2024届北京高考生物复习基因工程练习题

　 2024北京高考刺 基因工程 练习 1.科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测,该质粒的部分结构如图甲所示。其中V5编码序列表达标签短肽V5。 (1)与图甲中启动子结合的酶是　　　　　　。除图甲中标出的结构外,作为载体,质粒还需具备的结构有　　　　　　　　　　(答出2个结构即可)。  (2)构建重组质粒后,为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确,需进行PCR检测,若仅用一对引物,应选择图甲中的引物　　　　。已知J基因转录的模板链位于b链,由此可知引物F1与图甲中J基因的　　　　(填“a链”或“b链”)相应部分的序列相同。  (3)重组质粒在受体细胞内正确表达后,用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平,结果如图乙所示。其中,出现条带1证明细胞内表达了　　　　　　　,条带2所检出的蛋白　　　　(填“是”或“不是”)由重组质粒上的J基因表达的。  答案　(1)RNA聚合酶　标记基因、复制原点(或限制性酶切位点)　(2)F2和R1(或“F1和R2”)　a链　(3)J-V5融合蛋白　不是 解析　(1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因的转录。质粒作为载体,需要有复制原点、一个至多个限制酶切割位点和便于重组质粒筛选的标记基因等。(2)用PCR扩增分析法确定重组质粒中目的基因插入方向是否正确时,常设计一对引物,一个引物与目的基因序列互补,另一个引物与质粒序列互补,两引物延伸方向相反,以扩增出两引物间的序列,若插入方向正确,则可扩增出相应序列,反之,则不能扩增出相应序列,故选用的引物应为F2、R1或F1、R2,若选用引物F1、R1,不论目的基因插入方向是否正确,都可扩增出目的基因序列。因为J基因的b链为转录的模板链,启动子在左侧,所以转录方向为从左到右,由于转录沿模板链3'到5'端方向合成RNA,所以J基因b链左侧为3'端,引物要与DNA的3'端互补配对,所以F1与b链互补,a链也与b链互补,由此推知引物F1与a链相应部分序列相同。(3)抗J蛋白抗体和抗V5抗体均能检测到条带1,说明条带1为J-V5融合蛋白,条带2仅能由抗J蛋白抗体检测到,说明该蛋白仅含J蛋白,不含V5标签,故条带2检出的蛋白不是由重组质粒上的J基因表达的。 2.基因递送是植物遗传改良的重要技术之一,我国多个实验室合作开发了一种新型基因递送系统(切—浸—生芽Cut-Dip-Budding,简称CDB法)。图1与图2分别是利用常规转化法和CDB法在某植物中递送基因的示意图。 植株A 外植体 愈伤组织 愈伤组织与含重组载 体的农杆菌共培养幼苗→ 转化 植株A 图1 植株B植株上半部分 浸入含重组载 体的农杆菌液植株长出 毛状根阳性毛 状根段幼苗→ 转化 植株B 图2 回答下列问题。 (1)图1中,从外植体转变成愈伤组织的过程属于　　　　;从愈伤组织到幼苗的培养过程需要的激素有生长素和　　　　　　,该过程还需要光照,其作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　。  (2)图1中的愈伤组织,若不经过共培养环节,直接诱导培养得到的植株可以保持植株A的　　　　　　。图1中,含有外源基因的转化植株A若用于生产种子,其包装需标注　　　　　　　。  (3)图1与图2中,农杆菌侵染植物细胞时,可将外源基因递送到植物细胞中的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　  (4)已知某酶(PDS)缺失会导致植株白化。某团队构建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体(含有绿色荧光蛋白标记基因),利用图2中的CDB法将该重组载体导入植株B,长出毛状根,成功获得转化植株B。据此分析,从毛状根中获得阳性毛状根段的方法是　　　　　　　　　　　　　,图2中,鉴定导入幼苗中的基因编辑载体是否成功发挥作用的方法是　　　　　　　　　　　　　　,依据是　　　　　　　　　　　　　　　　。  (5)与常规转化法相比,采用CDB法进行基因递送的优点是　　　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。  答案　 (1)脱分化　细胞分裂素　诱导叶绿素的形成,使幼苗能够进行光合作用　(2)遗传特性　转基因种子　(3)农杆菌细胞内含Ti质粒,当它侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA转移并整合到受体细胞染色体DNA上　(4)检测毛状根段是否有绿色荧光　植物PDS中靶区域测序(或根据PDS基因的碱基序列设计引物进行PCR扩增)　若导入幼苗的基因编辑载体成功发挥作用,则PDS基因被敲除,靶区域的测序就会出现序列缺失,(或PCR无法扩增出条带)　(5)不需要无菌操作、不需要进行植物组织培养、操作简便 解析 (1)外植体经过脱分化形成愈伤组织,愈伤组织经过再分化形成幼苗,再分化培养基需要有一定比例的生长素和细胞分