力强的特点进行细胞培养可大量获得黄酮类化合物 D. 除了植株丙，植物乙、丁细胞核遗传物质与甲相同，属于同一物种 【答案】C 【解析】 【分析】根据图分析，过程①为接种外植体，②为诱导脱分化形成愈伤组织，③为诱导再分化，④为诱变育种，⑤为植物体细胞杂交，⑥为植物细胞培养。 【详解】A、过程①前需要用70%酒精和次氯酸钠对植株甲进行消毒，以保证外植体不被污染， A错误； B、生长素/细胞分裂素的值高时有利于生根，该值低时有利于生芽，过程③需先生芽，再生根，B错误； C、利用植物细胞培养进行细胞产物的工厂化生产可以获得目标产 物，过程⑥利用愈伤组织分裂能力强的特点进行细胞培养可大量获得黄酮类化合物，C正确； D、植株丙经历了诱变处理，基因发生了突变，遗传物质与甲植株不同；植株乙是通过植物组织培养过程获得，属于无性繁殖，基因型不变，植株乙和植株甲细胞核遗传物质相同；植物丁是将原生质体进行了融合，则遗传物质翻倍与甲植株不相同，D错误。 故选C。 8. 下图为DNA 分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（ ） A. DNA 连接酶、限制酶、解旋酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶 D. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 【答案】D 【解析】 【分析】解旋酶：能使DNA分子两条链之间的氢键断裂，使DNA双链打开。 限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 DNA连接酶：连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键。 【详解】①处为氢键，是解旋酶的作用部位；②处为磷酸二酯键，是限制酶的作用部位；③处为两个DNA片段的缺口，是DNA连接酶的作用部位，催化磷酸二酯键的形成，即D正确。 故选D。 9. 牛胚胎移植试验的主要流程如下，下列相关叙述正确的是（　　） ①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④_______→⑤胚胎移植→⑥子代小牛 A. ①过程需要对供体注射性激素，目的是获得更多的卵母细胞 B. ③过程的理论基础是哺乳动物早期胚胎未与子宫建立组织上的联系 C. ④过程是“对胚胎进行检查”，可移植的胚胎应发育到囊胚或原肠胚 D. ⑤过程成功率的高低主要取决于受体对移植胚胎的排斥程度 【答案】B 【解析】 【分析】胚胎移植：指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、①过程需要注射促性腺激素，目的是获得更多的卵母细胞，A错误； B、③过程是以哺乳动物早期胚胎处于游离状态，未与子宫建立了组织上的联系为前提，B正确； C、④过程是“对胚胎进行质量检查”，可移植的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚，C错误； D、⑤过程成功率的高低主要决定于供、受体生理状况的一致性，受体对移入的胚胎基本上不会产生免疫排斥反应，D错误。 故选B。 10. 下列关于哺乳动物受精的叙述，错误的是（ ） A. 自然情况下，受精和精子获能的过程都可在输卵管中 B. 卵细胞膜反应发生在精子入卵之后 C. 精子与卵子相遇时，会释放多种溶解卵细胞膜外结构的酶 D. 受精成功的标志是卵细胞排出第二极体，形成雌原核 【答案】D 【解析】 【分析】哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。采集到的卵母细胞和精子，要分别在体外进行成熟培养和获能处理，然后才能用于体外受精。一般情况下，可以将获能的精子和培养成熟的卵子置于适当的培养液中共同培养一段时间，来促使它们完成受精。 【详解】A、自然情况下，精子获能、受精都是在雌性输卵管内完成的，A正确； B、精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程，它是防止多精子入卵受精的第二道屏障，B正确； C、获能后的精子与卵子相遇时，首先它释放出多种酶，以溶解卵细胞膜外的一些结构，同时借助自身的运动接触卵细胞膜，C正确； D、精子入卵后，卵子完成减数第二次分裂，因此卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙出现两个极体，D错误。 故选D。 11. 如图是动物细胞培养过程中可能出现的接触抑制现象，下列有关叙述错误的是（ ） A. 正常动物细胞培养过程中，贴壁细胞会出现接触抑制现象，悬浮型细胞不会出现接触抑制现象 B. 癌细胞无接触抑制因而培养时可形成多层细胞 C. 出现接触抑制时细胞也会继续分裂活动 D. 出现接触抑制后需要用胰蛋白酶处理后才可进行传代培养 【答案】C 【解析】 【分析】1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 【详解】A、正常动物细胞培养分为两类，一类细胞能够悬浮在培养液中生长增殖，另一类细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。贴壁细胞会出现接触抑制现象，悬浮型细胞不会出现接触抑制现象，A正确； B、癌细胞培养过程中不会出现接触抑制现象，因而癌细胞培养时可形成多层细胞，B正确； C、出现接触抑制时细胞将停止分裂活动，C错误； D、出现接触抑制后需利用胰蛋白酶消化后使贴壁生长的细胞变为单个游离细胞才可进行传代培养，D正确。 故选C。 12. 干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，临床上广泛用于治疗病毒感染性疾病。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程，EcoRI、BamHI为限制酶。下列有关叙述错误的是（ ） A. 过程①依据的原理是DNA半保留复制，需要用到成对的引物 B. 过程②构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间 C. 过程③中Ti质粒的T-DNA能携带目的基因整合到根瘤农杆菌的染色体DNA中 D. 过程④需要控制培养基中植物激素的种类和比例，以防愈伤组织细胞发生再分化 【答案】C 【解析】 【分析】PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链结合的2种引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶。