内容正文:
希普:首例胚胎移植成功
哈里森:首创动物组织体外培养法
张明觉:发现哺乳动物精子获能现象
格登、童第周:体细胞核移植成功
试管家兔诞生
米尔斯坦和科勒:创立单克隆抗体技术
胚胎分割移植成功
埃文斯:成功分离和培养小鼠的胚胎干细胞
克隆羊多莉诞生
山中伸弥:获得诱导多能干细胞
单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生
我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。
1890年
1907年
1951年
1958年
1959年
1975年
1978年
1981年
1996年
2006年
2014年
2017年
动物细胞工程的发展历程
科技探索之路
1
皮肤的自体移植
小面积烧伤:植皮(自身)后恢复
1)使用他人皮肤?
患者自身的不够用,如何解决?
大面积烧伤?
2)培养自身细胞?
■ 问题探讨
—— 植物细胞工程常用的技术有哪些?
—— 动物细胞工程常用的技术有哪些?
■ 问题探讨
植物组织培养, 植物体细胞杂交
动物细胞培养 & 动物细胞核移植(克隆)
动物细胞融合 & 生产单克隆抗体
而其中动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础
动物细胞培养
第2节 第1课时
第2章 细胞工程
4
目标
01
02
03
用归纳与概括、演绎与推理等方法,用文字和图示说明动物细胞培养的过程。(科学探究)
运用稳态与平衡观,分析动物细胞培养的条件。(生命观念)
对干细胞培养用于人类疾病治疗等社会热点问题进行科学评价(社会责任)
学习目标
5
动物细胞培养
动物细胞融合
动物细胞核移植
动物细胞工程
基础
■ 问题探讨
目录
CONTENTS
动物细胞融合技术与单克隆抗体
二/
动物细胞培养
一/
动物细胞培养的条件
1/
动物细胞培养的过程
2/
动物细胞融合技术
1/
单克隆抗体及其应用
2/
干细胞培养及其应用
3/
动物体细胞核移植技术和克隆动物
三/
体细胞核移植的过程
1/
体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题
2/
1、概念:
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
2、目的:
获得细胞或细胞产物;不能获得完整动物个体。
3、原理:
细胞增殖(有丝分裂)
那么,动物细胞的培养需要哪些条件呢?
动物体
组织
单个细胞
细胞生长和增殖
取出
分散
适宜条件
4. 培养对象:
胚胎或幼龄动物的细胞
幼龄个体的细胞分化程度低、分裂能力强,易培养。
■ 一、动物细胞培养的条件
8
糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
充足的营养、稳定的内环境
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基
含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质,满足细胞对未知营养成分的需求。
培养基的构成:合成培养基 + 血清等天然成分
一般用液体培养基,
也称为培养液
■ 一、动物细胞培养的条件
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糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
①培养液、培养用具:灭菌处理;
②无菌操作;
③适量添加抗生素
定期更换培养液,以便清除代谢物。
①适宜的温度:哺乳动物细胞培养的温度多以___________ 为宜;
②适宜的pH:多数动物细胞生存的适宜pH为________ ;
③适宜的渗透压:
维持细胞正常的形态和功能。
36.5±0.5℃
7.2-7.4
■ 一、动物细胞培养的条件
11
糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …
无菌、无毒的环境
适宜的温度、pH和渗透压
适宜的气体环境
维持培养液的pH
O2:细胞代谢所必需
95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱
CO2培养箱
松盖培养瓶
培养皿
■ 一、动物细胞培养的条件
阅读教材P44-45,思考并回答下列问题:
■ 二、动物细胞培养的过程
12
①取动物组织
用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法,将组织分散成单个细胞
②分散组织细胞
一般选择幼龄动物或者是动物的胚胎;所取动物组织块一般体积大于1mm3 。
注意
机械方法
或胶原蛋白酶
进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞,这说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?
细胞间质中含有水分、蛋白质、代谢废物及其他营养物质,其中起细胞间连接作用的主要是黏连蛋白。用胰蛋白酶分散细胞说明细胞间物质主要是蛋白质。用胃蛋白酶不行,因为胃蛋白的适宜pH是2-3,如果用胃蛋白酶来分散细胞,在胃蛋白酶发挥作用的情况下,细胞会被杀死,要保证细胞存活胃蛋白酶又没有活性,不能分散细胞。
消化时间太短,消化就不充分,不能使细胞充分分散开来;
消化时间太长,会导致细胞膜表面蛋白大量被分解,从而导致细胞死亡!
■ 二、动物细胞培养的过程
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①取动物组织
用机械的