内容正文:
天然菌种
菌种差异
杂菌情况不明
发酵过程的控制缺乏标准等
发酵食品的品质不一
为缩短发酵时间,确保品质好且稳定(无杂菌污染),工业上大规模生产时,通常会先通过微生物的培养技术获得单一菌种,再将它们接种到物料中进行发酵。
天然菌种
菌种差异
杂菌情况不明
发酵过程的控制缺乏标准等
发酵食品的品质不一
自制酸奶因杂菌污染致肠胃不适
制作泡菜中有杂菌混入
①容器和原料灭菌
②接种纯的菌种
③在无菌条件下操作
思考:怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?
江西生物组 东东老师
学习目标:
1.概述培养基的配制方法和微生物纯培养的基本操作要求,进行酵母菌的纯培养。
2.阐明微生物选择培养的原理。
3.进行土壤中分解尿素的细菌的分离和计数。
第1章 发酵工程
第2节 微生物的培养技术及应用
难以用肉眼观察的微小生物
微生物
有细胞结构
无细胞结构:
真核生物
原核生物:
原生生物:
真菌:
草履虫、变形虫等
酵母菌、霉菌等
(真)病毒、亚病毒(只有环状RNA类病毒、只含核酸寄生病毒的拟/卫星病毒、朊病毒)
立克次氏体/放线菌/衣原体/支原体/细菌/蓝细菌
本章提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。
实验室微生物的基本培养技术:
(1)提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
(2)确保其它微生物无法混入
微生物结构简单、形体微小,眼睛看不到,若想得到纯净的微生物,就必须对其进行培养和分离。
(3)并将需要的微生物分离培养出来
培养基
无菌技术
纯化培养
培养基
培养环境
无菌技术
分离培养
Ⅰ微生物的基本培养技术
细菌
放线菌
霉菌
酵母菌
①为微生物提供合适的营养②为微生物提供合适的环境条件③确保其他微生物无法混入④将需要的微生物分离出来
培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物,有液体培养基、半固体/固体培养基。
培养
分离
鉴定
保存
菌落:单个微生物细胞接种到培养基表面/内层时,当它占有一定发展空间并处适宜条件下,该细胞会迅速生长繁殖形成一堆肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞集团。
思考:什么是培养基?它有何用途?它有何种类?它的必备营养成分有哪些?
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分
用途
不加琼脂(98℃以上融化,44℃以下凝固,不提供能量和营养)等凝固剂
加凝固剂,如1.5%~2.0%琼脂
工业大规模快速繁殖某微生物
观察微生物的运动、分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含成分不明确的蛋白胨/牛肉膏/酵母浸粉等天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
允许特定种类微生物生长,同时抑制/阻止其他微生物生长的培养基
培养、分离出特定微生物
培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
天然培养基
合成培养基
固体培养基
液体培养基
半固体培养基
选择培养基
鉴别培养基
通用培养基
加凝固剂,如0.3%~0.7%琼脂
通用培养基营养物质齐全,可以满足多种微生物的营养需求
鉴别不同种类的微生物
用于培养多种微生物
一、培养基的配制
琼脂:是一种从红藻中提取的多糖,在98℃以上融化,在44℃以下凝固,琼脂仅作凝固剂,不提供能量和营养。选择培养基有利于目的微生物生长,使其成为优势菌,从而抑制杂菌生长,如仅以纤维素为碳源的培养基可用来筛选土壤中产纤维素分解酶的微生物。鉴别培养基用于区分和鉴定不同微生物,如大肠杆菌在伊红美蓝培养基上的菌落呈现金属光泽的紫黑色。
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思考:培养基必备营养成分有哪些?如何配制培养基满足不同微生物特殊需求?举例说明。
1000mL牛肉膏蛋白胨培养基组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏(源于动物,含糖、维生素和有机氮等) 5g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素等
蛋白胨 10g 氮源(合成含氮物质)、碳源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 1000mL 水
①碳源
无机碳源:
有机碳源:
②氮源
NH4+、NO3-、NH3等。
牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等。
CO2、CO32-、HCO3-。
葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等。
无机氮源:
有机氮源:
③无机盐
Zn、Cu、Mn、Co、Mo等
大量元素:
微量元素:
Ca、K 、Mg等
(异养微生物)
(自养微生物)
(自养微生物)
(异养微生物)
④水
培养基
基本成分
微生物 碳源
蓝细菌 CO2
硝化细菌 CO2
根瘤菌 糖类等有机物
大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物
自养型微生物通过自身光合作用/化能合成作用合成有机物,能利用无机碳源;异养型微生物不能自身合成有机物,只能利用现成有机碳。
思考:培养基只有基本成分就够吗?
③