2024届高三生物二轮复习练习：基因工程的基本工具与操作程序

基因工程的基本工具与操作程序练习 一、选择题 1．如图表示由不同的限制酶切割而成的DNA末端及相关的酶作用位点。下列叙述错误的是(　　) A．甲、乙、丙都属于黏性末端 B．甲、乙片段可形成重组DNA分子，但甲、丙不能 C．DNA连接酶的作用位点在图乙中b处 D．切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子 2．T4 DNA连接酶可将任意2个具有相同黏性末端的DNA片段连接在一起。该反应过程需消耗ATP，其水解产生的腺苷一磷酸(AMP)通过共价键与酶相连，随后AMP转移至DNA片段，进而完成连接反应。下列叙述正确的是(　　) A．T4 DNA连接酶的底物种类较多，故其无专一性 B．T4 DNA连接酶催化反应后，其组成成分已改变 C．ATP在该反应过程中可能打开两个特殊的化学键 D．T4 DNA连接酶需保存于最适温度和pH条件下 3．大肠杆菌的质粒­环状DNA是基因工程的常用载体结构，如图所示。下列叙述正确的是(　　) A．①②③共同组成核糖核苷酸 B．质粒中的碱基遵循碱基互补配对原则 C．DNA连接酶会使化学键④重新连接 D．若某种限制酶在质粒上只有一个酶切位点，则质粒被切为两个片段 4．基因工程利用某目的基因（图甲）和P1噬菌体载体（图乙）构建重组DNA。限制性内切核酸酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的酶切位点分别如图所示。下列分析错误的是(　　) A．构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体 B．构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体 C．图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有两个游离的磷酸基团 D．用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA 5．构建基因表达载体时，可利用碱性磷酸单酯酶催化载体的5′­P变成5′­OH，如图所示。将经过该酶处理的载体与外源DNA连接时，由于5′­OH与3′­OH不能连接而形成切口(nick)。下列说法错误的是(　　) A．经碱性磷酸单酯酶处理的载体不会发生自身环化 B．外源DNA也必须用碱性磷酸单酯酶处理 C．T4 DNA连接酶可连接黏性末端和平末端 D．重组DNA经过2次复制可得到不含nick的子代DNA 6．TALEN是一种靶向基因操作技术，该技术利用了TAL靶向识别单元对靶向基因的识别作用和Fokl蛋白对靶向基因的切割作用，实现了对特定靶向基因的敲除。TAL靶向识别单元为间隔32个氨基酸的双连氨基酸（即两个相连的氨基酸）序列。不同的双连氨基酸分别与靶向基因中的A、T、C、G有恒定的对应关系，根据靶向基因的碱基序列可以设计出双连氨基酸序列。下列说法错误的是(　　) A．该技术应该先推测出信使RNA序列，再推测出目的基因的核苷酸序列 B．在构建的基因表达载体中，启动子应位于基因的上游，它是RNA聚合酶识别和结合的部位 C．TALEN是一种靶向基因操作技术，其中Fokl蛋白实质上是一种限制酶 D．双连氨基酸能够与含氮碱基A、T、C、G之间发生碱基互补配对 7．OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是(　　) A．可用抗原—抗体杂交技术检测四种酶在转基因水稻中的表达量 B．四个基因转录时都以DNA的同一条单链为模板 C．应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的水稻细胞 D．四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译 8．一种双链DNA分子被两种不同的限制酶切割，切割产物通过电泳分离，用大小已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记（如图左边一列）。关于该双链DNA，下列说法错误的是(　　) A．呈环状结构 B．分子质量大小为10 kb C．有一个NotⅠ和两个EcoRⅠ切割位点 D．NotⅠ切割位点与EcoRⅠ切割位点的最短距离为2 kb 9．B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞(2n)和精子(n)中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如图实验（Luc基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光，融合基因表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能）。下列相关叙述错误的是(　　) A．由于DNA聚合酶不能合成导致B基因在水稻卵细胞中不能转录 B．过程①中T­DNA以双链形式整合到受体细胞的染色体DNA上 C．过程②转化筛选水稻愈伤组织时，需在培养基中加入潮霉素 D．可通过检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光来鉴定B基因是否表达 10．如图是“DNA的粗提取与鉴定”实验中的