农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 【详解】A、PCR是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外对DNA进行大量复制的技术，因为DNA分子的两条链均要复制，故需要成对的引物，A正确； B、启动子负责与RNA聚合酶结合启动转录，终止子负责终止转录，因此构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间才能进行表达，B正确； C、根瘤农杆菌是原核生物，无染色体，C错误； D、该过程是要利用愈伤组织细胞生产干扰素，因此应控制培养基中植物激素的种类和比例，以防止愈伤组织细胞发生再分化，D正确。 故选C。 13. 我国科学家利用体细胞诱导产生多能干细胞（iPS细胞），并将其注射到无法发育到成体阶段的四倍体囊胚中，最终获得克隆鼠，经鉴定证实克隆鼠确实从iPS细胞发育而来，并可繁殖后代。实验流程见下图，下列分析正确的是（　　） A. 克隆鼠的遗传物质来自于白鼠和灰鼠 B. 诱导多能干细胞技术可应用于组织器官移植 C. 本实验使用到体外受精和胚胎分割移植等技术 D. 应在培养液中添加适量的抗生素防止病毒感染 【答案】B 【解析】 【分析】据图分析，黑鼠的体细胞诱导产生多能干细胞（iPS细胞），灰鼠的胚胎经过特殊处理，形成四倍体囊胚，再将iPS细胞注射到四倍体囊胚中形成重组胚胎，经过胚胎移植，最终获得克隆鼠。 【详解】A、据题干分析可知，克隆鼠是从iPS细胞发育而来，故克隆鼠的遗传物质来自于黑鼠，白鼠只是提供发育场所，不提供遗传物质，A错误； B、诱导多能干细胞技术可增殖分化形成特定的组织和器官，应用于组织器官移植，减少免疫排斥反应，B正确； C、本实验运用到动物细胞培养、胚胎移植，没有使用到体外受精和胚胎分割移植等技术，C错误； D、过程中应在培养液中添加适量的抗生素防止细菌感染，D错误。 故选B。 14. 《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需要。下列叙述错误的是（ ） A. 利用微型繁殖技术可获得大量樱桃脱毒苗，也能保持优良品种的遗传特性，培育无毒樱桃时常选取樱桃植株的茎尖或根尖分生区作为外植体 B. 过程①与过程②的培养基中生长素和细胞分裂素的比例一般不相同，且①必须避光处理 C. 富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素 D. 应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素 【答案】D 【解析】 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、应用微型繁殖技术采用茎尖或根尖作为外植体可获得大量樱桃脱毒苗，由于茎尖或根尖病毒少，甚至无病毒，且茎尖或根尖分裂能力旺盛，因而可以选用作外植体。微型繁殖技术其本质是无性繁殖，因而可以保持优良品种的遗传特性，A正确； B、图中过程①为脱分化过程，过程②为再分化过程，由于培养基中生长素和细胞分裂素的比例会影响细胞分化的方向，因此这两个过程的培养基中生长素和细胞分裂素的比例一般不同，①是脱分化不需要光，B正确； C、生长素是由色氨酸经过一系列转变产生的，因此，用富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素，C正确； D、应用樱桃细胞培养可工厂化生产次生代谢产物槲皮素，D错误。 故选D。 15. 研究人员用EcoRI和SmaI两种限制酶处理某DNA分子，图1为EcoRI切割该DNA分子后的结果；图2是酶切后的凝胶电泳图谱，其中1号泳道是DNA Marker，2号、3号、4号分别是EcoRI单独处理、SmaI单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（ ） A. 据图1可知EcoRI的识别序列为-GAATTC-，切割位点在G和A之间 B. 据图2可知琼脂糖凝胶的加样孔在A端，且连着电泳槽的负极 C. 据图2可知该DNA分子最可能是含1000个碱基对的链状DNA D. 据图2可知该DNA分子中两种限制酶的酶切位点各有一个 【答案】C 【解析】 【分析】切割DNA 分子的工具是限制性内切核酸酶，又称限制酶。这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。它们能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 【详解】A、图1中DNA双链片段被EcoRI切割成两段，该片段序列是—GAATTC—，断开的部位是在G和A碱基之间，A正确； B、相对分子质量大小会影响物质在电泳时的迁移速率，DNA片段相对分子质量越大，迁移就越慢，分子量越小，迁移速度越快，据图2可知琼脂糖凝胶的加样孔在A端，B正确； C、2号、3号、分别是EcoRI单独处理、Smal单独处理后的电泳结果，两个泳道均只出现一个DNA片段，且分子量是1000，说明该DNA分子最可能是含1000个碱基对的环状DNA，C错误； D、图2中4号是EcoRI和Smal两种酶共同处理后的电泳结果，显示800bp和200bp两个条带，说明在该DNA分子中，两种限制酶的酶切位点各有一个，D正确。 故选C。 16. 同尾酶是指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。下图为EcoRI、Bam-HI、Bgl I和MboI四种限制酶的识别序列及酶切位点。下列说法正确的是（ ） A. BamHI、BgⅡ、MboI属于同尾酶，他们的识别序列相同 B. 使用同尾酶构建基因表达载体时，切割位点的选择范围扩大 C. 选用两种不同的限制酶切割目的基因，都可以防止目的基因自身环化 D. 用DNA连接酶将BamHI和MboI形成的黏性末端连接后，可被二者重新切开 【答案】B 【解析】 【分析】由于同种限制酶切割得到的目的基因或质粒的两端黏性末端相同，会出现自体相连的现象，所以为了保证目的基因与载体的正确连接，通常用两种识别序列和切割位点不同的限制酶同时处理含目的基因的DNA片段与载体。 【详解】A、BamHI、BgⅡ、MboI识别序列不同，但切出的黏性末端相同，属于同尾酶，A错误； B、同尾酶是指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶，使用同尾酶构建基因表达载体时，切割位点的选择范围扩大，不同的酶也能切割出相同的黏性末端，B正确； C、图中BamHI、BgⅡ、MboI识别序列不同，但切出的黏性末端相同，故选用两种不同的限制酶切割目的基因，不一定都可以防止目的基因自身环化，C错误； D、用DNA连接酶将BamHI和MboI形成的黏性末端连接后，碱基序列与BamHI识别的序列不同，由于限制酶具有专一性，故不可被BamHI重新切开，D错误。 故选B。 17. 模型构建是生命科学教学、研究和学习的一种重要方法。下图是生物概念模型，相关分析或理解错误的是（　　） A. 若图示为动物体细胞融合技术，则D可能是杂交瘤细胞 B. 若图示为基因工程，则C为重组质粒，D为受体细胞 C. 若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞 D. 