内容正文:
以青春之名,书写家国担当
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DNA复制的应用
PCR技术:是利用DNA复制的原理,在体外完成DNA复制的一种分子生物学技术。
微量的DNA经过PCR扩增后, DNA片段的量将大幅增加。无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大。这也是“微量证据”的威力之所在。
第3节:DNA的复制
既然了解了PCR技术,也认识到了DNA的结构,请你推测如果要体外合成DNA需要在反应体系中加入哪些成分呢?
第一部分
对DNA复制的推测
资料一:科恩伯格向反应体系中加入了4种脱氧核苷酸、ATP和酶,结果并未得到DNA分子。
资料二:科恩伯格向反应体系中加入了4种脱氧核苷酸、ATP和酶。又加入了微量的DNA分子。结果有新的DNA产生,且与加入的微量DNA分子相同。
思考1:这两个实验有什么区别?
思考2:说明了什么?
思考3:DNA是以什么样的方式进行复制的呢?
DNA的复制还需要模板
一、对DNA复制的推测
原料、能量、酶
一、对DNA复制的推测
——半保留复制
亲代DNA分子
DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂,解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸根据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上。
新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链。
假说一:
有人持不同观点,提出全保留复制等不同假说
过渡
一、对DNA复制的推测
指DNA复制以DNA双链为模板,子代DNA的双链都是新合成的。
假说二:
——全保留复制
亲代DNA分子
一、对DNA复制的推测
DNA 复制是镶嵌型的复制,即在子代 DNA 两条链中,母链和子链片段镶嵌存在,也叫弥散复制。
假说三:
——分散复制
亲代DNA分子
提出问题
作出假设
演绎推理
实验验证
得出结论
DNA的复制方式?
(1)半保留复制
(2)全保留复制
(3)弥散复制
设计实验
证明DNA半保留复制的实验
思考•讨论
思考1:这两种假说从结果上来看有什么区别?
思考2:如果要设计实验验证假说,那么需要重点观察什么?
思考3:如何区分模板DNA母链和新合成的DNA子链呢?
第二部分
DNA半保留复制的实验证据
证明DNA半保留复制的实验
思考•讨论
任务一
阅读课本P53及“证明DNA半保留复制的实验”思考如下问题:
该实验用什么元素标记母链和子链?为什么?
如何测定子代DNA带有同位素的情况?
该实验的具体流程是什么?
提出问题
作出假设
演绎推理
实验验证
得出结论
设计实验
用什么方法能在实验中直观区分母链和子链?
同位素标记法。
该实验用什么元素做标记?为什么?
证明DNA半保留复制的实验
思考•讨论
通过实验区分DNA复制方式的三种假说,实验的关键是什么?
区分亲代和子代DNA
1.实验关键和方法
15N和14N是N元素的两种稳定的同位素(无放射性),这两种同位素的相对原子质量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大。
提出问题
作出假设
演绎推理
实验验证
得出结论
设计实验
含15N的DNA比含14N的DNA密度大;利用离心技术可以在试管中区分不同N元素的DNA分子
证明DNA半保留复制的实验
思考•讨论
中带
14N/14N
轻带
重带
根据试管中DNA带所在的位置就可以区分亲代与子代的DNA
2.背景知识
如何测定子代DNA带有同位素的情况?
15N/14N
15N/15N
提出问题
作出假设
演绎推理
实验验证
得出结论
设计实验
证明DNA半保留复制的实验
思考•讨论
3.实验过程
分裂一次
提取DNA
离心
15N/ 15N-DNA
14NH4Cl
再分裂一次
繁殖若干代
上
中
下
上
中
下
提取DNA
离心
上
中
下
哪个位置?
哪个位置?
15NH4CI
提取DNA
离心
14NH4Cl
14NH4Cl
提出问题
作出假设
演绎推理
实验验证
得出结论
设计实验
证明DNA半保留复制的实验
思考•讨论
上
中
下
上
中
下
上
中
下
上
中
下
上
中
下
上
中
下
上
中
下
上
中
下
上
中
下
(1)半保留复制
(2)全保留复制
(3)弥散复制
亲代
第一代
第二代
中带
轻带
重带
提出问题
作出假设
演绎推理
实验验证
得出结论
设计实验
证明DNA半保留复制的实验
思考•讨论
分裂一次
再分裂一次
亲 代
子一代
子二代
15N/14N
14N/14N
15N/14N
15N/15N
DNA的复制是以半保留方式进行的
第三部分
DNA复制的计算
第一代
亲 代
第二代
第三代
15N
15N
15N
15N
14N
14N
14N
14N
14N
14