2024届高三生物二轮复习练习：基因工程的基本工具与操作程序

基因工程的基本工具与操作程序练习 一、选择题 1．如图是3种限制性内切核酸酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图（箭头表示切点，切出的断面为黏性末端）。下列叙述错误的是(　　) A．不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶具有专一性 B．限制酶2和3识别的序列都包含6个核苷酸 C．限制酶1和3剪出的黏性末端相同 D．能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2 2．如图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制性内切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是(　　) A．将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，生成的由两个DNA片段连接形成的产物有两种 B．DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来，形成一个重组质粒时形成两个磷酸二酯键 C．为了防止目的基因反向连接和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ D．能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞中已成功导入该目的基因 3．PCR反应中使用的引物的3′端为结合模板DNA的关键碱基，而5′端则无严格限制，常用于给目的基因两侧添加限制酶切点等序列。下列相关叙述正确的是(　　) A．PCR第3个循环，消耗了7对引物 B．反应体系中游离的脱氧核苷酸作为PCR扩增的原料会依次连接到引物的5′端 C．耐高温的DNA聚合酶能将单个脱氧核苷酸结合到双链DNA片段的引物链上 D．用图中引物扩增仅需2个循环后就能获得两端均添加限制酶切点的目的基因 4．如图为培育转基因抗植物病毒番茄的过程示意图。下列叙述正确的是(　　) A．过程A需要限制酶和DNA聚合酶的参与 B．过程B需要用CaCl2处理，以提高番茄细胞细胞壁的通透性 C．抗植物病毒基因一旦整合到番茄细胞的染色体上，就能正常表达 D．转基因抗植物病毒番茄是否培育成功可通过抗病毒接种实验进行鉴定 5．下列以洋葱为实验材料进行“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是(　　) A．洋葱研磨液需要用滤纸过滤，以保证提取的DNA量 B．滤液中加入冷酒精后，用玻璃棒搅拌会使DNA的提取量增加 C．向含DNA的滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液有利于去除杂质 D．用二苯胺试剂鉴定DNA时，需沸水浴加热冷却后再观察颜色变化 6．用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液，2～10号为PCR产物；其中2号的模板为野生型植株DNA，3～9号的模板为转基因植株的DNA，10号使用无菌水代替模板DNA。PCR时加入的模板DNA如图所示。据此做出的分析不合理的是(　　) A．PCR产物的分子大小在250至500 bp之间 B．3号样品植株导入的目的基因一定能成功表达 C．9号样品对应植株不是所需的转基因植株 D．10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰 7.用氨苄青霉素抗性基因(Ampr)、四环素抗性基因(Tetr)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），并转化到受体菌中。下列叙述错误的是(　　) A．若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同 B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因 C．若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否 D．若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落 8.某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌、雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3­GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。 下列叙述正确的是(　　) A．Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达 B．翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白 C．2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3­GFP基因纯合子 D．若用引物1和引物3进行PCR，能更好地区分杂合子和纯合子 9.为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白(HMA3)基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是(　　) A．①＋③　　　　　　　　 B．①＋② C．③＋② D．③＋④ 二、非选择题 10．某同学拟