内容正文:
第二章 动物细胞工程
2.2.3 动物体细胞核移植技术和克隆动物
世上首例体细胞克隆猴在我国诞生
从社会中来
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第五级
核移植。
1.克隆猴用到了什么技术?
动物细胞核具有全能性。
2.为什么用供体猴的一个细胞核进行移植就可以培育出与它几乎一模一样的克隆猴?
动物胚胎细胞分化程度低,表现全能性相对容易,而动物体细胞分化程度高,表现全能性十分困难,因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。
3.胚胎细胞克隆猴与体细胞克隆猴有什么不同? 为什么体细胞克隆猴的诞生能够轰动世界?
从社会中来
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哺乳动物核移植的类型及特点
非人灵长类动物体细胞核移植非常困难的两个原因
种类 难易程度 原因
胚胎细胞核移植
体细胞核移植
较容易
较难
分化程度低,全能性易表现
分化程度高,全能性难表现
供体的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其分化前的功能状态,这导致了胚胎发育率低;
非人灵长类动物胚胎进行操作的技术尚不完善。
从社会中来
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目录
CONTENTS
体细胞核移植的过程
一、
体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题
二、
一般指DNA分子扩增,如PCR技术,还包括单克隆抗体技术。
由一个细胞分裂所形成的细胞群体,如动物细胞培养技术、植物细胞培养技术。
分子水平:
细胞水平:
个体水平:
在生物学上,克隆是无性繁殖,具体地说,是指一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的分子、细胞或个体。
克隆技术:是一个很广的概念,凡指新形成的事、物与亲本一致的现象均可称为“克隆”。
指基因型完全相同的个体或群体,如植物组织培养技术、核移植技术。
延伸拓展
1997年,美国的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛,年平均产奶量一般为十几吨,而我国奶牛产奶量年平均水平仅为3~4t。
思考:能否依据“多莉”的培育过程,进行优质奶牛的快速繁育?
从社会中来
联系克隆高产奶牛的流程,请分析、讨论以下问题,并完善流程。
1.请用箭头和文字画出体细胞核移植的过程。
2.选择卵母细胞作为核移植受体细胞的原因?采集的卵母细胞应培养至 ;卵母细胞为什么要“去核”?卵母细胞去核的方法?
3.注入去核的卵母细胞的是整个供体细胞还是供体细胞的细胞核?为什么?
4.诱导融合的方法?融合的结果?
5.什么是重构胚?激活重构胚的方法?用这些方法处理重构胚的目的?
6.该过程用到了哪些动物细胞工程的技术手段?
一、体细胞核移植的过程
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相关消息:
减数分裂Ⅱ中期(MⅡ期)的卵母细胞中的“核”其实是:
文中所说的“去核”是去除纺锤体-染色体复合物。由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管一般一并吸出第一极体。
核:纺锤体-染色体复合物
次级
卵母细胞
第一极体
MⅡ期:减数第二次分裂中期
一、体细胞核移植的过程
卵母细胞去核:
2)普遍使用的去核方法是显微操作法。
也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。
1)去核的原因
保证克隆动物的核基因全部来自供体细胞。
一、体细胞核移植的过程
采集牛卵巢中的卵母细胞,在体外培养到MⅡ期
从高产奶牛(供体)取体细胞
通过显微操作去核
(去除纺锤体-染色体复合物)
动物细胞培养
将供体细胞注入去核卵母细胞
保证核移植动物的核遗传物质全部来自供体细胞。
一、体细胞核移植的过程
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通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚。
激活重构胚使其完成细胞分裂和发育进程
早期胚胎
用物理或化学方法:
(电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)
将胚胎移入(受体)代孕母牛体内
生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛(克隆牛)
一、体细胞核移植的过程
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问题1:为何选用MⅡ卵母细胞?
①其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质;
②卵母细胞体积大,易操作;
③卵母细胞营养物质丰富。
问题2:卵母细胞为什么要“去核”?
保证核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自供体细胞。
一、体细胞核移植的过程
①对卵母细胞损伤较小;
②保证供体细胞的细胞核不被破坏,操作方便。
问题3:将整个供体细胞注入卵母细胞中有何优点?
问题4:激活重构胚目的是?
用