若图示为试管婴儿技术，D为婴儿，C→D的过程在试管中进行 【答案】D 【解析】 【分析】试管婴儿是体外受精－胚胎移植技术的俗称，是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。 【详解】A、若图示为动物体细胞融合技术，D是C经过筛选得到的，则D可能是杂交瘤细胞，A正确； B、若图示为基因工程，则C为重组质粒，是目的基因和载体相连形成的，D为受体细胞，为重组质粒的表达提供条件，B正确； C、动物核移植需要将供体的细胞核或细胞移植到去核卵母细胞中，若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞，此时A可能是细胞核供体细胞，C正确； D、若图示为试管婴儿技术，D为婴儿，C→D的早期胚胎发育过程在试管中进行，但胚胎移植之后的过程在母体子宫中进行，D错误。 故选D。 18. 下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述错误的是（　　） A. 图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B. 利用PEG融合法、灭活病毒诱导法和电融合法等方法可诱导细胞融合获得乙 C. 用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 D. 丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 【答案】C 【解析】 【分析】1、甲表示抗原，乙表示杂种细胞，丙表示杂交瘤细胞，丁表示能产生特异性抗体的杂交瘤细胞； 2、单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，两次抗体检测：专一抗体检验阳性。 【详解】A、实验目的是制备抗人体胃癌的单克隆抗体，因此给小鼠注射的甲应是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原，A正确； B、动物细胞融合的方法有聚乙二醇、灭活的病毒和电融合法等方法，均可诱导动物细胞融合获得乙，B正确； C、用特定的选择培养基对乙筛选，自身融合的细胞以及未融合的细胞均不能生长，C错误； D、丙为杂交瘤细胞，为了筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁，D正确。 故选C。 19. 科研人员用基因工程的方法从酵母菌细胞内获得了干扰素，临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病。下图为基因工程生产干扰素的部分操作，①②③④表示相关操作过程。下列说法错误的是（ ） A. ①-④过程中需要用到限制酶的操作是①②，需要用到DNA连接酶的是②③ B. ②过程操作的原理是DNA双链复制 C. 经③操作后得到的质粒中应含有启动子、终止子、干扰素基因、标记基因等 D. 干扰素基因在酵母菌细胞内转录时需要用到RNA聚合酶，但不需要解旋酶 【答案】A 【解析】 【分析】如图所示，过程①是从淋巴细胞中提取干扰素基因，过程②是扩增干扰素基因，常用PCR，过程③将干扰素基因和细菌质粒进行重组成带干扰素基因的质粒，过程④是将重组质粒导入酵母菌，最后酵母菌分泌干扰素。 【详解】A、过程①是从淋巴细胞中提取干扰素基因，该过程需要用到限制酶，过程③是将干扰素基因和细菌质粒进行重组，该过程需要用到限制酶和DNA连接酶，故①-④过程中需要用到限制酶的操作是①③，需要用到DNA连接酶的是③，A错误； B、过程②是扩增干扰素基因，常用PCR，其原理是DNA双链复制，B正确； C、过程③将干扰素基因和细菌质粒进行重组成带干扰素基因的质粒，即为基因表达载体的构建，经③操作后得到的质粒中应含有启动子、终止子、干扰素基因（目的基因）、标记基因等，C正确； D、DNA转录时，需要RNA聚合酶催化，因此干扰素基因在酵母菌细胞内转录时需要用到RNA聚合酶，但不需要解旋酶，D正确。 故选A。 20. 下列有关哺乳动物受精过程和胚胎早期发育的叙述，选项中全部正确的是（ ） ①动物排出的卵子成熟程度不同，但都需要到MII期时才具备与精子受精的能力 ②自然情况下，在雌性动物的子宫内精子进入卵细胞完成受精过程 ③获能精子与卵细胞相遇时，会引起透明带反应和卵细胞膜反应 ④受精卵在输卵管内进行卵裂时，细胞数量增加，胚胎总体积并不增加 ⑤受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期 ⑥桑葚胚的内细胞团细胞逐渐分化，将来可发育成胎儿的各种组织 ⑦胚胎发育形成三个胚层是原肠胚时期，是遗传物质改变引起的 A. ①③④ B. ②④⑦ C. ①⑤⑥ D. ③④⑥ 【答案】A 【解析】 【分析】受精卵形成后即在输卵管内进行有丝分裂，开始发育。胚胎发育早期，有一段时间是在透明带内进行分裂，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，这种受精卵的早期分裂称为卵裂。根据胚胎形态的变化，可将早期发育的胚胎分为以下几个阶段：桑葚胚、囊胚、原肠胚。 【详解】①动物排出的卵子成熟程度不同，但都需要到MII期时才具备与精子受精的能力，①正确； ②自然情况下，在雌性动物的输卵管内精子进入卵细胞完成受精过程，②错误； ③获能精子与卵细胞相遇时，会引起透明带反应和卵细胞膜反应，阻止多精入卵，③正确； ④受精卵在输卵管内进行卵裂时，细胞数量增加，胚胎总体积并不增加，④正确； ⑤受精卵发育为囊胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入原肠胚期，⑤错误； ⑥囊胚的内细胞团细胞逐渐分化，将来可发育成胎儿的各种组织，⑥错误； ⑦胚胎发育形成三个胚层是原肠胚时期，是基因选择性表达的结果，⑦错误。所以A正确，BCD错误。 故选A。 21. 如图所示为培育转基因抗植物病毒番茄的过程示意图。下列叙述正确的是（ ） A. 目的基因和Ti质粒构建重组表达载体时需要用DNA聚合酶和DNA连接酶 B. 转基因抗植物病毒番茄是否培育成功可通过抗病毒接种实验进行鉴定 C. 过程A需要的启动子，位于基因的下游，有了它才能驱动基因转录出mRNA D. 过程B需要用Ca2+处理，以提高番茄细胞壁的通透性 【答案】B 【解析】 【分析】过程A是构建基因表达载体，过程B是将重组DNA导入受体细胞，C是通过组织培养技术获得转基因番茄。 【详解】A、目的基因和Ti质粒构建重组表达载体时需要用限制酶（分子的手术刀）和DNA连接酶（分子缝合针），A错误； B、转基因抗植物病毒番茄是否培育成功可从个体水平通过抗病毒接种实验进行鉴定，B正确； C、启动子应位于基因的上游，有了它才能驱动基因转录出 mRNA，C错误； D、Ca2+处理只能提高农杆菌细胞的细胞壁的通透性，不能提高番茄细胞壁的通透性，D错误。 故选B。 22. 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1~4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是（ ） A. 若用PCR技术获取蛛丝蛋白基因，则设计的引物应分别结合在2、3部位 B. 