1.2.2.3 微生物的选择培养和计数导学案-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修三

课题 微生物的选择培养和计数（第3课时） 【学习目标】 概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求，进行酵母菌的纯培养。 【重点难点】 举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。 【学习流程】 ◎基础感知 三、微生物的数量测定 1.间接计数法——_______________法 （1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的__________。通过统计平板上的_______，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 （2）计数原则 ①一般选择菌落数为__________的平板计数。②在同一稀释度下，应至少对_____个平板进行重复计数，然后求出平均值。③适当的__________、_____是否均匀是成功统计菌落数目的关键。 （3）结果分析：①统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________；②统计结果一般用__________而不是用活菌数来表示。 原因：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是__________。 （4）计算公式：每g样品中的菌落数＝(C÷V)×M C代表某一稀释度下平板上生长的_______________；V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)；M代表__________。 2.直接计数法——__________计数 （1）原理：利用特定的_____计数板或__________计数板在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。 _____计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数，__________计数板常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的观察和计数。 （2）缺点：①统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，不能区分死菌与活菌。②个体_____的细菌在显微镜下难以观察。 ◎探究未知 【探究·实践·土壤中分解尿素的细菌的分离与计数】 1.结合对照组，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。 2.你是否获得了某一稀释度下菌落数为30～300的平板?在这一稀释度下，是否至少有2个平板的菌落数接近? ◎展示提升 【拓展——分解尿素细菌的进一步鉴定】 1.原理：细菌合成的脲酶将尿素分解为_____，_____会使培养基的碱性__________，pH_____，因此可以通过检测培养基pH的变化来判断是否发生了该化学反应，进而判断该菌是否为尿素分解细菌。 2.方法：在以_____为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变红： （1）液体培养基可以直接看液体的变色情况； （2）固体培养基上可以观察菌落周围是否出现__________，__________直径与菌落直径比值越_____，说明分解能力越_____。 两种纯培养方法的比较： 平板划线法 稀释涂布平板法 纯化原理 接种工具 单菌落的获得 用途 接种效果图 相同点 ◎达标检测 1.下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图,有关叙述错误的是( ) A.在配制步骤②、③的培养基时,应先调pH值后高压蒸汽灭菌 B.步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落 C.步骤③采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素 D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力 2.有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，下列相关叙述正确的是（　　） A．培养基应以尿素为唯一氮源，其上生长的都是能分解尿素的细菌 B．培养一段时间后，培养基中的营养成分会减少，pH会降低 C．稀释涂布平板进行活菌计数属于菌种密度的直接计数方法 D．牛肉膏蛋白胨培养基接种稀释液后同时培养，判断选择培养基是否起选择作用 【总结反思】 展示提升：氨，氨，增强，升高。尿素，红色环带，红色环带，大，强； 达标检测答案：1、C；2、D 学科网（北京）股份有限公司 $$