假期必刷3 动物细胞工程-【快乐假期】2024年高二生物暑假衔接一轮大作业

　　假期必刷３　动物细胞工程　　　　　　　　　　 １．动物细胞培养的条件为:营养、无菌、无毒的 环境,温度、pH 和渗透压,气体环境. ２．动物细胞融合突破了有性杂交的局限,使远 缘杂交成为可能. ３．传统抗体的特点是产量低、纯度低、特异性 差,单克隆抗体的特点是特异性强,灵敏度 高,可大量制备. ４．胚胎干细胞能够分化成为成年动物体内的 任何一种类型的细胞,成体干细胞具有组织 特异性,只能分化成特定的细胞或组织. ５．哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植 和体细胞核移植.后者难度高于前者. ６．试管动物:试管动物技术是指通过人工操作使 卵子在体外受精,经培养发育为早期胚胎后, 再经移植产生个体. ７．胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切 割成２等份,４等份,８等份,经移植获得同 卵双胎或多胎的技术. １．下列对高等哺乳动物细胞体外培养时,需要 满足的细胞培养条件的表述,正确的是 (　　) A．所需的各种营养物质 B．消毒的环境 C．３０℃左右的恒温环境 D．９５％的 O２ 和５％的CO２ ２．下列有关动物细胞核移植和克隆动物的叙 述,错误的是 (　　) A．胚胎细胞核移植的难度明显低于体细胞 核移植 B．用于核移植的卵母细胞需要在体外培养 到 MⅡ期 C．核移植后形成的重构胚可以直接移入受 体动物体内 D．克隆动物和体细胞供体动物的性状基本 相同 ３．单克隆抗体在生物工程和临床医学上有着极 为重要的地位和巨大的应用.下列有关单克 隆抗体技术及其应用的叙述,正确的是 (　　) A．新冠病毒检测单克隆抗体诊断试剂盒需 要根据新冠病毒内部的核酸研制 B．将选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞直 接用于生产单克隆抗体 C．利用抗原—抗体杂交技术可筛选出能产 生单一抗体的杂交瘤细胞 D．“生物导弹”中的单克隆抗体能特异性的 结合抗原并杀死癌细胞 ４．下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的 叙述,正确的是 (　　) A．绝大多数精卵细胞的识别具有物种特 异性 B．精子头部进入卵细胞后能阻止后续精子 入卵 C．内细胞团经酶处理形成的单个细胞可发 育成个体 D．原肠胚可发育分化形成内外两个胚层 ５．北方白犀牛曾经广泛分布于非洲中部,因盗 猎和栖息地破坏而濒临灭绝.２０１８ 年 ３ 月,北方白犀牛仅剩下最后两头雌性个体. 此前,科学家保存了北方白犀牛的精子,欲 通过胚胎工程方法繁育北方白犀牛.下列 说法错误的是 (　　) A．可以从雌性北方白犀牛体内取出卵母细 胞进行体外受精 B．可以使用雌性南方白犀牛作为受体,进 行胚胎移植 C．此过程和克隆技术相同,将会得到遗传 背景一致的后代 D．可以通过胚胎分割技术得到更多遗传物 质相同的后代 ６．中国科学院团队对雌性猕猴进行克隆,成功 获得“中中”和“华华”两姐妹,突破了现有技 术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界 难题,为建立人类疾病的动物模型、研究疾 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 ５ 病机理研发诊治药物带来光明前景.如图 为“中中”和“华华”培育的流程,下列相关叙 述不正确的是 (　　) A．这说明已分化的动物体细胞的细胞核是 具有全能性的 B．该过程属于无性生殖,图中的卵子实际 上是次级卵母细胞 C．图中的③过程是指动物胚胎的体外培养 过程 D．中中、华华的性别由纤维细胞的遗传物 质决定 ７．(不定项)如图表示抗人体胃癌单克隆抗体 的制备过程,下列有关叙述错误的是(　　) 甲 注射 　 →小鼠 B淋 巴细胞 骨髄 瘤细胞 融合 　 →乙 选择培养 　 →丙 丁→ 分泌 　 → 抗胃癌 单克隆 抗体 A．将单个B淋巴细胞大量增殖即可产生大 量单一抗体 B．丙细胞既能无限增殖又能产生所需的专 一抗体 C．要获得产生所需抗体的淋巴细胞,必须 给小鼠先注射特定的抗原 D．图中的乙包括未融合的亲本细胞,具有 同种核的融合细胞和杂种细胞 ８．(不定项)如图表示研究人员利用胚胎工程 培育优质奶牛的过程,下列相关叙述不正确 的是 (　　) A．在胚胎发育过程中,受精卵通过有丝分 裂不断增加体细胞数目 B．在进行步骤③时,应选择发育良好的原 肠胚来操作 C．