若受体细胞为大肠杆菌，则蛛丝蛋白的加工需要细胞中内质网的参与 C. 若一个蛛丝蛋白基因扩增了4次，则共消耗引物32个 D. 在PCR仪中根据选定的引物至少需经过5次循环才可获得32个符合要求的目的基因 【答案】A 【解析】 【分析】1、基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 2、PCR 反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链结合的2种引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶；同时通过控制温度使 DNA复制在体外反复进行。扩增的过程是：目的基因DNA 受热变性后解为单链，引物与单链相应互补序列结合；然后以单链 DNA为模板，在 DNA聚合酶作用下进行延伸，即将4种脱氧核苷酸加到引物的3'端，如此重复循环多次。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。 【详解】A、PCR是一项根据DNA半保留复制的原理体外合成DNA的技术，DNA复制延子链5′→3′进行，由于引物要延伸子链，子链和模板链反向平行，因此根据引物的延伸方向可知图中与引物结合的部位是2、3，A正确； B、大肠杆菌是原核生物，无内质网结构，B错误； C、利用PCR扩增一个基因要加入2个引物，若一个蛛丝蛋白基因扩增了4次，共得到16个DNA分子，需要消耗16×2-2=30个引物，C错误； D、根据PCR扩增的特点，1个DNA分子，经过n次复制后，得到个DNA。在PCR仪中根据选定的引物经过5次循环，得到个产物，这32个产物中，还有包含非蛛丝蛋白基因的片段，因此，在PCR仪中根据选定的引物经过5次循环无法获得32个符合要求的目的基因，D错误。 故选A。 23. 采用植物组织培养技术得到山药脱毒苗，可恢复其原有的优质高产特性，流程如下图，下列叙述错误的是（ ） A. 该技术体现了植物细胞具有全能性 B. 选择茎尖作为外植体可减少病毒感染 C. 外植体需要进行灭菌处理，否则会导致培养过程中外植体边缘污染 D. 将外植体接种至固体培养基时，需注意方向不要倒插 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养技术： 1、过程：离体的植物组织，器官或细胞(外植体)→愈伤组织→胚状体→植株(新植体)。 2、原理：植物细胞的全能性。 3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等) ；②一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素)。 【详解】A、该流程是利用植物组织培养技术得到的山药脱毒苗，植物组织培养技术体现了植物细胞具有全能性，A正确； B、芽尖等分生组织分裂旺盛，且含病毒少，取材时常选用其作为外植体，可减少病毒感染，B正确； C、外植体需要进行消毒处理，不能灭菌处理，灭菌处理会破坏外植体的活性，C错误； D、将外植体接种至固体培养基时，需注意方向不要倒插，倒插可能会导致外植体与培养基的接触不良，影响其对营养物质的吸收和利用。同时，倒插还可能使外植体的伤口部分暴露在空气中，增加感染的风险，D正确。 故选C。 24. 紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。科研人员为获得更多紫杉醇，尝试利用植物组织培养技术获取紫杉醇，操作流程图如下。下列相关叙述错误的是（ ） A. 用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织去除细胞壁，有利于原生质体的融合 B. 诱导愈伤组织形成需考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等 C. 细胞悬浮培养与继代培养有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长 D. 同一株植物不同部位的细胞经诱导培养后获得的植株基因型不一定相同 【答案】A 【解析】 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，其过程是：离体的植物组织、器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。 【详解】A、用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织去除细胞壁，可以得到悬浮细胞，并不是将原生质体进行融合，A错误； B、诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位（幼嫩部位较易成功）、培养基组成和激素种类（主要是生长素和细胞分裂素）等，B正确； C、 液体培养基中细胞悬浮培养与继代培养，可以有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长，C正确； D、同一株植物不同部位的细胞经诱导培养后获得的植株基因型不一定相同，如：花粉粒培养获得的愈伤组织细胞与正常体细胞的基因型不同，D正确。 故选A。 25. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（　　） A. 单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养 B. 制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 C. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选 D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 【答案】A 【解析】 【分析】1、单克隆抗体制备的两次筛选：①利用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞) ：②进行抗体检测，筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 2、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，此时胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段。 【详解】A、单倍体育种时，F1的花药不需要筛选直接进行组织培养，之后用秋水仙素处理单倍体幼苗使染色体加倍后，再进行筛选，A错误； B、制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞，去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞，B正确； C、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，挑取质量好，活性强的胚胎进行培养或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，C正确； D、制备单克隆抗体时，在筛选出杂交瘤细胞后，需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。