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选择性必修三期末复习2---基因工程
1.基因工程:按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
2.限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。
3.载体上有特殊的标记基因,便于重组DNA分子的筛选。
4.PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行,需提供DNA模板、2种引物、4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶。
5.真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活。因此,PCR反应缓冲液中一般要添加Mg2+。引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸,引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。
6.基因表达载体的构建的目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。基因表达载体是载体的一种,除目的基因、标记基因外,还必须含有启动子、终止子等。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终表达出人类需要的蛋白质。
7.转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
8.将目的基因导入植物细胞的方法是农杆菌转化法、花粉管通道法;导入动物细胞的方法是显微注射法;导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。
9.目的基因的检测与鉴定:首先是分子水平的检测,包括通过PCR等技术检测棉花的染色体DNA上是否插入了Bt基因或检测Bt基因是否转录出了mRNA;从转基因棉花中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原—抗体杂交,检测Bt基因是否翻译成Bt抗虫蛋白等。其次,还需要进行个体生物学水平的鉴定。例如,通过采摘抗虫棉的叶片饲喂棉铃虫来确定Bt基因是否赋予了棉花抗虫特性以及抗性的程度。
10.乳腺生物反应器是指将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起,通过显微注射的方法导入哺乳动物的受精卵中,由这个受精卵发育成的转基因动物在进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁来生产所需要的药物。
11.用转基因动物(猪)作器官移植的供体,方法是在器官供体基因组中导入某种调节因子,以抑制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决定基因,然后再结合克隆技术,培育出不会引起免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。
12.蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过改造或合成基因,来改造现有蛋白质,或制造一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求。
13.基因工程原则上只能生产自然界中已存在的蛋白质。
14.对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造或合成基因来完成。
15.蛋白质工程的基本思路:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。
16.DNA的粗提取与鉴定的原理:DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精,利用这一原理,可以初步分离DNA与蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2 mol/L的NaCl溶液。在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色,因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
17.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。凝胶中的DNA分子通过染色,可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来。
18.我国科学家将来自玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中,由于α-淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性,因而可以防止转基因花粉的传播。
1.基因工程是人工操作导致的染色体变异,变异是不定向的( × )
2.DNA连接酶可以连接目的基因与载体的氢键,形成重组DNA( × )
3.限制性内切核酸酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶( × )
4.质粒通常采用抗生素合成基因作为标记基因( × )
5.目的基因一定是编码蛋白质的基因( × )
6.真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活。因此,PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+( √ )
7.Ti质粒上的T-DNA可与植物受体细胞的染色体DNA整合在一起( √ )
8.为培育抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体( × )
9.检测目的基因是否导入受体细胞可用抗原—抗体杂交技术( × )
10.乳腺生物反应器是将药用蛋白基因导入动物的乳腺细胞中( × )
11.由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用( × )
79.蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列( × )
12.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改造分子的结构( × )
13.蛋白质工程是一项难度很大的工程,主要是