内容正文:
第6讲 基因工程的基本工具
考情研读·备考定位
课标要求 核心素养
1.概述基因工程的诞生。
2.阐明DNA重组技术实现需要利用限制性内切核酸酶,DNA连接酶和载体三种基本工具。
3.活动:DNA的提取和鉴定。 1.从结构与功能观角度理解基因工程的原理。(生命观念)
2.对比分析基因工程的三种操作工具,明确各自的应用及特点。(科学思维)
3.通过“DNA的粗提取与鉴定”实验,培养实验与探究能力。(科学探究)
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考点一 重组DNA技术的基本工具
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必备知识 · 夯实基础
知|识|巩|固
1.基因工程的概念
(1)手段:按照_______________,通过_________等技术,赋予生物新的遗传特性。
(2)目的:创造出更符合人们需要的新的_________和___________。
(3)水平:___________水平。由于在DNA分子水平上进行设计和施工,因此又叫作___________技术。
人们的愿望
转基因
生物类型
生物产品
DNA分子
重组DNA
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2.重组DNA技术的基本工具
(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)
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(2)DNA连接酶
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(3)载体
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思|维|辨|析
易错整合,判断正误。
(1)限制酶能够识别双链DNA分子中特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的氢键断开。( )
(2)限制酶在识别序列中心轴线两侧将DNA分子的两条链分别切开形成的是黏性末端,在识别序列中心轴线处切开形成的是平末端。( )
(3)基因工程中用到的工具酶有限制酶、DNA连接酶、载体。( )
(4)质粒上标记基因的存在,是便于重组DNA分子的筛选。( )
×
√
×
√
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延|伸|探|究
1.限制酶来源于原核生物,为什么不能切割自己的DNA分子?原核生物中存在限制酶的意义是什么?
提示:原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全,防止外来病原物的危害。限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
2.DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗?为什么?
提示:不是。DNA连接酶连接的是两个DNA片段,而DNA聚合酶是把单个的脱氧核苷酸连接到已有的DNA片段上。
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3.天然的DNA分子是否可以直接用作基因工程载体?为什么?
提示:不可以。具有能自我复制、有一个或多个限制酶切割位点、有标记基因及对受体细胞无害等特点的DNA分子才可以直接用作基因工程的载体。实际上天然的DNA分子一般不完全具备上述条件,往往需经过人工改造后才能用于基因工程操作。
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剖析难点 · 考点突破
重|难|精|讲
1.基因工程的理论基础
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2.图解限制酶的选择原则
(1)不破坏目的基因原则:如图甲中可选择PstⅠ,而不选择SmaⅠ。
(2)保留标记基因、启动子、终止子、复制原点原则:质粒作为载体必须具备标记基因,所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构,如图乙中不选择SmaⅠ。
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(3)确保出现相同黏性末端原则:通常选择与切割目的基因相同的限制酶,如图甲中PstⅠ;为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶。
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特别提醒:(1)限制酶是一类酶,而不是一种酶。
(2)将一个基因从DNA分子上切割下来,需要切两处,同时产生4个黏性末端或平末端。
(3)限制酶在识别序列中心轴线两侧切开形成的是黏性末端,而在识别序列中心轴线处切开形成的是平末端。
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3.与DNA有关的几种酶的比较
作用对象 作用部位 作用结果
限制酶 DNA
分子 磷酸
二酯键 将DNA切成两个或多个片段
DNA连
接酶 DNA分
子片段 磷酸
二酯键 将两个或多个DNA片段连接为一个DNA分子
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作用对象 作用部位 作用结果