内容正文:
聚焦
学习目标:
1.掌握动物体细胞核移植的概念及基本过程
2.阐明体细胞核移植技术的应用前景
3.理性看待体细胞核移植技术存在的问题
第2 节 动物细胞工程
第3课时 动物体细胞核移植技术与克隆动物
1.概念:
将动物的一个细胞的细胞核,移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。
用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
2.原理:
动物细胞核的全能性
4.种类:
胚胎细胞核移植:
体细胞核移植:
细胞分化程度低,表现全能性容易
减数分裂Ⅱ中期(MⅡ期)的卵母细胞
细胞分化程度高,表现全能性十分困难
3.生殖方式:
无性生殖
一.动物细胞核移植技术
供体
一个细胞的细胞核
受体
相关消息:
减数分裂Ⅱ中期(MⅡ期)的卵母细胞中的“核”其实是:
文中所说的“去核”是去除纺锤体-染色体复合物
核:纺锤体-染色体复合物
5.非人灵长类动物体细胞核移植的困难原因
1)供体细胞的细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其____前的功能状态,这导致了_____________;
胚胎发育率低
2)对非人灵长类动物_____进行操作的技术尚不完善。
胚胎
分化
非人灵长类动物:具有许多与人类相似的生物学特征的灵长类动物
一般指DNA分子扩增,如PCR技术,还包括单克隆抗体技术。
由一个细胞分裂所形成的细胞群体,如动物细胞培养技术、植物细胞培养技术。
分子水平:
细胞水平:
个体水平:
在生物学上,克隆是无性繁殖,具体地说,是指一个共同的祖先,通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的分子、细胞或个体。
延伸拓展:克隆(Clone)
克隆技术:是一个很广的概念,凡指新形成的事、物与亲本一致的现象均可称为“克隆”。
指基因型完全相同的个体或群体,如植物组织培养技术、核移植技术。
1)选择卵母细胞作为核移植受体细胞的原因?采集的卵母细胞应培养至 ;
2)卵母细胞去核的方法?“去核”去的是什么?
3)注入去核的卵母细胞的是整个供体细胞还是供体细胞的细胞核?为什么?
4)诱导融合的方法?融合的结果?
5)什么是重构胚?激活重构胚的方法?用这些方法处理重构胚的目的?
6)该过程用到了哪些动物细胞工程的技术手段?
自主学习:
阅读P53图2-18,思考下列问题
二.体细胞核移植的过程
(以体细胞克隆牛为例)
1.卵母细胞去核
2)普遍使用的去核方法是显微操作法。
也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。
1)去核的原因
保证克隆动物的核基因全部来自供体细胞。
二.体细胞核移植的过程
3)“去核”实际上是去除纺锤体-染色体复合物,由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管一般一并吸出第一极体。
次级
卵母细胞
第一极体
MⅡ期:减数第二次分裂中期
2.核移植操作将供体细胞整个注入去核卵母细胞
1)操作简单,对卵母细胞损伤较小;
2)保证供体细胞的细胞核不被破坏。
3.诱导细胞融合的方法和结果:
电融合法;形成重构胚。
4.重构胚
2)激活方法:用物理或化学方法(如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂)激活。
1)概念:是指人工重新构建的胚胎,具有发育成完整个体的能力。
3)激活重构胚的目的:使其完成细胞分裂和发育进程。
早期胚胎培养
动物细胞培养
胚胎移植
动物细胞融合
重构胚
早期胚胎
两细胞融合
激活重构胚
采集牛卵母细胞,体外培养到MⅡ期
去核的卵母细胞
供体细胞培养
核移植
高产奶牛(供体)
生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛
显微操作去核
取体细胞
将胚胎移入受体(代孕)母牛体内
动物体细胞核移植
5.整个过程中应用到的技术
1)动物细胞培养
2)动物细胞融合
3)早期胚胎培养
4)胚胎移植
5)动物细胞核移植
2)细胞质中的DNA(线粒体中的DNA)同时来自供体细胞和受体卵母细胞,一部分性状和卵母细胞受体一致;
3)生物性状还受到环境因素的影响,克隆动物所生活的环境与核供体动物生活的环境不会完全相同。
6.克隆动物的性状表现
表现型 = 基因型 + 环境
1)克隆动物绝大部分DNA来自供体动物的细胞核,绝大多数性状和核供体一致;
环境也会影响克隆动物的性状:动物的发育及一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系,克隆动物所生活的环境与核供体动物生活的环境不会完全相同。
克隆动物在个体发育过程中有可能发生基因突变、染色体变异等可遗传变异;
克隆猴细胞核基因型与核供体细胞完全一致,细胞质基因来源于受体细胞。
采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期
从供体高产奶牛身上取体细胞
显微操作 去核
对体细胞 进行培养
去核的卵母细胞
供体细胞
电融合法
将供体细胞注