内容正文:
第3章 第3节 DNA的复制
DNA结构对遗传的影响
①DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂;
一.对DNA复制的推测
5’
3’
5’
3’
3’
5’
5’
3’
双螺旋解开
氢键断裂
①DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂;
2
一.对DNA复制的推测
②解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上;
3’
5’
5’
3’
模板
模板
子链
子链
3
一.对DNA复制的推测
③新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,这种复制方式被称做半保留复制。
3’
5’
5’
3’
模板
模板
子链
子链
原来的
原来的
新的
新的
4
一.对DNA复制的推测
5’
3’
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
半保留复制
+
应该是
全保留复制
5
一.对DNA复制的推测
5’
3’
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
半保留复制
+
5’
3’
5’
3’
全保留复制
5’
3’
5’
3’
+
5’
3’
5’
3’
都是新链
哪种假说正确?
6
一.对DNA复制的推测
5’
3’
5’
3’
5’
3’
3’
5’
3’
5’
5’
3’
分散复制
+
应该是
分散复制
补充:
7
二.DNA半保留复制的实验证据
思考:
1、我们这里用什么区分原来链和新链?
颜色
2、真实DNA有没有颜色?有没有其他方法把他们区分?
没有
放射性同位素标记法
3、放射性同位素有哪些记得吗?
放射性同位素: 14C 、32P 、3H 、35S
8
二.DNA半保留复制的实验证据
思考:
4、怎么标记上放射性呢?
比如我们可以把原链中的C标记上放射性,子链中没有
5、放射性同位素标记法能区分开吗?
不能,这种方法只能检查到整体有还是没有放射性,不能区分每一条链有无放射性
有放射性
有放射性
9
二.DNA半保留复制的实验证据
思考:
6、除了放射性外,原链和新链还有什么不同?
原链上的C都为14C,新链中的C都为12C,相对分子质量不同,一条重,一条轻。
7、既然我们不需要放射性,用哪种同位素更好?
稳定同位素
有放射性
有放射性
14C
12C
14C
12C
14C
14C
12C
12C
稳定同位素: 15N 、18O
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二.DNA半保留复制的实验证据
思考:
8、这些DNA密度有什么区别?
9、有什么方法可以把他们区分开吗?
密度梯度离心
15N
14N
15N
14N
14N
14N
15N
15N
密度最大
密度居中
密度居中
密度最小
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通过超离心机对某一介质(氯化铯等) 长时间加一个离心力,使其在离心管 内从液面到底部出现一定的密度梯度。
密度梯度离心:
二.DNA半保留复制的实验证据
12
二.DNA半保留复制的实验证据
密度梯度模拟实验
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梅塞尔森
斯塔尔
二.DNA半保留复制的实验证据
1958年
大肠杆菌
同位素标记技术
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二.DNA半保留复制的实验证据
15NH4Cl
14N/ 14N
-DNA
繁殖若干代
15N/ 15N
-DNA
目的?
得到的大肠杆菌DNA几乎都是15N标记的
15
15N/ 15N
-DNA
二.DNA半保留复制的实验证据
14NH4Cl
再分裂一次
分裂一次
提取DNA
离心
提取DNA
离心
?
?
?
哪个位置
?
?
?
哪个位置
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半保留复制
分裂一次
再分裂一次
15N/ 15N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
15N/ 14N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N
14N
14N
+
+
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全保留复制
分裂一次
再分裂一次
15N/ 15N
-DNA
15N/ 15N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N / 14N
-DNA
15N/ 15N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N/ 14N
-DNA
14N
14N
14N
+
+
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实验结果与半保留复制结果一致
DNA的复制是以半保留的方式进行的
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DNA复制推测
DNA replication hypothesis
①DNA复制时,DNA双螺旋解开,互补的碱基之间的氢键断裂;
②解开的两条单链分别作为复制的模板,游离的脱氧核苷酸依据碱基互补配对原则,通过形成氢键,结合到作为模板的单链上;
③新合成的每个DNA分子中,都保留了原来DNA分子中的一条链,这种复制方式被称做半保留复制。
(教材P53P52)
DNA结构对遗传的影响
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DNA复制推测
DNA replication hypothesis
DN