1.2.2 微生物的选择培养和计数课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修二

复习 1、培养基的基本成分有 。 水、碳源、氮源、无机盐 2、培养基的灭菌用 ，培养皿的灭菌常用___________。 3、制备培养基的步骤包括：①制备培养基；_____________________。 4、酵母菌的纯培养中，将接种后的培养基和未接种的培养基都放入28℃恒温箱中，培养24h~48h后在观察。请问未接种的培养基的作用是：______________________________________。 5、微生物常用的接种方法有 和 。 平板划线法 稀释涂布平板法 作为空白对照，检测培养基是否被污染 ②灭菌； 高压蒸汽灭菌 干热灭菌 ③倒平板 自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或者稀释涂布平板法很难实现。 如何筛选呢？ 大本p14 4题D,B项 。 1.2（二） 微生物的选择培养和计数 一、筛选菌株 1. 科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶 PCR是一种在体外DNA复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。 耐高温的酶 耐高温生物体 高温环境（热泉、火山口） 寻找 寻找 1966年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的Taq细菌，并分离到耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）。 思考：为什么水生栖热菌能从热泉中被筛选出来呢？ 筛选原因：因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，使耐热的Taq细菌保留下来。 能否在实验室条件分离出某种菌？ 人为提供有利于目的菌株生长的条件（营养、温度、pH等），同时又抑制或阻止其他微生物生长的培养基。 （P16） 选择培养基 给你什么启示？ 3 加入青霉素的培养基 不加氮源的无氮培养基 不加含碳有机物的无碳培养基 ——分离出固氮菌 ——分离出自养型微生物 如果想分离土壤中分解尿素的细菌，应该怎样设计实验呢？ 几种常见选择培养基的设计思路 ——分离酵母菌、霉菌等真菌 （青霉素能杀死细菌、放线菌） 《大本》p17右上角设计思路 （1）加入某种化学物质 （2）营养缺陷 使用将pH调至酸性的培养基 ——分离出耐酸微生物 （3）培养条件 P6: 思考-讨论 尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3和CO2,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。这些细菌之所以能分解尿素，是因为能合成脲酶，来催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源。 尿素的立体结构 1、如何设计培养基配方，将土壤中分解尿素的细菌分离出来？ 2、该培养基与普通（完全）培养基有哪些共同点和不同点？ 以尿素作为唯一氮源 （其他微生物由于缺乏脲酶，不能分解尿素、缺乏氮源而不能生长） ——选择培养基 其他微生物由于缺乏脲酶，不能分解尿素、缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 定容到1000ml KH2PO4 1.4g NaH2PO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 葡萄糖 10.0g 尿素CO(NH2)2 1.0g 琼脂 15.0g 蒸馏水 定容到1000ml 配方一：培养细菌（p10） 配方二：培养可以分解尿素的细菌 普通（完全）培养基 选择培养基 1、从物理性质看，上述培养基属于哪类？从用途上属于哪类培养基？ 固体培养基 配方一是：普通培养基；配方二是：选择培养基 2、此培养基中共有哪些成分？哪些作为碳源和氮源？ 碳源、氮源、水、无机盐 碳源 氮源 碳源 氮源 思考：可否直接制备土壤溶液，接种到该选择培养基上进行培养？ 【资料1】：通常1g土壤中有几亿到几百亿个土壤微生物，其中，细菌的数量最多，能分解尿素的细菌是其中的一部分。 【资料2】：右图是用平板划线法接种的培养结果。 不行，（分解尿素的）细菌数量太多，难以计数 不能 稀释 思考： 1.可否直接制备土壤溶液，接种到选择培养基上进行培养？ 2.平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的？ ①平板划线不能确定取样的多少； ②最初划线处生长出来的菌落聚集在一起无法计数； ③灼烧接种环时死亡的菌体数无法估计。 稀释涂