内容正文:
基因工程与细胞工程
· 易混易错梳理
一、获取真核生物的目的基因要用人工合成基因的方法
若用鸟枪法得到的真核生物的目的基因中含有内含子原核生物中没有相应的机制不能切除内含子转录的部分所以内含子转录的部分要表达结果和供体细胞合成的蛋白质不同
二、基因工程的易错点
(1)病毒在生物学中的应用举例:①基因工程中作载体,②动物细胞工程中作诱融合剂
③在免疫学上可作疫苗用于免疫预防。
(2标记基因(通常选抗性基因)的作用是:用于检测重组质粒是否被导入受体细胞(不含抗性)洏而选择性培养基(加抗生素的培养基)的作用是:筛选是否导入目的基因的受体细胞。抗生素针对的不是目的基因,而是淘汰不具有抗性的没有导入目的基因的受体细胞。(3)动物细胞融合技术的最重要用途是制备单克隆抗体,而不是培养出动物
(4)基因工程中导入的目的基因通常考虑整合到核DNA中,形成的生物可看作杂合子
(Aa)产生配子时,可能含有目的基因,后代会发生性状分离。
(5)重组质粒即基因表达载体的构建)在细胞外形成,而不是在细胞内。
(6)质粒不是细菌的细胞器而是某些基因的载体,质粒存在于细菌细胞内的小型环状DNA。拟核是大型环状DNA
(7)启动子、终止子是基因的结构,在构建基因表达载体时目的基因插入两者之间;而起始密码、终止密码在mRNA上。
三、有关蛋白质工程的两点提醒
(1)改造对象是基因:任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因即对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以遗传下去。
(2)基因突变的新基因中含有不编码蛋白质的序列,而蛋白质工程中的新基因则没有。
四、动物细胞培养技术原理:细胞增殖
植物组织培养技术原理:细胞全能性(离体、出现新个体植物体细胞杂交技术原理:细胞膜流动性(原生质体融合)、细胞全能性(杂种细胞培养)
五、植物组织培养与细胞全能性的关系
(1)理论上毎个具有细胞核的活细胞都具有全能性,但要实现全能性还濡需要一定的条件。(2)全能性一定由一个细胞(细胞核)发育成完整个体中体现出来,而不是组织、器官等。(3)全能性的原理是细胞具有发育成完整个体所必需的“全套”基因而不是“全部”基因,因此含一个染色体组的配子中也有全套基因,同样有全能性
六、对动物细胞培养与植物织培养的异同点
动物细胞培养与植物组织培养的主要区别有:①培养基不同:植物组织培养通常是固体培养基,动物细胞培养是液体培养基;②培养基的成分不同:动物细胞培养的碳源是葡萄糖必须利用动物血清,植物组组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养得到的是只细胞群;④原理不同:植物组织培养的原理为植物细胞的全能性,动物细胞培养的原理为细胞的增殖;⑤过程植物组织培养的过程为脱分化和再分化,动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养;⑥培养基的不同:植物组织培养是为了快速繁殖和获得无病毒植株,动物细胞培养是获得生物制相同点有:①都要人工条件下的无菌操作,无菌培养;②都是合成培养基;③都需要
七、动物细胞合与植物体细胞杂交的特点
动物细胞融合和植物体细胞的主要区别是:
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、细胞的全能性
细胞膜的流功性、细胞的增殖
融合方法
去除细胞壁后诱导原生质体融合
使细胞分散后诱导细胞融合
使用的酶
纤维素酶和果胶酶
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
诱导手段
物理法:离心、电激、振动
化学法:聚乙二醇等试剂诱导
除物理法和化学法外,也可用灭活的病毒诱导
· 易混易错通关
1.通过设计引物,运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变。如图为基因工程中获取突变基因的过程,其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对,但不影响引物与模板链的整体配对,反应体系中引物1和引物2的5'端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述正确的是( )
A.在PCR反应体系中还需要加入4种游离的脱氧核苷酸、解旋酶Taq、DNA聚合酶等
B.第2轮PCR,引物1能与图中②结合并且形成两条链等长的突变基因
C.引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入载体
D.第3轮PCR结束后,含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/2
2.图1表示某种DNA分子上的多种限制酶切割位点,图2表示EcoRⅠ、BamHⅠ、Sau3AⅠ三种限制酶识别序列和切割位点。下列相关叙述错误的是( )
A.获取该目的基因可采用EcoRⅠ和BamHⅠ进行酶切
B.限制酶能使特定碱基序列的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开
C.Sau3AⅠ和BamHⅠ酶切该DNA分子,产生不同的黏性末端
D.能被Sau3AⅠ切割的序列不一定能被BamHⅠ切割
3.如图是利用基因工程培有抗虫植物的示意图。下列相关叙述不正确的是( )
A.①→②利用两种不同限制酶处理,能避免含抗虫基因的D