内容正文:
观察根尖分生区细胞组织细胞的有丝分裂(探究·实践)
个体发育
*动图来自百度图片
有丝分裂
魏尔肖:细胞通过分裂产生新的细胞
思考:细胞分裂过程是怎样的?
*图片来自百度图片
任务一:如何进行观察细胞有丝分裂实验操作?
思考1:观察有丝分裂的材料如何选择?
植物茎尖
植物根尖
*图片来自百度图片
1842年,瑞士内格里记录了百合和紫露草细胞分裂过程。
任务一:如何进行观察细胞有丝分裂实验操作?
思考1:观察有丝分裂的材料如何选择?
可用洋葱、葱、蒜等材料进行实验。
染色体数目相对较少,便于观察和计数
分裂期所占比例大
短时间内可获得根尖
1842年,瑞士内格里记录了百合和紫露草细胞分裂过程
任务一:如何进行观察细胞有丝分裂实验操作?
思考2:根尖有哪些结构?哪些结构中能观察到有丝分裂?
◆成熟区——吸收水分和无机盐的主要部位。
◆根冠——保护作用。
■分生区——细胞体积小,呈正方形,排列紧密,有的正在分裂。
◆伸长区——是根伸长最快的地方。
根尖分为4个部分:
*图片来自百度图片
任务一:如何进行观察细胞有丝分裂实验操作?
思考3:能不能直接将根尖直接放在显微镜下观察?
根尖培养
装片制作
观察
分析实验结果
解离
漂洗
染色
制片
临时装片要求:
根据根尖结构特点,需用化学方法(如盐酸解离)打开细胞之间的连接,再用物理方法(如压片、敲击盖玻片等)将堆叠在一起等细胞分散开,同时还需染色便于光学显微镜观察。
装片的制作:
过程 方法 时间
解离 上午10时至下午2时(洋葱分生区有较多的细胞处于分裂期,这会因洋葱品种、室温等的差异而有所不同),剪取洋葱根尖2~3mm,立即放入盛有盐酸和酒精混合液(1︰1)的玻璃皿中,在室温下解离。 3~5min
漂洗 待根尖软化后,用镊子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗。 约10min
染色 把根尖放入盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的甲紫溶液(或醋酸洋红液)的玻璃皿中染色。 3~5min
制片 用镊子将这段根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片。然后用拇指轻轻在按压盖玻片。
我校生物社团学生尝试用人教版教材P116-117操作流程进行实验,但遇到一些问题。
问题1.气温较高,洋葱水培根易腐烂且不易长根。
任务二:如何对实验中发现的问题加以改良?
1.材料改用小葱水培生根,1-2d即可获得根尖。
改良1:
洋葱培养生根:培养5d
葱培养生根:培养2d
问题2.不同实验材料分裂旺盛期不同,比如洋葱在上午10点-下午2点,但学生未必能在相应时间完成,导致观察到的分裂细胞数较少。
任务二:如何对实验中发现的问题加以改良?
参考必修二内容,可用卡诺氏液固定分裂旺盛期的根尖,处理24h后转移至70%的酒精中4°C保存,备用。
改良2:
卡诺氏液固定保存的根尖
A组:卡诺氏液固定后的根尖
物镜40X
B组:未固定的根尖
物镜40X
问题3.解离后漂洗、染色操作夹取不易,且染色后根尖不易找到。
任务二:如何对实验中发现的问题加以改良?
改良3:
解离和漂洗操作均置于小试管中,减少试剂用量。
用胶头滴管吸取换液,滴加蒸馏水反复漂洗。最后一次滴加蒸馏水并浸泡8-10min。
材料置于载玻片上染色3-5min,用吸水纸吸去多余染料。
解离和漂洗操作均置于小试管中,减少试剂用量。
解离完成后,用吸管吸出解离液,再滴加蒸馏水反复漂洗,吸出漂洗液后重复多次。最后一次滴加蒸馏水并浸泡8-10min。
在载玻片上染色3-5min,用吸水纸吸去多余染料。
问题4.甲紫染色时容易使细胞质着色,影响观察。
任务二:如何对实验中发现的问题加以改良?
改良4:
用改良的苯酚品红溶液染色。
物镜100X
甲紫溶液染色3-5min
物镜100X
改良的苯酚品红溶液染色3-5min
改良效果:改良的苯酚品红染液的效果明显优于甲紫,改良的苯酚品红染液特异性强,染色清晰,几乎只有染色体被染色,细胞质呈无色,对比更明显,有利于染色体的观察。
任务三:应用改良后的实验步骤观察根尖分生区细胞有丝分裂
根尖培养
装片制作
观察
分析实验结果
解离
漂洗
染色
制片
实验步骤:
任务三:应用改良后的实验步骤观察根尖分生区细胞有丝分裂
活动2:辨认细胞分裂时期,并按照细胞周期排序。
1
2
3
4
5
分裂时期顺序:5、1、4、2、3
*图片来自百度图片
任务三:应用改良后的实验步骤观察根尖分生区细胞有丝分裂
思考:该实验能否观察到根尖分生区细胞进入下一个分裂期?为什么?
学生成果展示
经过解离液处理,细胞已失去活性,不会进入下一个分裂时期
任务三:应用改良后的实验步骤观察根尖分生区细胞有丝分裂
实验异常现象分析
1.视野中细胞重叠严重的原因可能有哪些?
提示:①解离不充分,②没有压片。
2.用