2.2.1 动物细胞培养-2023-2024学年高二生物实践教学优质课件（人教版2019选择性必修3）

第二章 细胞工程 第2节 动物细胞工程（1） 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。 讨论：异体移植面临的问题： 。 供体器官短缺、免疫排斥等 获得大量的自体健康皮肤的方法： 。 取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增； 皮肤干细胞培养（研究中） 通过细胞培养构建的人造皮肤 从社会中来 通过细胞培养构建人造皮肤 从社会中来 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 动物细胞工程 是最基础的技术 问题:什么是动物细胞培养？ 动物细胞培养：从动物体中取出相关的组织或器官，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。（教材P43黑体字） 动物细胞培养需要什么样的条件？ 原理： 细胞分裂（增殖） 一、动物细胞培养的条件 5 单击此处编辑母版文本样式 第二级 第三级 第四级 第五级 动物细胞培养所需的基本条件 营养物质 其他条件 < < 糖类 氨基酸 无机盐 维生素 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH和渗透压 适宜的气体环境 将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。 含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。 培养基的构成：合成培养基 + 血清等天然成分 一般使用液体培养基，也称为培养液。 一、动物细胞培养的条件 1.培养的条件： (1)无菌、无毒的环境： 无菌 ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 无毒 定期更换培养液 问题:定期更换培养液的目的是什么？ 以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 问题:如何防止培养过程中的微生物污染？ 在细胞培养液中添加一定量的抗生素 一、动物细胞培养的条件 2.培养的条件： (2)温度、PH、渗透压： 多数动物细胞生存的适宜pH为________ ①适宜的温度： 36.5±0.5℃ 7.2-7.4 维持细胞正常的形态和功能 哺乳动物细胞培养的温度多以_ __________为宜； 维持适宜渗透压的目的______________________ ②适宜的pH： ③适宜的渗透压： 一、动物细胞培养的条件 2.培养的条件： (3)气体环境： 动物细胞培养所需气体主要有_____和______ 用培养皿或松盖培养瓶, 在含有_______________和__________的混合气体的__________ O2 CO2 细胞代谢所必需的 维持培养液的pH 95%空气 5%CO2 CO2培养箱 ①组成 不同气体的作用是什么？ ②培养仪器 （95%）空气: （5%）CO2： CO2 培养箱 一、动物细胞培养的条件 传代培养 取动物组织 制成细胞悬液 原代培养 放入CO2培养箱中培养 放入CO2培养箱中培养 用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法，将组织分散成单个细胞 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 （分化程度低，分裂能力强） 二、动物细胞培养的过程 10 单击此处编辑母版文本样式 第二级 第三级 第四级 第五级 第1类：悬浮生长细胞 第2类：贴壁生长细胞 （主要） 悬浮培养瓶 ★体外培养动物细胞分为两类 二、动物细胞培养的过程 接触抑制 原代培养 传代培养 细胞贴壁 大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面互相接触时，细胞通常会停止分裂增殖 将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养 将分瓶后的细胞培养称为传代培养 二、动物细胞培养的过程 原代培养（视频） 传代培养（视频） 动物 组织块 分散成 单个细胞 细胞 悬液 癌变细胞没有接触抑制现象，可以在培养瓶中形成多层细胞，在培养液可以无限增殖下去。 肿瘤细胞 （失去接触抑制） 正常细胞 二、动物细胞培养的过程 15 单击此处编辑母版文本样式 第二级 第三级 第四级 第五级 动物 组织块 分散成 单个细胞 细胞 悬液 原代培养 传代培养 放入培养瓶 在适宜条件 在适宜条件 分瓶培养 思考：为什么要进行分瓶培养？ 悬浮生长 贴壁生长 细胞密度过大 有害代谢物积累 营养物质缺乏 接触抑制 分瓶培养 (传代培养) 解决 原因 原代培养 问题 细胞分裂受阻 二、动物细胞培养的过程 16 单击此处编辑母版文本样式 第二级 第三级 第四级 第五级 植物组织培养 动物细胞培养 原理 培养前处理 取材 培养基的物理性质 培养基的成分 特有成分 植物细胞的全能性 细胞增殖 离体 用机械法或