内容正文:
在制作过程中有杂菌混入
1.容器灭菌(灭菌技术)
2.接种纯的菌种(①为微生物提供合适的营养和环境条件;②能将需要的微生物分离出来)
3.在无菌条件下操作
思考1:失败的原因是什么?
思考2:怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?
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第2节 微生物的培养技术及应用
一 微生物的基本培养技术
第1章 发酵工程
高压蒸汽灭菌
液体培养基
1.微生物的定义:肉眼难以看清,需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的一切微小生物的总称。
微生物概述
2.微生物分类
真菌:
酵母菌、毛霉等
原生生物:
草履虫、变形虫等
细菌:
大肠杆菌、乳酸菌、醋酸菌等
病毒:
SARS病毒、噬菌体等
无细胞结构
原核细胞
真核细胞
禽流感病毒
SARS病毒
球菌
蓝细菌
放线菌
草履虫
衣藻
酵母菌
青霉菌
大型真菌
微生物概述
有没有可能不借助显微镜观察到微生物类群?
1.微生物的定义:肉眼难以看清,需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的一切微小生物的总称
2.微生物分类
微生物概述
3.微生物菌落
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。
微生物概述
由单个微生物繁殖形成的纯培养物就是一个单菌落;
一个单菌落就是一个种群
研究和应用微生物的前提(即发酵工程的重要基础)?
防止杂菌污染,获得纯净的微生物培养物
一、微生物的基本培养技术
在实验室培养微生物的要求?
提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
——培养基
确保其它微生物无法混入
——无菌技术
一、微生物的基本培养技术
(一)培养基的配置
1.培养基的概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,即培养基。
2.培养基的作用:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
3.培养基类型(按物理性质分类)
固体
培养基
液体
培养基
有 无 琼脂
分离、计数、鉴定等
扩大培养、
工业生产
长有酵母菌菌落
盛有液体培养基
一、微生物的基本培养技术
4.培养基的营养组成
(1)基本成分:水、碳源、氮源、无机盐。
①碳源:
无机碳源
有机碳源
例如CO2、CO32-、HCO3-等
例如葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等
无机氮源
有机氮源
例如N2、NO3-、NH3、NH4+等
例如牛肉膏、蛋白胨、尿素等
提供碳元素的物质
提供氮元素的物质
②氮源:
一般情况下,添加无机碳源培养基用来培养自养微生物;
添加有机碳源培养基用来培养异养微生物。
一般情况下,不添加氮源培养基可用来培养固氮微生物
(一)培养基的配置
一、微生物的基本培养技术
为什么培养基需要氮源?
培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。
补充说明
(1)含有C、H、O、N的有机物可作为异养型微生物的碳源、氮源、能源;
(2)自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于碳源;
自养型微生物所需的碳源来自无机碳源,异养型微生物所需的碳源来自有机碳源,因此可以根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型;
(3)无机氮源不但能给自养型微生物提供氮源,也能作为能源物质,如NH3既作为硝化细菌的氮源,也作为能源(NH3氧化释放的化学能)
(4)无机盐除了可以调节酸碱平衡、维持一定的渗透压之外,如培养基一般都含有磷酸酸。
(5)补充:有些无机盐离子可以作为化能合成菌的能源(如铁细菌) 有些无机盐离子可以激活某些酶(如Mg2+激活DNA聚合酶)
牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000ml 水
4.培养基的营养组成
(1)基本成分:水、碳源、氮源、无机盐。
(一)培养基的配置
(2)基础培养基实例——牛肉膏蛋白胨培养基。
一、微生物的基本培养技术
(3)培养基的特殊需求:在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
特殊营养物质:维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)
4.培养基的营养组成
(1)基本成分:水、碳源、氮源、无机盐。
(一)培养基的配置
(2)基础培养基实例——牛肉膏蛋白胨培养基。
一、微生物的基本培养技术
微生物例子 培养基需要的特殊物质或条件
乳酸杆菌
霉菌
细菌
厌氧微生物
添加维生素
调至酸性
调至中性或弱碱性
提供无氧的条件
培养基的配制原则
(1)目的要明确:不同的微生物需求不同,根据培养目的进行配制。