上述筛选过程中涉及的抗体检测属于分子水平的筛选，所以，制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D正确。 故选A。 26. 下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图，下列叙述正确的是（　　） A. 步骤①应对切取的组织进行灭菌 B. 步骤②应向锥形瓶中加入无菌水制成细胞悬液 C. 培养液营养充足时，原代培养细胞不会出现接触抑制 D. ③→④分装时需调整到合适的细胞密度 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 【详解】A、步骤①的操作需要在无菌环境中进行，但不能对切取的组织进行灭菌，否则会杀死切取的组织，A错误； B、动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，分散成单个细胞，制成细胞悬液，故步骤②应向锥形瓶中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，制成细胞悬液，B错误； C、原代培养的过程中，大多数动物细胞培养时都会出现接触抑制现象，C错误； D、③→④分装时需调整到合适的细胞密度，因为若密度过大细胞直接仍存在接触抑制，D正确。 故选D。 27. 我国科学家培育克隆小猴的简要流程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 克隆小猴的培育应用了动物体细胞核移植技术 B. 采集到的母猴卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期 C. 重构胚需用梯度离心或化学物质处理等方法激活 D. 克隆小猴的线粒体DNA不可能来自代孕母猴 【答案】C 【解析】 【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。由此可见，克隆动物的形成需采用核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术，属于无性生殖。 【详解】A、据图分析，将胎猴体细胞中的细胞核取出，移植到去核的卵母细胞中形成重构胚，应用了动物体细胞核移植技术，A正确； B、采集到的母猴卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期，才能用于核移植，B正确； C、不能使用梯度离心的方法激活重构胚，可以使用电刺激等方法，C错误； D、克隆小猴的线粒体DNA来自于去核的卵母细胞，不可能来自代孕母猴，D正确。 故选C。 28. 体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生、拯救濒危动物等方面有着广泛的应用前景。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是（ ） A. 哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的 B. 克隆动物与供核动物的遗传性状完全相同，原因是遗传物质主要分布在细胞核中 C. 利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物，可作为生物反应器生产医用蛋白 D. 将患者细胞核移植到胚胎干细胞，诱导重组干细胞发育形成的器官可避免免疫排斥反应 【答案】B 【解析】 【分析】动物体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。 【详解】A、由于胚胎细胞的分裂能力比体细胞强，所以哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的，A正确； B、克隆动物与供核动物的遗传性状不完全相同，原因是供核动物的细胞质中的遗传物质也会影响克隆动物的性状，B错误； C、利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产珍贵的医用蛋白，C正确； D、以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞诱导形成的组织、器官等，可避免免疫排斥反应，D正确。 故选B。 29. 下列关于生物工程的叙述，正确的是（ ） A. 转基因克隆动物和转基因试管动物的培育均需进行早期胚胎培养和胚胎移植 B. 将动物组织分散成单个细胞和筛选杂交瘤细胞均需酶处理 C. 用灭活病毒可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 【答案】A 【解析】 【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。 2、培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）。 【详解】A、由于目前尚无体外全胚胎培养技术，因此转基因克隆动物和转基因试管动物的培育均需进行早期胚胎培养和胚胎移植，A正确； B、将动物组织分散成单个细胞需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，筛选杂交瘤细胞不需要，B错误； C、灭活病毒可诱导动物细胞融合，但不能诱导植物原生质体融合，C错误； D、某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目不同，前者是后者的两倍，D错误。 故选A。 30. 基因工程操作离不开三种工具，下列有关说法不正确的是（ ） A. 用相同的限制性内切核酸酶处理目的基因和质粒，可获得相同的末端 B. 载体质粒的基本单位是脱氧核糖核苷酸，另外两种工具的基本单位是氨基酸 C. DNA连接酶与DNA聚合酶催化合成化学键相同，催化反应的底物也相同 D. 限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离获得，具有识别特定核苷酸序列的能力 【答案】C 【解析】 【分析】1、限制性内切核酸酶（限制酶）能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 2、DNA连接酶将双连DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 3、基因工程中使用的载体有质粒、噬菌体、动植物病毒等。 