2.2.1 动物细胞培养 课件 2023—2024学年高二下学期生物人教版选择性必修3

2024-03-21
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第2章 细胞工程 2.2.1 动物细胞工程 从社会中来 在治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源又不足,而且会产生免疫排斥反应。那么,怎样才能获得大量的自体健康皮肤?能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤? 通过细胞培养构建的人造皮肤 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增; 目前,科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养,以获得适合临床上使用的人造皮肤。 动物细胞培养 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 动物细胞工程 是最基础的技术 什么是动物细胞培养?动物细胞培养的作用? 克隆猴:中中和华华 克隆皮肤 单克隆抗体 【思考】:动物组织的选择: 幼龄动物 or 老龄动物 幼龄个体的细胞分化程度低、分裂能力强,易培养。 从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。 动物体 组织 单个细胞 细胞生长和增殖 取出 分散 适宜条件 原理 地位 对象 目的 细胞增殖(有丝分裂) 动物细胞工程的基础 获得细胞或者细胞产物 胚胎或幼龄动物的细胞 一、动物细胞培养的概念 动物细胞培养所需的基本条件 营养物质 其他条件 < < 糖类 氨基酸 无机盐 维生素 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 二、动物细胞培养的条件 动物体内的细胞之所以能够维持正常的生命活动,是因为机体给这些细胞提供了适宜的条件。你还记得有哪些条件吗? 充足的营养 稳定的内环境 体外培养动物细胞需要满足什么条件? 葡萄糖 氨基酸 无机盐 维生素 1、营养条件 【思考】: 培养基的类型: 固体培养基 or 液体培养基 合成培养基 or 天然培养基 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制的培养基 由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚。 血清可以补充合成培养基中缺乏的物质,如蛋白质、氨基酸、未知的促生长因子等。 ? 动物血清 二、动物细胞培养的条件 液体培养基,也称培养液 培养基的构成:合成培养基 + 血清等天然成分 接下来,我们具体分析动物细胞培养的条件: 细胞培养时,一般需添加10%~20%的血清或血浆。 二、动物细胞培养的条件 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 定期更换培养液 无菌 无毒 2、无菌、无毒的环境 ③添加一定量的抗生素 在细胞培养液中添加适量的抗生素 思考:如何防止培养过程中的微生物污染? 思考:为什么要定期更换培养液? 以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 3、温度、pH和渗透压 一般与动物体内相同 ①适宜的温度: 哺乳动物细胞培养的温度多以______________为宜; 36.5±0.5℃ ②适宜的pH: 多数动物细胞生存的适宜pH为___________ 7.2-7.4 ③维持适宜的渗透压的目的: 维持细胞正常的形态和功能 二、动物细胞培养的条件 二、动物细胞培养的条件 (1)气体组成及作用: 细胞代谢所必需 维持培养液的pH (2)具体操作: 通常采用培养皿或松盖培养瓶。 置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 CO2培养箱 培养皿 培养瓶 4、气体环境 O2: CO2 :、 空气中有微量的二氧化碳,约占空气总体积的0.03%。 动物细胞培养的过程 课本P44-45 1.为何动物细胞培养过程要将组织分散成单个细胞呢? 可用什么方法? 2.体外培养动物细胞有哪些类型? 3.什么是细胞贴壁?什么是接触抑制? 4.什么是原代培养和传代培养? 5.为什么要进行分瓶培养?怎么处理? 6.动物细胞培养与植物组织培养有什么相同之处与不同之处? 阅读教材P44-45,思考并回答下列问题: 思考(课本P45思考·讨论第1题): 为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料? 取动物组织 (幼龄动物) 一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 因为这些细胞分化程度低,分裂能力强,容易培养 1. 取动物组织 三. 动物细胞培养的过程 思考: 为什么将取出的组织分散成单个细胞? 取动物组织 (幼龄动物) ①从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖 ②利于细胞与培养液充分接触,更易进行物质交换 (1)将组织分散成单个细胞 制成 细胞悬液 分散成单个细胞 ①机械的方法 ②用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间 (2)用培养液将细胞制成细胞悬液 思考: 如何将组织分散成单个细胞? 2. 制成细胞悬液 ①说明动物细胞间的物质主要是什么成分? 蛋白质 三. 动物细胞培养的过

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