内容正文:
单元复习
第3章 基因工程
内容网络
课标要求
生命观念:
1. 探究DNA的物理与化学性质,进行DNA分子的提取与鉴定。
2. 结合实例,采用文字和图示方式说明基因工程的基本操作程序。
3. 针对人类生产和生活的某一需求,尝试提出初步的基因工程构想,完成初步设计。
4. 基于基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业应用的实例,说明基因工程给社会带来的巨大进步。
5. 尝试通过蛋白质工程技术,根据人类需要的蛋白质结构,设计改造某一蛋白质的设计流程。
1. 运用结构与功能观说明基因工程的各种工具的特点。
2. 运用结构与功能观等观念理解PCR技术的过程、原理、条件等。
3. 说明基因的碱基排列顺序—蛋白质的结构—蛋白质功能的关系。
1. 探究DNA的物理与化学性质,进行DNA分子的提取与鉴定。
2.联系当地生产、生活中的具体实例,思考用基因工程的方法解决实际问题,基于基因工程在各方面发展的前景,理性看待基因工程的安全性。
3. 尝试运用逆向思维分析和解决问题。
科学思维、科学探究:
社会责任:
考点
CONTENTS
01 DNA的粗提取及鉴定
02 DNA重组技术
03 基因工程的基本操作程序
04 基因工程的应用
05 蛋白质工程的原理和应用
PART
01
DNA的粗提取及鉴定
考点一:DNA的粗提取及鉴定
原理一
原理二
原理三
思路 :DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面存在差异,可以利用这些差异,选用适当的物理或化学方法对它们进行提取
DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精
DNA能溶于物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液
在一定温度下,DNA被二苯胺试剂染成蓝色
一、实验原理:
二、实验材料及用具:
DNA含量相对较高的生物组织,如新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花和猪肝等。
1.选材:
不能选择哺乳动物成熟的红细胞,因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体,几乎不含DNA
2.试剂:
试剂
研磨液
体积分数为95%的酒精
二苯胺
2mol/L 的NaCl溶液
蒸馏水
溶解并提取DNA
析出DNA
溶解DNA
鉴定DNA,要现配现用
研磨液成分 作用
SDS 使蛋白质变性
EDTA 抑制DNA酶
Tris-HCl缓冲液 稳定DNA
考点一:DNA的粗提取及鉴定
三、实验步骤:
1.破碎细胞——
称取 ,切碎,放入研钵,倒入 , 研磨。
洋葱
研磨液
充分
研磨不充分,会使DNA分子不能从细胞核中释放出来,从而使研磨液中的DNA含量较低,影响最终提取的DNA量。
2.去除杂质——
在漏斗中垫上 过滤研磨液,4℃冰箱中静置后取 ;或将研磨液倒入塑料离心管中离心,取 。
纱布
上清液
上清液
不可以用滤纸代替纱布。因为DNA会被吸附到滤纸上而大量损失,影响最终提取的DNA量。
3.DNA的粗提取——
在上清液中加入体积相等的 溶液,静置2~3min,溶液中出现的
就是粗提取的DNA 。
预冷的酒精
白色丝状物
酒精作用:使蛋白质等溶解在酒精中,DNA不溶于酒精而析出。
预冷的酒精的优点
①可抑制核酸水解酶的活性,进而抑制DNA降解;
②抑制分子运动,使DNA易形成沉淀析出;
③低温有利于增加DNA分子的柔韧性,减少其断裂。
考点一:DNA的粗提取及鉴定
3.DNA的粗提取——
用玻璃棒沿 搅拌,卷起 ,并用滤纸吸去上面的水分:或将溶液倒入塑料离心管中离心,取 晾干。
一个方向
沉淀物
丝状物
为什么要用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌?
避免破坏DNA
4.DNA的鉴定——
将丝状物或沉淀物溶于 溶液中,加入 试剂,混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min。
二苯胺
2mol/L的NaCl
空白对照组:
在等体积的NaCl溶液中加入二苯胺试剂,将试管置于同等沸水浴中加热5min。
加入2mol/L氯化钠溶液
不加入丝状物
加入4mL二苯胺试剂
加入2mol/L氯化钠溶液
加入丝状物
加入4mL二苯胺试剂
实验组
对照组
水浴加热
——看提取物颜色
——看与二苯胺反应颜色的深浅
DNA纯度
DNA的量
考点一:DNA的粗提取及鉴定
例1.关于“DNA的粗提取与鉴定”实验,下列说法错误的是( )
A.粗提取的DNA中可能含有蛋白质
B.过滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解
C.在一定温度下,DNA遇二苯