【详解】A、限制性内切核酸酶具有特异性，用相同的限制性内切核酸酶处理目的基因和质粒，可获得相同的末端，A正确； B、载体质粒是一种双链环状DNA分子，其基本单位是脱氧核糖核苷酸，另外两种工具（限制酶、DNA连接酶）的化学本质都是蛋白质，蛋白质的基本单位是氨基酸，B正确； C、DNA连接酶催化反应的底物是DNA片段，DNA聚合酶催化反应的底物是脱氧核苷酸，二者催化合成的化学键都是磷酸二酯键，C错误； D、限制性内切核酸酶主要从原核生物中分离获得，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，D正确。 故选C。 31. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素 B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害 C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关 D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制 【答案】C 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件： （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。 （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。 （3）温度和PH：36.5℃+0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2 （维持培养液的pH）。 【详解】A、动物细胞培养时，为防止培养过程发生污染要加入抗生素，抗生素可以抑制杂菌生长，A正确； B、每隔一段时间更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害，同时还可补充细胞所需营养物质，B正确； C、据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且随着浓度的增加和培养时间的延长，抑制作用增强，即与浓度和作用时间都呈正相关，C错误； D、图乙的结果进一步表明，随着华蟾素浓度的增加，处于间期的细胞增多，则华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞进入分裂期，可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制 ，D正确。 故选C。 32. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c 表示现代工程技术，①、②、③表示其结果，下列说法正确的是 A. 若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性 B. c可以表示单克隆抗体的制备，③为获得的单克隆抗体 C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 D. 若 b 是试管动物技术，则②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能 【答案】D 【解析】 【详解】【分析】由题文和图示分析可知：该题以“动物细胞培养”等为主线，综合考查动物细胞核移植技术、生产单克隆抗体、胚胎移植、试管动物技术等相关知识。 【详解】若a是核移植技术，则①反映了动物体细胞的细胞核具有全能性，A错误；单克隆抗体的制备，需要借助动物细胞培养技术来培养杂交瘤细胞等细胞，但不涉及胚胎移植，因此c不能表示单克隆抗体的制备，B错误；①②③中都需要进行胚胎移植，作为受体的动物品种必须是同种的健康的雌性动物，不一定为珍稀动物，C错误；若 b 是试管动物技术，则借助体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，②为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，D正确。 【点睛】理清核移植技术的概念及原理、生产单克隆抗体的过程、试管动物技术的内涵和胚胎移植的意义，据此，结合概念图并利用所学的知识对各选项做出准确的判断。 33. 下图表示某胚胎工程的流程图。据图分析，下列叙述不正确的是(　　) ①→早期胚胎培养→早期胚胎→②→新个体 A. 若该工程表示的是转基因技术，则①是含有基因表达载体的受精卵 B. 若该工程表示的是核移植技术，则①的形成需要卵母细胞的参与 C. 若该工程表示的是胚胎分割技术，则①可以是桑椹胚 D. ②需对受体注射促性腺激素，以达到超数排卵和同期发情的目的 【答案】D 【解析】 【详解】若该工程表示的是转基因技术，则新个体为转基因动物，①是含有基因表达载体的受精卵，A项正确；若该工程表示的是核移植技术，则新个体为克隆动物，①是将细胞核注入到处于减Ⅱ中期的卵母细胞中（即细胞核移植后）得到的重组细胞，B项正确；若该工程表示的是胚胎分割技术，则①可以是处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎，C项正确；②表示胚胎移植技术，在胚胎移植时，需对供体注射促性腺激素，以达到超数排卵的目的，D项错误。 【点睛】解答本题需抓住问题的实质：转基因、核移植、或体外受精等技术获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代，因此胚胎移植是胚胎工程中最后一道程序。在此基础上结合基因工程的操作程序、细胞核移植的过程、胚胎移植过程、胚胎分割技术操作时间等分析各选项。 34. 某同学利用洋葱为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定实验。下列有关叙述错误的是（　　） A. 该同学也可选择鸡血、猪肝等动物细胞为实验材料提取DNA，但方法可能有所不同 B. 将洋葱切碎加研磨液研磨、过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置几分钟后，DNA存在于沉淀物中 C. 向含有DNA的粗提取液中加入体积分数为95%的冷酒精后，出现的白色丝状物为DNA D. 鉴定DNA时，需先将DNA溶解在2mol/L NaCl溶液，再加入二苯胺试剂并进行沸水浴加热 【答案】B 【解析】 【分析】1、DNA的粗提取与鉴定的实验原理是： ①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的； ②DNA不容于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离； ③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响； ④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色； 2、DNA粗提取与鉴定的实验中，不同操作步骤中加水的作用不同，破碎细胞获取含DNA的滤液时加蒸馏水的目的是使血细胞涨破；出去滤液中的杂质时，加蒸馏水的目的是降低NaCl溶液浓度使DNA析出。 