在胚胎发育中,内细胞团将来发育成胎 膜和胎盘 D．步骤①代表奶牛的体外受精,属于无性 繁殖的方式 ９．科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导 性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出 与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下: (１)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的 初次培养称为　　　　　,培养的细胞在贴 壁生长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现 象称为　　　　　　　　. (２)图中２－细胞胚胎可用人工方法从灰鼠 输卵管内获得,该过程称为冲卵;也可从灰 鼠体内取出卵子,通过　　　　　　(技术 名称)后进行早期胚胎培养获得. (３)图中重组囊胚通过　　　　　技术移入 白鼠子宫内继续发育,若想进一步提高胚胎 的利用率,可采用　　　　　　技术.小鼠 胚胎干细胞(ES)可由囊胚的　　　　　分 离培养获得. (４)若一次给受体母牛移入体外受精的多个 胚胎,产生的多个后代基因型相同吗? 　　 　　　 　.若想对胚胎做性别鉴定,可以 取　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 进 行 DNA 分析. (５)哺乳动物受精过程能阻止多个精子入卵 受精的有　　　. A．顶体反应 B．精子穿越卵子透明带触及卵黄膜,导致 透明带反应 C．精子触发卵细胞膜表面微绒毛的抱合反应 D．精子入卵后,触发卵细胞膜反应 动植物检疫专业 动植物检疫专业培养及具备动植物检验 检疫方面的基本理论知识和技能,能在国家各 级检验检疫部门、动植物产品卫生安全与监督 机构、农畜产品生产销售等企业从事动植物病 虫害检验检疫及防治、农畜产品卫生安全检 测、动植物保护等方面的技术、管理与推广的 高级技术人才. 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 ６ ６．A　[过程②是进行花药离体培养获得单倍体幼苗,A 错误; 过程⑤是通过逐代自交、不断筛选获得新品种,B正确;①② ③为方案一,是单倍体育种,以基因重组和染色体变异为原 理,C正确;与方案二杂交育种比,方案一单倍体育种能明显 缩短育种年限,D正确.] ７．AB　[通常使用酒精和次氯酸钠溶液对外植体进行消毒处 理,要兼顾消毒效果和植物的耐受性,避免过度消毒对外植 体造成损伤,A 正确;同一植株不同细胞经培养获得的植株 的基因型不一定相同,如花粉细胞培养形成的植株的基因只 有体细胞培养形成的植株的一半,B正确;植物组织培养常 用的 MS培养基是固体培养基,并不都需添加植物激素,如 菊花茎段自身内源激素可调节其生长,其组织培养时不必添 加植物激素,C错误;因为分生组织的病毒极少,甚至没有病 毒,所以将分生组织(如根尖、茎尖)进行离体培养能获得脱 毒植株,但不能获得抗病毒植株,D错误.] ８．BCD　[植物的次生代谢产物一般不是植物基本生命活动所 必需的,其在植物细胞中含量很少,A正确;愈伤组织是由高 度分化的细胞转化而来的一团薄壁细胞组成,其分化程度很 低,B错误;诱导外植体脱分化获得愈伤组织不需要PEG(聚 乙二醇),需要植物激素,C错误;愈伤组织的诱导受植物激 素配比 的 影 响,也 受 营 养 物 质 和 光 照 等 因 素 的 影 响,D 错误.] ９．解析:(１)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,根据酶的 专一性原理,采用酶解法去除植物细胞壁,常用的酶是纤维 素酶和果胶酶. (２)人工诱导原生质体融合的物理方法有离心、振动、电激 等;化学方法是用聚乙二醇(PEG)等试剂作为诱导剂诱导 融合. (３)植物细胞壁的形成与高尔基体有关. (４)④是由杂种细胞形成愈伤组织的过程,表示脱分化,⑤过 程是由愈伤组织形成杂种植株的过程,是再分化的过程;在 该过程中,细胞分裂的主要方式是有丝分裂,保证了遗传信 息在亲代和子代细胞中的一致性. (５)植物体细胞杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍,使远缘 杂交成为可能. 答案:(１)纤维素酶和果胶酶 (２)离心、振动、电刺激　聚乙二醇(PEG) (３)高尔基体 (４)脱分化　再分化　有丝分裂 (５)克服远缘杂交不亲和的障碍 假期必刷３ １．