内容正文:
第1节 DNA是主要的遗传物质(第2课时)
第3章 基因的本质
生物不仅受到非生物因素影响,还受到生物因素影响
实验中提取的DNA,纯度最高时还有0.02%的蛋白质。
自然界中是否有生物可以将DNA和蛋白质完全区分开?
艾弗里DNA转化实验的缺陷
艾弗里的实验提取物不纯
03
噬菌体侵染细菌实验
艾弗里的实验引起了人们的注意,但是,由于艾弗里实验中提取出的DNA,纯度最高时也还有0.02%的蛋白质,因此,仍有人对实验结论表示怀疑。
有没有更好的材料、更好的方法能够将DNA和蛋白质分开,单独去观察它们的作用呢?
1. 实 验 者 :
赫尔希和蔡斯
2. 实验材料:
T2 噬 菌 体
噬菌体侵染细菌实验
T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒(课本P45第1段)
课本P44最后1段
1.吸附
2.注入
3.合成
4.组装
5.释放
噬菌体侵染大肠杆菌过程:
吸附
注入
合成
组装
释放
新坐标P61第2点
噬菌体的复制与增殖
增殖需要的条件 内 容
模板 ________的DNA
合成噬菌体DNA原料 __________提供的四种脱氧核苷酸
合成噬菌体
蛋白质 原料 _____________________
场所 大肠杆菌的 .
噬菌体
大肠杆菌
大肠杆菌的氨基酸
核糖体
新坐标P61
噬菌体侵染细菌实验
思考:如何将噬菌体的DNA和蛋白质分开分别观察其作用?
(放射性)同位素标记
尾部
头部
DNA
蛋白质
(C、H、O、N、P )
(C、H、O、N、S )
3. 实验方法:
( 35S标记)
( 32P标记)
DNA
32P
蛋白质
35S
噬菌体侵染细菌实验
用14C和18O同位素标记可行吗?
No
标记T2噬菌体方法:
直接用含有放射性同位素的培养基来培养噬菌体。
×
大肠杆菌
标记噬菌体
含35S的培养基
含32P的培养基
T2噬菌体噬菌体是细菌病毒,不能独立生活,必须寄生在活细胞中。故应先培养细菌,再用细菌培养噬菌体。
含 .
大肠杆菌
35S
含 .
大肠杆菌
32P
培养
培养
噬菌体
得到
得到
标记的噬菌体
35S
标记的噬菌体
32P
4.19 5班、9班
8
4.实验过程:①制备含有放射性标记噬菌体
离心
含35S培养基
含35S细菌
噬菌体侵染含35S细菌
含35S噬菌体
含32P培养基
含32P细菌
噬菌体侵染
含32P细菌
含32P噬菌体
噬菌体侵染细菌实验
制备含有放射性标记噬菌体过程示意图
先标记大肠杆菌
再标记T2噬菌体
(2)已标记的T2噬菌体侵染未被标记的大肠杆菌
搅拌后离心
上清液
沉淀物
细菌裂解
离心后
保温
(3)搅拌:使吸附在大肠杆菌上的_________与___________分离开。
大肠杆菌
噬菌体
(4)离心:
使上清液中析出质量较轻的_________________,
而离心管沉淀物中留下被侵染的_____________。
T2噬菌体颗粒
大肠杆菌
(5)放射性检测
4.实验过程:②噬菌体侵染大肠杆菌 (课本P45第2段)
上清液:蛋白质外壳
沉淀物:大肠杆菌(内含子代噬菌体)
分别用35S或32P标记
噬菌体与大肠杆菌混合
离心检测上清液和沉
淀物中的放射性物质
细菌裂解后检测子代
噬菌体的放射性
32P标记
的噬菌体
35S标记
的噬菌体
经短时间保温后用搅拌器搅拌
笔记:1.采用对照方法:对比实验(相互对照)
2.保温时间要求:全部噬菌体侵染细菌且未释放
在搅拌器中搅拌、离心后,检测上清液和沉淀物中的放射性物质
用标记的噬菌体
侵染未标记的细菌
噬菌体被
35S标记
在新形成的噬菌体中没有检测到35S
细菌裂解
沉淀物的放射性很
上清液的放射性很
离心后
搅拌后离心
35S标记的噬菌体与细菌混合
35S标记的噬菌体
① 35S标记的噬菌体侵染细菌:
高
低
实验表明:
噬菌体侵染细菌实验
噬菌体侵染细菌时, 外壳留在外面,没有进入到细菌中。
蛋白质
搅拌不充分
理论上
上清液
沉淀物
其中一个
大肠杆菌
实际上
35S标记的一组,沉淀物中出现少量放射性的原因
实验误差分析:
在搅拌器中搅拌、离心后,检测上清液和沉淀物中的放射性物质
用标记的噬菌体
侵染未标记的细菌
噬菌体被
35S标记
在新形成的噬菌体中没有检测到35S
细菌裂解
沉淀物的放射性很
上清液的放射性很
离心后
搅拌后离心
35S标记的噬菌体与细菌混合
35S标记的噬菌体
① 35S标记的噬菌