【详解】A、不同类型的生物材料(如植物细胞、动物细胞、微生物)中DNA的提取过程虽有相似之处，但也存在差异。例如，使用动物血液作为实验材料时，通常利用红细胞破裂释放出的DNA进行提取，而不需要研磨和去除细胞壁的过程，A正确； B、在DNA粗提取实验中，通 常首先通过研磨和加入适量的洗涤剂与食盐溶液来释放细胞中的DNA，并破坏细胞膜和其他细胞结构。然后，在此混合液中DNA会溶解在溶液中，并随同蛋白质、多糖等其他物质一起存在。DNA在一定浓度的NaCl溶液中溶解度较高，所以初步处理后的滤液经过离心或静置 后，DNA不会形成沉淀，而是在溶液中，B错误； C、在DNA提取过程中，当加入高浓度酒精后，DNA会因不溶于酒精而析出，形成白色的絮状或丝状沉淀，这就是粗提取得到的DNA，C正确； D、鉴定DNA时，常用的方法之一就是二苯胺显色反应。需要将DNA样品溶解在适当的NaCl溶液中，然后加入二苯胺试剂，在沸水中加热后，若存在DNA，则反应液会变为蓝色，D正确。 故选B。 35. 让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断，下列说法正确的是（　　） A. 图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等 B. 小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同，小羊a与羊N的性状表现相同 C. 若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故而它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状 D. 依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛” 【答案】D 【解析】 【分析】据图分析，图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞去核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行胚胎分割移植技术获得小羊 abc。 【详解】A、图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等，没有细胞融合，A错误； B、题图中由早期胚胎到小羊a、小羊b、小羊c的过程利用了胚胎分割、胚胎移植技术，由于这些个体都是由一个细胞（重组细胞）发育而来的，故三者表现出的性状应该基本相同，B错误； C、由重组细胞细胞培养、胚胎分割、胚胎移植后获得的小羊a，其细胞核遗传物质来自羊N，细胞质遗传物质来自羊O，小羊a的性状与羊N不完全相同，羊N细胞的线粒体中的遗传物质不会遗传给小羊a，C错误； D、生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控，相互影响的，所以依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊—牛”，D正确。 D正确。 二、非选择题（共40分） 36. 如图所示表示科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a~h为操作过程，请据图回答有关问题： （1）“试管牛”技术的操作流程是_______（用箭头将相关字母连接起来表示）。 （2）一般是对发育到_______（阶段）的早期胚胎进行过程c_______的处理，后经过d→e过程获得A牛和B牛的性别______（填“相同”“不同”或“不一定相同”）。 （3）d和f过程采用的技术是_______，进行该操作之前要对图中的“母牛”进行_______处理。该操作后的早期胚胎能在受体内存活的原因_____________________。 【答案】（1）a→b→f→g     （2） ①. 桑葚胚或囊胚 ②. 胚胎分割 ③. 相同 （3） ①. 胚胎移植 ②. 同期发情 ③. 受体和供体处于相同的生理状态 【解析】 【分析】题图分析：图示是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，其中a表示体外受精、b是胚胎发育过程、c是胚胎分割、d和f表示胚胎移植、e和g是妊娠。b过程形成的是囊胚，其中①是滋养层细胞、②是囊胚腔、③是内细胞团细胞。 【小问1详解】 据图可知，“试管牛”技术的操作流程包含a体外受精→b胚胎发育过程→f胚胎移植→g妊娠阶段。 【小问2详解】 c是胚胎分割，胚胎分割一般是对发育到桑葚胚或囊胚的早期胚胎进行处理，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将③内细胞团均等分割，以免影响胚胎的恢复和进一步发育，，后经过d→e过程得到的A牛和B牛，由于遗传物质相同，故两牛的性别相同。 【小问3详解】 d和f表示胚胎移植，在胚胎移植之前应该对供体和受体进行同期发情处理，使二者处理相同的生理状态，以提高早期胚胎在受体内的存活率。 37. 某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题： （1）若抗盐基因序列已知，根据序列信息设计引物进行PCR扩增。PCR反应过程所需要的引物一般有________种，DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸，合成新的DNA链。 （2）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。构建的基因表达载体除了含有目的基因、标记基因外，还要含有________。 （3）将目的基因导入植物细胞，采用最多的方法是________，其中用到的质粒上含有一段特殊的DNA片段，可带目的基因进入植物细胞，该片段称为________。 （4）在构建重组质粒时，选用上图中SalI、HindⅢ两种酶酶切效果更好，而不是只用SalI酶，原因是________。质粒和抗盐基因同时用两种限制酶处理后利用________连接，可得到重组DNA分子。 （5）含有目的基因的农杆菌可根据标记基因进行筛选。若农杆菌在含有四环素和氨苄青霉素的培养基上都可以生长繁殖，农杆菌中________（填“是”或“否”）已含有目的基因，为什么？________。 【答案】（1） ①. 2 ②. 3′ （2）启动子、终止子等 （3） ①. 农杆菌转化法 ②. T-DNA （4） ①. 防止目的基因、质粒的自身环化，防止目的基因与质粒反向连接 ②. DNA连接酶 （5） ①. 否 ②. 含有目的基因的质粒中抗四环素基因结构被破坏 【解析】 【分析】农杆菌转化法主要操作步骤是将含目的基因的重组质粒首先导入土壤农杆菌中，再通过土壤农杆菌侵染植物细胞，使植物细胞获得重组质粒，利用质粒中含有的T-DNA片段将目的基因插入到植物细胞的染色体DNA上整合，最后进行选择培养、筛选获得转基因植株。 