内容正文:
第34讲 微生物的培养技术及应用
高压蒸汽灭菌
液体培养基
从社会中来
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌,再经过发酵就可以制成酸奶。
一般家庭自制酸奶可能会导致肠胃不适,主要原因是有杂菌混入。
那么怎么才能保证无处不在的杂菌
不混入发酵物中呢?
这需要应用无菌技术和微生物的培养技术
防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提,也是发酵工程的重要基础。在实验室培养微生物,一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件;另一方面要确保其他微生物无法混入,并将需要的微生物分离出来。
一 微生物的基本培养技术
1.微生物的类群
原核生物 (细菌、蓝细菌等)
原生生物 (如草履虫、衣藻等)
真菌 (如酵母菌、霉菌等)
酵母菌
青霉菌
大型真菌
球菌
蓝细菌
放线菌
草履虫
衣藻
病毒
禽流感病毒
SARS病毒
一、微生物简介
微生物结构简单、形体微小,眼睛看不到,若想看某种纯净的微生物。我们该怎么做?若想通过肉眼能看到细菌,我们又该如何?
提示:必须对其进行分离纯化;
对微生物进行大量培养,致使其在培养基表面或内部形成菌落。不同的细菌具有不同的菌落。
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。
3.实验室培养微生物条件
——培养基
2)确保其它微生物无法混入
——无菌技术
高压蒸汽灭菌
1)提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
1.培养基概念:
人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
3.培养基类型:
固体
培养基
液体
培养基
有 无 琼脂
分离、
计数、
鉴定等
扩大培养、
工业生产
2.培养基作用:
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
阅读P9回答
长有酵母菌菌落
盛有液体培养基
①提供微生物繁殖所需各种营养,
②异养微生物的能源
二、培养基的配制
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分
用途
培养基的类型及用途
不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂
工业生产
观察微生物的运动、
分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
鉴别不同种类微生物
选择培养基
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
天然培养基
合成培养基
鉴别培养基
半固体培养基中琼脂的含量通常在0.3%到0.6%之间。
这个范围低于通常用于固体培养基的琼脂含量(1.5%到2.0%)。琼脂的这种用量有助于培养基在剧烈震荡后仍保持结构稳定,但不会过于坚硬,适合用于需要一定流动性以便于观察的微生物鉴定实验
天然培养基
合成培养基
(天然物质,成分不明确)
如:牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基
如:高氏1号培养基、查氏培养基
(培养基成分明确)
高氏1号培养基:
可溶性淀粉(20g),KNO3(1g),K2HPO4(0.5g),MgSO4· 7H2O(0.5g),NaCl(0.5g),FeSO4· 7H2O(0.01g),琼脂 20g,pH=7.4-7.6
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培养基中加氨苄青霉素
具有抗氨苄青霉素能力的菌落
没有氨苄青霉素抗性的细菌
选择培养基
培养基+氨苄青霉素
培养基
没有抗氨苄青霉素能力的菌落被淘汰
怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
3.培养基的营养构成
(1)基本成分
碳源、氮源、水、无机盐
①碳源
无机碳源:
CO2、CO32-、HCO3-
有机碳源:
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等
自养微生物
异养微生物
②氮源
无机氮源:
NH4+、NO3-、NH3等
有机氮源:
牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
注:含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源
③无机盐
Ca、K 、Mg为大量元素
Zn、Cu、Mn、Co、Mo等微量元素
4.培养基的营养构成:
能够为微生物提供C、N等元素的营养物质。
表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000ml 水
牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。
(2)培养基还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
乳酸杆菌——添加维生素
霉菌——酸性培养基