A　[动物细胞培养需要有充足的营养供给:微量元素、无机 盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等,A 正确;动物细胞培 养需要无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理.通常还 要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污 染.此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自 身造成危害,B错误;动物细胞培养需要３６􀆰５℃左右的恒温 环境,C 错 误;动 物 细 胞 培 养 需 要 ９５％ 空 气 ＋５％CO２,D 错误.] ２．C　[体细胞分化程度高,表现全能性困难,而胚胎细胞分化 程度低,表现全能性容易,因此胚胎细胞核移植的难度明显 低于体细胞核移植,A正确;获得的卵母细胞去核后,需要培 养到减数分裂Ⅱ中期才能进行核移植,B正确;重构胚,使其 完成细胞分裂和发育进程才能移入受体动物体内,C错误; 个体性状表现主要由细胞核控制,因此克隆动物的性状表现 与供体动物(供核动物)基本相同,D正确.] ３．C　[单克隆抗体诊断试剂盒检测病毒的原理是:抗原和抗 体的结合具有特异性,所以新冠病毒检测单克隆抗体诊断试 剂盒需要根据新冠病毒表面的抗原研制的,A 错误;将选择 培养基筛选得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测, 不能直接用于生成单克隆抗体,B错误;利用抗原—抗体杂 交技术可筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞,C正确;“生 物导弹”的原理是借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定 向带到癌细胞,在原位杀死癌细胞,单克隆抗体只起定位作 用不能杀死癌细胞,D错误.] ４．A　[细胞膜表面均有糖蛋白,糖蛋白具有细胞识别功能,绝 大多数精卵细胞的识别具有物种特异性,精子、卵细胞的相 互识别保证了同种精卵结合,A正确;精子接触卵细胞膜时, 会发生透明带反应,精子入卵后,会发生卵细胞膜反应,卵细 胞能阻止其它精子进入,以防多个精子与卵细胞受精,B错 误;内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,将内细胞团经酶 处理形成的单个细胞不可以发育成个体,C错误;原肠胚发 育分化形成内外中三个胚层,D错误.] ５．C　[为了繁育北方白犀牛,由于已经保存了北方白犀牛的 精子,因此需要从雌性体内取出卵母细胞进行体外受精,以 便获得较多的胚胎,A 正确;因为受体子宫对移入的胚胎基 本无免疫排斥反应,因此,可以使用雌性南方白犀牛作为受 体,进行胚胎移植,B正确;此过程采用了体外受精、早期胚 胎培养和胚胎移植的技术手段,为有性生殖的过程,而克隆 技术为无性繁殖,显然二者有差别,不会得到遗传背景一致 的后代,C错误;为了得到更多遗传性状相同的后代,可以通 过胚胎分割技术,该过程中需要对胚胎进行均等分割,通常 选择桑葚胚和囊胚进行分割,选择囊胚时注意对内细胞团进 行均等分割,D正确.] ６．C　[该过程没有经过精卵的结合,属于无性繁殖过程,重组 细胞能发育成完整个体说明动物体细胞的细胞核具有全能 性,A正确;该过程没有经过精卵的结合,属于无性繁殖过 程,体外培养到减数分裂Ⅱ中期的卵子才能参与受精,故图 中的卵子实际上是次级卵母细胞,B正确;图中的③过程是 指动物胚胎移植到受体母猴的子宫内的过程,即胚胎移植过 程,C错误;中中、华华是由重组细胞发育而来,其细胞核内 的遗传物质来自纤维细胞,因此性别由纤维细胞的遗传物质 决定,D正确.] ７．AB　[单个B淋巴细胞不能增殖,所以不能产生大量的单一 抗体,A错误;丙细胞是产生不同抗体的多种 B细胞和骨髓 瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞,能够无限增殖,但不一定产 生所需抗体,B错误;给小鼠先注射特定的抗原后,刺激小鼠 产生免疫反应,从而获得产生所需抗体的淋巴细胞,C正确; B细胞和骨髓瘤细胞融合后,形成的细胞包括B细胞和B细 胞的融合、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合,B细胞和骨髓 瘤细胞的融合,故图中的乙包括未融合的亲本细胞,具有同 种核的融合细胞和杂种细胞,D正确.] ８．