【小问1详解】 DNA分子是反向平行的双螺旋结构，复制过程中只能从子链的5'向3'端延伸，因此PCR过程中需要两种引物分别与两条模板链结合，使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。 【小问2详解】 要让基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，基因表达载体上需要有复制原点；使目的基因能够在受体细胞中表达和发挥作用，需要启动子和终止子。 【小问3详解】 将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。 【小问4详解】 在构建重组质粒时，如果只用一种酶切割目的基因的两端及质粒，切割后的目的基因或者质粒各自出现的两个黏性末端碱基序列正好能互补配对，容易发生目的基因或质粒各自自连的现象，但是如果选用 HindII和Sal I两种酶切割目的基因或质粒，则可以避免这种自连现象的发生,这样将切割后的它们混合, 在DNA连接酶的作用下，才可以得到更多的目的基因和质粒相连接的重组质粒。 【小问5详解】 根据图示分析，所给的限制酶在质粒上的切割位点都位于抗四环素基因的部位，如果目的基因插入到质粒中，得到重组质粒，则含重组质粒的农杆菌只含有完整的抗氨苄青霉素基因，不含完整的抗四环素基因(被目的基因破坏)，而这种农杆菌不能在同时含两种抗生素的培养基中正常生长繁殖，只能在含抗氨苄青霉素的培养基中生长繁殖。 38. 2019年1月24日，5只生物钟紊乱体细胞克隆猴登上中国期刊《国家科学评论》封面，标志着中国体细胞克隆技术走向成熟。利用这项技术可批量生产实验用疾病模型猴。如图是体细胞克隆猴的培育过程。请回答下列问题： （1）研究者选择出生夭折的猕猴作为供核个体，先取相应组织，剪碎，用______酶处理后，置于含有______的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 （2）克隆猴的获得属于______繁殖，该过程需要先获得卵母细胞，为获得更多的卵母细胞，需要对母猴进行______处理，然后对卵母细胞去核。实际上去掉的是______________________________ （3）核移植过程中用去核卵母细胞作为受体细胞的原因是①卵母细胞比较大，容易操作；②_____。 （4）非人灵长类的体细胞核移植非常困难，研究发现体细胞克隆猴胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。据此提出攻克技术难点的思路是________。 【答案】（1） ①. 胰蛋白（胶原蛋白） ②. 95％的空气和5％的CO2 （2） ①. 无性 ②. 超数排卵 ③. 纺锤体-染色体复合物 （3）卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达，同时卵细胞的细胞质营养物质丰富 （4）利用去甲基化酶除去克隆胚胎基因组中组蛋白的甲基化，进而降低组蛋白甲基化水平，促进胚胎发育 【解析】 【分析】1、克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2、动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。 【小问1详解】 研究者选择出生夭折的猕猴作为供核个体，先用酒精对其腹部进行消毒，取相应组织，剪碎用胰蛋白（胶原蛋白）酶处理后，置于含有95％的空气和5％的CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养，其中的二氧化碳能维持培养液的pH。 【小问2详解】 克隆猴的获得属于无性繁殖，该过程需要先获得卵母细胞，为获得更多的卵母细胞，需要对母猴进行超数排卵处理，然后对卵母细胞去核，实际上去掉的是纺锤体-染色体复合物。 【小问3详解】 核移植过程中用去核卵母细胞作为受体细胞的原因是①卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达，同时卵细胞的细胞质营养物质丰富；②卵母细胞大，便于操作，更易成功。 【小问4详解】 非人灵长类的体细胞核移植非常困难，研究发现体细胞克隆猴胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。该信息给我们的思路是，为了促进非人灵长类的体细胞核移植的成功合适的做法是设法利用去甲基化酶除去克隆胚胎基因组中组蛋白的甲基化，进而降低组蛋白甲基化水平，促进胚胎发育。 39. 玉米中含有β-胡萝卜素，为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题。 （1）甲方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是___。 （2）通过⑤获得“黄金大米”幼苗过程中，植物需要依赖培养基中蔗糖，其中蔗糖的作用是___（请至少答出两点）。 （3）乙方案中，在体细胞杂交前需要用___酶除去细胞壁获得原生质体，获得原生质体后，将其置于___溶液中防止其吸水涨破。常用化学试剂____________诱导原生质体的融合。 （4）甲乙两方案在育种工作中都具有广泛的应用价值，两者共有的优点是___。 【答案】（1）玉米和水稻共用一套遗传密码（或生物共用一套遗传密码） （2）作为碳源；能源物质；参与维持培养基的渗透压 （3） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 等渗 ③. 聚乙二醇 （4）克服远缘杂交不亲和的障碍（或打破生殖隔离） 【解析】 【分析】分析甲方案：该方案采用基因工程技术育种，其中①表示目的基因获取；②表示将目的基因导入受体细胞；③表示将转基因细胞培育成转基因植株，需要采用植物组织培养技术。 分析乙方案：该方案采用植物细胞工程技术育种，其中④表示植物体细胞杂交过程，⑤表示将杂交细胞培育成杂交植株，需要采用植物组织培养技术。 【小问1详解】 自然界中玉米和水稻共用一套遗传密码（或生物共用一套遗传密码），因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达。 【小问2详解】 ⑤表示将杂交细胞培育成杂交植株，需要采用植物组织培养技术。其中蔗糖可作为外植体的碳源，能作为能源物质，同时还参与维持培养基的渗透压。 【小问3详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，在植物体细胞杂交前需用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁获得原生质体，获得原生质体后，将其置于等渗溶液中防止其吸水涨破。诱导植物原生质体融合常用的化学试剂是聚乙二醇。 【小问4详解】 甲是基因工程育种，乙是植物细胞工程技术育种，两方案在育种工作中都具有广泛的应用价值，两者共有的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍（或打破生殖隔离）。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $