2.2.1 动物细胞培养 课件 2023-2024学年高二下学期生物人教版选择性必修三

第二章 细胞工程 2.2.1 动物细胞培养 1 从社会中来 在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。 可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增； 目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤； 通过细胞培养构建的人造皮肤 讨论： 怎样才能获得大量的自体健康皮肤？ 能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？ 既解决了来源不足，又不会产生排斥反应 人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等，都离不开动物细胞的培养。 动物细胞工程 动物细胞培养（基础） 动物细胞融合技术和单克隆抗体 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1.动物细胞培养的条件 2.动物细胞培养的过程 3.干细胞培养及应用 一、动物细胞培养的条件 操作原因： 原理： 对象： 从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。 细胞增殖 一般是指动物胚胎或出生不久的幼龄动物组织，因为这些组织细胞比老龄动物的组织细胞生命力旺盛，易于培养，同时增殖能力也更强。 将组织块分散成单个细胞后，细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出。 目的：获得细胞或细胞产物；不能获得完整动物个体。 一、动物细胞培养的条件 动物体内的细胞之所以能够维持正常的生命活动，是因为机体给这些细胞提供了适宜的条件。你还记得有哪些条件吗？ 充足的营养 稳定的内环境 体外培养动物细胞需要满足什么条件？ 糖类、氨基酸、无机盐、维生素 …… 无菌、无毒的环境 适宜的温度、pH 和渗透压 适宜的气体环境 一、动物细胞培养的条件 将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按种类和所需量严格配制的培养基。 1.营养条件 （1）培养基构成： 合成培养基 血清等一些天然成分 ＋ 合成培养基： 血清等一些天然成分： 含人类未知、细胞生长增殖所必需的物质，满足细胞对未知营养成分的需求。 （2）培养基类型： 一般使用液体培养基 （培养液） 血清 一、动物细胞培养的条件 一、动物细胞培养的条件 1.营养条件 1.血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。 2.氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。 3.血清中有胰岛素、生长激素等及多种生长因子；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。 4.因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。 补充资料： 一、动物细胞培养的条件 8 无菌： ①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理 ②在无菌环境下进行操作 定期更换培养液。 无毒： ③可添加一定量的抗生素 目的：以便清除代谢物， 防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。 一、动物细胞培养的条件 2.无菌、无毒的环境 3.温度、pH和渗透压 （1）适宜的温度： 哺乳动物细胞培养的温度多以 为宜； 36.5±0.5℃ （2）适宜的pH： 多数动物细胞生存的适宜pH为 ； 7.2-7.4 （3）适宜的渗透压： 目的 。 维持细胞正常的形态和功能 与相应动物内环境的理化性质保持一致。 对比 人体内环境的理化性质 ①人体细胞外液的温度一般维持在： 36.5±0.5℃ ②正常人的血浆近中性，pH约为： 7.35~7.45 ③渗透压：指溶液中溶质微粒对水的吸引力。 在37℃时，人的血浆渗透压约为： 770 kPa 一、动物细胞培养的条件 4.气体环境 （1）气体组成及作用： O2 CO2 细胞代谢所必需 维持培养液的pH （2）具体操作： 通常采用培养皿或松盖培养瓶。 置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 CO2培养箱 一、动物细胞培养的条件 1、一般来说动物细胞体外培养需要满足的条件是 ①无毒的环境； ②无菌的环境； ③合成培养基需加血清； ④温度与动物体温相近； ⑤需要O2 ，不需要CO2； ⑥用CO2 调节培养液pH A.①②③④⑤⑥ B.①②③④ C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥ 2、用动植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A.都需要用含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱 B.都需要用液体培