BCD　[在胚胎发育过程中,受精卵通过有丝分裂不断增加 体细胞数目,A正确;进行胚胎分割时,应选择发育良好、形 态正常的囊胚,因囊胚期的内细胞团未分化,而原肠胚已经 分化,不能用于胚胎分割移植,B错误;在胚胎发育中,滋养 层细胞将来发育成胎膜和胎盘,C错误;体外受精属于胚胎 工程,生殖方式属于有性生殖,D错误.] ９．解析:(１)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称 为原代培养;培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止 分裂,这种现象称为接触抑制. 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 ６７ (２)图中２－细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得, 该过程称为冲卵,也可从灰鼠体内取出卵子,培养到一定时 期再通过体外受精(或核移植)后进行早期胚胎培养获得. (３)图中体外获得的重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子 宫内继续发育;胚胎分割技术可以得到多个相同的胚胎,提 高胚胎的利用率;囊胚的内细胞团保留分裂和分化能力,小 鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的内细胞团分离培养获得. (４)一次给受体母牛移入多个胚胎,由于这些胚胎可能由不 同的受精卵发育而来的,它们的基因型可能相同,也可能不 同,因此产生的多个后代基因型不一定相同;囊胚的滋养层 细胞是在胚胎发育成桑葚胚后,桑葚胚进一步发育,开始出 现分化沿透明带内壁扩展和排列的一种个体较小的细胞,通 常取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病或做性别鉴定,这 样不会影响胚胎发育. (５)受精时,首先发生顶体反应释放顶体酶,有利于精子穿过 放射冠、透明带,故顶体反应不会阻止精子入卵受精,A 错 误;哺乳动物受精过程阻止多精子入卵受精机制:精子通过 顶体酶溶解出的两条通道与卵黄膜接触,立即发生透明带反 应以阻止其他精子通过透明带,这是防止多个精子进入卵细 胞的第一道屏障,B正确;精子进入卵黄膜的时候,卵黄膜表 面有大量的微绒毛,抱合精子,精子外膜与卵黄膜融合,精子 入卵,故精子触发卵黄膜表面微绒毛的抱合反应不会阻止精 子入卵受精,C错误;精子入卵后,卵细胞随即发生卵黄膜封 闭作用,是阻止多精入卵受精的第二道屏障,D正确. 答案:(１)原代培养　接触抑制 (２)体外受精(或核移植) (３)胚胎移植　胚胎分割　内细胞团 (４)不一定相同　囊胚的滋养层细胞 (５)BD 假期必刷４ １．C　[作为运载体必须具备的条件之一是能够在宿主细胞中 稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因,A 正确;作为运载体必须具备的条件之一是具有多个限制酶切 点,以便于目的基因的插入,B正确;作为运载体必须具备的 条件之一 是 具 有 某 些 标 记 基 因,以 便 于 重 组 后 进 行 重 组 DNA分子的筛选,C错误;携带外源 DNA 片段的质粒进入 受体细胞后,停留在细胞中进行自我复制,或整合到染色体 DNA上,随着染色体 DNA进行同步复制,同时运载体对宿 主细胞无伤害,以使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保 存,D正确.] ２．B　[DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒 精,可利用这个特性将 DNA与蛋白质分离,A 正确;高温能 使蛋白质、DNA 变性,蛋白质在６０~８０ ℃发生变性,DNA 在８０℃以上变性,B错误;在用预冷的酒精沉淀DNA时,要 用玻璃棒沿一个方向搅拌,为了防止丝状的 DNA 搅碎,有 利于DNA絮状物的挑出,C正确;DNA在不同浓度 NaCl溶 液中溶解度不同,DNA在２mol/L的 NaCl溶液中的溶解度 最大,可利用此特性将提取的丝状物或沉淀物溶解于 NaCl 溶液中,D正确.] ３．C　[DNA连接酶催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成磷酸二酯 键,A正确;切割甲的限制酶的识别序列是－GAATTC－,切割 乙的限制酶的识别序列是－CAATTG－,所以甲、乙黏性末 端是由不同的限制酶切割而成,B正确;甲、乙片段形成的重 组 DNA分子的序列是－CAATTC－,而甲酶的识别序列是 －GAATTC－,且在 G 和 A 之间切割,所以切割甲的限制 酶不能识别由甲、乙片段形成的重组 DNA 分子,C错误;甲 和乙的黏性末端相同,都是－AATT－,可以被 DNA 连接 酶连接形成重组 DNA分子,D正确.] ４．D　[PCR技术所用TaqDNA聚合酶能耐高温,但其最适温 度不是９５℃,A错误;每合成一条子链需要一个引物,PCR 扩增n次后有２n＋１条 DNA 单链,其中有两条是母链,所以 经PCR扩增n次后需２n＋１－２个引物,B错误;第１次扩增 的产物 DNA为长－中链,第二次扩增出现中－短链,在第３ 轮循环产物中开始出现目标DNA片段(短－短链),C错误; 一个DNA片段n次扩增有２个长－中链和２n－２个中－短 链,一个 DNA 片段经 PCR 扩增 n次后含 目 标 DNA 片 段 ２n－２－(２n－２)＝２n－２n,D正确.] ５．B　[DNA 半保留复制需要解旋酶破坏氢键,再利用 DNA 聚合酶将单个脱氧核糖核苷酸连接形成磷酸二酯键,A 正 确;PCR扩增 DNA 时用高温代替解 旋 酶,B 错 误;转 录 时 RNA聚合酶可连接单个核糖核苷酸形成磷酸二酯键,C正 确;蛋白质水解破坏的是肽键,D正确.] ６．C　[酶 E会破坏两种标记基因,为避免切割后 DNA 片段的 自身环化,又保留质粒上的标记基因,切割时应选择的限制 酶组合是酶 F 和酶 G,A 正确;所选用的受体菌 不 能 含 有 AmpR 和TetR 基因,以便于对含有目的基因的受体菌的选 择,B正确;用含氨苄青霉素的培养基筛选出的有导入重组 质粒的受体菌和导入原质粒的受体菌,C错误;据图可知,同 时用三种限制酶处理图中质粒,因酶 E有两个作用位点,故 将质粒切割成了４个 DNA片段,电泳后可得到４个条带,D 正确.] ７．ABC　[蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物 功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋 白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产 和生活的需求,故蛋白质工程可以定向改造蛋白质分子的结 构,A正确;蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成进行的, 故改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的,B正确;改造 后的中华鲟具有新的性状,但不存在生殖隔离,其和现有中 华鲟仍是同一物种,C正确;蛋白质工程改造的是基因,可以 遗传给子代,因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白 质,D错误.] ８．B　[预变性是 使 DNA 的 两 条 链 完 全 变 性 解 开,A 错 误; 后延伸过程中后延伸是为了让引 物 延 伸 完 全 并 让 单 链 产 物完全退火形 成 双 链 结 构,可 使 目 的 基 因 的 扩 增 更 加 充 分,B正确;延伸过程 需 引 物 参 与,C错 误;转 基 因 品 种 不 只需要检测是否含有目的基因,还要 检 测 是 否 表 达,还 有 安全性问题,D错误.] ９．解析:(１)E．coliDNA 连接酶和 T４DNA 连接酶都能连接黏 性末端,另外 T４DNA 连接酶还可以连接平末端,但连接平 末端时 的 效 率 比 较 低.据 图 可 知,EcoRⅠ 和 PstⅠ 切 割 DNA后产生的是黏性末端,SmaⅠ和EcoRⅤ切割 DNA 后 产生的 是 平 末 端.因 此 图 中 EcoRⅠ、PstⅠ 酶 切 割 后 的 DNA片段可以用E．coliDNA 连接酶连接,图中EcoRⅠ、 PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ 酶 切 割 后 的 DNA 片 段 可 以 用 T４DNA连接酶连接. (２)目的基因片段与质粒载体片段均是 DNA 片段,因此两 片段之间通过核苷酸形成磷酸二酯键连接.因此 DNA 连 接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键 是磷酸二酯键. 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 􀪋 ７７